高胆汁酸血症影响兔呼吸功能的实验研究

目的比较研究经典血压下降反射性引起呼吸功能改变与高胆汁酸血症引起呼吸功能改变是否特性相同,为认识胆汁酸
调节呼吸功能提供实验依据。方法70只新西兰雄性大白兔,20%乌拉坦以5 ml/kg体质量耳缘静脉注射麻醉,颈部正中切开,
气管插管、颈总动脉插管,与呼吸、血压换能器相连,生物信号通过BL-420生物信号采集系统采集,显示记录。观察刺激迷走神
经、耳缘静脉注射稀释胆汁液、5种不同游离胆汁酸单品水溶液后血压、呼吸变化的特性。结果刺激迷走神经与注射稀释胆汁
液均可降低血压,两者在血压总的反应时间方面差异不大,但呼吸反应时间RT（胆汁）远远长于自身血压总反应时间T（胆汁）,有9~10
倍的差异（P<0.001）,呼吸幅度峰峰值RR（胆汁）明显大于经典反射性活动引起的RR（迷走神经）变化（P<0.001）。在RT1（胆汁）区间,RR（胆汁）
值显著高于RT2（胆汁）区间的RR（胆汁）值（P<0.001）;熊脱氧胆酸对血压、呼吸没有明显影响（P>0.05）;其他4种游离胆汁酸单品对呼
吸、血压有影响（P<0.001）。结论高胆汁酸血症引起的呼吸功能变化有反射性的因素,也有对呼吸功能直接的调节作用;在我
们的实验条件下,熊脱氧胆酸对血压、呼吸没有影响;其他4种单品均具有降低血压的能力,并且具有剂量依赖性;其他4种游离
胆汁酸单品对呼吸功能都有明显影响。
     

瞬时感受器电位通道1在臭氧致小鼠肺组织炎症中的表达

目的探讨经典瞬时感受器电位通道1（TRPC1）在臭氧暴露下小鼠肺组织中的表达情况。方法采用臭氧暴露建立小鼠肺
组织炎症模型,通过对小鼠行为学观察、支气管肺泡灌洗液的细胞分类计数和肺组织病理形态分析证实模型建立成功后,
RT-PCR法检测肺组织TRPC1 mRNA的表达,Western blot法和免疫组织化学染色法分别观察TRPC1蛋白在肺组织的表达和
定位情况。结果RT-PCR和Western blot 结果显示,与对照组相比,臭氧组小鼠肺组织TRPC1 mRNA及其蛋白表达上调（P<
0.05）;免疫组织化学染色法进一步证实,臭氧组小鼠肺组织TRPC1蛋白在肺泡上皮细胞、支气管上皮细胞、浸润的炎症细胞的
表达均较对照组明显增强（P<0.05）;相关性分析显示,小鼠肺组织中TRPC1 mRNA和蛋白的表达均与支气管肺泡灌洗液中白
细胞总数、巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞数呈显著性正相关（P<0.01）。结论TRPC1可能与小鼠肺组织炎症发病机制有关。
     

2.5%碳酸氢钠在人工支气管肺泡灌洗中的应用探讨

目的:探讨2.5%碳酸氢钠在人工支气管肺泡灌洗治疗中的作用。方法:对97例无自主呼吸,须持续呼吸机机械通气的低氧血症患者行气道注液→通气→翻身→拍背→吸痰系列人工支气管肺泡灌洗。其中治疗组63例予2.5%碳酸氢钠注射液为灌洗液;对照组34例予0.9%氯化钠注射液为灌洗液。结果:经人工支气管肺泡灌洗后肺功能明显好转,治疗后血氧饱和度(SaO_2)均有不同程度的提高,痰栓性肺不张获复张。治疗组显效率63.5%,痰液稀薄93.6%;对照组显效率55.9%,痰液稀薄70.6%,两组比较P<0.05,显示治疗效果与灌洗液药物作用相关。结论:应用2.5%碳酸氢钠行支气管肺泡灌洗效果良好,安全可行。     

氯喹对哮喘小鼠气道高反应性的抑制作用

目的探讨氯喹对哮喘小鼠气道高反应性的作用及其可能机制。方法Balb/c 小鼠随机分为对照组、哮喘组、氯喹治疗组、
地塞米松治疗组、氯喹+地塞米松治疗组,除对照组外,其余各组小鼠均给予OVA致敏和激发,建立哮喘小鼠模型,于每次激发
前腹腔注射给药,对照组则于同一时间予等量PBS处理,末次激发后24 h 内小鼠肺功能仪检测小鼠气道高反应性;检测支气管
肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数及分类计数;制作肺组织病理切片,HE 染色后光镜下观察病理变化;ELISA检测支气管肺泡灌
洗液中细胞因子IL-6、PGF2α水平。结果氯喹可明显降低哮喘小鼠气道高反应性（吸入25 mg/ml Ach 时4.5±0.4 vs 6.1±0.9,P<
0.05,吸入50 mg/ml Ach 时4.6±0.5 vs 8.2±1.0,P<0.001）;明显降低哮喘小鼠支气管肺泡灌洗液中炎症细胞数（P<0.01）;显著降
低哮喘小鼠病理评分（P<0.05）;可一定程度降低哮喘小鼠BALF中PGF2α因子水平;与地塞米松合用可明显减轻哮喘小鼠支气
管细支气管周围炎症（P<0.05）、血管周围炎症（P<0.01）、肺组织病理评分（P<0.001）,明显降低哮喘小鼠BALF中IL-6因子水平
（P<0.05）。结论氯喹可抑制哮喘小鼠气道高反应性;地塞米松与氯喹合用较单独用药效果更好,可能对中性粒细胞参与的哮
喘有效。
     

支气管肺泡灌洗液嗜酸细胞检测在嗜酸细胞性支气管炎诊断中的作用

目的对嗜酸细胞性支气管炎（EB）患者行支气管肺泡灌洗液嗜酸细胞检测及血清嗜酸细胞检测,评价支气管肺泡灌洗液嗜酸细胞检查在EB诊断中的作用。方法选择10例EB患者作为实验组及12名健康人作为对照组,分别对其进行支气管肺泡灌洗液嗜酸细胞检测及血清嗜酸细胞检测。结果实验组支气管肺泡灌洗液嗜酸细胞比例为（23.1±11.3）%,而对照组为（0.261±0.234）%,实验组明显高于对照组（P〈0.01）。结论支气管肺泡灌洗液嗜酸细胞在EB的诊断中有重要意义,且效果优于外周血嗜酸细胞检查。     

支气管肺泡灌洗液ADA定量检测对不明原因肺部阴影的临床诊断意义

目的探讨支气管肺泡灌洗液中腺苷脱氨酶（ADA）定量检测在不明原因肺部阴影诊断中的临床价值。方法对76例不明原因肺部阴影患者在行支气管镜检查时留取支气管肺泡灌洗液进行ADA定量检测。根据最终病理确诊结果分为结核组（35例）和肺癌组（41例）。结果结核组患者支气管肺泡灌洗液中的ADA浓度明显高于肺癌组患者支气管肺泡灌洗液中的ADA浓度,差异有统计学意义（P〈0.05）;结核组患者患侧支气管肺泡灌洗液中的ADA浓度明显高于健侧ADA的浓度,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论支气管肺泡灌洗液中ADA定量检测在肺部不明原因阴影的鉴别诊断,尤其是肺结核的诊断中具有较高的应用临床价值。     

十二指肠胃食管反流合并吸入性肺炎的支气管肺泡灌洗液分析

目的了解十二指肠胃食管反流（DGER）合并吸入性肺炎（AP）时的支气管肺泡灌洗液（BALF）的变化。方法实验组和对照组幼兔各5只,将胃液和胆汁注入实验组幼兔的气管内,复制成动物模型。对两组行支气管肺泡灌洗术,并对BALF的细胞和非细胞成分进行检测。结果实验组BALF的细胞总数明显增多（P〈0．001）,以中性粒细胞为主（P〈0．001）,巨噬细胞体积增大、并充满脂质。总蛋白明显增多（P〈0．001）。结论DGER合并AP时,胃酸和胆汁酸对肺脏有直接损伤作用;炎性细胞和炎症介质有间接损伤作用。BALF的改变有助于本病的诊断．     

支气管肺泡灌洗液中T-抗原检测对肺癌诊断的价值

目的 :探讨肺癌支气管肺泡灌洗液中T 抗原检测的诊断意义。方法 :收集 61例原发性肺癌和 3 1例非肺癌患者的支气管肺泡灌洗液 ,采用半乳糖氧化酶法检测痰液中T 抗原的敏感性和特异性。结果 :肺癌组T 抗原总阳性表达率为 68 3 % ,对照组BALF中T 抗原阳性率为 9 7%。中心型肺癌组支气管肺泡灌洗液中T 抗原阳性率 67 3 % ,纤支镜刷检细胞学阳性率为 61 2 % ,支气管肺泡灌洗液细胞学阳性率为 12 2 % ,支气管肺泡灌洗液中T 抗原的阳性率高于细胞学阳性检出率 ,二者比较差异有显著性 (P <0 .0 1)。周围型肺癌组支气管肺泡灌洗液中T 抗原阳性率为 71 4% ,纤支镜刷检细胞学阳性率为 5 0 0 % ,支气管肺泡灌洗液细胞学阳性率为 2 1 4% ,支气管肺泡灌洗液中T 抗原阳性率高于支气管肺泡灌洗液细胞学阳性率 ,二者比较差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论 :支气管肺泡灌洗液中T 抗原有较高的敏感性和特异性 ,可作为肿瘤标志物为临床诊断提供重要线索     

弥漫性间质性肺疾病肺功能改变和支气管肺泡灌洗液细胞学检测对比研究

弥漫性间质性肺疾病肺功能改变和支气管肺泡灌洗液细胞学检测对比研究李振华孔灵菲宋玉侯显明于润江（呼吸疾病研究所，沈阳１１０００１）关键词间质性肺疾病；肺功能；支气管肺泡灌洗为探讨肺功能改变和支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）细胞学检查对间质性肺疾病（ＩＬＤ）...     

肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF联合血清TSPOT-TB在病原学阴性肺结核中的诊断价值

目的：分析肺泡灌洗液利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术（Xpert MTB/RIF）联合血清结核感染T细胞斑点试验（TSPOT-TB）在病原学阴性肺结核中的诊断价值。方法：选取2021年2月至2022年2月在我院收治的120例可疑痰病原学阴性的肺结核患者为研究对象,研究对象的三次痰抗酸杆菌涂片检测均为阴性,且同时进行肺部CT、支气管镜检查等临床诊断,最终将120例肺结核患者分为肺结核组和非结核组,同时进行肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF、血清TSPOT-TB检测、MGIT 960药敏试验。结果：经血清TSPOT-TB检测涂阴肺结核阳性预测值为75.00%（48/64）、阴性预测值为73.21%（41/56）;经支气管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF检测涂阴肺结核阳性预测值为75.34%（55/73）、阴性预测值为82.97%（39/47）;支气管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF、血清TSPOT-TB及二者联合诊断涂阴肺结核的ROC曲线下面积（AUC）值分别为0.741、0.779、0.865;以MGIT 960药敏试验结果为金标准,Xpert MTB/RIF诊断利福平耐药性的阳性预测值和阴性预测值分别为88.89%（8/9）和96.86%（62/64）。结论：肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF联合血清TSPOT-TB在病原学阴性肺结核诊断中有较好的应用价值,且肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF检测利福平耐药性较可靠,值得临床推广使用。     

血清胆汁酸谱在肝病鉴别诊断中的应用研究

为探索血清胆汁酸谱在各种肝病中的特异性，用气相色谱法观察了黑索金，氯乙烯职业接触者及急性黄疸型肝炎、慢性活动型肝炎、肝硬化、肝癌等患者血清胆汁酸的变化情况。结果发现２种亲肝性毒物致肝损害时胆汁酸变化不同，黑索金接触者血清鹅脱氧胆酸（ＣＤＣＡ）、脱氧胆酸（ＤＣＡ）、石胆酸（ＬＣＡ）水平均升高，与对照组比较有显著性差异（Ｐ＜０．０５、Ｐ＜０．０１、Ｐ＜０．０１）；氯乙烯接触者则只有ＤＣＡ、ＬＣＡ水平升高，（Ｐ＜０．００１、Ｐ＜０．０００５）。其变化主要集中在次级胆汁酸上。急性黄疸型肝炎、慢性活动型肝炎、肝硬化、肝癌４种普通肝病血清ＣＡ、ＣＤＣＡ、ＤＣＡ和ＬＣＡ均有不同程度升高，以ＣＡ、ＣＤＣＡ变化较明显，与对照组比较其差异显著（Ｐ＜０．００５），但彼此间４种胆汁酸水平的变化都无显著性差异（Ｐ＞０．０５），而ＣＡ与ＣＤＣＡ比值互有不同，其差异有统计学意义，提示血清胆汁酸可用于鉴别诊断各型肝病。     

体外鼠肝灌注时胆酸对胆汁、谷氨酸脱氢酶和线粒体膜稳定性的影响（英文）

目的：探讨熊脱氧胆酸（UDCA）和鹅脱胆酸（CDCA）对胆汁分泌，谷氨酸脱氢酶（GLDH）和线粒体膜结构的作用。以及UDCA的线粒体膜保护作用。方法：应用离体大鼠肝灌注技术，0．1－0．5mmol/L胆酸灌注鼠肝，测定胆汁分泌及GLDH释放，分离鼠肝线粒体，自旋标记物插入线粒体膜，研究膜结构变化。结果：CDCA（0.1,0.3,0.5mmol/L)可使胆汁分泌分别减少12％，77．25％，78．98％，明显增加GLDH释放达3，9和12倍，并增加线粒体膜的流动性，UDCA在0.3,0.5mmol/L时可增加胆汁分泌达1．8倍和1．9倍，不影响GLDH和线粒体膜结构，预灌注UDCA可部分缓解CDCA引起的GLDH释放和胆汁分泌减少，稳定线粒体膜结构，结论：CDCA破坏线粒体膜和引起肝功能减退，UDCA可改善胆汁分泌，部分阻止CDCA对线粒体的损害，低浓度CDCA不损害肝功能。     

血清胆汁酸谱在肝病鉴别诊断中的应用研究

为探索血清胆汁酸谱在各种肝病中的特异性，用气相色谱法观察了黑索金、氯乙烯职业接触者及急性黄疸型肝炎、慢性活动型肝炎、肝硬化、肝癌等患者血清胆汁酸的变化情况。结果发现２种亲肝性毒物致肝损害时胆汁酸变化不同，黑索金接触者血清鹅脱氧胆酸、脱氧胆酸、石胆酸水平升高，与对照组比较有显著性差异；氯乙烯接触者则只有ＤＣＡ、ＬＣＡ水平升高。（Ｐ〈０．００１，Ｐ〈０．０００５），其变化主要集中在次级胆汁酸上，急性黄     

呼吸窘迫综合征肺表面活性物质变化的探讨

实验性呼吸窘迫综合征兔支气管肺泡灌洗液总磷脂，磷脂酰胆碱和磷脂酰甘油减少，白蛋白和Ｃ－反应蛋白升高，且与ＢＡＬＦ表面张力增大相关。钌红染色见肺泡表面活性层失去连续，绒状结构，而以变性状态散落于肺泡腔。还见到纤维素阻拦肺表面活性物质，使之不能向肺泡表面解聚的特殊现象。以上结果表明，ＰＳ质、量和形态结构的异常在实验性ＲＤＳ发病中有重要作用，蛋白性肺泡渗出物能破坏或抑制ＰＳ的结构和功能。     

高效液相色谱串联质谱法检测妊娠期肝内胆汁淤积症7种胆汁酸及其临床意义

目的 比较妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)孕妇、肝功异常孕妇和正常孕妇胆汁酸谱中7种胆汁酸亚型在不同孕周的血清水平差异及其与妊娠结局的关系,探讨血清胆汁酸亚型分析在临床应用中的价值。 方法 回顾性分析2018年9月—2019年2月于杭州市妇产科医院常规产检并分娩的ICP孕妇84例、单纯肝功异常孕妇20例和正常孕妇30例,于9～13+6周、15～20+6周及28～40周采集空腹静脉血,应用高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)检测血清中胆酸(CA)、鹅脱氧胆酸(CDCA)、石胆酸(LCA)、熊脱氧胆酸(UDCA)、甘氨胆酸(GCA)、牛磺胆酸(TCA)、甘氨鹅脱氧胆酸(GCDCA)水平;分析与相应妊娠结局间的关系。 结果 孕早、中、晚期ICP孕妇均有多种胆汁酸亚型水平显著高于正常孕妇组和肝功异常孕妇组,以GCA和TCA为主;ICP组胆汁酸谱随孕周升高趋势明显,7种胆汁酸亚型在3个妊娠阶段均有显著差异;GCA与分娩孕周负相关,GCA、LCA、GCDCA与新生儿体重负相关,其他胆汁酸与临床结局无显著相关性。 结论 3组病例的胆汁酸谱随孕周变化规律不同;CA/CDCA比值有望作为区分ICP和单纯肝功异常的指标;LCA、GCA和GCDCA升高可能与不良预后有关,HPLC-MS/MS法检测的7种胆汁酸可用于ICP临床诊断及疗效评估。      

Bile acid metabolism in extrahepatic biliary atresia: lithocholic acid in stored dried blood collected at neonatal screening

Lithocholic acid (LCA) is a potent hepatotoxic compound. Fetal LCA may have a role in the pathogenesis of neonatal cholestasis/extrahepatic biliary atresia (EHBA). Fetal liver efficiently hydroxylates LCA in several positions. This may represent a detox-ification mechanism. In the present study LCA, cholic acid (CA) and chenodeoxycholic acid (CDCA) were quantitated by gas chromatography-mass spectrometry using selected ion monitoring in small amounts of stored dried blood from six newborn infants with EHBA and fourteen con-trols. The blood was collected at neonatal metabolic screening. Mean blood levels (+/- S.E.M.) of LCA were 0.11 +/- 0.04 microM in the in-fants with EHBA and 0.08 +/- 0.02 microM in the control infants. The correspon-ding levels for CA and CDCA were 15.6 +/- 3.6 microM and 7.4 +/- 2.5 microM in the infants with EHBA and 1.7 +/- 0.3 microM and 1.8 +/- 0.4 microM in the controls. The increased levels of CA and CDCA in the infants with liver disease can be explained by cholestasis. The low blood levels of LCA indicate a normal fetal metabolism of this bile acid in EHBA.     

胆汁酸通过p-STAT3-SOCS3途径调节下丘脑神经元食欲及抑制信号肽表达

目的 探索胆汁酸牛磺石胆酸或鹅去氧胆酸对小鼠下丘脑GT1-7细胞食欲抑制信号肽表达的影响及可能的作用途径。方法 将实验分为3组,每组3个平行样本。空白对照组：仅给予含10%胎牛血清高糖培养基培养GT1-7细胞。胆汁酸牛磺石胆酸处理组：分别采用10 nmol/L,100 nmol/L,1 μmol/L和10 μmol/L浓度的胆汁酸牛磺石胆酸处理GT1-7细胞12、24和48 h。鹅去氧胆酸处理组：分别采用10 nmol/L,100 nmol/L,1 μmol/L和10 μmol/L浓度的鹅去氧胆酸处理GT1-7细胞12、24和48 h。采用Real-time PCR 检测GT1-7细胞食欲抑制信号肽阿黑皮素原（POMC）mRNA表达水平;ELISA法检测POMC剪切产物抑制食欲肽α-促黑素细胞激素水平。采用Western blot检测G蛋白偶联胆汁酸受体（TGR5）和法呢醇X受体表达以及磷酸化信号转导转录激活因子3（p-STAT3）,磷酸化蛋白激酶（p-AKT）,细胞因子信号传导抑制因子3（SOCS3）蛋白表达量。结果 Western blot结果显示,下丘脑神经元GT1-7细胞能表达TGR5和FXR两种胆汁酸受体,且表达量受胆汁酸调节。Real-time PCR检测结果显示,10 μmol/L tLCA或鹅去氧胆酸处理GT1-7细胞24 h后POMC mRNA表达水平上升,ElISA结果也发现10 μmol/L 胆汁酸牛磺石胆酸或鹅去氧胆酸处理GT1-7细胞24 h后具有抑制食欲作用的POMC衍生肽[α]-MSH释放增多。Western blot结果显示,胆汁酸处理可上调GT1-7细胞p-STAT3和p-AKT蛋白表达,且调控STAT3信号通路的SOCS3蛋白表达也有增加。结论 胆汁酸牛磺石胆酸或鹅去氧胆酸通过GT1-7细胞胆汁酸受体TGR5和FXR促进POMC mRNA表达,增加[α]-促黑素细胞激素水平,提示胆汁酸具有通过抑制食欲信号肽表达调节食欲的潜在作用,该作用是通过p-AKT和p-STAT3 -SOCS3 信号通路实现。     

低剂量黄连素对小鼠肠道短链脂肪酸和胆汁酸成分以及血脂的影响

 目的 研究低剂量黄连素对正常饮食小鼠肠道短链脂肪酸、胆汁酸以及血脂的影响,探讨其降血脂作用的机制。方法 40只C57BL/6小鼠被随机分为对照组和黄连素低、中、高剂量组,每组雌雄各5只。除对照组外,低、中、高剂量实验组分别以10、20、40 mg·kg^-1·d^-1的剂量将黄连素添加至饮水中进行干预。4周后检测体脂率、瘦体重率、血清总胆固醇（total cholesterol,TC）、低密度脂蛋白（low-density lipoprotein,LDL）、高密度脂蛋白（high-density lipoprotein,HDL）、三酰甘油（triglyceride,TG）含量,并用气相色谱法（gas chromatography,GC）检测肠道短链脂肪酸含量,用液相色谱串联质谱法（liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry,LC-MS）检测肠道胆汁酸含量。结果 雄性小鼠黄连素组肠道异丁酸（isobutyric acid,IBA）、异戊酸（isovaleric acid,IVA）、胆酸（cholic acid,CA）、鹅去氧胆酸（chenodeoxycholic acid,CDCA）、牛磺胆酸（taurocholic acid,TCA）及去氧胆酸（deoxycholic acid,DCA）含量明显高于对照组且随黄连素剂量升高而升高（P<0.05）,血清TG水平随黄连素剂量升高而降低（P<0.01）。雌性小鼠黄连素组肠道胆酸及石胆酸（lithocholic acid,LCA）含量明显高于对照组且随黄连素剂量升高而升高（P<0.05）,血脂及肠道短链脂肪酸含量的差异无统计学意义。结论 低剂量黄连素可以促进正常饮食小鼠肠道短链脂肪酸和胆汁酸产生,降低正常饮食小鼠血清TG水平。低剂量黄连素的降血脂效果在雄性小鼠中更明显。