与坐骨神经和盆神经对应的后根节中CGRP,SP,NOS样阳性神经元？…

为了探索大鼠坐骨神经（躯体性）和盆神经（内脏性）内与传递痛信号有关的初级传入神经元在后根节内的分布特点，本研究采用荧光金逆行追踪与免疫荧光组化技术相结合的方法，对ＣＧＲＰ能、ＳＰ能和ＮＯＳ样神经元在相应的根节内（坐骨神经，Ｌ４￣Ｌ６；盆神经，Ｌ６￣Ｓ１）的分布状况进行了分析。结果表明：（１）坐骨神经和盆神经初级传元中有相当数量的ＣＧＲＰ和ＳＰ样阳性细胞，与这二者相比，ＮＯＳ样细胞数量稀少；（２）盆     

大鼠三叉神经节细胞向三叉神经脊束核各亚核的分枝投射

本文应用荧光素双标记与免疫荧光结合方法研究了单个含ＳＰ或ＣＧＲＰ的三叉神经节细胞向三叉神经脊束核的尾侧亚核、极间亚核和吻侧亚核的分枝投射。将ＤｉａｍｉｄｉｎｏＹｅｌｌｏｗ（ＤＹ）注入尾侧亚核，ＦａｓｔＢｌｕｅ（ＦＢ）分别注入吻侧亚核或极间亚核，发现ＤＹ／ＦＢ双标细胞占同侧三叉神经节内标记细胞总数的１３．２％（ＦＢ注入吻侧亚核例）和２．３％（ＦＢ注入极间亚核例）；双标细胞中含ＳＰ者分别为７４．４％和６９．６％；含ＣＧＲＰ者分别为７２．１％和６４．３％。将ＤＹ注入极间亚核，ＦＢ注入吻侧亚核时，ＤＹ／ＦＢ双标细胞占同侧三叉神经节标记细胞总数的１．６％，双标细胞中有６７．９％为ＳＰ阳性，７３．９％为ＣＧＲＰ阳性。多数的双标且呈ＳＰ或ＣＧＲＰ阳性的三叉神经节细胞直径约为２５～５０μｍ，为中、小型节神经元，而直径大于５０μｍ的大型细胞较少见。以上结果提示，三叉神经初级传入纤维进入脑干后的下降支分枝投射向三叉神经脊束核的各亚核，它们可能与面口部的痛信息传递有关。ＳＰ和ＣＧＲＰ是这些分支投射神经元的重要神经活性物质。     

骶髓后连合核接受盆内脏伤害性信息传入的形态学证明

为阐明投射至骶髓后连合核的盆内脏初级传入中是否含有传递伤害性信息成分，本研究综合运用特异性标记初级传入Ｃ纤维的ＢＳＩ－Ｂ４－ＨＲＰ跨节追踪技术，神经干局部涂抹Ｃ纤维毒素ＣａＰｓａｉｃｉｎ并结合ＳＰ免疫组化方法，研究了猫投射至骶髓后连合核的盆神经初级传入纤维中是否含有传递伤害性刺激的成分；同时观察了秋水仙素处理的骶２后根节内ＢＳＩ－Ｂ４标记的初级传入神经元与ＳＰ免疫阳性神经元的关系。结果如下：（１）向盆神经注入ＢＳＩ－Ｂ４－ＨＲＰ，骶１～３后根节内出现平均直径３４μｍ的标记细胞，后连合核内出现密集的标记终末，电镜下证明通过Ｌｉｓｓａｕｅｒ氏束进入脊髓内的标记纤维均为无髓纤维；（２）对盆神经进行局部Ｃａｐｓａｉｃｉｎ处理，引起后连合核内的ＳＰ免疫阳性纤维和终末明显减少；（３）骶２后根节内ＢＳＩ－Ｂ４－ＦＩＴＣ标记细胞有１７％同时呈ＳＰ免疫阳性；（４）骶２后根节内ＢＳＩ－Ｂ４－ＨＲＰ标记的盆内脏初级传人神经元的３９％同时呈ＳＰ免疫阳性。本研究结果在形态学上证实了骶髓后连合核接受盆腔内脏伤害性信息的传入，它可能是中继和整合盆内脏伤害性信息的低级中枢。     

LEAKAGE TESTING OF ENDOSCOPE

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THE STATUS AND TREND OF LAPAROSCOPIC SURGERYIN CHINA

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异体神经移植后再生神经的荧光逆行标记

本文用ＷＩＳＴＡＲ大鼠作为实验模型，切除１ｃｍ坐骨神经，再用同系ＷＩＳＴＡＲ大鼠从骨神经行异体桥接，修复坐骨神经的缺损。用ＦＬＵＲＯ－ＧＯＬＤ（Ｆ．Ｇ）或ＦＡＳＴ ＢＬＵＥ（Ｆ．Ｂ）两种荧光标记物，进行示踪检验，证实ＷＩＳＴＡＲ鼠异体神经桥接能修复周围神经的缺损。     

PREPARATION OF COLLAGEN/HYDROXYLAPATITE COMPOSITE FILLING PLASTIC MATERIAL AND ANIMAL EXPERIMENT STUDY

ＰＲＥＰＡＲＡＴＩＯＮＯＦＣＯＬＬＡＧＥＮ／ＨＹＤＲＯＸＹＬＡＰＡＴＩＴＥＣＯＭＰＯＳＩＴＥＦＩＬＬＩＮＧＰＬＡＳＴＩＣＭＡＴＥＲＩＡＬＡＮＤＡＮＩＭＡＬＥＸＰＥＲＩＭＥＮＴＳＴＵＤＹＰＲＥＰＡＲＡＴＩＯＮＯＦＣＯＬＬＡＧＥＮ／ＨＹＤＲＯＸＹＬＡＰＡ...     

神经营养素在小鼠脾的定位研究

为了解神经营养素与免疫系统的关系，用免疫组织化学方法对神经营养素包括神经生长因子（ＮＧＦ）、脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）、神经营养素３（ＮＴ－３）进行小鼠脾的定位研究。结果表明：３种神经营养素的免疫反应均存在于脾内，但分布特点各不相同。ＮＧＦ主要分布于白髓动脉周围淋巴鞘（ＰＡＬＳ）外层、边缘区（ＭＺ）和红髓（ＲＰ）的巨噬细胞样和淋巴细胞样细胞；ＢＤＮＦ除具有与ＮＧＦ相似的分布特点外，还见于脾淋巴小结生发中心的淋巴细胞样细胞；ＮＴ－３则存在于白、红髓的网状细胞样细胞。这一结果提示，脾的免疫和非免疫细胞均可能产生神经营养素，并提示不同类型的神经营养素对免疫系统有不同的作用。     

面口部炎症刺激增强CGRP mRNA、PPTA mRNA及NOS在大鼠三叉神经节中的表达

为了研究ＣＧＲＰｍＲＮＡ、ＰＰＴＡｍＲＮＡ和ＮＯＳ在伤害性刺激后大鼠ＴＧ中合成和表达的变化，将４％鹿角菜胶（ＣＡＲ）溶液注射到大鼠一侧口周皮下作为伤害性刺激模型，用ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学法结合ＣＧＲＰ、ＰＰＴＡｍＲＮＡｓ原位杂交组织化学法对此进行了观察。结果显示：对照组大鼠ＴＧ中约有３２．２％、１６．２％和１０％的神经元分别呈ＣＧＲＰｍＲＮＡ、ＰＰＴＡｍＲＮＡ和ＮＯＳ阳性。ＣＡＲ刺激后，在刺激侧ＴＧ、ＣＧＲＰｍＲＮＡ、ＰＰＴＡｍＲＮＡ和ＮＯＳ阳性神经元的数量均增多，其阳性率分别达到了３８．６％、２２．８％和１４．２％。ＴＧ中约有６．８％和７．３％的神经元同时呈ＮＯＳ和ＣＧＲＰｍＲＮＡ或ＮＯＳ和ＰＰＴＡｍＲＮＡ阳性，ＣＡＲ刺激使得两种双标神经元的数量也明显增多，双标细胞占ＴＧ细胞总数的百分比分别达到了１１．０％和１０．９％，而且刺激后增加的ＮＯＳ阳性神经元主要为双标神经元。上述结果提示ＣＧＲＰｍＲＮＡ、ＰＰＴＡｍＲＮＡ和ＮＯＳ阳性神经元，尤其是共存神经元可能在面口部伤害性信息的传递和调节中起重要作用，伤害性刺激所诱导的ＮＯＳ合成的增加与ＣＧＲＰｍＲＮＡ和ＰＰＴＡｍＲＮＡ表达的增强可能有密切的关系。     

抗氧化剂PDTC抑制氧化的低密度脂蛋白诱导的人肾小球系膜细胞NF_(-k)B活化

目的 研究氧化的低密度脂蛋白（Ｏｘ－ＬＤＬ）对体外培养的人肾小球系膜细胞（ＨＭＣ）核因子－ＫＢ（ＮＦ－ＫＢ）活化的影响，以及抗氧化剂毗咯二硫氨基甲酸酯（Ｐ ＤＴＣ）对ＮＦ－ＫＢ活化的抑制作用，探讨ＯＸ－ＬＤＬ介导肾损害的基因调控机制及抗氧化剂ＰＤＴＣ防治脂质肾损害的可能性。方法 将Ｏｘ－ＬＤＬ或ＰＤＴＣ与ＨＭＣ共培养后，提取细胞核蛋白进行凝胶迁移率变动分析（ＥＭＳＡ）检测ＮＦ－ＫＢ的活化，用细胞ＥＬＩＳＡ法检测细胞内ＩＫＢα蛋白含量的变化，反映ＩＫＢα的降解及免疫组化染色检测细胞内的Ｐ６５向核转位。结果 正常对照组未见ＮＦ－ＫＢ活化，当用不同浓度（１０、２５、５０及１００ｍｇ／Ｌ）的Ｏｘ－ＬＤＬ，刺激肾小球系膜细胞 ｌｈ后，均可引起细胞 ＮＦ－ＫＢ活化及 ＩＫＢα降解。与对只组相卜较差异显著（ｐ＜０．０５），以５０ｍｇ／Ｌ 的ＯＸ－ＬＤＬ刺激ＨＭＣ１ｈ，ＮＦ－ＫＢ活化及 ＩＫＢα降解最明显。ＮＦ－ＫＢ活化的同时，伴有Ｐ６５由胞浆向胞核的转位。１００μｍｏｌ／Ｌ ＰＤＴＣ，能明显抑制 ＮＦ－ＫＢ的活化、ＩＫＢα降解（ｐ＜０．０１）及 Ｐ６５的核转位。结论Ｏｘ－ＬＤＬ。能诱导ＨＭＣ的ＩＫＢαａ降解、Ｐ６５的核转位，最终使Ｎ     

Correlation Between the Distribution of SP and CGRP Immunopositive Neurons in Dorsal Root Ganglia and the Afferent Sensation of Preputial Frenulum

The aim of this study was to explore the distribution of substance P (SP) and calcitonin gene‐related peptide (CGRP) immunoreactive nerve terminals in the penis prepuce and the preputial frenulum. The possible correlation between SP‐ and CGRP‐immunopositive neurons in dorsal root ganglia (DRG) and the afferent sensation of the penile preputial frenulum is also discussed. Immunohistochemistry showed SP‐ and CGRP‐positive nerve terminals in the epidermal basal layer of the prepuce and frenulum in adult human males. The majority of the nerve terminals presented as bundles of different lengths and a few as enlarged nodosities. The density of SP‐ and CGRP‐immunopositive nerve terminals in the preputial frenulum was significantly higher than those in the penis prepuce (P<0.01). Fluoro‐Gold (FG) retrograde tracing method was used to trace the origin of nerve terminals in Sprague‐Dawley rats. SP and CGRP immunofluorescence labeling was employed to detect the distribution of SP‐ and CGRP‐immunoreactive neurons in DRG. FG retro‐labeled neurons were localized in L₆‐DRG and S₁‐DRG. All the FG/SP and FG/CGRP double‐labeled neurons were medium or small‐sized. One‐third of the FG‐labeled neurons were SP‐immunoreactive, and a half of them CGRP‐immunoreactive in L₆‐DRG and S₁‐DRG, respectively. The FG/SP/CGRP‐labeled neurons accounted for one fifth of the FG retro‐labeled neurons. Taken together, these data suggest that the SP‐ and CGRP‐immunopositive nerve fibers may participate in the transmission of afferent sensation in the preputial frenulum. Anat Rec, 2011. © 2010 Wiley‐Liss, Inc.     

骶髓后连合核内躯体初级传入粗纤维的证明及其意义探讨

近 2 0年来的研究表明 ,骶髓后连合核是接受和中继盆腔脏器初级传入信号的重要内脏感觉核团。通过盆神经传入脊髓的盆腔脏器初级传入神经纤维除一部分投射于中间带外侧核区参与排尿反射活动的调控外 ,其余部分基本上都投射于骶髓后连合核。本文作者等又曾发现躯体神经 (坐骨神经、阴部神经 )的初级传入粗纤维有一部分经后索投射于后连合核 ,推测这些躯体初级传入粗纤维可能与内脏传入细纤维汇聚于后连合核神经元并在此进行机能的整合、产生新的神经效应。但是投射于后连合区的躯体初级传入粗纤维 ,必须在电镜下直接证实。为此 ,本研究通过透射电镜及 HRP标记电镜技术探索了阴部神经躯体初级传入粗纤维在后连合核区的存在 ,并用 Philips CM-10 0电镜附件 Measuring装置测量了这种纤维的轴突直径和髓鞘厚度、通过计算求得了它们之间的比例 ( A/M值 ) ,藉此取得了科学地辨认并确证粗纤维的根据     

大鼠骶髓后连合核内代谢型谷氨酸受体的定位分布

本研究用免疫组织化学技术观察了代谢型谷氨酸受体７ 种亚型（ｍ ＧｌｕＲ１, １α, ２, ３, ５, ７, ８）在大鼠骶髓后连合核的分布。结果如下：（１）骶髓后连合核含有少量大、中型ｍ ＧｌｕＲ１ 样阳性神经元的胞体,但几乎看不到阳性纤维和终末;（２）ｍ ＧｌｕＲ１α样阳性胞体较少,且多为小型,阳性纤维和终末却十分致密;（３）骶髓后连合核可见一些中、小型ｍ ＧｌｕＲ２／３ 样阳性胞体,阳性纤维和终末比较稀疏;（４）骶髓后连合核可见少量小型ｍ ＧｌｕＲ５ 样阳性胞体,而阳性纤维和终末却十分致密;（５）骶髓后连合核内淡染的ｍ ＧｌｕＲ７ 样阳性胞体、纤维和终末均较少;（６）骶髓后连合核几乎看不到ｍ ＧｌｕＲ８ 样阳性胞体和纤维,只能见到少量阳性终末样结构。另外,在外侧脊核内可见到一些ｍ ＧｌｕＲ７ 样阳性胞体和纤维;在脊髓背角浅层内可见到许多ｍ ＧｌｕＲ７ 样阳性胞体、纤维和终末以及少量ｍ ＧｌｕＲ８ 样阳性结构。骶髓后连合核是后肢躯体非伤害性信息和盆内脏伤害性信息传递的重要汇聚点。本研究的结果进一步证实谷氨酸是参与躯体和内脏感觉信息传递的重要神经递质。它可通过与在骶髓后连合核大量分布的ｍ ＧｌｕＲｓ（ｍ ＧｌｕＲ１, １α, ２, ３, ５     

Distinct chemical classes of medium-sized transient receptor potential channel vanilloid 1-immunoreactive dorsal root ganglion neurons innervate the adult mouse jejunum and colon

Physiological studies suggest visceral spinal afferents are generally small diameter, unmyelinated C-fibers or myelinated Adelta-fibers, but little is known about the size and chemical phenotypes of visceral sensory neurons supplying the small intestine. This study examines the size and expression patterns of transient receptor potential vanilloid 1 (TRPV1), calcitonin gene-related peptide (CGRP), substance P (SP), neuronal nitric oxide synthase (NOS) and isolectin B4-binding (IB4) in dorsal root ganglion (DRG) neurons projecting to the gastrointestinal tract. The spinal afferent innervation of mouse jejunum and distal colon was investigated with retrograde neuronal tracing and multi-label immunohistochemistry. Expression of histochemical markers and soma sizes of retrogradely labeled DRG profiles were determined with confocal microscopy. Most (>75%) jejunal and colonic afferent neurons were medium- and large-sized cells. The majority (82%) of jejunal afferents expressed TRPV1, but few bound IB4. All retrogradely labeled jejunal afferents expressing NOS-immunoreactivity (64%) also expressed TRPV1 and CGRP and most expressed SP. Most labeled colonic afferents expressed TRPV1 (62%) and half expressed NOS. Taken together these data demonstrate that the spinal afferent supply of the jejunum and colon is largely from medium and large sensory neurons, suggesting most intestinal afferent axons are A fibers. The various chemically-defined subpopulations of afferents may play multiple roles in sensory innervation of the jejunum apart from nociceptive transduction. Additionally, we have identified a unique chemical code, TRPV1/NOS/CGRP/SP, that distinguishes many spinal afferent terminals from those of enteric neurons.     

5-羟色胺在大鼠腰骶髓后连合核和中间带外侧核参与盆腔内脏炎性痛调控的形态学研究

本研究运用荧光金(FG)逆行束路追踪与5-HT1A受体免疫荧光组织化学染色技术相结合,观察了大鼠腰骶髓后连合核(DCN)和中间带外侧核(IML)内感受盆腔内脏伤害性信息并向外侧臂旁核(LPB)发出投射的神经元呈5-HT1A受体免疫反应阳性。将FG注入一侧LPB后,可在腰骶节段(L6-S2)观察到大量的FG逆标神经元,这些FG逆标神经元主要集中于DCN和IML内,以同侧为主;5%福尔马林注入大鼠结肠后,Fos蛋白阳性神经元主要分布于腰骶髓DCN和IML,以同侧为主,在同侧脊髓背角I层、II层和深层也有少量的分布。另外,在腰骶髓DCN和IML内,还可观察到大量5-HT1A受体阳性的神经元胞体、纤维和终末,同时有部分Fos蛋白阳性的FG逆标神经元呈5-HT1A受体阳性。上述结果提示,大鼠腰骶髓DCN和IML内的5-HT能终末可能对盆腔内脏伤害性信息的传递发挥调控作用。     

内脏和躯体初级传入冲动在猫骶髓后连合核的汇聚

用玻璃微电极细胞外记录的方法，观察了在电刺激猪盆神经和胫神经或机械性刺激会阴部时骶髓后连合核神经元自发放电频率的变化．共记录了80个单位放电神经元，其中13个为无关单位．电反应类型有3种：长潜伏期长串反应，短潜伏期长串反应，抑制性反应．在所观察的对刺激呈有效反应的67个单位中，30个（44．78％）对躯体和内脏刺激均起反应，其中，12个对盆神经和胫神经传入冲动都起反应；18个对盆神经和会阴部躯体感受野的传入呈汇聚性反应．对会阴部感受野施加各种机械性刺激，鉴定此汇聚神经元为WDR神经元．67个有效反应单位中还有5个（7.46％）只对内脏传入冲动，32个（47.76％）仅对躯体传入冲动做出反应．本研究从电生理学上验证了本教研室在形态学上发现的盆腔内脏（膀胱）初级传入和坐骨神经躯体初级传入在骶髓后连合核神经元的汇聚，并对汇聚的类型和意义进行了观察和讨论．     

猫阴部神经传入传出成分在脊髓内的定位分布—HRP逆行及跨越神经节追踪研究

向猫阴部神经及其分支注入HRP溶液,观察并分析了逆行和跨节追踪的结果。 1.证实阴部神经为含躯体传出、传入,内脏传出、传入纤维的混合神经,其内脏性传出、传入成分仅存在于阴茎背神经中。 2.逆行标记细胞出现于L_7—S_3前角Onuf核和S_(1-3)的中间带外侧核。本文结果表明,Onuf核是支配盆底横纹肌的运动核,但它和其它前角运动核在细胞形态和活性物质的分布上都明显不同。特别是它的一部分神经元的树突形成树突束到达中间带外侧核。本文结合排尿、排便功能从形态学上较详细地讨论了Onuf核和中间带外侧核的关系。 3.本文证明阴部神经领域的内脏初级传入(来自阴茎背神经)和躯体初级传入纤维都向骶髓后连合核区有浓密的投射。结合以往的工作讨论了盆腔脏器、外生殖器的内脏传入和坐骨神经、阴部神经的躯体传入在骶髓后连合核区汇聚的现象及机能意义,推测这种汇聚可能是产生牵涉痛和针刺镇痛机制的形态学基础。     

大鼠脊髓向延髓网状背侧亚核投射神经元的形态及分布

既往的电生理学研究已经证实,位于延髓尾侧部的网状背侧亚核（subnucleusretlcularlsdorsalls．SRD）对伤害性信息的调控具有重要作用j',SRD神经元可被来自全身各部的AS或C纤维的冲动所兴奋,这种兴奋可被吗啡抑制,又可被纳洛酮所翻转"。。形态学研究也表明,在脊髓和S...     

大鼠颈脊神经节中降钙素基因相关肽免疫阳性神经元分支至颈椎关节突关节囊和前肢

目的探讨颈椎关节突关节疼痛综合征并发上臂痛的神经解剖学机制。方法以抗降钙素基因相关肽（CGRP）抗体对SD大鼠C4-T1关节突关节囊作免疫组织化学染色。将荧光标记物快蓝（FB）和核黄（NY）分别注射到SD大鼠右侧桡神经和C1～T1颈椎关节突关节囊。显微镜下观察颈脊神经背根节（DRG）内被逆行荧光标记的神经元，再用抗CGRP抗体行免疫组织化学染色，观察DRG内的CGRP免疫阳性神经元。最后比较荧光照片和免疫组织化学照片上的神经元。结果C4～T1关节突关节囊上分布着丰富的CGRP免疫阳性神经纤维，它们或独立走行或交织成网。在C5～T1各节段的DRG中均可观测到被FB单标（76％）、NY单标（16％）和FB／NY双标（8％）的神经元。约40％的荧光逆行标记神经元在免疫组织化学染色的切片上呈CGRP免疫反应阳性。结论大鼠颈部DRG内一部分含GRP的感觉神经元的周围突分两支，一支支配颈椎关节突关节囊，另一支随桡神经分布到前（上）肢。提示，颈椎关节突关节疼痛综合征并发上臂牵涉痛的神经形态学基础之一可能发生在DRG水平。     

阿片μ受体与SP、CGRP和SOM在大鼠三叉神经节和背根神经节内的共存研究

本研究应用免疫荧光及免疫荧光双重染色技术，观察了大鼠三叉神经节和背根神经节内阿片μ受体免疫反应阳性神经元的分布及其与SP、CGRP和SOM阳性神经元之间是否存在共存关系。结果显示：（1）三叉神经节和背根神经节内的阿片μ受体免疫反应阳性神经元多为中小到细胞，其免疫反应阳性产物不仅见于胞膜表面也出现于胞浆内。SP和SOM免疫反应阳性神经元亦为中小型细胞，但以小细胞为主，而CGRP免疫反应阳性神经元有一部分为大型神经元。（2）在三叉神经节内，有相当数量的阿片μ受体阳性神经元同时呈SP、CGRP或SOM免疫反应阳性。其中双重免疫反应神经元分别占阿片μ受体阳性细胞总数的34．6％、54．3％和23.9％，而在SP、CGRP和SOM各阳性细胞中分别有49．4％、50．9％和37.5％的神经元同时是阿片μ受体免疫反应阳性．（3）在背根神经节内，也有相当数量的神经元呈阿片μ受体与SP、CGRP和SOM双重免疫反应阳性，其中双标细胞数分别占阿片μ受体免疫反应阳性细胞总数的30．1％、48．4％和26.8％，各占SP、CGRP和SOM阳性细胞总数的51．5％、44．2％和35．9％。本文结果提示吗啡的镇痛作用中有部分可能是通过激活阿片μ受体来影响初级传入纤维中SP、CGRP和SOM的释放而实现的．