外周血CD4+CD25+调节性T细胞与乙型肝炎疫苗接种后应答关系的研究

目的 通过检测乙型肝炎(简称乙肝)疫苗接种后弱应答和无应答人外周血CD4+CD25+ 调节性T细胞(CD4+ CD25+ regulatory T cell,简称Treg细胞)的频率,探讨CD4+ CD25+ 调节性T细胞与乙肝疫苗接种后弱和(或)无应答之间的关系.方法 利用流式细胞分析方法 对25例乙肝疫苗无应答、30例乙肝疫苗弱应答者外周血Treg细胞的频率进行分析,另外选取20例乙肝疫苗强应答者作为对照.结果 强应答组Treg细胞的频率为(4.32±1.21)%,弱应答组Treg细胞的频率为(7.01±1.06)%,无应答组Treg细胞的频率为(12.75±2.01)%,无应答组和弱应答组与强应答组相比Treg细胞频率显著升高(t=8.426,t=3.289,P值均＜0.01).结论 乙肝疫苗接种后无应答和弱应答现象与外周血CD4+ CD25+ 调节性T细胞频率升高存在一定关系.     

聚乙二醇干扰素α-2a治疗后乙型肝炎患者外周血Th1与Th2细胞变化

目的 研究聚乙二醇IFN-α2a(Peg-IFN-α2a)治疗后完全应答乙型肝炎患者外周血中Th1与Th2细胞频数变化.方法 抽取应用Peg-IFN-α2a治疗发生完全应答乙型肝炎患者7例、健康对照者9名、未进行治疗的乙型肝炎患者9例的静脉血,分离血清及外周血单核细胞(PMBC),检测血清中HBV标志物、HBV DNA、ALT以及外周血中的CD3+CD4+IFN-γ+T细胞、CD3+CD4+IL-4+T细胞的频数.结果 7例患者发生HBsAg转换的时间最短为36周,最长为49周,平均为(39.28±6.44)周.患者外周血中CD3+CD4+IFN-γ+T细胞的频数表现为持续下降,但6个月后仍高于健康对照;而CD3+CD4+IL-4+T细胞的频数在发生应答的时间点升高,明显低于健康对照,6个月后下降.结论 应用Peg-IFN-α2a治疗后发生完全应答的患者,体内Th1类免疫应答下降而Th2类应答不足,体内仍存在一定程度的炎症反应.     

TLR3对乙型肝炎疫苗无弱应答婴儿脐血单个核细胞Th1/Th2型细胞因子的影响

  目的   探索能否通过上调乙型肝炎病毒表面抗原(hepatitis B surface antigen, HBsAg)阳性母亲脐血单个核细胞(cord blood mononuclear cells, CBMCs)TLR3改变其Th1/Th2型细胞因子表达水平及其程度。   方法   收集40例HBsAg阳性母亲脐血, 分离CBMCs进行体外实验, 分对照组、HBV(hepatitis B virus, HBV)刺激组和聚肌苷酸胞苷酸(polyinosinic-polycytidylic acid, Poly I:C)+HBV刺激组。用流式细胞术和酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)分别检测TLR3蛋白和Th1/Th2型细胞因子水平, 以化学发光免疫分析法测定婴儿12月龄外周血抗-HBs水平判定乙型肝炎疫苗(简称乙肝疫苗)应答情况。   结果   经TLR3激动剂协同HBV干预后, 乙肝疫苗无/弱应答者CBMCs TLR3上升37.41%, 高于强应答者(22.48%)(P=0.262), Th1/Th2型细胞因子表达水平均低于强应答者(均有P < 0.001)。HBV刺激可下调Th1/Th2型细胞因子表达水平, Poly I:C+HBV刺激可上调Th1/Th2型细胞因子表达水平(均有P < 0.05);经Poly I:C+HBV刺激后, 无/弱应答者γ干扰素(interferon-γ, IFN-γ)、白细胞介素4(interleukin 4, IL-4)和白细胞介素10(interleukin 10, IL-10)表达水平接近强应答者HBV刺激后的表达水平(均有P > 0.05)。   结论   HBV感染对HBsAg阳性母亲婴儿的免疫损伤与乙肝疫苗无/弱应答可能有关, 上调CBMCs TLR3蛋白表达水平可以提高无/弱应答者Th1/Th2型细胞因子表达水平。     

Th1、Th2、Th17、Treg细胞在宫颈癌患者外周血中的变化及意义

目的检测宫颈癌患者外周血中Th1、Th2、Th17、Treg细胞的比例,初步探讨宫颈癌免疫逃避的机制,为宫颈癌免疫治疗提供实验依据。方法研究对象分为3组:宫颈癌患者组(CC组)75例,同期宫颈上皮内瘤变组(CIN组)48例,健康体检者组(HC组)30例。采用流式细胞术检测宫颈癌患者、CIN患者及健康体检者外周血单个核细胞Th1、Th2、Th17细胞和Treg细胞表达情况,分析宫颈癌患者Th1/Th2、Th17/Treg平衡失调与疾病发生的关系。结果与健康对照组及宫颈上皮内瘤变组相比,宫颈癌外周血中Treg、Th2及Th17细胞占CD4~+T细胞比例均升高,而Th1细胞占CD4~+T细胞比例均下降,均有统计学差异(P<0.05)。结论宫颈癌患者外周血中Treg、Th2及Th17细胞明显升高,而Th1细胞比例明显下降,外周血中Th1/Th2、Th17/Treg细胞失衡可能与宫颈癌的发病有关。     

急性非淋巴细胞白血病Th1/Th2极化改变

目的探讨急性非淋巴细胞白血病(ANLL)患者Th1/Th2极化改变的临床意义。方法采用流式细胞仪检测26例ANLL患者起病时及治疗缓解后外周血CD3 CD8-细胞内IFN-γ和IL-4水平,并与同期28例对照组比较。结果ANLL患者治疗前Th0、Th1细胞和Th1/Th2比值较对照组显著降低(P<0.01),Th2细胞升高(P<0.05),治疗后Th0、Th1细胞和Th1/Th2比值较治疗前显著增高(P<0.01),Th2减低(P<0.05)。结论ANLL的发病可能与Th1/Th2失调有关。     

Th1/Th2细胞相关因子对乙肝疫苗免疫效果的影响

目的探讨Th1/Th2细胞相关因子对乙肝疫苗免疫效果的影响。方法将接种过乙肝疫苗的900名大学生按照接种后免疫效果分为应答良好组及弱应答、无应答组,每组60人。采用ELISA法检测血清Th1/Th2细胞相关因子INF-γ、IL-2、IL-4、IL-10水平,以及抗-HBs水平;采用Person相关性对抗-HBs与Th1/Th2细胞相关因子进行相关性分析。结果应答良好组的抗-HBs水平为(15.52±5.31)IU/ml,显著高于弱应答、无应答组的(5.36±2.12)IU/ml,差异有统计学意义(P 0.05);应答良好组的INF-γ、IL-2、IL-4、IL-10分别为(7.52±2.22)pg/ml、(6.32±1.22)pg/ml、(5.86±1.85)pg/ml、(5.92±0.79)pg/ml,弱应答、无应答组的INF-γ、IL-2、IL-4、IL-10分别为(3.21±1.49)pg/ml、(3.41±1.18)pg/ml、(2.55±0.98)pg/ml、(2.69±0.88)pg/ml,两组的INF-γ、IL-2、IL-4、IL-10差异有统计学意义(P 0.05);抗-HBs水平与INF-γ、IL-2、IL-4及IL-10均呈显著正相关(P 0.05)。结论 Th1/Th2细胞相关因子INF-γ、IL-2、IL-4及IL-10水平可反映乙肝疫苗接种后的免疫效果。     

成人接种乙型肝炎疫苗后细胞免疫应答的动态变化

目的探讨人体接种乙型肝炎(乙肝)疫苗后细胞免疫的动态变化,了解疫苗介导的细胞免疫应答与体液免疫应答的关联。方法8例成人按0、1、2月程序接种乙肝疫苗,于首针免疫后3、8、21、34和65 d采静脉血,分离外周血单个核细胞(PBMC),对PBMC进行细胞分选,获得纯度95%以上的CIM~ 和CD8~ T淋巴细胞,应用酶联免疫斑点法(ELISPOT)测定PBMC、CD4~ 和CD8~ T淋巴细胞体外刺激后所产生的细胞因子IFN-γ、IL-2和IL-4的斑点数(SFC),并收集乙肝疫苗免疫前(0 d)和免疫后3、8、21、30、34、60、65和150 d血样,测定乙肝表面抗体(抗-HBs)。同时设立阴、阳性对照各2例。结果人接种乙肝疫苗后,CD4~ 、CD8~ T淋巴细胞产生不同细胞因子趋势和强度不同: IFN-γ(由CD8~ 、CIM~ T淋巴细胞产生)出现较早,且较为稳定,而CD4~ T淋巴细胞产生的IL-2和IL-4出现较晚,但其升高与第2、3针乙肝疫苗免疫有关;免疫后IL-4阳转率与抗-HBs阳转率呈显著正相关,IL-2、IL-4的SFC与抗-HBs滴度也呈显著正相关。结论成人接种乙肝疫苗后可早期检测出以IFN-γ为主的细胞免疫,IL-4和IL-2阳转与抗-HBs升高有关。     

宫颈鳞癌患者外周血单个核细胞Th1/Th2平衡状态的研究

目的探讨宫颈癌患者外周血辅助T细胞1(Th1)和辅助T细胞2(Th2)型细胞因子的表达状况。方法 30例宫颈癌患者采集外周血,采用流式细胞分析法,检测患者外周血CD4+细胞胞内细胞因子干扰素γ(IFN-γ)和白介素4(IL-4)的表达。应用酶联免疫吸附方法(ELISA)检测培养上清IFN-γ、IL-4的水平,并与10例健康对照组进行比较。结果宫颈癌患者IFN-γ染色阳性(Th1)的细胞比例及培养上清IFN-γ浓度明显低于健康对照组,IL-4染色阳性(Th2)细胞比例及培养上清IL-4浓度在两组间差异无统计学意义。结论宫颈癌患者存在Th1/Th2细胞功能失衡,呈Th2优势应答模式,机体免疫抑制,导致肿瘤发生,同时为宫颈鳞癌的生物治疗提供靶点。     

谷氨酰胺对运动员Th1/Th2细胞平衡影响的研究

[目的]采用流式细胞仪检测外周血T细胞表型和淋巴细胞内细胞因子IFN-γ和IL-4的表达,探讨大强度运动期间补充谷氨酰胺对Th1/Th2细胞平衡的影响。[方法]将24名游泳运动员随机分为对照组和谷氨酰胺(Gln)组。两组运动员在3周时间内接受相同的运动强度和运动量训练,并于实验前、后对两组运动员采静脉血进行相关指标检测。[结果](1)3周大强度运动后,Gln组CD4+、CD4+/CD8+高于对照组,而CD8+则明显低于对照组;CD3+两组比较无明显差异。(2)3周大强度运动使对照组的IFN-γ和IFN-γ/IL-4比值降低,IL-4无明显变化;而Gln组IFN-γ和IFN-γ/IL-4均高于对照组,IL-4两组比较差异无统计学意义。[结论]3周大强度训练使运动员CD4+/CD8+比值明显下降,Th1/Th2比值低于运动前,致使Th2优势表达,免疫平衡向Th2方向漂移,产生运动性免疫抑制现象。补充谷氨酰胺可调节和提高大强度运动后运动员的免疫功能,有效预防运动性免疫抑制的发生。     

儿童慢性特发性血小板减少性紫癜Th1和Th2功能极化分析

目的探讨Th1/Th2极化改变与儿童cITP之间关系。方法流式细胞仪检测21例cITP患儿糖皮质激素治疗前后和28例健康者外周血CD3＋CD8-细胞内IFN-γ和IL-4表达。结果cITP患儿治疗前Th0、Th1细胞和Th1/Th2比值较对照组显著降低（P〈0.01）,治疗后Th0、Th1细胞和Th1/Th2比值较治疗前显著增高（P〈0.01）,与对照组比较,治疗后cITP患儿Th0、Th1细胞增高（P〈0.05）,Th2细胞和Th1/Th2比值无显著差异（P〉0.05）。结论cITP患儿起病时表现为Th1减低,Th2相对优势表达,治疗有效者表现为Th1显著增高,Th2无改变,cITP起病时Th1分泌的IFN-γ分泌减少可促进产生自身抗体,糖皮质激素治疗主要通过增加IFN-γ的分泌达到治疗目的。     

急性颅脑损伤后肺损伤患者血清Th1/Th2细胞因子表达分析

目的 探讨急性颅脑损伤后急性肺损伤(ALI)患者,血清Th1/Th2细胞因子水平改变.方法 设立发生ALI组23例和未发生ALI为对照组53例;用ELISA法检测细胞因子IFN-γ、IL-4的水平.结果 与对照组相比,发生ALI组血清IFN-γ浓度及IFN-γ/IL-4比值均明显低下,而IL-4浓度则显著高于后者,差异有统计学意义(P＜0.05或0.01).结论 急性颅脑损伤后ALI患者存在Th2类细胞因子优势状态表达.     

Th1/Th2细胞因子在子痫前期的表达变化及意义

目的:研究Th1/Th2细胞因子在子痫前期的表达变化,并分析其与子痫前期之间的关系。方法:随机搜集2008年3月～2009年10月住院孕妇共60例,其中20例为正常妊娠妇女(对照组),40例为子痫前期患者(子痫前期组,轻度20例,重度20例),采用ELISA法检测孕妇外周静脉血清中细胞因子IFN-γ、IL-4水平。结果:轻度子痫前期组、重度子痫前期组IFN-γ表达水平高于对照组(P<0.01),重度子痫前期组IFN-γ表达水平高于轻度组(P<0.01);轻度子痫前期组、重度子痫前期组IL-4表达水平低于对照组(P<0.01),重度子痫前期组IL-4表达水平低于轻度组(P<0.01)。IFN-γ与IL-4水平呈负相关(r=-0.74,P<0.05);IFN-γ与胎盘重量呈负相关(r=-0.58,P<0.05);IFN-γ与新生儿体重呈负相关(r=-0.83,P<0.05);IL-4与胎盘重量呈正相关(r=0.78,P<0.05);IL-4与新生儿体重呈正相关(r=0.63,P<0.05)。结论:Th1/Th2细胞因子失衡,可能与子痫前期的发生有关。     

辅助性T细胞亚群失衡与结核病的关系

目的通过检测结核病患者外周血和局部病灶的辅助性T细胞亚群细胞因子的表达,探讨结核病患者的免疫失衡.方法收集活动性结核病患者20例,其中肺结核15例,淋巴结结核5例;同时选取正常对照组15例.应用流式细胞仪在单个核细胞水平检测结核病患者外周血和局部病灶Th细胞内的细胞因子.结果结核病组20例外周血中Th1细胞较正常对照组普遍偏低(P=0.000),而Th2细胞较正常对照组无显著性差异(P＞0.05).其中5例淋巴结结核患者淋巴结活检标本中的Th1、Th2细胞和正常对照组相比均无显著性差异(P＞0.05),和其外周血相比均有显著性差异(P＜0.05).结论结核病的发生、发展与Th细胞亚群的失衡有密切关系,主要表现为Th1细胞数量低下.结核患者的Th1细胞低下主要表现在外周血,而局部病灶中的Th1细胞并未减少.在外周血Th1细胞低下的同时有Th2细胞的增加.     

Th1/Th2型细胞因子失衡与自身免疫性甲状腺疾病的关系研究

目的分析血清Th1/Th2型细胞因子水平与抗甲状腺自身抗体的相关性,研究甲状腺Th1/Th2细胞免疫失衡与自身免疫性甲状腺疾病(AITD)的发病关系。方法选取21例Graves病(GD)患者、18例桥本甲状腺炎(HT)患者,17例非毒性结节性甲状腺肿(NTNG)患者,20例正常人作为对照进行研究。采用ELISA法检测各组人群血清Th1型细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、白介素2(IL-2)和Th2型细胞因子白介素4(IL-4)、白介素10(IL-10)的含量,并与血清促甲状腺激素受体抗体(TRAb)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)水平进行相关分析。结果GD患者血清IL-4和IL-10水平明显高于HT、NTNG和对照组(P<0.01);而HT患者血清IFN-γ和IL-2水平明显高于GD、NTNG和对照组(P<0.01),IL-4水平明显低于对照组(P<0.05);GD患者血清IL-4和IL-10含量与TRAb水平呈显著正相关(r=0.683,0.579;P<0.05);HT患者血清IFN-γ和IL-2水平与TGAb、TPOAb均呈显著正相关(IFN-γ:r=0.542,0.650;IL-2:r=0.517,0.602;P<0.05)。结论GD患者Th1/Th2细胞免疫平衡偏向以Th2细胞免疫占优势的免疫应答,而HT患者Th1/Th2细胞免疫平衡偏向以Th1细胞免疫占优势的免疫应答。     

新利尿合剂对子痫前期患者Th1/Th2比率的影响

目的:探讨新利尿合剂(多巴胺、酚妥拉明、速尿及硫酸镁)治疗子痫前期的机理。方法:采用流式细胞技术分别测定24例使用新利尿合剂治疗的子痫前期患者(新利尿合剂组)、20例使用硫酸镁治疗的子痫前期患者(硫酸镁组)以及21例正常妊娠妇女(正常妊娠组)Th1、Th2细胞百分比和Th1/Th2比率,同时测量各组受试者血压、肝、肾功能。结果:①新利尿合剂组和硫酸镁组治疗后Th1细胞、Th1/Th2比率均降低(P<0.05),新利尿合剂组较硫酸镁组降低明显(P<0.05),但均未降至正常妊娠状态(P<0.05)。②新利尿合剂组和硫酸镁组治疗后Th2细胞比率无明显变化(P>0.05)。③用药后新利尿合剂组的血压较硫酸镁组有显著下降(P<0.05),肝、肾功能明显好转(P<0.05),但未完全恢复正常妊娠状态(P<0.05)。结论:使用新利尿合剂治疗可以改变Th1细胞与Th1/Th2比率,可以促进子痫前期患者体内Th1/Th2比率趋于平衡,是临床上治疗子痫前期的一种有效、可行的方法。     

Th17和Treg细胞的平衡状态与肺结核的关系

Th17和Treg细胞均来源于CD4+T细胞,在机体免疫应答中的作用基本相反,Th17促进免疫应答,而Treg细胞抑制免疫应答,正常情况下两者之间的平衡状态有利于保持机体免疫平衡.结核分枝杆菌感染可能打破两者之间的平衡从而导致疾病进展,而抗结核治疗可能恢复二者平衡关系.此文就Th17和Treg细胞的分化、调控和功能,以及两者在艾滋病及肺结核患者中的变化等进行综述.     

胆红素对脐血Th1/Th2功能状态的影响

[目的]探讨胆红素对足月新生儿脐血Th1/Th2（T-helper typel/T-helper type2）功能状态的影响.[方法]收集并分离21例正常足月新生儿脐血单个核细胞（cord blood mononuclear cells,CBMC）,分别置于含有不同浓度胆红素（0、60、90、120 mg/L）的牛血清白蛋白溶液中进行预先孵育,洗涤后经植物血凝素-P（phytohemagglutinin-P,PHA-P）刺激培养48 h,采用酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测培养上清液中自细胞介素-4（interleukin-4,IL-4）及干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）水平. [结果]①经PHA-P诱生的IFN-γ水平120 mg/L组明显低于60 mg/L组、0mg/L组（Q=38.17、41.95,P＜0.01）,90 mg/L组亦明显低于60 mg/L组、0 mg/L组（Q=35.95、39.73,P＜0.01）,120 mg/L组与90 mg/L组比较,差异无显著性（Q=2.21,P＞0.05）,60 mg/L组低于0 mg/L组,差异有显著性（Q=3.78,P＜0.05）.②各组培养上清液中IL-4产生水平差异无显著性（P＞0.05）.[结论]生理性黄疸状态下胆红素水平≥60 mg/L时可进一步加重新生儿时期的Th1/Th2失衡状态.     

复发性念珠菌性阴道炎与Th1/Th2失衡

外阴阴道念珠菌病是育龄妇女常见的生殖道感染性疾病,目前认为局部Th1和Th2型细胞因子协调作用决定了机体对真菌的易感性.现有的治疗手段包括局部和系统用药,对防止复发作用均有限,免疫治疗有望为复发性外阴阴道念珠菌病的治愈带来希望.     

碘对实验性自身免疫性甲状腺炎Th1/Th2型细胞因子表达的影响

目的　研究不同碘水平饮食对实验性自身免疫性甲状腺炎 (EAT)大鼠甲状腺的Th1型细胞因子IFN -γ和Th2型细胞因子IL - 10表达的影响 ,进一步探讨碘在自身免疫性甲状腺疾病 (AITD)发病中的作用机理。方法　雌性Lewis大鼠用低碘饲料和含不同浓度的KI水喂养 ,即分为低碘 (LI)、适碘 (NI)和高碘 (HI)组。EAT诱发组用Wis tar大鼠Tg免疫 ,诱发EAT的形成 ,观察大鼠甲状腺病理改变、血清中Tg自身抗体水平和甲状腺IFN -γ和IL -10mRNA的表达水平。结果　 (1)EAT诱发的HI组大鼠甲状腺炎细胞浸润明显 ,接近重度炎症 ,NI组大鼠甲状腺为近炎症恢复期 ,而LI组呈轻度炎症。 (2 )EAT诱发组的HI、NI和LI大鼠血清中抗Tg自身抗体平均水平明显高于非EAT诱发对照组 ,P <0 0 1。 (3)EAT诱发组中的HI组大鼠甲状腺IFN -γ和IL - 10mRNA的表达 ,均明显高于非EAT诱发对照组 ,P <0 0 5。NI组大鼠甲状腺IL - 10mRNA和LI组甲状腺IFN -γmRNA的表达均高于非EAT诱发对照组 ,P <0 0 5。结论　EAT诱发组中的HI组大鼠甲状腺有较高水平的IFN -γ和IL - 10mRNA的表达 ,出现明显炎症和抗炎症反应 ;NI组大鼠仅Th2型细胞因子IL - 10较高水平表达 ,甲状腺炎症处于恢复期 ;LI组大鼠有较高水平IFN -γ的表达 ,甲状腺炎症反应较轻 ,其病程发展缓慢