慢性吗啡处理及戒断对大鼠不同脑区突触素ⅠmRNA表达水平的影响

目的 :探讨慢性吗啡处理及戒断对大鼠中脑腹侧被盖区 (VTA)、伏隔核 (NAc)、中脑导水管灰质 (PAG)、杏仁核 (AMG)、海马CA1区 (HIPCA1)突触素ⅠmRNA表达水平的影响。方法 :吗啡组大鼠ip吗啡 10d ,每日两次 ,剂量递增 ,对照组大鼠注射等量生理盐水。于末次注射后 3h及 72h处死 ,取脑并做冰冻切片。利用原位杂交技术检测各脑区突触素ⅠmRNA的水平并作同期比较。结果 :3h处死时 ,吗啡组大鼠突触素ⅠmRNA表达水平在VTA显著高于同期对照 (P <0 .0 1) ,在NAc、HIPCA1显著低于同期对照 (P <0 .0 5 )。自然戒断 72h时 ,吗啡组大鼠突触素ⅠmRNA表达水平在VTA仍显著高于同期对照 (P <0 .0 1) ,在AMG、HIPCA1显著低于同期对照(P <0 .0 5 )。结论 :吗啡慢性处理及戒断大鼠突触素ⅠmRNA表达在不同脑区有选择性的改变 ,可能是阿片依赖及戒断的分子机制之一     

慢性吗啡依赖及戒断对大鼠不同脑区NSF附着蛋白表达的影响

目的探讨慢性吗啡依赖及戒断对大鼠伏隔核(NAc)、尾壳核(CPu)及海马(Hip)中NSF附着蛋白(SNAPs)表达的影响。方法成年♂Wistar大鼠,随机分为对照组、吗啡组和戒断不同时间组,吗啡组大鼠背部皮下注射吗啡8d,每日3次,剂量递增,对照组大鼠注射等体积生理盐水。吗啡组末次注射吗啡4h后处死,断头取脑。自然戒断组分别在戒断不同时间处死动物。各组均设平行对照。利用RT-PCR和Western blot技术分别检测各脑区SNAPs的mRNA和蛋白表达水平。结果与对照组相比,慢性吗啡依赖大鼠CPu内γ-SNAP的mRNA和蛋白表达水平均上调25%左右(P<0.01),NAc及Hip脑区则无明显变化,自然戒断d2、d3、d7组亦未观察到γ-SNAP明显的表达改变。α-SNAP和β-SNAP在吗啡依赖和自然戒断状态下3个被检脑区(NAc、CPu、Hip)均未检测到明显的表达变化。结论慢性吗啡依赖可增加CPu内γ-SNAP的表达,对α-SNAP和β-SNAP的表达没有影响,提示SNAPs 3种亚型在慢性吗啡依赖过程中行使不同的功能,可能与特定神经递质的分泌有关。慢性吗啡依赖及戒断引起的突触前神经递质释放改变可能不是由α-SNAP和β-SNAP表达量变化介导的,其具体机制可能与其内在活性变化或蛋白在细胞内的转位有关。     

吗啡依赖及戒断大鼠相关脑区多巴胺D2受体基因表达的变化

目的:研究吗啡依赖及戒断大鼠相关脑区D2R基因表达的变化.方法:将24只雄性Sprague-Dawley大鼠随机等分为吗啡依赖组(吗啡组:在大鼠腹腔内注射盐酸吗啡,2次/d,起始剂量为5mg/kg,逐日递增5 mg,至第10天为50 mg/kg)及生理盐水对照组(对照组:用相同方式注射同体积的生理盐水),于末次注射后3 h及72 h处死(每组每时间点各6只),取中脑腹侧被盖区(VTA)、伏隔核(Nac)、中脑导水管灰质(PAG)、尾壳核(CPU)、海马CA1区(HIPCA1)等脑组织.利用组织原位杂交技术检测各脑区的D2R mRNA的吸光度(A)值,并作同期平行比较.结果:末次注射3 h,吗啡组大鼠五个被检脑区D2R mRNA A值均低于同期对照;末次注射72 h,尾壳核高于同期对照,其它四个被检脑区仍低于同期对照,差异具有显著性(P<0.05或0.01).结论:慢性吗啡处理可抑制大鼠相关脑区D2R基因表达,戒断后有不同程度的恢复.     

慢性吗啡处理对大鼠不同脑区前强啡肽原mRNA表达水平的下调作用

目的·· :观察慢性腹腔注射(ip)吗啡对大鼠下丘脑、海马、纹状体中前强啡肽原mRNA(PPDmRNA)表达的影响。方法·· :20只SD大鼠随机分为吗啡依赖组和对照组;依赖组大鼠ip 吗啡12d,建立吗啡依赖模型 ,对照组注射生理盐水。于d13断头处死大鼠 ,取出下丘脑、海马、纹状体组织,以NorthernBlot印迹杂交检测其中PPDmRNA的表达水平。结果·· :依赖组大鼠下丘脑、海马、纹状体中PPDmRNA的表达水平分别下降至51.5 %±s4.7 %、81.3 %±s4.5 %、62.3%±s4.5 % ,明显低于生理盐水对照组 (P<0.05)。结论·· :吗啡依赖大鼠下丘脑、海马、纹状体中PPDmRNA的表达水平较生理盐水对照组有显著下降,不同脑区PPDmRNA的表达水平与吗啡耐受和依赖的神经生物学机制有关     

丹参对吗啡依赖大鼠戒断综合征的影响

目的研究丹参对大鼠吗啡戒断反应的影响。方法以剂量递增法形成吗啡依赖模型,用纳洛酮催促戒断,根据戒断评分和体质量丧失评定戒断症状的强度。结果 3种不同剂量(20、40、80mg/kg)的丹参对大鼠的吗啡戒断分值和体质量下降有明显抑制作用(P<0.05,P<0.01),并呈量效关系。结论丹参能抑制吗啡依赖大鼠的戒断症状。     

达尔康对吗啡依赖大鼠戒断症状的影响

目的 :观察中药达尔康对吗啡依赖大鼠戒断症状的抑制作用。方法 :采用剂量递增法皮下注射吗啡 14d和3 0d ,分别建立大鼠吗啡依赖模型 ,观察达尔康大、中、小 3个剂量对吗啡依赖大鼠纳洛酮催促和自然戒断的戒断症状及体重的影响。结果 :达尔康能显著减轻吗啡依赖大鼠ip纳洛酮引起的催促戒断症状 (P <0 .0 5 )和体重下降(P <0 .0 1) ,能抑制自然戒断大鼠体重下降 (P <0 .0 1和P <0 .0 5 )。结论 :达尔康对吗啡依赖大鼠戒断反应有明显的抑制作用     

褪黑素对吗啡戒断大鼠脑脊液和血浆中cAMP水平抑制的影响

目的·· :探讨褪黑素(melatonin,MT)抑制吗啡戒断反应的作用及其与脑脊液(CSF)和血浆中cAMP含量的关系。方法··:建立吗啡依赖大鼠自然戒断模型 ,脑室插管及放免测定吗啡依赖大鼠CSF和血浆中cAMP含量。结果·· :(1)MT对大鼠吗啡戒断反应有明显的抑制作用;(2)吗啡依赖大鼠CSF中(20.07pmol·ml-1±s4.62pmol·ml-1)和血浆中(76.40pmol·ml-1±s8.71pmol·ml-1)cAMP含量均低于正常大鼠,P<0.01 ;吗啡戒断大鼠CSF中(38.19pmol·ml-1±s6.62pmol·ml-1)和血浆中(96.65pmol·ml-1±s5.32pmol·ml-1)cAMP含量则明显高于吗啡依赖大鼠,P<0.001;(3)MT可使吗啡戒断大鼠CSF中(23.28pmol·ml-1±s4.10pmol·ml-1)和血浆中(61.72pmol·ml-1±s3.49pmol·ml-1)cAMP含量明显降低,P<0.01和P<0.001。结论·· :MT可抑制大鼠吗啡戒断反应 ,并与MT降低CSF和血浆中cAMP的含量有关。     

吗啡依赖及戒断大鼠糖皮质激素及其受体mRNA表达水平的改变

目的:研究慢性吗啡处理和吗啡戒断对大鼠血清中ACTH及其受体mRNA表达水平的影响。方法:利用放射免疫法测定吗啡依赖及戒断大鼠血清中ACTH及皮质醇的浓度;利用核酸分子杂交技术研究下丘脑糖皮质激素受体(GR)基因表达的改变情况。结果:(1)吗啡依赖组大鼠血清中ACTH及皮质醇的浓度明显低于对照组;戒断d1大鼠血清ACTH浓度仍明显低于对照组(P<0.01),但血清皮质醇的浓度则明显高于对照组(P<0.01);戒断d7大鼠血清ACTH浓度与对照组比较,无显著性差异(P>0.05),而血清皮质醇的浓度仍略高于对照组(P<0.05);(2)吗啡依赖组大鼠下丘脑GR基因表达水平下降(P<0.05),戒断组大鼠GR的基因表达均高于对照组,但无显著性差异(P>0.05)。结论:吗啡类物质的长期使用可以对下丘脑-垂体-肾上腺轴的激素分泌功能及GR的基因表达产生明显的抑制作用。     

吗啡依赖及戒断大鼠下丘脑前阿黑皮素原mRNA的变化

目的··:观察大鼠吗啡依赖和戒断状态下脑内前阿黑皮素原 (POMC )mRNA的变化。方法·· :采用腹腔注射法 ,按剂量递增原则建立大鼠吗啡依赖动物模型 ,同时建立生理盐水对照组。吗啡依赖大鼠随机分为依赖组和戒断组。对照组和依赖组动物于末次注射后3h ,戒断组大鼠于末次注射后72h迅速断头处死取脑 ,收集各个脑区组织总RNA标本。以POMC反义RNA探针对得到的RNA标本进行NorthernBlot印迹杂交 ,用电子计算机图像处理系统对所得结果进行分析。结果·· :吗啡依赖大鼠下丘脑POMCmRNA的表达仅为生理盐水对照组的69.56%±s4.7 % ,戒断72h状态下的吗啡依赖大鼠下丘脑POMCmRNA的表达恢复至生理盐水对照组的78.26 %±s5.3 % ;海马、纹状体和垂体POMCmRNA表达均为阴性。结论··:吗啡依赖大鼠下丘脑POMCmRNA的表达较生理盐水对照组有显著下降 ,戒断72h状态下的吗啡依赖大鼠其下丘脑POMCmRNA的表达较依赖组大鼠有显著回升 ,但仍显著低于正常组水平。此结果从分子生物学水平证实阿片类药物依赖机制与其引起内源性阿片肽系统功能变化有关     

中枢5—羟色胺对大鼠吗啡戒断反应的影响

本实验对吗啡依赖大则脑室注射５－ＨＴ受体激动剂，可增强其戒断反应强度，并呈量效关系，而注射５－ＨＴ受体阻断剂肉桂硫胺时，则减轻其戒断反应程度，也呈量效关系。同时还发现用５－ＨＴ化学切断剂，５，６－双色胺破坏大鼠中缝５－ＨＴ神经元后，吗啡戒断反应显著减弱。因此５－ＨＴ受体阻断剂和５－ＨＴ化学切断剂可对开发临床脱毒治疗药物提供有意义的参考。     

吗啡依赖、戒断及丁丙诺啡的替代治疗对大鼠垂体POMC基因表达的影响

目的··:结合戒断体征的观察从分子水平研究吗啡依赖和戒断机理及丁丙诺啡对吗啡戒断的影响。方法··:观察吗啡戒断及经丁丙诺啡治疗大鼠的戒断体征 ;利用核酸分子杂交技术研究其垂体阿黑皮源(POMC)基因表达的变化。结果··:丁丙诺啡能有效减轻或消除戒断体征,吗啡依赖及戒断时大鼠垂体POMC -mRNA含量下降,丁丙诺啡对其影响不大。结论··:吗啡依赖和戒断抑制大鼠垂体POMC基因表达,丁丙诺啡能纠正吗啡躯体依赖,但从基因水平看丁丙诺啡可能也具有依赖潜能     

甲氧氯普胺对吗啡依赖性小鼠戒断症状和脑区cGMP含量的影响

目的 :观察甲氧氯普胺脑室给药对吗啡依赖小鼠戒断症状的影响以及腹腔给药对小鼠不同脑区cGMP含量的影响。方法 :皮下注射 (sc)盐酸吗啡建立吗啡依赖小鼠实验模型 ,在纳洛酮催促戒断前 30min侧脑室微量注射甲氧氯普胺 ,观察其急性给药对吗啡依赖性戒断症状的影响 ;用放射性免疫法观察腹腔注射 (ip)甲氧氯普胺对吗啡依赖小鼠小脑、大脑皮层、海马及丘脑四个脑区cGMP含量的影响。结果 :甲氧氯普胺 (1 0mg·kg- 1 )可有效抑制纳洛酮催促的吗啡依赖小鼠的跳跃反应 (P <0 0 1) ;吗啡依赖小鼠四个脑区中cGMP含量均低于正常鼠 (P <0 0 1) ,甲氧氯普胺急性给药 (2 0mg·kg- 1 ,ip)可使吗啡依赖小鼠cGMP接近正常水平。结论 :中枢神经系统是甲氧氯普胺抑制吗啡依赖小鼠戒断跳跃反应的主要作用部位 ;脑区cGMP水平的恢复作用可能是其抑制吗啡戒断的主要机制之一     

卡马西平对吗啡依赖大鼠戒断症状及ACTH的影响

目的 :观察卡马西平 (Carb)对吗啡依赖大鼠纳洛酮催促戒断症状的抑制作用及血清促肾上腺皮质激素(ACTH)水平的影响。方法 :剂量递增法皮下注射 (sc)盐酸吗啡 (Mor) ,建立大鼠吗啡依赖模型 ,腹腔注射 (ip)盐酸纳洛酮 1mg·kg- 1 催促 ,观察戒断反应并评分 ;免疫发光法测定血清ACTH水平。结果 :Carb 10 0mg·kg- 1 及 2 0 0mg·kg- 1 均可明显减轻大鼠戒断症状 (P <0 0 5 )。 10 0mg·kg- 1 剂量组的ACTH水平接近正常 ,低于Carb 2 0 0mg·kg- 1 组(P <0 0 5 )。结论 :适当剂量的卡马西平可有效控制吗啡依赖大鼠的戒断症状     

丁螺环酮对吗啡戒断焦虑大鼠海马、杏仁核突触结构可塑性和CaMKⅡ的影响

目的獉獉:探讨丁螺环酮治疗吗啡依赖戒断焦虑的细胞和分子机制。方法獉獉:66只雄性SD大鼠随机分为生理盐水对照组(对照组)、吗啡戒断焦虑组(模型组)、丁螺环酮治疗组(治疗组)。吗啡剂量递增皮下注射10 d自然戒断,于戒断1-3 d丁螺环酮灌胃治疗行高架十字迷宫实验后,取海马CA3区和杏仁核组织,用电镜体视学方法定量检测其各组突触的数密度(Nv)、面密度(Sv)、突触连接带平均面积(S),Western-blot技术检测其CaMKⅡ的含量和磷酸化水平。结果獉獉:与模型组比较,治疗组大鼠进入开放臂的次数和时间明显增加(P<0.01或P<0.05);海马CA3区和杏仁核突触的Nv和Sv显著降低、S增加(P<0.01或P<0.05),CaMKⅡ蛋白含量和β亚基磷酸化水平显著下调(P<0.01或P<0.05)。结论獉獉:逆转吗啡戒断焦虑大鼠海马、杏仁核突触结构的可塑性和CaMKⅡ分子的变化可能是丁螺环酮缓解吗啡戒断焦虑的重要细胞和分子机制。     

长波紫外线照射对吗啡戒断大鼠血液中去甲肾上腺素及多巴胺…

吗啡成瘾大鼠的血液在体外经长波紫外线照射后回输其体内，对纳络酮诱导的戒断症状有明显抑制作用－这种作用被认为与血液中单胺类递质水平的改变有关。以吗啡成熟大鼠模型，利用高压液相色谱－电化学检测法，发现成烹饪大鼠血液去甲肾上腺素和多巴胺含量较正常大鼠有明显增加；而经长波紫外线照射的血液中上述两种递质含量显著下降，若血液在接受照射的同时吹入氧气流，则含量下降更为显著。     

慢性吗啡处理对大鼠交感神经节cAMP、cGMP水平的影响

目的观察慢性吗啡(Mor)处理对大鼠交感神经节——颈上神经节(SCG)环腺苷酸(cAMP)和环鸟苷酸(cGMP)含量的影响。方法剂量递增法连续皮下注射(sc)吗啡5 d建立慢性吗啡依赖大鼠模型,纳洛酮(Nal)催促戒断法和55℃热水甩尾试验判断模型依赖性和耐受性,125I放射性免疫测定法测定SCG中cAMP和cGMP的含量。结果①吗啡急性给药组大鼠SCG中cAMP含量较正常对照组降低(P<0.05);②吗啡依赖组大鼠SCG中cAMP含量回到正常对照组水平,并有增高趋势(与正常对照组比较,P>0.05;与吗啡急性给药组比较,P<0.05);③吗啡戒断组大鼠SCG中cAMP含量较正常对照明显增高(P<0.05);④各组大鼠SCG的cGMP含量差异无显著性(P>0.05)。结论慢性吗啡处理大鼠交感神经节cAMP存在适应性上调现象。     

地卓西平对吗啡依赖大鼠部分脑区前脑啡肽基因表达的影响

目的:研究谷氨酸受体拮抗剂地卓西平对吗啡依赖大鼠部分脑区前脑啡肽(PENK)基因转录水平的影响.方法:18只雄性Sprague-Dawley大鼠随机等分吗啡组、干预组及对照组,每组6只.吗啡组大鼠腹腔注射吗啡,起始剂量5 mg/kg,2次/d,逐日递增5 mg,至第10天为50 mg/kg;干预组大鼠每次注射吗啡前30分钟腹腔注射地卓西平0.075 mg/kg;对照组按平行对照原则注射同体积的生理盐水.末次注射后3 h取脑并冰冻切片,留取中脑腹侧被盖区(VTA)、伏隔核(NAc)、中脑导水管灰质(PAG)、杏仁核(AMG)、海马CA1区(HIPCA1)的切片.利用原位杂交及图像分析技术检测各脑区PENK mRNA的水平(吸光度A值).结果:与对照组相比,吗啡组大鼠各脑区A值均明显降低,干预组大鼠在除AMG外的其它被检脑区也明显降低;与吗啡组相比,干预组大鼠VTA、NAc、AMG、HIPCA1区A值升高.结论:吗啡依赖大鼠多个脑区PENK基因表达明显下调,合并使用地卓西平可在一定程度上拮抗PENK基因表达的下调.     

神经干细胞对AD大鼠行为及突触素Ⅰ表达的影响

目的:探究神经干细胞(NSCs)移植对β-淀粉样蛋白(Aβ1-42)诱导的阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆能力及海马组织内突触素I表达的影响。方法:采用β-淀粉样蛋白(Aβ1-42)注射到大鼠海马组织内建立阿尔茨海默病(AD)大鼠动物模型,通过Y迷宫测试大鼠学习记忆能力和Western blot技术检测大鼠海马组织内Synapsin I表达。结果:与对照组比较,AD模型组、细胞移植组大鼠学习记忆和大鼠海马组织内Synapsin I蛋白表达量均低(P<0.05),与AD模型组比较,细胞移植组大鼠学习记忆能力和大鼠海马组织内Synapsin I蛋白表达量均较高(P<0.05)。结论:NSCs能显著改善AD大鼠的学习记忆能力,可能与上调突触素Ⅰ的表达有关。     

慢性吗啡成瘾戒断大鼠海马Schaffer侧支-海马CA1区突触可塑性的改变

目的利用离体脑片细胞外微电极记录技术,研究吗啡慢性成瘾戒断后大鼠海马Schaffer侧支至CA1区辐射层突触可塑性的改变。方法雄性SD大鼠随机分为空白对照组、吗啡戒断组(n=9)。吗啡戒断组大鼠连续7 d sc注射吗啡5 mg·kg-1),建立吗啡依赖模型,空白对照组大鼠sc注射等体积生理盐水。停止给予吗啡戒断14 d后断头取脑,置于冰冷人工脑脊液中制备400μm冠状切片。采用离体脑片细胞外微电极记录技术,经Schaffer侧支刺激神经元,在海马CA1区记录细胞外场兴奋性突触后电位的变化。结果高频刺激后30 min,空白对照组fEPSP斜率标准化后的数值为基础测量值的(152±7)%,而吗啡戒断组fEPSP斜率为(213±18)%,明显高于空白对照组,有统计学意义(P<0.05)。结论慢性吗啡成瘾戒断后海马CA1区LTP增强,导致海马Schaffer侧支至CA1区突触传递功能增强。