不同强度微波辐射对小鼠脑组织钙、镁ATP酶活性的影响

目的　探讨微波对机体中枢神经系统作用的机理。　方法　用 2 45 0 MHz连续波微波理疗机为辐射源 ,以昆明小鼠为对象 ,观察在 1m W/ cm2、5 m W/ cm2和 10 m W/ cm2三种照射强度下 ,小鼠脑皮层、海马及丘脑细胞膜 Ca2 、Mg2 - ATP酶活性的变化情况 ,用组织化学方法测定其活性。　结果　 1m W/ cm2时 ,皮层、海马及丘脑 Ca2 、Mg2 - ATP酶活性均比对照组高 (P<0 .0 5 ) ,5 m W/ cm2 时 ,酶活性与对照组差别均无显著性的意义 ,10 m W/ cm2 时 ,皮层、海马酶活性比对照组显著降低 ,而丘脑则无明显变化。　结论　 2 45 0 MHz微波照射小鼠时 ,脑组织细胞膜上 Ca2 、Mg2 -ATP酶活性随照射强度不同而有不同变化。受高强度照射时 ,参与学习记忆功能的皮层、海马先于参与体温调节功能的丘脑受到影响     

3000 MHz微波辐射对鼠脑电能量及脑组织酶的影响

为探索微波辐射中对枢神经系统影响的机理，以ＬＡＣＡ纯种雄性小白鼠为观察对象，以３０００ＭＨｚ为辐射源，照射强度为５ｍＷ／ｃｍ＾２，在每天１ｈ连续照射７ｄ的条件下，照射组左中央导、右中央导的脑电总能量分别为－５．３７和－５．２３ｄＢ，较对照组的－２．０９和－２．４０ｄＢ，前者有极显著下降，后者有显著下降，脑电峰值能量分别为－１３．４４和－１４．０９ｄＢ，较对照组的－１０．３３和－１０．８４ｄＢ均有显     

阿的平对微波辐射小鼠海马损伤的保护作用

目的探讨预先给予阿的平（quinacrine）对微波辐射致小鼠脑损伤的保护作用。方法小鼠随机分为4组,即正常组、辐射对照组、阿的平低剂量组（12.6 mg/kg）、阿的平高剂量组（50.4 mg/kg）。接受辐射动物于照射后即刻（0 d）,1,2,7 d后完成检测,正常组动物在辐射实验后7 d后完成检测。微波辐照后,于不同时间点提取小鼠的脑组织蛋白,检测脑组织中HSP70蛋白表达变化。结果脑组织蛋白表达检测显示,微波辐射后1 d,辐射对照组小鼠脑中HSP70蛋白的表达开始升高,直至7 d。阿的平两个剂量组0,1,7 d给药组与辐射对照组相比明显上调,高剂量组尤甚。辐射对照组小鼠大脑海马的病理切片显示细胞水肿、血管扩张肿胀、间质充血等损伤,并出现海马沟回组织松散、细胞核皱缩、细胞水肿、空泡现象。预先灌胃给予小鼠阿的平后,小鼠脑组织的病理损伤有所减轻,状况有所改善。结论阿的平的这些保护机制可能与其上调HSP70蛋白表达发挥抗炎和抗凋亡作用,降低微波辐照引起的组织、细胞炎症反应和凋亡、坏死有关。     

高功率微波辐射对小鼠心肌氧化应激及ATPase的影响

目的观察高功率微波辐射(high power microwave radiation,HPM)对小鼠心肌氧化应激及ATPase活性的影响。方法雄性ICR小鼠32只,随机分为4组(n=8):假照组、微波辐射10 min组、微波辐射20 min组、微波辐射30 min组。采用S波段,平均表面功率为10 mW/cm2微波;照射时间分别为0,10,20,30 min/次,每周2次,共2周。末次辐射完毕,立即处死小鼠,取心脏、冰冷生理盐水冲洗后,加入匀浆液制作匀浆。采用试剂盒测定超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活性、总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽(GSH)及丙二醛(MDA)的含量以及Na+K+-ATPase和Ca2+Mg2+-AT-Pase活性。结果微波辐射后,与假照组比,微波辐射20 min组和微波辐射30 min组SOD活性降低(P<0.05)、GSH-px活性增加(P<0.05);而微波辐射20 min组GSH含量明显增加(P<0.01);微波辐射30 min组Ca2+Mg2+-ATPase活性明显降低(P<0.01),其他指标变化无明显统计学差异。结论微波辐射可能引起小鼠心脏氧化应激平衡状态以及Ca2+转运的改变。     

冷冻伤性脑水肿钙—ATP酶活性变化与脑水肿的关系

目的：研究大鼠冷冻伤性脑水肿后线粒体钙－ＡＴＰ酶活性变化与脑水肿的关系，同时应用尼莫地平干预，观察其对神经细胞钙－ＡＴＰ酶活性和脑水肿的影响．方法：测定线粒体内钙－ＡＴＰ酶活性，干湿法测定脑组织含水量的改变．结果：冷冻伤后３０分钟，线粒体钙－ＡＴＰ酶活性显著下降，４小时和２４小时组钙－ＡＴＰ酶活性持续进行性下降；相反脑组织水份含量则明显增高．应用尼莫地平干预，钙－ＡＴＰ酶活性明显回升，脑水肿则显著减轻．结论：冷冻伤后线粒体内钙－ＡＴＰ酶活性下降与脑组织水份含量增高密切相关，尼莫地平通过升高线粒体内钙－ＡＴＰ酶活性等，可明显减轻脑水肿     

不同照射时间下2450MHz微波辐射小鼠脑内神经递质的影响

目的 探索微波辐射对中枢神经系统影响的机理。方法 以２４５０ＭＨｚ微波理疗机为辐射源,在照射总剂量相同的条件下对ＬＡＣＡ纯种小白鼠分别进行２ｄ、７ｄ和１４ｄ照射,照射强度均为５ｍＷ／ｃｍ＾２。结果 照射组小鼠大脑皮层的单胺氧化酶活性均较对照组高（Ｐ〈０．０５）;２ｄ、７ｄ组小鼠脑内去甲肾上腺素含量较对照组明显减少（Ｐ〈０．００１）;各对照组５－羟吲哚乙酸含量均高于对照组,其中２ｄ和１４ｄ组显著升高     

2450 MHz微波辐照对小鼠脑组织SOD活性及GSH、MDA含量的影响

微波作为一种非电离辐射的物理因素 ,在生产和生活中的应用日益广泛 ,其生物学效应已引起人们的高度重视。一定剂量的微波对生物体可造成危害[1 ,2 ] ,但微波对机体生物学作用的机理研究至今尚不深入 ,有关文献报道较少。本实验通过观察不同功率密度的微波作用不同时间后 ,小鼠脑组织中超氧化物歧化酶 (SOD)活性及谷胱甘肽 (GSH)、丙二醛(MDA)含量的变化 ,以探讨微波对组织细胞损伤的机理。一、材料和方法1 .动物 :选用BALB/c雄性小鼠 ,鼠龄 1 0周 ,体质量 2 0g左右 (第四军医大学实验动物中心提供 )。依照不同辐照时间和辐照强度进行…     

不同氧压高压氧对急性脑缺血脑组织Na,K—ATP酶活力的影响

利用蒙古种沙土鼠(Mongolian Gerbil)制成急性脑缺血动物模型,观察了缺血后再灌注及不同氧压的高压氧治疗后脑组织Na,K-ATP 酶活力的改变。结果表明:脑缺血60min 后重灌流80min 的动物呈现昏迷、少动状态,时而出现四肢抽搐、强直等症状;肌力、肌张力下降,并逐渐加重;脑组织Na,K-ATP 酶活力显著下降(P0.01)。以101.3kPa 纯氧和253.25kPa 纯氧治疗缺血60min 动物,脑组织Na,K-ATP 酶活力的恢复,与不治疗组相比,差别非常显著(P<0.01)。其中,又以后者更好,其值已接近正常组(P>0.05)。动物经253.25kPa 治疗后,肌力、肌张力有所恢复,在舱内爬行;其它几组动物的行为无明显改善。提示,高压氧治疗脑水肿机制之一是通过恢复脑组织Na,K-ATP 酶活力,恢复细胞内外离子分布而实现。     

不同深低温停循环方法对脑组织ATP酶的影响

目的：观察深低温停循环对脑组织ATP酶活力及结构的影响。方法：18只实验犬随机分为3组，深低温停循环（DHCA）组，DHCA＋逆行脑灌注（RCP）组，DHCA＋顺行间断脑灌注（IACP）组。降温至18℃后停循环90min，在停循环前、后及再循环后留取血液标本作ATP酶活力和乳酸含量测定。手术结束时取海马组织作透射电镜检查。结果：停循环后，DHCA和RCP组ATP酶活力值显著降低，乳酸含量显著升高；IACP组ATP酶活力值无显著差异，乳酸含量仅在停循环后45min时显著升高。结论：DHCA时间较长时，脑组织会发生缺血缺氧性损伤；RCP对脑组织有保护作用，但易发生神经细胞水肿；IACP的脑保护效果较为理想。     

高功率微波辐射对小鼠学习记忆能力的影响

高功率微波（hish power microwave，HPM）是一种峰值功率很高的特殊类型微波，在民用和军事领域有着广泛的应用前景。已有的微波辐射生物学效应数据大都是建立在中低功率微波的研究基础之上，而HPM辐射效应尚无定论，因此亟需进行系统研究和评估。学习记忆属于脑的高级功能，学习记忆任务模型则是评价环境因素危害的经典方法之一。在机体整体出现损伤之前，脑的学习记忆活动可能已出现功能上的障碍。本实验中我们分别使用被动回避及方形水迷宫两个实验方法，以研究HPM对小鼠学习记忆能力的影响，为HPM生物学效应研究提供基础资料。     

低剂量X射线全身照射对小鼠T淋巴细胞钙激活钾通道的影响

本文作者应用连细胞膜片钳技术，观察了低剂量Ｘ射线全身照射对小鼠Ｔ淋巴细胞钙激活钾通道［Ｋ（Ｃａ）］的影响。发现低剂量照射使ＣｏｎＡ（２０μｇ／ｍｌ）引起的Ｋ（Ｃａ）通道开放增强，表现为开放时间延长、开放概率增加，而对单通道电流幅值无明显影响。在淋巴细胞浸浴液中加入ＣｏｎＡ后３分钟，照射组动物淋巴细胞Ｋ（Ｃａ）通道开放概率明显高于对照组。而且照射后４～２４小时，Ｋ（Ｃａ）通道的激活随时间推移而逐步增强。所以Ｋ（Ｃａ）通道在低剂量放射增强免疫的机制中可能具有重要的意义。     

X射线全身照射后脾细胞内[Ca2+)]i对Con A反应性的变化

目的 研究电离辐射对ConA激活的脾细胞内游离钙离子[Ca²⁺]i)动员的影响, 以探讨电离辐射免疫抑制作用的发生机理。方法 采用Fura2/AM双波长荧光测定法检测了X射线全身照射后的小鼠脾细胞内[Ca²⁺]i对ConA反应性的变化。结果 小鼠接受0、0.5、1、2、4和6Gy吸收剂量的X射线全身照射后24小时, 脾细胞内[Ca²⁺]i对ConA反应性呈剂量依赖性下降, 表现为[Ca²⁺]i上升幅度减小、上升至峰值时间延长。2GyX射线全身照射后的时程观察表明, 照后2小时细胞内[Ca²⁺]i对ConA反应性开始下降, 24小时达最低点, 照后5天才略有回升。结论 电离辐射所致免疫功能抑制与其抑制淋巴细胞内[Ca²⁺]i动员等信息传递过程有关。     

不同剂量X射线全身照射后胸腺细胞游离钙浓度的变化时程

目的研究Ｘ射线全身照射后胸腺细胞游离钙浓度的变化时程，以揭示低剂量辐射免疫增强效应的分子机理。方法应用Ｆｕｒａ－２ＡＭ荧光探针，采用荧光分光光度法检测了小鼠胸腺细胞内游离钙浓度。结果７５ｍＧｙ全身照射后可使细胞内游离钙浓度增高，２４小时达峰值，７２小时回降至对照水平。结论低剂量辐射可促进Ｔ淋巴细胞信号传递     

血清和尿液中钙离子浓度作为骨丢失评价指标的初步探讨

目的探讨体液中钙离子浓度作为早期评价骨丢失间接指标的可行性。方法采用尾悬吊模拟失重性骨丢失为动物模型,悬吊组和对照组各8只3月龄SD雌性大鼠,悬吊时间为3周。大鼠每2 d收集1次尿液;每周麻醉1次称重,并使用骨密度仪测量股骨和胫骨处的骨密度;实验结束大鼠麻醉后动脉取血,分离血清,采用离子敏感电极技术检测尿液和血清中钙离子浓度。分离大鼠右侧股骨和胫骨,烘烤后称量骨干质量和骨灰质量。结果大鼠尾悬吊1周后体重明显下降(P<0.01);尿液中钙离子浓度显著升高(P<0.01,P<0.001);股骨的骨密度在第2周和第3周有明显下降(P<0.001);股骨骨干和骨灰质量也有明显变化(P<0.05)。结论尿液中钙离子浓度可以作为评价骨丢失的间接指标。     

CD34+脐血干细胞转染pIRES2-FL-IL-3后静脉移植对辐射损伤小鼠的影响

目的 观察CD₃₄⁺ 脐血干细胞转染质粒载体pIRES2-FL-IL-3后静脉移植对辐射损伤小鼠的影响并探讨其机制。方法 质粒载体pIRES2-FL-IL-3转染脐血CD₃₄⁺干细胞,将其通过静脉移植到辐射损伤的小鼠体内(5×10⁵个细胞/只,双表达组,12只),观察辐照后2、4和6周动物存活率及外周血象变化。6周时免疫荧光法检测实验小鼠脾脏CD₃₄表达,RT-PCR法和Western blot 法进行IL-3和FL的mRNA和蛋白活性检测,另外3组为单纯CD₃₄⁺细胞组(CD₃₄组)、转染pIRES2-IL-3CD₃₄⁺细胞组(IL-3组)和转染pIRES2-FL CD₃₄⁺细胞组(FL组),各组动物数均为12只。结果 CD₃₄组、IL-3组和FL组动物6周存活率分别为25.0%、50.0%和50.0%,双表达组动物存活率为91.7%,显著高于其余各组。2周时双表达组白细胞数量、红细胞数量及血小板数量显著高于其余3组。双表达组脾脏CD₃₄免疫荧光强度显著高于其余3组,IL-3及FL的mRNA 水平及蛋白活性均显著高于其余3组。结论 真核共表达质粒载体pIRES2-FL-IL-3转染CD₃₄⁺脐血干细胞后对辐射损伤小鼠具有显著的促脾脏造血作用,其机制与移植后小鼠脾脏组织中移植CD₃₄⁺脐血干细胞的聚集、增殖及目的 蛋白的高效表达有关。     

12C6+重离子束照射人淋巴细胞蛋白质组分析

目的 探讨¹²C⁶⁺离子束照射对人淋巴细胞蛋白质组的影响。方法 将人淋巴细胞Peng-EBV按照射剂量分为0.1、0.5和2.0 Gy组,未照射为对照组。使用¹²C⁶⁺离子束进行照射,吸收剂量率为0.3~0.5 Gy/min。利用同位素标记的相对和绝对定量技术（iTRAQ）分析受照淋巴细胞的蛋白质表达,筛选出差异表达蛋白质。对差异表达的蛋白质进行基因本体（GO）分析、相互作用网络分析及通路分析。结果 在4组样品中共鉴定到5 158种蛋白质,与对照组相比,0.1 Gy组差异蛋白质有91种,0.5 Gy组有191种差异蛋白质,2.0 Gy组有68种差异蛋白质;3组共同差异表达的蛋白质有11种,其中,7种蛋白质表达上调,4种下调。对3个剂量组的差异表达蛋白质进行生物信息学分析显示,这些蛋白质主要与生物代谢及其调节过程、蛋白结合以及催化反应过程等有关,纤维黏连蛋白-1（FN1）和热休克蛋白1B（HSPA1B）是蛋白质相互作用网络的关键性节点。结论 不同剂量重离子照射诱导人淋巴细胞蛋白质组发生改变的机制不同,而且SZT2、FN1、HSPA1B蛋白质可能在重离子照射的损伤机制中发挥重要作用,有望成为重离子诱发辐射损伤的分子生物学标志。     

12C6+重离子诱导可溶性TRAIL表达增强及其抗肿瘤作用的实验研究

目的构建可被辐射诱导激活的表达载体pEgr-sTRAIL,研究其体外瞬时转染联合不同剂量的^12C^6＋离子辐照对人宫颈癌HeLa细胞凋亡和增殖活性的影响。方法SOEing PCR法克隆可溶性TRAIL基因,测序正确后连入pcDNA3.1-Egr质粒,构建pEgr-sTRAIL表达载体;采用GeneCompanionTM聚阳离子转染试剂体外瞬时转染人宫颈癌HeLa细胞;接受不同剂量的^12C^6＋照射后,RT-PCR法检测目的基因 mRNA水平的表达,流式细胞术检测细胞凋亡,克隆形成实验检测细胞增殖存活。结果成功构建了辐射诱导表达载体pEgr-sTRAIL;瞬时转染联合^12C^6＋离子照射可在mRNA水平上诱导sTRAIL表达增强;随照射剂量的增加,转染pEgr-sTRAIL的HeLa细胞凋亡率明显增加,克隆形成率明显下降。结论^12C^6＋离子可诱导重组质粒pEgr-sTRAIL在被转染的HeLa细胞中表达增高,体外基因-^12C^6＋离子联合治疗可诱导肿瘤细胞凋亡明显增多,具有显著的肿瘤抑制作用。     

血清碱性磷酸酶、Ca2+水平在肺癌早期骨转移诊断中的临床意义

目的：分析血清ALP、Ca²⁺水平在早期肺癌骨转移诊断中的临床意义。方法：选择206例病理确诊为肺癌的患者,均行SPECT全身骨扫描、CT骨扫描,并检测血清ALP、Ca²⁺水平。206例SPECT均为阳性,CT示骨质破坏为A组（138例,骨转移伴骨质破坏）;CT未发现骨质破坏,6个月后复查发现骨质破坏者为B组（33例,骨转移伴早期无骨质破坏）,仍无骨质破坏者为C组（35例,无骨转移）。结果：A组ALP水平明显高于B组和C组（均P<0.05）;B组ALP水平与C组比较差异无统计学意义（P>0.05）。A组Ca²⁺水平明显高于B组和C组（均P<0.05）;B组Ca²⁺水平与C组比较差异无统计学意义（P>0.05）。ROC曲线显示ALP诊断肺癌骨转移的临界值为93.85 U/L,敏感度和特异度分别为60.61%、71.43%;其敏感度明显高于正常参考值的诊断结果（P=0.001）。Ca²⁺水平诊断肺癌骨转移的临界值为2.315 mmol/L,敏感度和特异度分别为27.27%、82.86%。成骨型骨转移ALP水平明显高于溶骨型（P=0.000）;溶骨型骨转移的Ca²⁺水平明显高于成骨型（P=0.000）。结论：对于早期骨质破坏的肺癌骨转移患者,其血清ALP、Ca²⁺水平均高于无转移患者;成骨型骨转移患者ALP明显升高,溶骨型骨转移患者Ca²⁺水平明显升高;血清ALP>93.85 U/L有助于提高诊断肺癌早期骨转移的敏感度。