iNOS在喉癌中的表达及其临床意义

目的探讨诱生型一氧化氮合酶(iNOS)在喉癌中的表达及其临床意义。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测40例不同病理分化程度、临床分期的喉鳞癌组织、癌旁组织及10例喉乳头状瘤、7例正常喉黏膜中诱生型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA的表达。结果喉癌组织iNOSmRNA阳性表达率为85.00%,较对照组癌旁组织(20.00%)、良性肿瘤组(40.00%)、正常人组(0/7)明显增高(P<0.0001,P<0.005,P<0.0001),有淋巴结转移组(19/19)显著高于无淋巴结转移组(71.42%)(P<0.05),iNOSmRNA阳性表达与肿瘤原发部位及T分级无关,与细胞分化程度呈负相关。结论喉癌组织中存在iNOS,它可能通过合成一氧化氮(NO)在分子水平参与了喉癌的发生、发展。     

喉鳞癌中NO、iNOS的测定及其临床意义

目的：探讨一氧化氮（NO）、诱生型一氧化氮酶（iNOS）在喉鳞癌中的表达及其临床意义，方法：采用硝酸还原酶法测定健康人和喉癌患者血清NO3和NO2^-之和；采用逆转录－聚合酶锭反应（RT－PCR）技术检测40例不同病理分化程度，临床分期和喉鳞癌组织，癌旁组织及10例喉乳头状瘤、7例正常喉粘膜中诱生型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA的表达。结果：喉鳞癌患者血清NO含量显著高于正常对照组，喉癌组织iNOSmRNA阳性表达率为85．00％，较对照组癌旁组织（20．00％），良性肿瘤组（40．00％）、正常人组（0／7）明显增高（P＜0．0001，P＜0．005，P＜0．0001），有淋巴结转移组（19／19）显著高于无淋巴结转移组（71．42％）（P＜0．05），iNOSmRNA阳性表达与肿瘤原发部位及T分级无关，与细胞分化程度呈负相关。结论：喉鳞癌组织中存在iNOS，它可能通过合成一氧化氮（NO）在分子水平参与了参与了咆癌的发生、发展。     

喉鳞癌中NO、iNOS的测定及其临床意义

目的 :探讨一氧化氮 (NO)、诱生型一氧化氮合酶 (i NOS)在喉鳞癌中的表达及其临床意义。方法 :采用硝酸还原酶法测定健康人和喉癌患者血清 NO3和 NO- 2 之和 ;采用逆转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)技术检测 4 0例不同病理分化程度、临床分期的喉鳞癌组织、癌旁组织及 10例喉乳头状瘤、7例正常喉粘膜中诱生型一氧化氮合酶 (i NOS) m RNA的表达。结果 :喉鳞癌患者血清 NO含量显著高于正常对照组 ,喉癌组织 i NOS m RNA阳性表达率为 85 .0 0 % ,较对照组癌旁组织 (2 0 .0 0 % )、良性肿瘤组 (40 .0 0 % )、正常人组 (0 / 7)明显增高 (P <0 .0 0 0 1,P <0 .0 0 5 ,P <0 .0 0 0 1) ,有淋巴结转移组 (19/ 19)显著高于无淋巴结转移组 (71.4 2 % ) (P<0 .0 5 ) ,i NOS m RNA阳性表达与肿瘤原发部位及 T分级无关 ,与细胞分化程度呈负相关。结论 :喉鳞癌组织中存在 i NOS,它可能通过合成一氧化氮 (NO)在分子水平参与了喉癌的发生、发展     

人喉鳞状细胞癌中PTEN、PCNA的表达及临床意义

目的　研究抑癌基因PTEN(phosphotaseandtensionhomologdeletedfromchromsome 10 )、增殖细胞核抗原PCNA(proliferatingcellnuclearantigen)在人喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义。 方法　应用免疫组化S -P法检测 10例正常喉组织 ,2 0例癌旁组织和 6 0例喉鳞状细胞癌中抑癌基因PTEN ,增殖细胞核抗原PCNA的表达。结果　 10例正常喉组织和 2 0例癌旁组织均有较强的PTEN蛋白的表达 ,15 % (9/ 6 0 )的喉癌呈PTEN蛋白阴性 ,31.7% (19/ 6 0 )的喉癌呈PTEN蛋白弱阳性 ,5 3.3% (32 / 6 0 )的喉癌呈PTEN蛋白阳性或强阳性 ;PTEN阴性喉癌颈部淋巴结转移率为 77.8% (7/ 9) ;PTEN阳性喉癌颈部淋巴结转移率为 33.3% (17/ 5 1) ,两者之间差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。 83.3% (5 0 / 6 0 )的喉癌呈PCNA阳性表达 ,显著高于正常及癌旁组织 (P <0 .0 1)。晚期、低分化、伴颈部淋巴结转移的喉癌组织中PCNA阳性表达率显著高于早期、高分化、无颈部淋巴结转移的喉癌组织(P <0 .0 1)。结论　抑癌基因PTEN的表达异常可能与喉鳞状细胞癌的发生、发展有关 ;PCNA在喉癌中的表达与其分级、临床分期、淋巴结转移密切相关 ,PCNA可作为喉癌进展的重要参考指标。     

MMP-7和MMP-14在喉癌中的表达及临床意义

目的 研究基质金属蛋白酶7(matrix metallo-proteinase-7,MMP-7)及MMP-14在喉癌中的表达及临床意义.方法 采用免疫组化方法检测60例喉癌组织、34例癌旁组织、22例正常喉黏膜组织中MMP-7和MMP-14的表达,统计分析其在标本中的表达及相关性.结果 ①MMP-7和MMP-14在喉癌组织、癌旁组织及正常喉黏膜组织中阳性和强阳性表达率3组间两两比较,喉癌组织与癌旁组织、正常喉黏膜组织差异均具有统计学意义(P均<0.01);癌旁组织与正常喉黏膜组织差异无统计学意义(P>0.05);②MMP-7和MMP-14强阳性表达与颈淋巴结转移、临床分期及组织病理学分级具有显著相关性(P均<0.05);⑨MMP-7和MMP-14在喉癌组织中的阳性表达率呈正相关(r=0.969,P<0.05).结论 ①MMP-7和MMP-14的高表达与喉癌的发病、浸润、转移有关;②MMP-7和MMP-14两者在喉癌组织中的阳性率呈显著正相关,联合检测对喉癌的治疗和预后判断具有临床意义.     

成纤维细胞生长因子2型受体在喉癌中的表达及临床意义

目的　探讨成纤维细胞生长因子2型受体（fibroblast growth factor 2,FGFR2）在喉癌中的表达及临床意义。方法　应用免疫组织化学（SP法）检测FGFR2蛋 白在40例喉癌组织、15例癌旁组织和8例正常喉黏膜中的表达情况。应用流式细胞术的方法定量检测40例喉癌组织、13例癌旁组织和5例正常喉黏膜组织中FGFR2的含量。结果　喉癌组织、癌旁组织及正常喉黏膜中FGFR2蛋白的表达强度呈下降趋势,差异有统计学意义（H =11.4573,P <0.01）。FGFR2蛋白在喉癌组织、癌旁组织及正常黏膜中的表达量分别为1.8776±0.1683、1.1815±0.2710和1.0100±0.1341,差异有统计学意义（F =93.1797,P =0.0000）。喉癌组织中FGFR2蛋白的表达量明显高于癌旁组织及正常喉黏膜组织,而癌旁组织与正常喉黏膜相比无显著性差异。喉癌组织中FGFR2蛋白表达与病理分级有关,而与其临床分期、淋巴结转移、临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别均无关。结论　FGFR2蛋白在喉癌中的发生、发展有一定的相关性。     

喉癌组织中DcR3蛋白的表达及临床意义

目的：探讨诱捕受体3（DcR3）在喉癌组织中的表达及其与各临床病理因素的关系。方法：采用流式细胞术检测41例喉癌组织和41例相应癌旁组织中的DcR3的表达,并以15例非喉癌患者喉部正常黏膜组织作对照。结果：①喉癌组织中DcR3蛋白的表达量及阳性表达率均明显高于癌旁组织及正常喉黏膜组织（P〈0．01或P〈0．05）,癌旁组织及正常喉黏膜组织的表达差异无统计学意义（P〉0．05）;②DcR3蛋白的表达与喉癌组织中的淋巴结转移、临床分期、分化程度有相关性（均P〈0．05）;与临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无相关性（均P〉0．05）。结论：DcR3蛋白的高表达可促进喉癌的发生、发展,其蛋白检测可作为判断喉癌分化、浸润、转移、分期的重要指标。     

Survivin基因在喉癌中的表达及意义

目的 研究凋亡抑制蛋白Survivin基因在喉癌组织及喉癌细胞株中的表达,探讨其在喉癌发生发展中的作用。方法 采用免疫组织化学技术,研究42例喉癌标本、20例癌旁组织、20例喉角化症、10例正常喉黏膜中Survivin 蛋白的表达情况;并用RT-PCR技术检测喉癌细胞株Hep-2中Survivin mRNA的表达。结果 正常喉黏膜中无Survivin表达, 喉癌组织中Survivin 蛋白的表达 (66.6 %) 明显高于癌旁组织 (40.0 %)和喉角化症(35.0 %)(P<0.001),喉癌组织中Survivin表达与临床分期、病理分级及有无颈淋巴结转移无明显相关性(P > 0.05)。喉癌细胞株Hep - 2中有较强Survivin mRNA的表达。结论 Survivin基因在喉癌组织及喉癌细胞株中的高表达可能与喉癌的发生关系密切,具体机制有待于进一步研究。     

VEGF-C和VEGFR-3在喉鳞状细胞癌及转移淋巴结组织中的表达

目的 :探讨血管内皮生长因子C(VEGF C)和血管内皮生长因子受体 3(VEGFR 3)在喉鳞状细胞癌中的表达及与喉癌生物学行为之间的关系。方法 :采用逆转录聚合酶链反应技术 (RT PCR) ,对 30例喉鳞状细胞癌患者的正常喉黏膜组织、喉癌组织及颈淋巴结组织中的VEGF C、VEGFR 3基因表达进行检测。结果 :VEGF C、VEGFR 3在喉癌组织、颈淋巴结组织及正常喉黏膜组织中的表达差异有统计学意义 (均P <0 .0 5 ) ;在喉癌组织中 ,VEGF C、VEGFR 3的表达与淋巴结转移以及病理分级有关 (均P <0 .0 5 ) ,与患者年龄、性别、病变部位、T分期无关 (均P >0 .0 5 )。结论 :VEGF C、VEGFR 3联合检测可望作为判断喉鳞状细胞癌患者预后的指标。     

MIF、GSK-3β在喉鳞状细胞癌中表达的临床意义及相关性研究

目的 探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)及糖原合成激酶-3(GSK-3β)在喉鳞状细胞癌中表达的临床意义及相关性。 方法 采用免疫组化法检验30例喉癌患者癌组织及相应癌旁组织中MIF、GSK-3β的表达情况,并以10例非喉鳞状细胞癌患者喉部正常黏膜组织作对照;分析喉组织中MIF、GSK-3β表达与患者临床病理因素之间的关系,探讨喉鳞状细胞癌中MIF与GSK-3β表达的相关性。 结果 喉癌组织中、癌旁组织及喉正常喉黏膜中MIF表达率分别为73.33%,40.00%,20.00%,喉癌组织中、癌旁组织及喉正常喉黏膜中GSK-3β阳性表达率分别为70.00%,13.33%,20.00%;MIF、GSK-3β在喉癌中表达与肿瘤分化程度、TNM分期及淋巴结转移均相关(P<0.05);与患者年龄、性别、吸烟史和饮酒史均无相关性(P>0.05)。MIF、GSK-3β在喉癌中的表达具有相关性(r=0.592,P=0.003)。 结论 喉鳞状细胞癌中MIF、GSK-3β的高表达可促进喉癌的发生及发展,MIF、GSK-3β可作为喉癌的潜在的组织生物标志物和喉癌患者疾病进展监控及预后观测的指标。     

抑癌基因PTEN在喉癌中的表达及临床意义

目的：研究抑癌基因PTEN在喉癌组织中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组织化学SP法,检测PTEN在68例喉鳞状细胞癌组织（喉癌组）及33例癌旁正常黏膜组织（对照组）中的表达。结果：①喉癌组PTEN蛋白阳性表达率为61．8％（42／68）,对照组为100．0％（33／33）,喉癌组PTEN蛋白阳性表达率显著低于对照组（P＜0．01）。②PTEN蛋白阳性表达与喉癌临床病理特征的关系：高、中分化组与低分化组之间PTEN蛋白阳性表达率比较（79．3％：48．7％）差异有统计学意义（P〈0．01）;淋巴结转移者PTEN蛋白阳性表达率（55．0％）显著低于无淋巴转移者（71．4％）（P＜0．05）;根据临床病理分期,Ⅰ加Ⅱ期与Ⅲ加Ⅳ期之间PTEN蛋白阳性表达率（76．0％：53．5％）差异有统计学意义（P＜0．05）;随临床分期增加、喉癌分化程度降低及淋巴结的转移,PTEN蛋白阳性表达率逐渐降低。另外,PTEN蛋白阳性表达与患者年龄、性别、肿瘤组织大小及部位无关（P〉0．05）。结论：抑癌基因PTEN在喉癌的发生及发展中起重要作用,对其蛋白的检测可作为判定喉癌发生及侵袭转移能力的一项客观指标。     

VEGF和iNOS在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的 :研究血管内皮生长因子 (VEGF)和诱生型一氧化氮合成酶 (iNOS)在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系 ,并分析两者表达的相关性。方法 :采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术 ,检测 4 0例新鲜喉鳞状细胞癌标本和远离肿瘤的正常喉组织中的VEGF和iNOS的mRNA表达。结果 :VEGF和iNOS在肿瘤组织中的阳性表达率明显高于正常组织 (P <0 .0 1) ;在肿瘤组织中 ,两者的表达与患者的性别、年龄、病变部位、T分期无关 (P>0 .0 5 ) ,而与病理分化程度和颈淋巴结转移相关 (P<0 .0 5及 P<0 .0 1) ,在肿瘤组织中两者的表达存在相关性 (P <0 .0 5 )。结论 :VEGF和iNOS在喉鳞状细胞癌的生长、发展和转移中起重要作用 ,两者可能通过相互上调表达而密切相关 ,共同参与喉鳞状细胞癌的生长、发展和转移。     

喉癌组织RKIP基因甲基化表达调控研究

摘要：目的检测喉癌组织中Raf 1激酶抑制蛋白（ Raf 1 kinase inhibitor protein, RKIP ）基因启动子区域的甲基化状态及其蛋白表达情况,并探讨其临床意义。方法采用甲基化特异性PCR（methylation specific PCR,MSP ）技术及免疫组化方法检测53例喉癌组织及34例癌旁组织中RKIP基因启动子区域的甲基化状态及蛋白表达情况。结果喉癌及癌旁组织中RKIP基因启动子甲基化发生率分别为17%、3%,两者比较差异具有统计学意义（P=0.045）。结论RKIP基因启动子区高甲基化状态可能是造成喉癌组织中RKIP表达缺失的分子机制之一,RKIP蛋白表达缺失与喉癌的发生发展及转移有关。     

喉癌组织血管内皮生长因子的表达与喉癌临床病理关系

目的 :探讨血管内皮生长因子 (VEGF)的表达与喉鳞状细胞癌的临床病理关系。方法 :采用SP免疫组织化学染色技术 ,评价 87例喉鳞癌患者的肿瘤组织中VEGF的表达和微血管计数 (MVC)。资料分析采用SAS软件。结果 :在喉鳞状细胞癌中 ,VEGF的免疫反应主要发生于肿瘤细胞的胞浆内 ,其阳性率为 77.0 %。肿瘤侵犯范围越广 ,VEGF的表达越强 ,肿瘤侵犯范围越小 ,VEGF的表达越弱 (P <0 .0 5 ) ;肿瘤分化越差 ,VEGF的表达越强 ,肿瘤分化越好 ,VEGF的表达越弱 (P <0 .0 5 ) ;VEGF的表达越强 ,MVC越多 ,二者呈明显的正相关(P <0 .0 1) ,且肿瘤组织中的平均MVC明显高于切缘组织中的平均MVC(P <0 .0 1)。结论 :在喉鳞状细胞癌中 ,VEGF的表达与肿瘤的临床分期和分化明显相关 ,与MVC存在着明显的正相关 ,提示VEGF在喉鳞状细胞癌的进展中具有重要的作用     

肾上腺髓质素在人喉癌组织中的表达

目的观察肾上腺髓质素(adrenomedullin,AM)在人喉癌中的表达、分布和随着肿瘤进展其含量的变化。方法运用免疫组化方法观察喉癌组织中AM分布特点,放射免疫分别测定新鲜喉癌组织标本、非癌喉黏膜含量和喉癌患者术前血浆、健康对照血浆中AM浓度。结果选取的21例喉癌石蜡标本免疫组化染色均有AM表达,可以观察到AM表达主要在癌细胞细胞质中,高分化鳞癌癌巢周边癌细胞染色强而中心位置染色弱,中分化和低分化喉癌标本中癌巢AM染色较均一,间质染色较重。喉癌组织中AM含量为(49.67±28.33)pg/ml(x-±s,n=44,以下同),癌旁非癌喉黏膜组织(距离肿瘤1cm喉黏膜组织,组织病理证实无肿瘤浸润)AM含量为(14.71±7.17)pg/ml,肿瘤组织AM含量较癌旁非癌喉黏膜组织高(u=135.00,P<0.01)。T2、T3和T4期喉癌患者癌组织中AM含量依次为(31.52±15.22)pg/ml、(56.63±18.51)pg/ml和(96.12±18.22)pg/ml,差异有统计学意义;N0、N1期患者喉癌组织中AM含量差异无统计学意义(u=30.00,P>0.05),重新分组发现AM含量关系为(N0+N1)M0,差异有统计学意义(u=31.00,P<0.01)。喉癌患者术前血浆AM质量浓度为(10.75±2.49)pg/ml(n=20),健康对照血浆质量浓度为(9.74±2.39)pg/ml(n=20),喉癌患者术前血浆AM浓度和健康对照组间差异无统计学意义(u=153.00,P>0.05)。结论喉癌组织中存在AM高表达,喉癌组织AM含量与TNM分期有关,AM含量增加与肿瘤的进展有关。     

Fhit 蛋白与喉咽癌生物学行为相关性研究

目的：探讨脆性组氨酸三联体（FHIT）基因蛋白Fhit在喉咽癌组织中的表达状况及与该肿瘤生物学行为的可能关系。方法：采用兔抗人Fhit抗体与枸橼酸-微波-SP免疫组织化学方法检测66例喉咽癌标本中Fhit的表达状况,并分析其与组织学分级、淋巴结转移的关系。结果：①喉咽癌组织Fhit表达阳性率为42.42％（28／66）,正常喉咽组织为83.33％（55／66）,二者比较,P〈0．01;②Fhit在高、中、低分化鳞状细胞癌中的表达阳性率分别为65．38％（17／26）、38．10％（8／21）和26．32％（5／19）,各个病理分级之间比较,P〈0．01;③无淋巴结转移组Fhit表达阳性率为75.00％（12／16）,淋巴结转移组为36．OO％（18／50）,P〈0．01。结论：喉咽癌Fhit的表达较正常组织降低,其表达状况与病理分级及淋巴结转移明显相关,提示Fhit表达降低可能对喉咽癌的演化和进展具有重要作用,并有可能成为一个新的预后指标。     

COX-2和iNOS在喉鳞癌中的表达及其与血管生成的相关研究

目的探讨喉鳞癌组织中环氧合酶-2（COX-2）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的表达及其相关性,同时探讨二者与喉鳞癌血管生成的关系。方法应用免疫组化检测48例喉鳞癌组织、20例癌旁组织及20例声带息肉组织中COX-2和iNOS的表达,并观察微血管密度（MVD）。结果COX-2和iNOS在喉鳞癌组织中表达上调,与癌旁组织及声带息肉组织相比均有统计学意义（P〈0．05）。COX-2蛋白表达与喉鳞癌患者肿瘤临床分期有关。iNOS蛋白表达与喉鳞癌患者淋巴结转移、肿瘤病理分期有关。COX-2和iNOS蛋白表达之间呈正相关,两种蛋白在喉鳞癌中的表达有协同关系。喉鳞癌组织中MVD表达与声带息肉组织、癌旁组织有显著差异,且COX-2、iNOS与MVD显著正相关。结论COX-2和iNOS可能在喉鳞癌发生发展中起一定的促进作用。喉鳞癌组织MVD增高与COX-2及iNOS有关,COX-2与iNOS可能通过促进新生血管形成共同影响喉鳞癌的发生发展。     

喉癌组织中FHIT基因蛋白表达的研究

目的:以喉鳞状细胞癌为研究对象,探讨FHIT基因蛋白表达在喉癌发生、发展中的作用及临床意义.方法:用免疫组织化学SP法检测52例喉癌组织、23例癌旁组织及10例正常组织中FHIT基因蛋白的表达,分析在不同临床病理指标下FHIT蛋白表达的情况.结果:FHIT蛋白在正常组织中的阳性表达率(90.0%)及癌旁组织中的阳性率(78.3%)均高于癌组织中的阳性率(46.2%),差异有统计学意义(均P＜0.01).癌组织FHIT蛋白阳性表达率与临床分期和颈淋巴结转移有关,与病理分级无关.结论:喉癌的发生、发展与FHIT抑癌基因的失活有密切关系,FHIT基因很可能是喉癌重要的侯选抑癌基因.     

喉癌和癌旁组织的端粒酶活性检测

目的：探索端粒酶活性与喉癌发生发展的关系。方法：采用重复序列扩增法（TRAP－PCR）检测56例手术切除的喉癌组织和癌旁粘膜组织的端粒酶活性。喉癌组织均经病理证实,喉癌旁粘膜组织中有正常喉粘膜41例,轻度不典型增生15例。结果：喉癌组织端粒酶活性阳性率为91．07％（51／56）,正常喉粘膜和轻度不典型增生喉粘膜的阳性率分别为9．76％（4／41）和33．33％（5／15）,喉癌组织和癌旁粘膜组织中端粒酶活性阳性率有显著差异（P<0．01）。癌旁上皮端粒酶活性阳性的9例患者其喉癌组织端粒酶活性皆为阳性。结论：端粒酶激活与喉癌的发生发展有密切关系,并可作为喉癌分子诊断的肿瘤标记物。