一种简便的赫坎按蚊复合体近缘种按蚊基因鉴别新技术

目的 建立一种能鉴别赫坎按蚊种团内不同近缘种按蚊的基因鉴别技术。方法 依据赫坎按蚊种团内中华按蚊、嗜人按蚊、雷氏按蚊和八代按蚊4种近缘种按蚊ITS2区段的基因序列特征设计特异性引物，建立一种能鉴别赫坎按蚊种团内中华按蚊、嗜人按蚊、雷氏按蚊和八代按蚊4种近缘种按蚊的简便的PCR基因鉴别技术，并采用传统的形态学分类方法和新建立的基因鉴别技术对从辽宁、河南省以及在朝鲜现场捕获的按蚊分别进行了形态学和基因鉴别及比较。结果与结论 新建立的基因鉴别技术能准确鉴别赫坎按蚊种团内中华按蚊、嗜人按蚊、雷氏按蚊和八代按蚊4种近缘种按蚊。具有比传统的形态学分类方法准确，比已有的PCR-RFLP蚊种基因鉴别技术更简便、价廉和省时的特点。适用于不同的复合媒介地区的疟疾媒介调查和监测。     

我国雷氏按蚊和嗜人按蚊的分子鉴别和分类地位的探讨

[目的 ]论证我国雷氏按蚊与嗜人按蚊的分类地位。 [方法 ]采用分子鉴别法 (鉴别PCR和rDNA ITS2序列 )检测辽宁及山东两省现场按蚊标本 ,并依据ITS2区序列建立分子系统树。 [结果 ]分子鉴别显示 ,辽宁和山东两省均存在雷氏按蚊和嗜人按蚊。我国雷氏按蚊 (辽宁和山东省 ,n =6 )和嗜人按蚊 (辽宁、云南、河南和四川省 ,n =10 )ITS2序列长度和GC含量分别为 45 1bp、 46 2 % ,44 8bp、 46 0 % ;各地雷氏按蚊和嗜人按蚊序列均无差异 ,但各地嗜人按蚊与对照组江苏的嗜人按蚊相比 ,种内序列差异为 0 88% ;雷氏按蚊与嗜人按蚊种间序列差异为 2 5 7%。分子系统树显示雷氏按蚊与中华按蚊、嗜人按蚊与凉山按蚊亲缘关系较近。 [结论 ]根据分子鉴别 ,确认我国雷氏按蚊与嗜人按蚊为同域分布的 2个独立种     

云南省微小按蚊A、C种群密度高峰及嗜血习性的观察

目的研究云南省勐腊县微小按蚊A、C种群密度高峰及其与当地疟疾发病的相关性,并比较微小按蚊A、C的嗜血习性。方法在云南省勐腊县选取人房,逐月收集微小按蚊,以复合PCR方法分子鉴别其为微小按蚊A或C,观察密度高峰;收集当地疟疾发病情况,分析其与微小按蚊A或C密度高峰的相关性。对勐腊和元江县人房和牛栏采集的吸血蚊经复合PCR方法分子鉴别后,以ELISA方法检测胃血来源。结果微小按蚊A的密度高峰出现在9月,微小按蚊C则在7月,两者密度高峰的出现均会引起当地疟疾发病人数的增加。微小按蚊A的吸人血率(19 .1 %)略高于微小按蚊C的(12 .8 %) ,但无统计学意义。结论微小按蚊A、C的的种群密度高峰略有不同,两者均嗜吸牛血,尚不能认为微小按蚊A、C的嗜血习性存在差异。     

利用指数曲线分析嗜人按蚊分布区疟疾流行形式

疟疾发病率的上升和下降呈曲线关系 ,笔者试用指数曲线分析邛崃、蒲江、大邑 3县 (市 )嗜人按蚊分布区疟疾流行形式。1　基本情况邛崃、蒲江、大邑 3县 (市 )有嗜人按蚊分布的 3 2个乡镇 ,均为水稻种植区 ,以马尾松林覆盖为主 ,覆盖面 3 0 %～5 0 % ,山间小沟纵横 ,堰塘面积占稻田面积的 2 0 %～3 0 %。常年雨量充沛 ,5～ 1 0月平均气温在 2 4℃左右 ,这些自然条件适合嗜人按蚊的孳生和繁殖。3县 (市 )嗜人按蚊分布区是历年疟疾高发区 ,90 %以上的疟疾病人分布在这 3 2个乡镇。1 986年发病 5 2 1 0人 ,发病率为 1 2 2 .78/万 ,1 987年开展以…     

福建省嗜人按蚊残存分布区的疟疾监测

目的　考核福建省以嗜人按蚊为主要传疟媒介区的疟疾防治效果。　方法　 1988年起对该类区的疟疾与媒介实行监测 ;1998～ 2 0 0 0年按照卫生部 WHO的课题 ,选择建阳市童游镇和邵武市水北乡实施纵向监测。每年在疟疾流行季节 (7～ 10月 ) ,组织专业人员 ,捕捉原嗜人按蚊村人房 (帐内 )按蚊 ,鉴定蚊种并计算密度 ;对发热者采血镜检疟原虫。　结果　对原该蚊分布的 2 63个和 2个村的纵向观察 3年 ,均未再捕到嗜人按蚊。发热病人血检疟原虫阳性者从 1988年的 13 15例降至 2 0 0 1年的 3例。　结论　福建省抗疟措施有效 ,防治成果巩固。     

氟氯氰菊酯浸帐防制疟疾媒介按蚊的效果观察

目的　观察氟氯氰菊酯浸帐防制疟疾媒介按蚊效果。　方法　在疟疾暴发流行点 ,以 12 .5 %氟氯氰菊酯水乳剂按 15mg/m2 帐面的剂量 ,对居民的蚊帐实施浸泡 ;定时、定点室内晨间帐内、室外人诱和猪舍内捕蚊观察按蚊密度 ;通过疟史调查了解疟疾发病情况。　结果　浸帐后连续 2年居民帐内嗜人按蚊和中华按蚊密度分别较浸帐前下降了10 0 .0 0 %和 99.93 %。浸帐当年未浸泡居民帐内仍可捕到两种按蚊 ;室外人诱及猪舍内嗜人按蚊密度有所回升 ,但室外人诱该蚊占按蚊的比率显著下降。第 2年后两种捕蚊方法未再捕到嗜人按蚊 ,而中华按蚊则维持较高密度 ,显示浸帐对降低中华按蚊种群数量的效果不佳。疟疾发病率从浸帐前 (1999年 )的 2 1.0 1%下降至 2 0 0 1年的 1.3 8%。　结论　一次氟氯氰菊酯浸泡蚊帐 ,可明显降低嗜人按蚊密度 ,能有效控制疟疾的暴发流行。     

氟氯氰菊酯浸帐防制疟疾媒介按蚊的效果观察

目的观察氟氯氰菊酯浸帐防制疟疾媒介按蚊效果。方法在疟疾暴发流行点，以12．5％氟氯氰菊酯水乳剂按15mg／m^2帐面的剂量，对居民的蚊帐实施浸泡；定时、定点室内晨间帐内、室外人诱和猪舍内捕蚊观察按蚊密度；通过疟史调查了解疟疾发病情况。结果浸帐后连续2年居民帐内嗜人按蚊和中华按蚊密度分别较浸帐前下降了100．00％和99．93％。浸帐当年未浸泡居民帐内仍可捕到两种按蚊；室外人诱及猪舍内嗜人按蚊密度有所回升，但室外人诱该蚊占按蚊的比率显著下降。第2年后两种捕蚊方法未再捕到嗜人按蚊，而中华按蚊则维持较高密度，显示浸帐对降低中华按蚊种群数量的效果不佳。疟疾发病率从浸帐前(1999年)的21．01％下降至2001年的1．38％。结论 一次氟氯氰菊酯浸泡蚊帐，可明显降低嗜人按蚊密度，能有效控制疟疾的暴发流行。     

传疟按蚊抗药性研究进展

我国卫生部于2010年5月印发《中国消除疟疾行动计划（2010-2020年）》,提出在2020年,将全面彻底消除疟疾.控制及消除疟疾的关键在于传播媒介的控制,而按蚊为疟疾主要传播媒介,传疟媒介对杀虫剂的抗药性直接导致了疟疾发病的死灰复燃.为了全面了解疟疾蚊媒的抗药性现状和产生机制,该文对国内外传疟按蚊抗药性现状、产生机制和检测方法进行综述.     

福建省疟疾周期性暴发流行与媒介按蚊关系的分析

在非稳定性疟区，疟疾常出现大面积暴发流行，并常有5－20年不等的周期性，暴发的原因与人群易感性增高、传染源增加人故接触机会频繁等因素有关“’。福建省自30年代至今出现3次大面积暴发流行，每次相隔17－18年。本文就福建疟疾大面积暴发流行与媒介按故种类关系进行分析探讨，以期为今后抗疟策略提供科学依据。资料与分析方法1收集3次大面积暴发流行的时间、发病人数、发病率以及流行区域范围等资料。2收集不同年代媒介按蚊调查资料，并以不同年代恶性疟及马来丝虫病的流行分布情况，推测当时媒介按蚊种类与地理分布，与疟疾暴发流行范…     

湖北嗜人按蚊传播疟疾的阈值研究

目的研究湖北嗜人按蚊传播疟疾的阈值和潜势,为当地疟疾监测、预警与防治提供科学的评价指标。方法选取湖北嗜人按蚊分布区疟疾发病率较高的随州市府河镇严家畈村为调查点,于2001年7～8月现场调查媒介按蚊的叮人率、经产蚊比例、人血指数和吸血趋性,调查人群疟疾发病率、原虫率以及疟疾患者发病至接受治疗的平均间隔期,收集观察期间的平均气温数据。根据基本繁殖率概念计算以媒介按蚊临界叮人率为指标的传播疟疾阈值。结果嗜人按蚊趋吸人血的比例为92.6％(63/68),在人房的构成比为91.5％(97/106),人血指数是中华按蚊的12.5倍(0.50/0.04),媒介能量是中华按蚊的6.5倍(0.9448/0.1449),实际叮人率是其临界叮人率(0.2823)的3.5倍(0.98916/0.2823)。疟疾发病率为0.65％(12/1844),小学生原虫率为0.51％(1/198)。结论湖北省试点嗜人按蚊的实际叮人率需要降低71.5％,当地由嗜人按蚊引起的疟疾传播将被阻断。     

福建省嗜人按蚊防制措施与效果

经调查发现福建省嗜人按蚊主要分布于闽西北南平和三明地区及闽中永泰等 15县 (市、区 ) 6 1个乡 (镇 )2 5 9个村。南平和三明两地区 14县 (市、区 )嗜人按蚊分布区采取 DDT室内滞留喷洒和溴氰菊酯浸泡蚊帐的防制措施 ,有效地控制了嗜人按蚊。反复查灭是清除嗜人按蚊的主要措施 ,灭蚊后 95 .34%的分布点经复查均未再捕获嗜人按蚊 ,其中复查 2次以上的分布点占 5 8.4% ,最多复查次数达 12次 ,显示嗜人按蚊在闽西北地区已基本被清除 ,疟疾发病数从防制前 1980年的 12 92 1例降至 1998年的 8例 ,有效地控制了疟疾流行。 1996～ 1998年 ,未再发现当地疟疾继发感染者 ,基本阻断了闽西北地区疟疾的传播     

昆明按蚊传疟作用的定量研究

腾冲县固东区,位于云南西部地区,1986年曾发生较大面积的疟疾流行,发病率达12%∞.当地按蚊相简单,仅捕获昆明按蚊、中华按蚊和多斑按蚊3种,以昆明按蚊为优势种,捕于人、牛房共14871只按蚊,其中昆明按蚊占77.6％。为弄清当地的传疟媒介及其以传播疟疾有关的生态习性,于1987年7～8月,对昆明按蚊和中华按蚊的传疟作用作了定量研究,并将两种按蚊作一比较。昆明按蚊的昆虫学接种率为0.0038,中华按蚊为0.000031,按比例推算当地居民的疟疾病例,由昆明按蚊传播占99.1％,中华按蚊为0.9%。结果证明:昆明按蚊为当地的高效媒介.它的传疟作用相当于中华按蚊的110倍。     

PCRRFLP单酶切法鉴别赫坎按蚊复合体的研究

目的建立一种新的赫坎按蚊复合体近缘种按蚊基因鉴别技术,应用于现场按蚊样本的鉴别。方法用分子生物学软件Vector NTI 9.0,对赫坎按蚊复合体的嗜人按蚊、雷氏按蚊、中华按蚊、八代按蚊4个近缘种按蚊rDNA基因的ITS2区段序列进行限制性内切酶酶切位点预测分析,选择特异性内切酶,建立一种能同时鉴别4种近缘种按蚊的聚合酶链反应限制性片段长度多态(PCR RFLP)单酶切法鉴别技术,并对现场捕获的452只按蚊样本进行基因鉴别。结果软件预测赫坎按蚊复合体近缘种4种按蚊的rDNA基因的ITS2区段可被限制性内切酶Dde I切成大小易于区分的不同片段,PCR RFLP单酶切实验结果和软件预测结果完全吻合。4个疟疾流行区捕获的452只按蚊样本经PCR RFLP Dde I单酶切法鉴定有20只嗜人按蚊、6只雷氏按蚊、391只中华按蚊、35只八代按蚊,与形态学鉴别结果符合率为93.4%,与PCR RFLP双酶切法结果符合率为100%。结论新建立的PCR RFLP Dde I单酶切法基因鉴别技术可准确鉴别赫坎按蚊复合体,比传统的形态学鉴别更为简便、可靠,适合用于复合媒介地区的媒介监测。     

海南岛按蚊的鉴定和迷走按蚊的进化研究

目的 阐明海南岛某些按蚊的分类地位,探讨迷走按蚊与其近缘种的亲缘关系. 方法 对采自海南岛8个地点的按蚊依据形态和分子特征进行鉴别研究,应用的分子特征包括核糖体DNA(ribosomal DNA,rDNA)第2内转录间隔区(second internal transcribed spacer,ITS2)和28S第3编码区(third domain,D3)序列,综合分析迷走按蚊及其近缘种的ITS2和D3序列,构建系统发育树. 结果 本研究共鉴定按蚊407只,其中84.9％的成蚊分子鉴定与依据形态鉴定的结果一致.在228条迷走按蚊的ITS2序列中,部分个体在2个位点存在单碱基套峰(G/A),出现的频率分别为57.9％、64.8％,同时有两个套峰的占样本数的57.0％,其他位点保守.迷走按蚊的D3序列,在种内无碱基差异.结合本研究和文献的迷走按蚊及其近缘种ITS2序列构建的ML树,显示迷走按蚊与浅色按蚊MC/D亲缘关系近,与另一支的浅色按蚊B、圣代克按蚊复合体的亲缘关系较远.关于未订名种NBC (Anophelessp.NBG)的分类地位,依据分子特征鉴定其为浅色按蚊B,可能是圣代克按蚊复合体新的成员种.结论 鉴定形态在个体间变异大的种类时,客观的分子特征更具重要性,迷走按蚊与浅色按蚊MC/D具较近的亲缘关系.     

贵州省残存嗜人按蚊地区疟疾发病流行病学特点分析

目的　分析贵州省残存嗜人按蚊地区疟疾发病特点及流行规律 ,为制定疟疾防治及监测方案提供科学依据。　方法　收集分布区 1999～ 2 0 0 1年疟疾发病及病例侦察情况 ,用流行病学方法分析疟疾病人及疫点类型 ,疫点平均病例数等流行病学特点。　结果　嗜人按蚊疟区发病率仍超过 1 ,发热病人血检阳性率为 0 .2 5 % ,流动人群血检阳性率为1.31% ,当地感染疟疾病例占病例总数的 84 .5 9% ,输入性病例占 15 .4 1% ,内源性疫点占 87.2 3% ,外源性疫点占12 .77% ,平均疫点病例数为 1.30例。　结论　嗜人按蚊疟区是现阶段主要疟疾高发流行区 ,发现病人的主要手段仍是对当地发热病人的血检 ,以本地病例和内源性疫点为主 ,发病比较散发 ,呈点状分布。     

福建省嗜人按蚊残存分布区的疟疾监测

目的考核福建省以嗜人按蚊为主要传疟媒介区的疟疾防治效果。方法1988年起对该类区的疟疾与媒介实行监测；1998-2000年按照卫生部／WHO的课题，选择建阳市童游镇和邵武市水北乡实施纵向监测。每年在疟疾流行季节(7～10月)，组织专业人员，捕捉原嗜人按蚊村人房(帐内)按蚊，鉴定蚊种并计算密度；对发热者采血镜检疟原虫。结果对原该蚊分布的263个和2个村的纵向观察3年，均未再捕到嗜人按蚊。发热病人血检疟原虫阳性者从1988年的1315例降至2001年的3例。结论福建省抗疟措施有效，防治成果巩固。     

我国嗜人按蚊和雷氏按蚊分类地位的探讨

我国嗜人按蚊和雷氏按蚊的分类地位虽经多次修订,其存疑问题迄今未获解决,蚊媒分子鉴别研究的发展为澄清问题提供了有利条件。本文综合国内外文献作历史性回顾评述,并根据分子鉴别研究新进展对我国嗜人按蚊和雷氏按蚊的分类地位和正确命名修订作探讨。     

西藏林芝地区察隅县按蚊种群调查

目的确定西藏林芝地区察隅县主要按蚊蚊种。方法2010年7-8月在察隅县选择4个自然村,采用通宵/半通宵室内、外人饵帐诱捕法和通宵诱蚊灯诱捕法捕蚊,对捕获的按蚊进行形态学鉴定。结果共捕获按蚊2 991只,其中带足按蚊2 284只(占76.36%),多斑按蚊种团667只(占22.30%),其他按蚊40只(占1.34%);带足按蚊室内、外半通宵平均密度分别为56.2只/夜和4只/夜,多斑按蚊种团室内、外半通宵平均密度分别为17.8只/夜和17.9只/夜;带足按蚊室内、外全通宵室内叮人率分别为28.1只/(人夜)和2只/(人夜),多斑按蚊种团全通宵室内、外叮人率均为8.9只/(人夜)。结论带足按蚊和多斑按蚊为察隅县优势蚊种,是可能的疟疾传播媒介。     

西藏墨脱县疟疾流行区多斑按蚊复合体种型鉴定

目的 鉴定西藏林芝地区墨脱县疟疾流行区多斑按蚊复合体的种型。 方法 墨脱县捕获的5 190只按蚊经形态学鉴定为多斑按蚊复合体后,随机取575只,酚-氯仿法提取单蚊DNA作为模板,根据伪威氏按蚊、多斑按蚊、威氏按蚊、达罗毗按蚊和塞沃按蚊分别设计5对特异性引物,PCR扩增rDNA第二转录间隔区（ITS2）片段,进行种型鉴别。对目标片段进行测序、同源性比对,并运用MEGA（3.1）软件构建多斑按蚊复合体的系统进化树。 结果 575份DNA样本中有11份扩增出约231 bp的条带,即威氏按蚊（1.9%）;564份扩增出约119 bp的条带,为伪威氏按蚊（98.1%）。 PCR种型鉴定结果与同源性比对及系统进化树的结果一致。 结论 西藏林芝地区墨脱县疟疾流行区多斑按蚊复合体由伪威氏按蚊和威氏按蚊构成,伪威氏按蚊为优势蚊种。     

微小按蚊和溪流按蚊翅斑形态的比较

目的：比较微小按蚊和溪流按蚊翅斑的形态，了解它们的变异情况，寻找可靠的鉴别特征。方法：微小按蚊采自云南省景洪县基诺乡，溪流按蚊采自广西壮族自治区凌云县。将母蚊产的卵，在实验室饲养至成蚊，再将成蚊的翅制成玻片标本，在显微镜下测量标本的翅长和部分翅斑的长度。结果：共检查微小按蚊雌蚊翅５２个，雄蚊翅６０个，溪流按蚊雌蚊翅４０个，雄蚊翅６０个。认为翅前缘脉上分脉前白斑（ＰＳＰ）的有无和分脉白斑与分脉暗斑比例（ＳＰ／ＳＤｒａｔｉｏ）的大小，是鉴别微小按蚊和溪流按蚊的重要依据。结论：无论是雌蚊还是雄蚊，微小按蚊的翅斑形态与溪流按蚊的翅斑形态均有较为明显的差异。