中波紫外线诱导人皮肤成纤维细胞衰老及机制研究

目的 探讨中波紫外线(UVB)对人皮肤成纤维细胞的诱导衰老作用及可能机制.方法 使用组织块法分离培养原代人皮肤成纤维细胞,通过观察不同剂量UVB照射后的细胞形态学改变以及β-半乳糖苷酶(p-gal)细胞衰老染色情况,确定后续实验诱导皮肤成纤维细胞衰老的UVB单次照射剂量.于经确定剂量UVB照射后的不同时点(12、24、48、72 h)收集细胞及其细胞培养上清液,Western blotting检测诱导衰老的皮肤成纤维细胞衰老相关蛋白P16表达;ELISA法检测诱导衰老细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原及基质金属蛋白酶1、3(MMP1、MMP3)表达.结果 经40 mJ/cm2 UVB单次照射的人皮肤成纤维细胞呈现典型的衰老细胞形态学改变,β-gal细胞衰老染色阳性细胞百分比为(88.75±5.32)%,确定诱导衰老UVB单次照射剂量为40 mJ/cm2.Western blotting显示,诱导衰老皮肤成纤维细胞P16蛋白表达随UVB照射时间的延长而明显升高;ELISA法检测发现诱导衰老细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达随UVB照射时间的延长而明显减少,MMP1和MMP3表达则随UVB照射时间的延长而显著增加.结论 UVB照射能诱导人皮肤成纤维细胞发生衰老,其机制可能与细胞胶原合成减少而降解增加有关.     

UVB诱导人皮肤成纤维细胞改变后β-catenin基因表达水平的研究

【摘要】 目的 研究经过不同剂量紫外线中波(UVB)照射正常人皮肤成纤维细胞(HSF) 不同时间后β 链蛋白(β catenin)基因的表达改变,探讨UVB诱导HSF衰老可能的机制。方法 未经UVB照射的HSF为对照组;经过不同剂量(100、200、300) mJ/cm2 UVB处理不同时间(1、2、3)天后的HSF为实验组。实时荧光定量PCR技术(FQ PCR)检测实验组和对照组中β-catenin基因的表达;四唑盐比色法(MTT)观察HSF的生长活性改变,流式细胞仪检测HSF的凋亡率变化。结果 UVB照射对HSF细胞的生长有明显抑制作用,并且随着UVB照射时间延长和剂量的增加,HSF细胞生长率逐渐下降;UVB处理后实验组中β-catenin基因的相对表达水平明显低于对照组,差异具有统计学意义(P＜005);β-catenin基因的表达水平随着UVB作用的时间和剂量的不同而变化,存在较为明显的时间依赖性和剂量依赖性。结论 经过UVB处理的HSF细胞中调控皮肤衰老的基因β-catenin表达明显降低,大剂量长时间UVB照射可诱导HSF发生衰老改变。     

强脉冲光对UVB照射后人皮肤成纤维细胞金属基质蛋白酶-1、金属基质蛋白酶-3表达的影响

目的 观察强脉冲光(IPL)照射人皮肤成纤维细胞后金属基质蛋白酶-1(MMP-1)、金属基质蛋白酶-3(MMP-3)表达的变化,探讨强脉冲光嫩肤的分子生物学机制.方法 原代培养人皮肤成纤维细胞,分为三组:A组(正常对照组):无UVB照射无IPL照射;B组(UVB照射组):采用UVB(20 mJ/cm2)照射成纤维细胞;C组(UVB+IPL照射组):先用UVB(20 mJ/cm2)照射成纤维细胞,24 h后再用强脉冲光照射成纤维细胞.培养48 h后采用免疫组化检测细胞中MMP-1、MMP-3的表达.结果 UVB照射后成纤维细胞中MMP-1及MMP-3表达较对照组显著升高(P＜0.05),C组成纤维细胞MMP-1及MMP-3表达较B组显著降低.结论 强脉冲光能显著抑制UVB导致的成纤维细胞MMP-1、MMP-3的表达升高,可能通过该机制改善光老化中皱纹的形成.     

UVB诱导下脂肪干细胞的抗衰老机制

目的:探讨中波紫外线(UVB)下脂肪干细胞的抗衰老作用及可能机制。方法:分离培养原代人脂肪干细胞(观察组,n=12)及人皮肤成纤维细胞(对照组,n=12),均以40 m J/cm2UVB单次照射诱导衰老,48 h后镜下观察衰老情况;分别于照射开始即刻、照射12 h、24 h、48 h、72 h时行Western Blotting法检测细胞PDGFRα蛋白、MMP-24蛋白的表达。结果:观察组细胞形态未见明显变化;对照组呈现典型衰老形态。经UVB照射后,观察组各时间点PDGFRα蛋白表达明显高于对照组而MMP-24表达明显低于对照组,上述差异均有统计学意义(P<0.05),且观察组上述指标虽时间延续变化不显著(P>0.05),但对照组变化显著(P<0.05)。结论:脂肪干细胞能够抵抗UVB的诱导衰老,其机制可能与抑制PDGFRα蛋白的低表达与MMP-24蛋白的高表达有关。     

红外线影响人皮肤成纤维细胞中c-Jun、Ⅰ型和Ⅲ型胶原的表达

目的研究红外线对体外培养成纤维细胞（HSF）中c-Jun和Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响,为红外线引起光老化损伤的分子机
制提供理论依据。方法提取原代皮肤成纤维细胞培养,成纤维细胞被分为对照组（无红外线照射）和实验组（红外线照射）;用
MTT检测各组细胞活性;用实时定量PCR和免疫细胞化学（ICC）方法检测各组c-Jun和Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA和蛋白的表达。结
果MTT检测显示与对照组比较,实验组各组中红外线照射对HSF的增殖有不同程度的抑制作用;红外线照射下调Ⅰ型胶原
mRNA和蛋白的表达,随着照射剂量的增加,Ⅰ型胶原的mRNA和蛋白表达下降越明显（P<0.01）;红外线照射成纤维细胞12 h
后Ⅲ型胶原mRNA和蛋白的表达都呈照射剂量依赖性下调（P<0.05,P<0.01）,24 h后Ⅲ型胶原mRNA和蛋白的表达都呈照射
剂量依赖性上调（P<0.05,P<0.01）;红外线照射上调了c-Jun mRNA和蛋白的表达水平,随着照射剂量的增加,呈照射剂量依赖
性（P<0.05,P<0.01）。结论红外线照射人皮肤成纤维细胞后上调c-Jun表达,抑制Ⅰ型胶原表达,干扰Ⅲ型胶原表达,这可能是
其引发和促进皮肤光老化的发生机制之一。
     

长波紫外线对人皮肤成纤维细胞增殖及NO/iNOS系统的影响

目的：观察不同剂量长波紫外线(UVA)对人皮肤成纤维细胞增殖及诱导型一氧化氮合酶（iNOS) /一氧化氮(NO)系统的影响，探讨皮肤光老化机制。方法：用1，5，10 J/cm2 剂量UVA照射培养的人原代皮肤成纤维细胞。分别采用四唑盐比色实验(MTT法)、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹以及Griess反应等技术检测UVA照射后培养不同时间（24，48和72 h）人皮肤成纤维细胞增殖情况、iNOS mRNA和蛋白表达水平及NO生成量。结果：正常人成纤维细胞在72 h之内随培养时间延长细胞存活率增加， 仅检测到低水平iNOS表达和NO生成，但在5和10 J/cm2剂量UVA照射后各时间点成纤维细胞存活数下降，iNOS mRNA/蛋白表达水平和NO生成量随着UVA剂量的增加升高，与同一时间点对照组和1 J/cm2UVA照射组相比，差异有统计学意义（P<0.01或P<0.05）,而且以各剂量UVA照射后24 h时间点细胞存活数下降、iNOS mRNA/蛋白表达水平和NO生成量增高最为明显，与同剂量UVA照射后48 h和72 h组相比，差异有统计学意义（P<0.01)。结论：UVA抑制人皮肤成纤维细胞的增殖可能与其诱导iNOS基因的表达和NO的分泌有关。     

TLR9在HaCaT细胞UVB光老化模型中对下游信号分子的调控作用

目的：探讨Toll样受体9（Toll-like receptor 9,TLR9）在中波紫外线（ultraviolet B,UVB）诱导的人永生化角质形成细胞（human immortal keratinocyte,HaCaT）光老化模型中对下游信号分子的调控作用。方法：实验分为3组：正常对照组、模型组、A151组。正常对照组予以假照射处理,模型组予以辐照剂量30 mJ/cm2 UVB照射处理,A151组予以辐照剂量30 mJ/cm2 UVB照射并加用TLR9抑制剂进行干预处理。使用衰老相关β半乳糖苷酶法观察细胞衰老。CCK-8法检测细胞增殖。Western blot检测TLR9、磷酸化核转录因子（phospho nucler factor-κB,pNF-κB）蛋白表达。RT-PCR法检测细胞肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白介素-6（interleukin-6,IL-6）mRNA转录水平。结果：Western blot结果显示模型组较正常对照组TLR9、pNF-κB蛋白表达量升高（P=0.000,P=0.000）,A151组较模型组TLR9、pNF-κB蛋白表达量降低（P=0.010,P=0.000）。RT-PCR结果显示模型组较正常对照组TNF-α、IL-6mRNA转录水平上调（P=0.000,P=0.000）,A151组较模型组TNF-α mRNA、IL-6 mRNA转录水平下调（P=0.000,P=0.030）。衰老相关β半乳糖苷酶染色结果显示模型组较正常对照组染色阳性细胞数增多（P=0.000）,A151组较模型组染色阳性细胞数减少（P=0.000）。CCK-8结果显示模型组较正常对照组细胞增殖率降低（P=0.010）,A151组较模型组细胞增殖率升高（P=0.045）。结论：UVB通过上调HaCaT中的TLR9表达,引起核转录因子磷酸化,促进细胞因子TNF-ɑ、IL-6转录水平升高,介导细胞炎性反应,从而降低细胞增殖率,诱导细胞衰老。     

紫外线致成纤维细胞损伤及VitE保护作用的研究

目的观察UVB辐射对体外培养的真皮成纤维细胞的损伤作用及VitE对细胞的光保护作用。方法由健康人皮肤中分离培养成纤维细胞,用紫外线以一定时间(1、5、10、15分钟)进行照射,并加入VitE进行干预处理。MTT法检测细胞增殖活性,荧光显微镜检测各受试组细胞凋亡率。结果UVB照射后24h,上述细胞均出现增殖活性下降,活性下降程度与照光时间成正比;加入VitE处理后,细胞活性可有一定程度恢复。UVB照射可诱导真皮成纤维细胞产生凋亡,其凋亡率随UVB照射时间延长而增加。加入VitE处理后,各组HeLa上皮细胞和成纤维细胞凋亡率均明显下降。结论紫外线辐射可引起真皮成纤维细胞损伤,VitE可抑制紫外线辐射的损伤效应。     

表没食子儿茶素没食子酸酯影响慢性紫外线辐射诱导的人皮肤成纤维细胞凋亡和突变的研究

目的 研究紫外线(UV)照射对人皮肤成纤维细胞的细胞凋亡率、细胞周期变化和次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HPRT)基因位点突变频率的影响以及表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的干预作用.方法 采用一定剂量的中、长波紫外线(UVA和UVB)慢性照射培养的新生儿包皮成纤维细胞.通过流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期变化,HPRT突变分析法检测突变频率.结果 慢性UVA组引起的细胞凋亡率低于UVB组(P<0.05),而HPRT基因位点突变的频率是UVB组的4.79倍.EGCG干预组与单纯UV辐射组相比,成纤维细胞的凋亡率增加,HPRT基因位点突变的频率降低.结论 慢性照射日常剂量UVA,其损伤性高于UVB.EGCG可以升高慢性UV照射引起的细胞凋亡率,降低UV照射引起的突变频率,提示EGCG可以诱导不可逆损伤细胞的凋亡,从而减少突变细胞.     

基因Wip1低表达与椎间盘退行性病变的关系

目的探讨基因Wipl异常表达与椎间盘退行性疾病（intervertebraldiscdegeneration,IDD）的关系。方法选取62例患者退行性病变的椎间盘组织,通过实时定量PCR测定w印l基因表达量;siRNA干扰人髓核（nucleuspulposus,NP）细胞Wipl的表达后,通过SA-β-gal染色检测细胞衰老情况;通过MTT检测NP细胞的增殖能力;通过实时定量PCR检测NP细胞衰老分子标记的表达水平;吖射线照射siRNA转染后的NPP3细胞,分别于不同时间点行SA-β-gal染色检查。结果62例病变椎间盘组织中,18例Wipl基因的表达明显下降（P〈0．01）;siRNA干扰人NP细胞Wipl表达后,衰老细胞数量明显增加;MTT结果表明,干扰Wipl的表达能够显著抑制人NP细胞的增殖;P3细胞培养8d,实时定量PCR检测发现,Col2al、Agc、Ver的表达水平显著下调,MMP3的表达水平明显增高。Y射线照射NP细胞后,SA-β-gal染色显示,Wipl表达组出现明显的衰老现象。结论Wipl的低表达与椎间盘退行性病变的发生相关,干扰Wipl的表达能够促进NP细胞衰老,而过表达Wipl可以有效抑制细胞衰老的发生。     

EGCG对中长波紫外线引起的皮肤成纤维细胞光老化及光突变的干预作用

目的观察绿茶提取物中的主要活性成分没食子儿茶素没食子酸脂（EGCG）对经多次长、中波紫外线（UVA、UVB）照射后人皮肤成纤维细胞（HSF）光老化及突变情况的影响。方法分离并培养新生儿包皮HSF,将其分为正常对照组、EGCG干预组、UVA组、UVA＋EGCG组、UVB组、UVB＋EGCG组;UVB照射剂量为30mJ／cm^2,UVA照射剂量为10J／cm^2,每天照射HSF共持续2周。预实验选定EGCG浓度25μg／ml。采用组织化学染色法检测细胞中衰老相关β-半乳糖苷酶的表达量,观察细胞老化情况;采用克隆法检测次黄嘌呤磷酸核糖转移酶（HPRT）基因位点突变频率,观察紫外线照射的致突变力以及加入EGCG干预后的情况。结果（1）正常对照组及EGCG组均只见少量的β-半乳糖苷酶阳性细胞。其他几组阳性细胞比率为UVB组：43％±4％;UVA组：54％±4％;EGCG＋UVB组：64％±5％;EGCG＋UVA组：75％±5％,4组细胞间阳性比率差异有统计学意义（P〈0．05）。（2）正常对照组与EGCG处理组的HPRT自发突变率很低。单纯UVB及UVA照射诱导的突变分别是自发突变的72倍及241倍,而UVB＋EGCG组和UVA＋EGCG组分别较单纯UVB组和UVA组降低了52．78％和32．37％,差异有统计学意义（t=2．0742、2．7042,均P〈0．05）。结论UVA、UVB多次照射后均可上调HSF老化概率,加入EGCG可进一步上调其老化概率。UVA、UVB多次照射后均可增加HSF的HPRT基因位点突变频率,加入EGCG可显著减少HPRT基因位点突变频率。提示EGCG对UVA、UVB多次照射HSF后的保护干预作用可能与诱导突变细胞老化从而减少细胞突变频率有关。     

二苯乙烯苷可抑制中波紫外线诱导的人皮肤成纤维细胞光老化

目的: 研究二苯乙烯苷（TSG）对紫外线B（UVB）诱导的人皮肤成纤维细胞（HSF）应激性提早衰老的作用及可能的机制。方法: UVB小剂量、多次照射HSF,每次照射完毕后分别用0.02、0.10、0.50 mmol/L浓度的TSG处理。实验分为6组：空白对照组、模型对照组、UVB+0.02 mmol/L TSG组、UVB+0.10 mmol/L TSG组、UVB+0.50 mmol/L TSG组、TSG对照组。采用细胞计数法（CCK-8）检测细胞增殖活性;细胞化学染色法检测衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）表达;TBA法、WST-1法测定细胞丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性;ELISA法测定细胞上清液中基质金属蛋白酶-1（MMP-1）的含量变化。结果: 与空白对照组比较,模型对照组细胞增殖活性减弱（P < 0.05）,SA-β-gal染色呈强阳性,细胞裂解液中SOD活性减弱、MDA含量增加,MMP-1浓度升高（P < 0.05或P < 0.01）。与模型对照组比较,UVB+各浓度TSG组细胞增殖活性改善（均P < 0.05）,SA-β-gal染色阳性率下降,细胞裂解液中SOD活性增强、MDA含量减少,MMP-1浓度减小（P < 0.05或P < 0.01）。结论: TSG可以在一定程度上抑制UVB诱导的HSF应激性提早衰老,该作用可能与改善氧化应激、抑制MMP-1高表达有关。     

人参皂苷Rg1、Rb1及Re对人皮肤胶原代谢作用的研究

目的以人成纤维细胞为载体对三种皂苷Rg1、Rb1、Re进行研究。方法MTT法测定三种药物在不同浓度下对人成纤维细胞增殖的影响,消化法检测羟脯氨酸含量。ELISA法测定细胞分泌I型前胶原、基质金属蛋白酶-1（matrix metalloproteinase-1,MMP-1）、基质金属蛋白酶抑制酶-1（tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1）的蛋白表达情况,RT—PCR法观察上述三种蛋白的mRNA表达水平。结果与空白组比较,三种单体均能显著提高细胞增殖水平,羟辅氨酸含量、I型前胶原的蛋白质及mRNA表达量,显著降低MMP—1蛋白质及mRNA表达量。结论人参皂苷Rg1、Re、Rb1通过影响成纤维细胞的基因及蛋白质的表达,均显著促进胶原合成、抑制胶原降解,从而提高胶原蛋白总量,改善胶原代谢。     

下调表达SND1通过调控衰老相关分泌表型促进人二倍体成纤维细胞衰老的研究

  目的  研究下调表达葡萄球菌核酸酶和tudor结构域1(staphylococcal nuclease and tudor domain containing 1, SND1) 对人二倍体成纤维细胞衰老的影响,并探讨其相关机制。  方法  Western blot和免疫组化分别检测SND1在年轻及衰老2BS细胞（博来霉素诱导2BS细胞老化）和老年组织（人结肠腺瘤组织）中的表达情况;免疫荧光检测SND1在年轻2BS细胞中的定位;CCK8和EDU分析检测2BS的增殖能力;集落形成分析评价2BS集落形成能力;表达芯片和RT-qPCR分析衰老相关分泌表型（SASP）表达改变;β半乳糖苷酶染色用于显示衰老的2BS细胞。  结果  SND1在衰老2BS细胞中的表达较年轻2BS细胞显著下调,且在人结肠腺瘤组织中的表达较非病变结肠组织明显下调。在年轻的2BS中,敲低SND1抑制2BS增殖和克隆形成,并出现增强的衰老相关β半乳糖苷酶染色(P<0.05)。表达芯片检测结果和RT-qPCR分析表明敲低SND1上调了SASP成分(P<0.05)。  结论  本研究结果表明下调的SND1通过上调SASP表达来调控人二倍体细胞衰老。     

灯盏细辛对低氧环境下肺成纤维细胞Ⅰ型胶原、MMP1和TIMP1表达的干预作用

目的研究灯盏细辛对低氧环境下肺成纤维细胞Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶1(MMP1)和金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1)表达的影响。方法以人胚肺成纤维细胞系MRC-5为研究对象,Western blot法检测常氧、低氧、丝/苏氨酸激酶抑制剂星型孢菌素(straurosporine,SP)、灯盏细辛作用下MRC-5缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1alpha,HIF-1α)、Ⅰ型胶原前α1链(pro-col1α1)、p-smad2蛋白的表达,ELISA法检测细胞培养上清液中Ⅰ型胶原、MMP1和TIMP1蛋白的含量。结果体外培养的MRC-5,常氧环境下细胞内表达一定的pro-col1α1、p-smad2蛋白,几乎不表达HIF-1α,细胞外基质有较低水平的Ⅰ型胶原、MMP1和TIMP1蛋白表达;低氧环境下细胞内pro-col1α1、p-smad2蛋白、HIF-1α和细胞外基质Ⅰ型胶原、MMP1和TIMP1均较常氧组表达增加(P<0.05);SP(5nmol/L)预处理细胞30min与单纯低氧组比较,其胞内的p-smad2蛋白、pro-col1α1和基质中的Ⅰ型胶原、TIMP1降低(P<0.05),而基质中的MMP1表达增加(P<0.05);灯盏细辛组(12.5μg/mL、50μg/mL)与单纯低氧组比较其胞外的Ⅰ型胶原、MMP1、TIMP1蛋白和胞内的HIF-1α、pro-col1α1和p-smad2蛋白表达均有降低(P<0.05)。结论灯盏细辛可降低低氧环境下HIF-1α蛋白的表达,并部分通过p-smad2信号通路抑制Ⅰ型胶原、TIMP1蛋白生成。     

枸杞多糖对紫外照射成纤维细胞活力及MMP-1、MMP-3、MMP-9表达的影响

目的:本研究通过观察枸杞多糖对UVB照射的体外培养人皮肤成纤维细胞活力的影响,对比探讨枸杞多糖抗光老化的作用效果。方法:以30μw/cm~2的UVA照射成纤维细胞,MTT法测定不同浓度的枸杞多糖对人纤维细胞的增殖影响,western-blot检测MMP-1、MMP-3、MMP-9的表达。结果:(1)MTT检测细胞增殖情况:在相同UVA照射条件下,模型组OD值显著降低(P0.01),各给药组随枸杞多糖浓度的升高而增高,且高剂量组与低、中剂量组比较,差异有统计学意义(P0.05,P0.01);(2)免疫印迹法检测MMPs蛋白的表达结果显示,模型组MMPs蛋白表达增加,而给药组MMPs的表达明显减弱,且高剂量组显著低于中剂量组(P0.05,P0.01)。结论:枸杞多糖能明显增强紫外照射引起的皮肤成纤维细胞的活力,同时下调细胞中基质金属蛋白MMP-1、MMP-3、MMP-9的表达。     

Ultraviolet B light-induced apoptosis in human keratinocytes enriched with epidermal stem cells and normal keratinocytes

Background  The stem-cell compartment is the primary target for the accumulation of oncogenic mutations. Overexposure to solar ultraviolet radiation is responsible for the development and progression of >90% of skin cancers. Ultraviolet B (UVB) light-induced keratinocyte apoptosis is a strong preventive mechanism against carcinogenesis. The aim of this study was to isolate keratinocytes enriched with putative human epidermal stem cells and to investigate their apoptotic induction by UVB.

Methods  Keratinocytes enriched with putative human epidermal stem cells were isolated by adherence to collagen IV and the expressions of β1-integrin and p63 were investigated. Keratinocytes enriched with putative human epidermal stem cells and normal keratinocytes were irradiated with UVB at 0–80 mJ/cm². The apoptotic response was investigated with phase-contrast microscopy, Hoechst 33342 staining, flow cytometry of annexin V/PI, and procaspase-3 Western blotting.

Results  Keratinocyte enriched with stem cells expressed high levels of p63 protein and β1-integrin and low level of pan-keratin (C11). In comparison to non-irradiated cells, significant apoptosis of keratinocyte enriched with stem cells was found with 40 and 80 mJ/cm² UVB. However, significant apoptosis of normal keratinocytes was only found for 80 mJ/cm² UVB.

Conclusions  Human epidermal stem cells can undergo apoptosis in response to UVB radiation and are more susceptible than other keratinocytes. The method could be used in vitro studies of human epidermal stem cells.

     

IL-1α and ATP mRNA expression after ultraviolet irradiation in human keratinocyte original-SCC 12F cells

Background Generally speaking, undifferentiated keratinocytes may synthesize a larger amount of IL-α and its production is decreased as cells complete differentiation gradually. Ultraviolet B (UVB)light can signigicantly stimulate the production and release of some cytokines. In this study we investigated the influence of UVB irradiation on IL-1α and adenosine triphosphoric (ATP) mRNA expressions in the human keratinocyte (KC) of original squamous cell carcinoma line (SCC 12F cells).Methods The cultured SCC 12F cells were irradiated with 30 mJ/cm^2 of UVB. Northern blot was employed to analyze the expression of IL-1α and ATP mRNA.Results There was a constitutive expression of IL-1α mRNA in SCC 12F cells. The expression increased in culturing time in regular KC medium and reached the highest expression at 120 hours.The expression level of IL-1α was up-regulated with two peaks at 6 hours and 72 hours, respectively after UVB irradiation. In comparison with IL-1α mRNA expression, ATP mRNA was down-regulated,with similar biphasic peaks, compared with the sham irradiated group.Conclusions SCC12F cells may express IL-1α mRNA constitutively. After UVB irradiation, the mRNA expression of IL-1α and ATP will show opposite effect because of inflammation/immunity and energy consumption mechanisms.