广西空肠弯曲菌和结肠弯曲菌流行病学调查

目的 了解广西两种弯曲菌引起腹泻的流行病学特点以及在健康人群和动物中病原菌的携带状态,为该病防控提供依据。方法 在广西崇左市大新县和南宁市对腹泻病例、5岁以下健康人群、养猪场和屠宰厂职工以及养殖场和农贸市场的猪、鸡等进行流行病学调查并采集粪便标本,进行实验室空弯菌和结弯菌的分离培养、PCR鉴定以及脉冲场凝胶电泳分型（PFGE）分析。结果 弯曲菌检出率为2.13%,空肠弯曲菌和结肠弯曲菌检出率分别为1.12%和1.02%。腹泻病例检出率为0.89%,以5岁以下年龄组和20-29岁年龄组检出阳性率为高,除冬季外其余季节均检出阳性;人群弯曲菌检出阳性率为8.26%,2岁以下空肠弯曲菌检出率较高,结肠弯曲菌则在每个年龄段均有检出;鸡、猪检出弯曲菌阳性率为3.23%,空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的检出率分别为1.29%和1.94%,两种动物的阳性率差异无统计学意义。所有生化结果阳性的菌株其PCR复核鉴定结果均为阳性。来自南宁市和大新县的两株空弯菌PFGE型别一致,提示二者可能存在相同的感染源。结论 广西地区人群及部分动物中空弯菌、结弯菌的流行状况呈现多样化和复杂化态势。     

用不同选择性平板和增菌培养基对空肠弯曲菌分离、传代和增菌的比较试验

本文报告用改良弯曲菌卵黄琼脂平板对来自鸡、猪和人的26株空肠弯曲菌传代后,放4℃冰箱内虽长达7天,少数菌株(7/26)已出现球变,但全能传代生长;而在改良弯曲菌血琼脂平板上至第5天即有部分菌株发生变异,传代中约1/3的菌株(9/26)已不能生长。另用含卵黄的选择性布氏肉汤培养污染于牛奶和光鸡体表的空肠弯曲菌有增菌作用,可以提高其检出效果。     

用Lior玻片凝集法作空肠弯曲菌血清学分型与流行病学分析

本文用Lior氏玻片凝集法,对从福建省人与动物中检出的379株空肠弯曲菌进行血清学分型,有212株被分成18个型14个亚型。其中人源菌分布14型,以29、21、8型较多见,占可分型菌的62.5％,鸡菌分布15型,以2、21、44、11和29型较为多见,占65.7％,鸭菌分布9个型,猪菌分布10型,以29、20、2和9型较多见,占66.7％。鸡、鸭、猪检出菌与人源菌同血清型菌株数分别为91.7％、83.3％和95.8％。因而这些禽、畜属于人类空肠弯曲菌的主要传染来源。     

猪源弯曲菌的分离鉴定及耐药性分析

目的 为调查猪肠道内空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的流行和耐药性状况。方法 本试验自北京郊区养猪场和屠宰场采集猪肠道粪便样品,经增菌培养后利用三重PCR进行弯曲菌属、空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的检测,进而对PCR检测阳性样品进行弯曲菌的分离鉴定,最后对分离鉴定的弯曲菌分离株进行药敏试验鉴定。结果 本试验共采集猪肠道和肛门棉拭子样品241份,PCR检测结肠弯曲菌阳性样品数为178份,阳性率为73.9%,而空肠弯曲菌阳性样品数5份,阳性率仅为2.1%。经分离鉴定后共获得结肠弯曲菌菌株63株,分离率为35.4%,未分离获得空肠弯曲菌菌株。对26种抗生素的药敏试验结果显示结肠弯曲菌分离株对氯霉素(100%)、丁胺卡那(93.65%)、强力霉素(91.48%)、庆大霉素(82.54%)和阿莫西林(82.54%)等抗生素比较敏感,而对头孢哌酮(100%)、 头孢氨苄(100%)、头孢拉啶(100%)、头孢唑啉(98.41%)、头孢克肟(92.06%)、萘啶酸(92.06%)、链霉素(90.48%)、环丙沙星(90.32%)、诺氟沙星(88.89%)和青霉素(87.30%)具有显著的耐药性;而且分离株多重耐药现象比较普遍,主要集中于14-20耐。结论 本试验结果显示猪肠道内普遍存在结肠弯曲菌,而且菌株对多种抗生素产生了显著的耐药性。     

空肠弯曲菌全菌灭活疫苗免疫鸡效果评价北大核心CSCD

目的拟研制一种可降低空肠弯曲菌在鸡肠道内定植的全菌灭活疫苗。方法利用一种新的灭活剂H;O;与CuCl;混合物灭活空肠弯曲菌制备油佐剂灭活疫苗,免疫SPF鸡后测定灭活疫苗诱导产生的特异性抗体水平,通过口服攻毒评价疫苗免疫对空肠弯曲菌在鸡盲肠内定植的影响,同时测定盲肠细胞因子在转录水平的变化,以及对盲肠绒毛长度和隐窝深度的影响。结果制备的全菌灭活疫苗免疫SPF鸡后可诱导产生特异性血清IgG和胆汁IgA,但口服攻毒后不能抑制或降低空肠弯曲菌在盲肠内的定植水平,且对免疫鸡的盲肠绒毛长度和隐窝深度无明显影响。测定的鸡盲肠中多数细胞因子在空肠弯曲菌攻毒前与攻毒后1 d的转录水平差异不明显,而在攻毒后10 d明显上升;同日龄样品比较结果显示,部分细胞因子的表达量在佐剂对照组和全菌免疫组较空白对照组明显上调。结论本试验研制的全菌灭活疫苗虽可诱导产生高水平特异性抗体,但不能降低空肠弯曲菌在鸡盲肠内的定植水平,提示空肠弯曲菌在鸡盲肠内的定植机制需深入探究。     

深圳市408份不同来源样本弯曲菌的检测及耐药特征分析

目的 分析深圳市不同来源样本弯曲菌的流行和抗生素敏感特征,与往年菌株的耐药特征进行比对,获得深圳地区弯曲菌的流行现状及耐药变化。方法 采用增强过滤法分离弯曲菌并应用琼脂稀释法进行抗生素敏感性分析。结果 408份不同来源样本中,鸡盲肠的弯曲菌阳性率最高,达72.0%(36/50),鸡肉的分离率次之,为49.3%(34/69)。腹泻病人弯曲菌分离率为10.7%(17/159)。牛肉、猪肉中弯曲菌分离率低,海鲜中分离到1株空肠弯曲菌,生菜未分离到弯曲菌。53株腹泻病人来源和鸡源空肠弯曲菌耐药率最高的是萘啶酸(94.3%)和环丙沙星(94.3%),其次是四环素(92.4%)、氟苯尼考(75.5%)。32株腹泻病人来源和鸡源结肠弯曲菌耐药率最高为萘啶酸、环丙沙星、四环素(100%)。73.6%(39/53)的空肠弯曲菌和100%(32/32)的结肠弯曲菌存在多重耐药性。与往年相比,鸡源空肠弯曲菌对大环内酯类抗生素的耐药增强,腹泻病人来源空肠弯曲菌对萘啶酸-环丙沙星-四环素-氟苯尼考多重耐药性增强。结论本地区首次在腹泻患者中分离到简明弯曲菌,其病原特征有待于进一步分析。深圳地区腹泻病人来源及鸡源空肠弯曲菌有耐药增强现象,应引起重视。     

空肠弯曲菌Ⅵ型分泌系统结构特征和菌株中分布

目的明确中国空肠弯曲菌Ⅵ型分泌系统基因簇的结构特征及其在菌株中的分布。方法对中国不同来源空肠弯曲菌菌株进行全基因组测序,并与数据库不同来源空肠弯曲菌菌株基因组序列和VI型分泌系统基因簇做比较分析。结果 52株空肠弯曲菌经基因组系统发育分析被分为了6个进化分支,对应不同来源的菌株。空肠弯曲菌的Ⅵ型分泌系统基因簇大小约14 kb,包含14个基因,其中hcp等9个主要基因与其他细菌T6SS相同基因的同源性较高,但仍具有空肠弯曲菌独特的基因簇结构。有36.5%(19/52)空肠弯曲菌菌株含有Ⅵ型分泌系统基因簇,主要为鸡来源分支和混合来源分支中的鸡来源菌株;有83.3%(10/12)中国的鸡来源菌株携带Ⅵ型分泌系统基因簇。结论空肠弯曲菌的Ⅵ型分泌系统与鸡来源菌株密切相关。     

用不同方法制备微氧环境对空肠弯曲菌分离和传代的比较试验

本文介绍用连二亚硫酸钠和碳酸氢钠制备的微氧环境从鸡、猪和人分离与传代空肠弯曲菌取得了良好的效果。它较烛缸法为优,与换气法(使含85％N_2、10％CO_2和5％O_2)几无差别。由于该法简便易行,易被一般实验室所采用,因而对微需氧性空肠弯曲菌检测工作的开展,提供了一种新的简便而有效的方法。     

动物及其产品中空肠弯曲菌PCR检测方法的建立

目的建立快速检测空肠弯曲菌的PCR方法。方法从鸡猪样品中分离培养获得空肠弯曲菌,以该菌特异的VS1基因保守序列为模板自行设计引物,扩增产物为516bp片段,同时进行特异性、灵敏度试验。结果显示该方法只对空肠弯曲菌有扩增产物出现,而其它细菌如大肠杆菌、沙门氏菌、无乳链球菌、粪链球菌、金黄色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌ATCC、腐生葡萄球菌等均不能扩增出特异性片段,检测灵敏度达6 CFU/ml。结论该方法具有灵敏、高效、特异、稳定的特点。     

空肠弯曲菌VI型分泌系统结构特征和菌株中分布

目的 明确中国空肠弯曲菌VI型分泌系统基因簇的结构特征及其在菌株中的分布。方法 对中国不同来源空肠弯曲菌菌株进行全基因组测序,并与数据库不同来源空肠弯曲菌菌株基因组序列和VI型分泌系统基因簇做比较分析。结果 52株空肠弯曲菌经基因组系统发育分析被分为了6个进化分支,对应不同来源的菌株。空肠弯曲菌的VI型分泌系统基因簇大小约14 kb,包含14个基因,其中hcp等9个主要基因与其他细菌T6SS相同基因的同源性较高,但仍具有空肠弯曲菌独特的基因簇结构。有36.5%(19/52)空肠弯曲菌菌株含有VI型分泌系统基因簇,主要为鸡来源分支和混合来源分支中的鸡来源菌株;有83.3%(10/12)中国的鸡来源菌株携带VI型分泌系统基因簇。结论 空肠弯曲菌的VI型分泌系统与鸡来源菌株密切相关。     

广西地区空肠弯曲菌血清学分型的研究(摘要)

<正> 近年来,随着对空肠弯曲菌研究的深入,该菌的血清学分型及其应用已日益受到关注。为了调查广西地区空肠弯曲苗的血清型分布情况,并探讨人源菌与动物源菌的关系,我们以加拿大Lior博士提供的标准抗血清,采用快速玻片凝集法对近年来从广西地区人、畜、禽检出的空肠/结肠弯曲菌118株中的38株(随机抽样)进行血清学分型鉴定,兹报告如下。 一、菌株 人源菌2株、鸡源菌16株,鸭源菌11株,豚鼠源菌7株,鸽子源菌2株,共28株。 二、抗血清 采用加拿大Lior博士提供的标     

WCG空肠/结肠弯曲菌无血培养基的研究

本研究的WCG无血培养基与Camp-BAP含血培养基同时进行对已知空肠/结肠弯曲菌的培养计数及599份来自鸡和人类粪便标本中空肠/结肠弯曲菌的分离培养试验,结果表明13株已知空肠/结肠弯曲菌在WCG培养基上生长的菌落数(CFU/ml)、菌落形态、菌体特征和生化特性及5次共599份来自鸡和人类粪便标本分离培养取得与Camp-BAP培养基一致或较优的效果。为此,我们认为WCG无血培养基可代替Camp-BAP含血培养基用作培养分离空肠/结肠弯曲菌。     

保定市鸡嗜热弯曲菌感染调查

嗜热弯曲菌是指能在42oC生长而不能在25t生长的一类弯曲菌，主要包括空肠弯曲菌和结肠弯曲菌。它们是人类腹泻病最常见的病原菌之一。近年的研究表明，它们与Relier’s综合征‘”和格林巴利综合征”’等疾病密切相关。KISt等报道结肠弯曲菌可引起败血症并导致孕妇流产‘”。嗜热弯曲菌也是家禽腹泻的常见病原菌。家禽是人群弯曲菌病的最重要的传染源。为了了解保定市鸡的嗜热弯曲菌感染情况并比较两种选择性培养基Preston和BF的分离效果，我们于1995年11月做了此项调查。1材料和方法1．1采样方法按常规。1．2试剂弯曲菌Preston选择性培…     

不同来源的空肠弯曲菌对20种抗生素敏感性调查

<正> 空肠弯曲菌是目前引起腹泻的重要病因之一。现在多数学者主要致力于该菌的致病学研究,而对于动物体内、人体内等不同来源的空肠弯曲菌的特性的研究,国内外均极少报道。本文选择人源、鸡源空肠弯曲菌对常用的20种抗生素的敏感性做比较研究。     

弯曲菌在猪及其胴体表面带染情况调查

<正> 我们于1984年11月对长春市某肉联厂的猪及其胴体表面带染空肠弯曲菌的情况进行了调查,现报告如下。 一、材料与方法 对在屠宰过程中的猪,剖开肠管,用无菌棉拭子采肠内容物;在退毛并摘去内脏的猪胴体表面,用无菌棉拭子涂擦取样,在淋浴后的猪胴体表面,用无菌     

2006-2008年江苏地区不同宿主感染空肠弯曲菌及其耐药性

目的检测2006-2008年江苏地区鸡、水禽、奶牛、丹顶鹤、猪、实验猴等标本感染空肠弯曲菌及其耐药性。方法采用APICampy System进行生化与分类鉴定,结合弯曲菌多重PCR检测方法对来自江苏地区的禽、牛、猪、猴3 010份标本,检测分离株及其耐药性。结果共检测样本3010份,402份空肠弯曲菌阳性,阳性率13.36%,其中家禽样阳性率15.83%（258/1630）;水禽10.40%（52/500）;奶牛7.65%（39/510）;猪18.75%（30/160）;猴15.00%（15/100）;丹顶鹤12.50%（10/80）;糜鹿0%（0/30）。选择不同宿主来源的108株对10大类27种抗生素高度敏感率的是：氯霉素100%、阿莫西林99.07%、阿米卡星92.59%、头孢噻肟91.67%、阿齐霉素90.74%;高度耐药率的是：头孢哌酮99.07%、复方新诺明99.07%、头孢孟多99.07%、磺胺甲基异噁唑97.22%、头孢拉丁91.67%。结果显示,108株分离株的耐药主要集中在9耐～20耐,占85.19%,猪分离株的多重耐药性较其它宿主来源分离株严重。结论江苏地区空肠弯曲菌的流行和耐药状况呈现多样化和复杂化,不同宿主来源分离株耐药性和多重耐药性存在差异。     

空肠弯曲菌共同抗原的提取及应用:SPA协同凝集试验快速检测空肠弯曲菌的实验研究

本文报道一株空肠弯曲菌用甘氨酸提取的共同抗原,能和52种空肠弯曲菌分型血清起交叉反应。用这种共同抗原免疫家兔制备的抗血清致敏SPA后,协同凝集法检测了23株不同血清型的空肠弯曲菌标准株,结果均阳性,而对18株其它肠道菌检测结果均阴性。协同凝集试验与培养法平行检测57份鸡标本,两者均为阳性31份,均阴性14份,总符合率78.9％。无显著性差异。本法具有特异、敏感、快速、简单的特点,便于推广。对临床快速诊断空肠弯曲菌肠炎具有一定价值。     

中国小型猪细菌分离鉴定及药敏试验

目的对小型猪携带的细菌种群分布情况及耐药性进行调查分析。方法对小型猪采样进行细菌分离培养、生化鉴定和细菌16SrRNA基因PCR扩增、测序分析,并进行药敏试验。结果从25只小型猪中共分离到45株细菌。结果显示,小型猪携带的细菌种群主要有弯曲菌属(空肠弯曲菌)、螺杆菌属(幽门螺杆菌)、克雷伯菌属(肺炎克雷伯氏菌);肠杆菌属(阴沟肠杆菌);埃希菌属(大肠埃希菌、弗格森埃希菌);假单胞菌属(铜绿假单胞菌);窄食单胞菌属(嗜麦芽窄食单胞菌);葡萄球菌属(金黄色葡萄球菌、溶血葡萄球菌、模仿葡萄球菌);链球菌属(肺炎链球菌、猪链球菌、前庭链球菌、缓症链球菌、麻疹孪生球菌、绿色气球菌);肠球菌属(粪肠球菌);芽孢杆菌属(枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、蜂房芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌)。这些菌株对氨曲南、头孢噻吩等药物敏感,而对痢特灵等药物不敏感。结论小型猪携带的细菌种群具有多样性,研究结果为我国小型猪细菌学检测以及质量标准的制定提供了科学依据。     

空肠弯曲杆菌LAMP检测方法的建立及初步应用

目的 建立一种灵敏的环介导等温扩增方法（Loop-mediated Isothermal Amplification, LAMP）用于空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni)的快速检测。方法：根据已公布的空肠弯曲杆菌旋转酶基因（gyrA）设计引物,建立并优化LAMP反应体系,对检测方法的特异性和灵敏度进行验证,并运用该方法对我国不同地方鸡种空肠弯曲杆菌的携带率进行调查。结果 该方法能扩增出典型的梯形条带,且扩增产物的酶切鉴定结果与理论值相符;对单增李斯特菌等8株实验菌株进行检测,仅空肠弯曲杆菌的LAMP结果为阳性;该方法检测空肠弯曲杆菌纯培养物的灵敏度为20cfu／mL,高于常规PCR检测方法10倍;不同地方鸡种空肠弯曲杆菌携带率介于6%～90%之间,差异显著。结论 本试验建立的空肠弯曲杆菌LAMP检测方法特异性强、灵敏度高,有望在临床样品检测中发挥作用。     

贵州省鸡源弯曲菌的流行现状及抗生素敏感谱研究

目的 了解贵州省鸡源弯曲菌的流行现状和耐药特征,为兽医和人医临床上抗生素的合理使用提供参考。方法 随机从贵州省东、西、南、北、中5个片区中的养殖场和农贸市场采集359份新鲜粪便样本进行分离培养、生化及MALDI-TOF MS鉴定。采用琼脂稀释法检测分离株对7类11种不同抗生素的耐药性,通过PCR方法检测耐药基因的携带情况。结果 弯曲菌总体检出率为43.5%,包括68株(43.6%)空肠弯曲菌和88株(56.4%)结肠弯曲菌;对其中84株弯曲菌进行药敏实验和耐药基因检测,结果显示分离株对11种抗菌药物产生了38种耐药谱,空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的优势谱型都为NAL-CIP-TET;81.0%的弯曲菌呈多重耐药,其中结肠弯曲菌的多重耐药率(91.7%)高于空肠弯曲菌(54.2%);红霉素、阿奇霉素、泰利霉素、克林霉素、庆大霉素和链霉素耐药株的耐药表型与耐药基因携带相关;交叉耐药显示,红霉素与阿奇霉素呈高度相关(|r|=0.79>0.7),庆大霉素与链霉素呈中度相关(|r|=0.46>0.4),萘啶酸与环丙沙星(|r|=0.36<0.4)、氯霉素与氟苯尼考呈弱相关(|r|=0.04<0.4)。结论 贵州省鸡源弯曲菌存在区域性流行特征和耐药差异,多重耐药现象严重,存在通过食物链传播给人的风险。