人类胚胎超快速冷冻保存的初步研究

198 7年 ,Ｔｒｏｕｓｏｎ等[1] 最先用鼠胚建立了胚胎的超快速冷冻方法 ,并认为可获得与常规的慢速冷冻方法相似的冻存效果 ,同时具有耗时短、易操作和花费低等优点。到 1990年才有人类胚胎利用相同冷冻技术保存获得妊娠的报道[2 ] 。我室于 1996年开始在部分因不孕症行体外受精 胚胎移植(ＩＶＦ ＥＴ)者中 ,开展人类胚胎超快速冷冻的研究 ,现将结果报道如下。一、资料与方法1.研究对象 :选择 1996年 5月～ 1998年 6月在我室接受ＩＶＦ ＥＴ治疗后的 2 1例患者共 6 5个剩余胚胎。2 .方法 :(1)ＩＶＦ ＥＴ :方法见文献 [3]。于取卵后 4 8ｈ…     

辅助生育技术进展──囊胚期胚胎培养及移植

黄国宁副主任医师　尽管近20余年来ＩＶＦ-ＥＴ技术已进行很多革新,但胚胎种植率及临床妊娠率仍然很低。由于ＩＶＦ-ＥＴ在通常情况下是将体外培养了2～3天的4～8细胞期的胚胎移植回宫腔,而不象在生理环境下,胚胎在妇女输卵管内发育至囊胚期(第5天左右)才进入子宫腔进一步卵裂、囊胚孵出、着床。所以改变移植回子宫腔的胚胎时期从生殖生理上被认为是提高胚胎种植率的方法之一。(1)囊胚期胚胎移植的优点:①减少移植胚胎数量,降低多胎率。②缩短囊胚移植入子宫腔后胚胎进一步发育与着床之间的间隔,从而减少母-胎相互间的某些不利因素的影响。…     

促超排卵周期表皮生长因子对人卵泡发育的调节

目的：研究表皮生长因子（ＥＧＦ）、转化生长因子α（ＴＧＦα）及其共同受体（ＥＧＦＲ）在促超排卵过程中对卵泡发育的调节。方法：采用免疫组织化学及原位杂交技术，研究１０例正常卵巢组织、５例体外受精－胚胎移植（ＩＶＦ－ＥＴ）周期得到的颗粒细胞ＥＧＦ和ＥＧＦＲ的表达；分别采用放射免疫受体法、放射免疫法检测ＩＶＦ患者体液（１６例用药前血清、４２例卵泡液及同期血清）内ＥＧＦ样物质（ＥＧＦｓ）（主要包括ＥＧＦ和ＴＧＦα）、６种性激素水平。结果：卵巢局部不产生ＥＧＦ，但颗粒细胞具有ＥＧＦＲ并可产生ＴＧＦα。促超排卵过程中，血清ＥＧＦｓ水平显著升高，其在卵泡液内的水平明显高于同期血清水平；所有标本中未发现ＥＧＦｓ与性激素间存在相关关系。结论：卵巢局部产生ＥＧＦｓ是ＴＧＦα而非ＥＧＦ，ＴＧＦα通过自分泌作用于ＥＧＦＲ；促超排卵药物作用后，血清ＥＧＦｓ水平升高。     

抗心磷脂抗体对体外受精—胚胎移植的影响

目的探讨血清抗心磷脂抗体对体外受精－胚胎移植（ＩＶＦ－ＥＴ）中胚胎着床的影响。方法采用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ法）对１９９４年１１月至１９９６年５月共１５０个ＩＶＦ－ＥＴ周期（１５０例）中女性血清中抗心磷脂抗体（ＡＣＡ－ＩｇＧ、ＩｇＭ类）进行测定,同时观察ＩＶＦ－ＥＴ周期的妊娠结局。结果２１个ＡＣＡ阳性周期的临床妊娠率为９．５％,明显低于１２９个ＡＣＡ阴性周期的临床妊娠率２６．３％（Ｐ＜０．０５）。１５例生化妊娠者的血清ＡＣＡ阳性率为２０．０％,９９例未妊娠者的ＡＣＡ阳性率为１６．２％,两者ＡＣＡ阳性率均高于３６例临床妊娠者的５．６％（Ｐ＜０．０５）。生化妊娠者与未妊娠者的ＡＣＡ阳性率比较,差异无显著性（Ｐ＞０．２５）。结论女性患者体内ＡＣＡ可能干扰了ＩＶＦ－ＥＴ中胚胎着床和胚胎着床后的早期发育,体内自身抗体的存在也是ＩＶＦ－ＥＴ失败的原因之一。     

三维透明带部分切割辅助胚胎孵化在助孕治疗中的应用

目前体外受精 胚胎移植 (ＩＶＦ ＥＴ)植入失败率较高。有资料显示 ,在失败的病例中接近 5 0 %的胚胎发育是正常的 ,失败原因之一是透明带失去弹性、增厚或变硬 ,使胚胎不能从透明带中孵出。三维透明带部分切割 (3Ｄ ＰＺＤ)法辅助孵化在国外已有文献报道[1] ,现将我们应用情况报道如下。一、方法1.助孕方法 :按本所常规行促性腺激素释放激素激动剂(ＧｎＲＨ ａ)长方案诱导卵泡生长、采卵及ＩＶＦ[2 ] 。依据Ｄａｌｅ及Ｅｌｄｅｒ[3 ] 的ＩＶＦ的标准对卵子及胚胎评分 ,优质胚胎为 1～ 2级胚胎 ,即卵裂球大小相等 ,少于 10 %的碎片。将移植…     

体外受精-胚胎移植后异位妊娠12例临床分析

随着助孕技术的应用 ,在ＩＶＦ ＥＴ中胚胎虽被直接置入宫腔内 ,却无法完全避免并发异位妊娠甚至宫内外同时妊娠 ,体外受精 胚胎移植 (ＩＶＦ ＥＴ)后异位妊娠 (ＥＰ)发生率有增加趋势[1 ] ,其发生、诊治有一定的特殊性 ,现对ＩＶＦ ＥＴ后ＥＰ12例进行回顾性分析 ,以探讨其发生的高危因素 ,临床特点及早期诊治方法。1　临床资料1.1　一般资料　 1996年 1月至 2 0 0 0年 10月在我院施行ＩＶＦ ＥＴ后妊娠 176例 ,其中发生异位妊娠 12例 ,发生率为 6 .8% ,其中宫内外同时妊娠 1例。患者年龄 2 6～ 37岁 ,均为未产妇 ,不孕 2～ 6年。原发不孕…     

表皮生长因子受体在植入前胚胎细胞中的表达

目的 研究表皮生长因子（ＥＧＦ）受体在植入前胚胎细胞中的表达及其生物学意义。方法 应用间接免疫我法检测人植入前胚胎细胞ＥＧＦ受体的表达情况。结果 未受精卵即卵母细胞,受精卵卵裂后２细胞期至１０细胞期胚胎细胞表面均有ＥＧＦ受体的表达,其表达量的荧光强度基本一致,结论ＥＧＦ受体在植入前胚细胞中有表达,ＥＧＦ超家族成员听肝素结合ＥＧＦ可能通过与ＥＧＦ受体结构,参与早期人类胚的生长、发育和着床。     

应用无糖和磷酸盐的培养基使胚胎移植从卵子回收后的48小时延长至72小时以改善体外授精的临床预后

由于培养基中的糖和磷酸盐对胚胎具有抑制作用，体外授精（ＩＶＦ）中的胚胎移植（ＥＴ）在卵子回收４８小时时进行往往不能获得满意效果。本文回顾性分析了１９９４年１０月至１９９６年１０月间１５０例应用无糖和磷酸盐培养基进行ＩＶＦ或ＩＣＳＩ的临床预后。７２例在...     

IVF—ET失败的原因及采取的措施

近十几年来，ＩＶＦ－ＥＴ发展韧带，但临床上活产率仅１０％左右。ＩＶＦ－ＥＴ失败的原因很多，涉及到每一个环节，包括受精率低、胚胎体外发育欠佳、子宫内膜接受能力差以及母俩 分泌失调等诸多因素。针对这些因素，生殖 们采取了一系列的措施。本文对此做一简要综述。     

宫腔镜检查在体外受精-胚胎移植中的价值

体外受精 -胚胎移植 (ｉｎｖｉｔｒｏｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎａｎｄｅｍｂｕｙｏｔｒａｎｓ ｆｅｒ,ＩＶＦ -ＥＴ)的临床受孕率虽经努力 ,但效果仍不如人意 ,导致ＩＶＦ -ＥＴ失败的原因很多且复杂 ,子宫内环境不良是重要原因之一。为探讨宫腔镜在ＩＶＦ -ＥＴ中的价值 ,我们进行了本研究。1　资料与方法1.1　临床资料　有 15 4例不孕患者行宫腔镜检查。检查指征为 ( 1)实施ＩＶＦ前 ;( 2 )子宫输卵管造影 (ＨＳＧ)显示宫腔异常 ;( 3)阴道Ｂ超显示子宫内膜形态异常。患者 2 5～ 37岁 ,不孕 2～ 11年。原发不孕 86例 ,继发不孕 6 8例。1.…     

影响体外受精-胚胎移植妊娠的相关因素分析

近年来 ,虽然行体外受精 (ＩＶＦ)或卵母细胞浆内单精子注射 (ＩＣＳＩ)受精与胚胎移植 (ＥＴ) (ＩＶＦ/ＩＣＳＩ ＥＴ)后的临床妊娠率已有较大幅度的提高 ,但由于患者自身情况和操作技术等因素的影响 ,仍有较大比例的ＩＶＦ/ＩＣＳＩ ＥＴ未能妊娠成功。本研究对有关临床和实验资料进行综合分析 ,寻找影响ＩＶＦ/ＩＣＳＩ ＥＴ妊娠的临床相关因素。一、资料和方法1 研究对象 :研究对象为 2 0 0 0年 2月～ 2 0 0 1年 1月在本中心完成ＩＶＦ/ＩＣＳＩ ＥＴ治疗的患者 887例 ,共进行 947个周期的治疗。2 临床资料收集 :对 887例患者按本中心…     

辅助生育技术进展──胚胎植入前遗传学诊断进展

卢光教授　胚胎植入前遗传学诊断(ＰＧＤ),又称为孕前诊断。顾名思义,是在胚胎植入母体前(或妊娠前)完成的遗传学诊断。因此不需要通过人工流产来选择胚胎,避免了人流对夫妇造成精神和肉体上的损伤。所以更易于为大众所接受,特别适用于有高风险生育遗传病患儿的夫妇,是近十年来遗传优生领域的重要进展。ＩＶＦ的问世是开展ＰＧＤ的必需前提。这不仅是能在体外获得胚胎并能操作胚胎,而且,通过药物诱导排卵,一次可得到数枚乃至数十枚胚胎,从而能充足地选择最好的胚胎,所以该方法可以排除遗传病携带者胚胎,阻断致病基因的纵向传递。1989～199…     

妇科肿瘤与细胞因子

细胞因子是由免疫细胞被激活后产生的一类能介导和调节免疫及炎症效应的小分子多肽 ,分子质量为 6 0 0 0 0ｕ ,具很强的生物学活性。细胞因子可影响肿瘤的发生、发展、侵袭转移。并且 ,生殖系统中的一些细胞成分及胚胎本身也可调节免疫细胞合成和分泌细胞因子 ,其中生长因子 ,包括表皮生长因子 (ＥＧＦ)、转化生长因子 (ＴＧＦ)、血管内皮生长因子 (ＶＥＧＦ)及胰岛素样生长因子 (ＩＧＦｓ)等。通过内分泌、自分泌、旁分泌等多种形式 ,影响细胞生长、分化调控 ,近年来成为妇科肿瘤的研究热点。1　ＥＧＦ、ＴＧＦ和ＥＧＦＲ(表皮生长因子受体…     

三种助孕技术治疗多囊卵巢综合征不孕的疗效比较

目的：观察３种助孕技术：ＩＶＦ ＥＴ、ＧＩＦＴ和控制性超促排卵（ＣＯＨ）后自行同房对多囊卵巢综合征（ＰＣＯＳ）不孕患者的疗效。方法：应用３种方法治疗,观察各组的临床妊娠率和发生卵巢过度刺激综合征（ＯＨＳＳ）的情况。结果：ＩＶＦ ＥＴ和ＧＩＦＴ与ＣＯＨ相比能得到更高的临床妊娠率,而前二者发生ＯＨＳＳ的危险性明显低于后者。结论：为避免ＣＯＨ后发生ＯＨＳＳ,建议对因ＰＣＯＳ不孕的患者采取体外助孕技术治疗。应用何种技术要根据患者的具体情况而定。如果有至少１ 条输卵管完全正常,可先试行ＧＩＦＴ。此外,须将多余的卵子进行体外授精试验,观察其受精及卵裂情况,从而对今后的治疗提出指导性建议,并要将得到的胚胎进行冷冻保存,以备今后使用。     

丹那唑与激素治疗子宫内膜异位症对卵子发育的影响

文收集了接受体外受精－胚胎移植（ＩＶＦ－ＥＴ）的子宫内膜异位症患者３２例，包括曾经丹那唑治疗２１例（丹那唑组）和孕激素或ＧｎＲＨ类似物治疗１１例（激素组），并以因单纯输卵管疾病接受ＩＶＦ－ＥＴ者２１例作对照组，分析ＩＶＦ－ＥＴ的各项参数。结果：丹那唑组的ｈＣＧ注射前血清Ｅ２，卵泡直径＞１５ｍｍ卵泡数和卵子受精率显著低于对照组（Ｐ＜０．０５，Ｐ．＜０．０１和Ｐ＜０．０５），而激素组与对照组相比，差异均无显著性。提示丹那唑可能妨碍卵泡发育，降低卵子质量而影响卵子受精。对于拟接受助孕技术的子宫内膜异位症患者宜选用孕激素或ＧｎＲＨ类似物制剂治疗。     

体外受精-胚胎移植中影响临床妊娠的因素——附559个周期分析

目的探讨体外受精胚胎移植（ＩＶＦＥＴ）中影响临床妊娠率的因素。方法对１９９２年至１９９５年１１月因双侧输卵管梗阻而行ＩＶＦＥＴ的５５９个周期的资料进行回顾性分析，应用计算机ＳＰＳＰＣＶ３０系统，进行单因素变异方差分析。结果５９个周期总临床妊娠率为２１６％。结核性输卵管梗阻占２８４％，继发不孕中３４９％有人工流产史。环境改变、阻塞原因不同及过去子宫内妊娠，不影响ＩＶＦＥＴ成功率。当移植胚胎数增加到５个时，临床妊娠率最高，为３２５％。累积胚胎评分或胚胎质量与临床妊娠率明显有关。结论移植胚胎数及其质量，是影响临床妊娠成功的重要因素，同时应注意预防高序多胎妊娠发生，并对胚胎存活潜力及子宫接受力作进一步研究。     

促超排卵周期胰岛素样生长因子—1对人卵泡发育的调控

目的：探讨促超排卵周期胰岛素样生长因子－１（ＩＧＦ－１）对人卵泡发育的调控。方法：采用放射免疫法检测体外受精－胚胎移植（ＩＶＦ－ＥＴ）患者体液（１３例用药前血清、３８例卵泡液及同期血清）中ＩＧＦ－１及性激素的含量；采用原位杂交技术检测５例在ＩＶＦ周期得到的颗粒细胞上ＩＧＦ－１及其受体（ＩＧＦ－１Ｒ）的表达。结果：（１）促超排卵过程中血清ＩＧＦ－１含量显著增高（Ｐ＜０．００１），其在卵泡液内的平均含量低于同期血清中水平（Ｐ＜０．０５），且与卵泡发育数之间呈负相关关系（Ｐ＜０．０１）；在卵泡发育数少于３个的卵巢低反应型患者中，卵泡液水平接近同期血清水平。（２）卵泡液内ＩＧＦ－１与卵泡刺激素（ＦＳＨ）、同期末梢血清中ＩＧＦ－１与雌二醇（Ｅ２）呈显著的负相关（Ｐ＜０．０１）。（３）颗粒细胞上存在ＩＧＦ－１Ｒ，但不能产生ＩＧＦ－１。结论：促超排卵药物作用后血清ＩＧＦ－１水平升高，并进入卵泡液内协同促性腺激素参与对卵泡发育的调控。     

配子赠送在体外受精—胚胎移植中的应用

本文报道２例配子赠送体外受精－胚胎移植（ＩＶＦ－ＥＴ）妊娠成功，并分娩正常婴儿。１例染色体异常，１例丈夫染色体异常。２例均有反复流产史。本文对这２例染色体平衡易位者形成配子的情况进行讨论，说明这２例为获得健康后代都有应用赠送配子的必要性。同时，赠送卵子必须应用ＩＶＦ－ＥＴ技术，其中１例赠送精子应用ＩＶＦ－ＥＴ技术，是因其他助孕技术屡次失败。     

促超排卵周期表皮生长因子对人卵泡发育调节

研究表皮生长因子、转化生长因子α臁其共同受体在促超排卵过程中对卵泡发育的调节。方法采用免疫组织冢原位杂交技术，研究１０例正常卵巢组织、５例体外受精－胚胎和吉期得到的颗粒细胞ＥＧＦ和ＥＧＦＲ的表达；分别采用放射免疫受体法、放射免疫法检测ＩＶＦ患者体液内ＥＧＦ样物质、６种性激素水平。     

辅助生育技术进展──影响体外受精-胚胎移植成功率的因素

梁晓燕教授　在ＩＶＦ-ＥＴ的临床工作中,除患者年龄、实验室中胚胎的质量、移植时间及移植胚胎数目外,仍有较多的因素影响ＩＶＦ-ＥＴ的成功率。①患者的不孕原因,是否合并生殖道感染;②卵巢的储备功能;③个体化的控制性超排卵方案的运用;④取卵的数目及质量,是否合并手术并发症;⑤子宫内膜的同步及接受性,是否存在子宫内膜的病理性改变;⑥胚胎移植的过程;⑦精子的质量。在此,主要讨论子宫腔和子宫内膜状态影响ＩＶＦ-ＥＴ成功率的可能因素,以及关于ＥＴ时操作的有关问题。子宫内膜状态,已有大量的报道,当ＥＴ时,子宫内膜厚度为8～12ｍｍ时…