缺血预处理抗缺血再灌注心肌间质损伤的实验研究

目的：观察缺血预处理（ＩＰＣ） 对大鼠缺血再灌注心肌间质胶原及心肌功能结构关系的影响,以进一步探讨ＩＰＣ 对心肌的保护作用。方法：实验采用体重（２５０ ±３０）ｇ 雄性ＳＤ 大鼠２４ 只,分３ 组,每组８ 只,即假手术对照（ＳＣ）组;缺血再灌注（Ｉ／Ｒ） 组和缺血预处理（ＩＰＣ） 组。用超微结构立体计量及羟脯氨酸浓度测定观察心肌间质胶原变化,多道记录仪测量心功能指标,透射电镜观察心肌超微结构。结果：Ｉ／Ｒ 时心肌间质胶原浓度显著低于ＳＣ 组（ Ｐ＜ ０－０１） ,心肌超微结构损伤严重,左室功能明显低于ＳＣ 组（ Ｐ＜ ０－０１） 。ＩＰＣ 组心肌超微结构破坏明显低于Ｉ／ Ｒ 组。同时,心肌间质胶原浓度、胶原纤维线密度及左室功能指标明显高于Ｉ／Ｒ 组（ Ｐ＜ ０－０５ ,Ｐ＜ ０－０１） 。结论：ＩＰＣ 的心肌保护作用不仅表现在对心肌细胞上,而且对心肌间质也有重要的保护作用。     

心脏缺血预处理及其应用研究现状

1986年Muny等发现当反复短暂的缺血和再灌注之后心脏对缺血状态产生适应,这种适应可以使心肌在后续的持续性缺血中得到保护,保护效应有能量消耗的降低和在缺血过程中细胞损伤状况的延迟,由此他们提出了“缺血预处理”这一概念,此概念的提出纠正了多年来人们一直认为反复短暂心肌缺血会造成累积性损伤,最终导致心肌梗塞的观点,从此缺血心肌的保护及其机理探讨开始了崭新的一页。     

局部缺血“预处理”诱导家兔相邻非缺血心肌热休克蛋白70基 …

目的：研究兔心局局部缺血“预处理”后，局部缺血和相邻非血心肌热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０）ｍＲＮＡ的水平变化。方法：提取心肌组织总ＲＮＡ，用ＨＳＰ７０探针进行斑点杂交。结果：缺血预处理组的缺血区和非缺血区ＨＳＰ７０ ｍＲＮＡ表达水平均显著高于对照组相应部位（Ｐ〈０．０５），而每组内的缺血区及非缺血区间无显著差异（Ｐ〉０．０５），结论：局部缺血“预处理”后，缺血和非缺血区两处心肌的内反应呈“一致性”；     

去甲肾上腺素和缺血预处理对大鼠缺血再灌注心肌的作用

缺血预处理 (Ｉｓｃｈｅｍｉｃｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ ,ＩＰ)的机理及其临床应用前景至今仍不清楚。目前肾上腺素能神经递质及其受体在ＩＰ的保护心脏作用中所起的作用日益受到重视。本试验通过大鼠缺血再灌注模型 ,并与ＩＰ保护作用相比较 ,探讨外源性去甲肾上腺素预     

热休克预处理对家兔肝缺血-再灌注损伤的影响

目的 :探讨热休克预处理对肝缺血 再灌注损伤的影响。方法 :随机将家兔分为对照组和热休克预处理组 ,复制肝脏缺血 再灌注模型 ,分别于缺血前、缺血 45min、再灌注 45min三次取血 ,赖氏法检测血清谷丙转氨酶 (ALT)活性。结果 :热休克预处理组缺血前的ALT活性稍高于对照组 ,但是缺血后及再灌注后显著低于对照组。结论 :热休克预处理对肝细胞有轻微的损伤作用 ,但是对缺血后和再灌注后损伤均有显著的保护作用。     

血管紧张素Ⅱ预处理大鼠缺血再灌注损伤心脏的保护作用

许多证据表明,心肌缺血再灌注损伤过程中,心脏局部肾素血管紧张素系统（RAS）被激活,局部增多的血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）会对心脏产生进一步的损害作用。于是认为,如果在缺血再灌注前给予外源性Ang Ⅱ势必会加重心肌的损害。然而,我们的研究却表明,大鼠离体心脏缺血前随灌流液给予1nmol/L Ang Ⅱ 5min灌流,然后再给5min正常灌流不但对随后40min缺血及20min再灌注的心肌没有加重损伤,反而对心脏有一定的保护作用,且这种效应不被AT1受体阻断剂Losartan阻断。由此推测,缺血前给予少量的外源性Ang Ⅱ有可能通过非AT1途径对心脏发挥保护作用。其机制可能与缺血性预处理的某些过程有关,其意义和机理值得进一步探讨。     

大鼠背阔肌肌皮瓣缺血再灌注损伤局部缺血预处理及 肢体远程缺血预处理的影响对比

目的 对比局部缺血预处理和肢体远程缺血预处理对大鼠背阔肌肌皮瓣缺血再灌注损伤的影响。方法 选取广西医科大学动物实验中心提供的40只体质量在250~300 g的健康雄性SD大鼠,采用随机数字表法分为肢体缺血预处理组、局部缺血预处理组、缺血组、对照组,每组10只。用无损伤血管夹对肢体缺血预处理组大鼠右股动脉进行夹闭,对局部缺血预处理组大鼠胸背动脉进行夹闭,对缺血组大鼠的胸背动脉进行夹闭,对照组大鼠只在胸背动脉穿线,不结扎。运用ELISA法检测四组大鼠缺血前（T0）、缺血3 h（T1）、灌流恢复后1 h（T2）血清NO、ET水平。结果 肢体缺血预处理组、局部缺血预处理组、缺血组大鼠T1、T2时血清NO水平均低于T0时,血清ET水平均高于T0时,差异均有统计学意义（P＜0.05）;肢体缺血预处理组、局部缺血预处理组、缺血组大鼠T1、T2时血清NO水平均低于对照组,血清ET水平均高于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）;肢体缺血预处理组、局部缺血预处理组大鼠血清NO水平高于缺血组,血清ET水平低于缺血组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 大鼠背阔肌肌皮瓣缺血再灌注损伤在局部缺血预处理和肢体远程缺血预处理下均能够减轻,并保护肌皮瓣。     

缺血预处理对大鼠肥大心脏缺血再灌注损伤的影响

本实验用一氧化氮合成抑制剂－左旋硝基精氨酸复制大鼠高血压心脏肥大模型并作缺血再灌注处理，以观察缺血预处理对高血压肥大心脏Ｉ／Ｒ损伤的影响及ＮＯ在其中的作用。结果显示：ＩＰＣ能减轻大鼠高血压有肥大心脏Ｉ／Ｒ损伤，其程度与ＩＰＣ对正常心脏Ｉ／Ｒ损伤的保护相近，表明高血压肥大心脏同样具有ＩＰＣ保护现象，但ＮＯ在本模型中未起作用。     

内皮源性舒张因子在大鼠小肠缺血预处理中的作用

本实验在大鼠小肠缺血再灌注（I/R）损伤模型上观察左族精氨酸（L－Arginine，L-Arg）和左旋硝基精氨酸（L－NNA）对缺血预处理（IPC）和I／R损伤的影响，旨在探讨内皮源性舒张因子/1-氧化氮(endothlium-derivedrelaxingfactor/nitricoxide,EDRF/ND）系统在IPC细胞保护中的作用。结果表明IPC能减轻小肠I/R后血压下降程度（8．3±2．5vs5．6±0．9kPa，P＜0．01），及肠粘膜出血，减少LDH漏出（0．6±0．4vs1．1±0．4U／L），MDA产生（112．9±3．7vs370．1±27.5mmol/g）；明显改善肠道血管床功能，使伊文思兰渗出减少（153．8±36．6vs341．1±429μg/g，P＜0．01），MPO活性下降（24．6±12．8vs79．9±11．5U/g，P＜0．01）。LPC还使血浆NO2含量升高（3．2±1．0vs1．0±0．2μmol/L，P＜0．01），ET水平下降。L－NNA完全消除IP的保护作用，L-Arg则模拟了IPC的保护作用。提示：IPC对I/R损伤小肠有保护作用，EDRF／NO系统的激活参与了这种保护。     

缺血预处理对大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤时Bax基因蛋白表达影响的实验研究

探讨缺血预处理对大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤的可能影响,特别是对Bax基因表达的影响.用免疫组化方法检测并观察大鼠后肢止血带缺血4 h后再灌注4、24、48 h后和先经预缺血处理后再灌注4、24 h后Bax基因蛋白在肌细胞中的表达情况.结果表明缺血4 h(A组)肌细胞出现Bax蛋白表达,24h后(B组)表达量显增加,48h后(C组)无表达.缺血预处理后再灌注4 h后(D组)肌细胞内无Bax蛋白表达,再灌注24 h后(E组)Bax蛋白表达量非常显著地低于B组.Bax基因参与了骨骼缺血再灌注损伤的病理过程,其蛋白表达量与组织损伤程度密切相关,经缺血预处理可以下调Bax基因蛋白的表达水平、或是抑制其合成,使肌细胞存活而发挥其保护作用.     

缺血预处理快速效应对兔急性缺血脊髓的保护作用

目的:探讨缺血预处理快速相对兔腹主动脉短暂阻断致缺血脊髓的保护作用。方法:36只雄性新西兰兔随机分成3组(n=12):即缺血再灌注损伤组(IR组)、缺血预处理组(IPC+IR组)及假手术组(Sham组)。IR组阻闭兔腹主动脉肾下段20min,复制兔脊髓缺血损伤模型;IPC+IR组预先阻闭腹主动脉肾下段6min,再灌注30min后再次阻闭腹主动脉肾下段20min;Sham组除不夹闭腹主动脉外,其余处理同IR组。再灌注后8h、12h、24h和48h分别对动物神经功能评分,然后,处死动物取脊髓(L_5-7),分别行组织病理学观察及测定脊髓组织中Na⁺,K⁺-ATP酶的活性。结果:Sham组及IPC+IR组神经功能评分各时点均明显高于IR组(P＜0.01);Sham组及IPC+IR组脊髓前角正常神经细胞数明显多于IR组(P＜0.01);Sham组及IPC+IR组脊髓组织中Na⁺,K⁺-ATP酶的活性明显高于IR组(P＜0.01)。结论:缺血预处理快速相对兔急性缺血脊髓有显著的保护作用,这种保护作用可能与稳定Na⁺,K⁺-ATP酶的活性有关。     

柳胺苄心定对急性心肌梗塞家兔心肌血流量梗死范围及左室功能的影响

本文观察了兼有α_1受体阻断作用的β受体阻断剂柳胺苄心定(labetalol,简称Lab)对急性心肌梗塞家兔心肌血流量(放射性微球法),梗死范围及左室功能的影响,并与心得安比较。结果表明:小剂量Lab(1mg/kg)主要显示β受体阻断效应,它能减慢心率,降低心肌耗氧量,降低非梗死区心肌血流量,缩小梗死范围,其效应与心得安相似,且能改善左室舒缩功能;大剂量Lab(5mg/kg),能同时阻断α_1和β受体,它能降低动脉血压,相对增加各区心肌血流量,显著减少心肌耗氧量,缩小梗死范围。结果提示:在急性心肌梗塞治疗中,同时阻断α_1和β受体较单纯阻断β受体优越。     

局部缺血"预处理"诱导家兔相邻非缺血心肌热休克蛋白70基因表达

目的：研究兔心局部缺血“预处理”后,局部缺血和相邻非缺血心肌热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０）ｍＲＮＡ的水平变化。方法：提取心肌组织总ＲＮＡ,用ＨＳＰ７０探针进行斑点杂交。结果：缺血预处理组的缺血区和非缺血区ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ表达水平均显著高于对照组相应部位（Ｐ＜００５）,而每组内的缺血区及非缺血区间无显著差异（Ｐ＞００５）。结论：局部缺血“预处理”后,缺血和非缺血区两处心肌的内反应呈“一致性”;缺血预处理对心肌的保护作用可能与ＨＳＰ７０的合成增多有关。     

清醒兔反复短阵心肌缺血对心肌梗塞影响的研究

本文旨在以清醒兔反复短阵心肌缺血(RBMI)模型,观察RBMI对局部心肌的影响。每24h缺血3分钟,连续10次,结果并不致心肌超微结构的明显改变及心电图的累积性损伤变化,但可致局部心肌毛细血管密度增加(P<0.001,X±SD)及线粒体横截面积增大(0.5302±0.1060 VS 0.5923±0.1305(μm~2),P<0.05);经历RBMI的动物在再次4h心肌缺血中的死亡率(1/9VS 9/17,P<0.001,卡方检验)、Q波出现的频率、梗塞范围(IS)(33.23±2.82 VS 56.61±8.01,坏死区/缺血区%,P<0.001)及ST段的抬高量均明显低于单纯4h缺血组,而两组血浆NAGase活性则明显增加,但组间比较并无差别。上述表明,RBMI不仅对兔心肌无累积性损伤,却能减少心肌严重缺血时的损伤,其机制可能与侧支循环的开放或重建有关;线粒体横截面积增大在其中的意义也值得重视。     

粒细胞集落刺激因子联合缺血后适应治疗急性心肌梗死的实验研究

 目的：探讨粒细胞集落刺激因子（G-CSF）联合缺血后适应（IP）对实验兔急性心肌梗死的心脏保护作用。方法：将兔结扎左室支（LVA）后分为4组：缺血再灌注模型组（IR组,松结后直接再灌注）、G-CSF组（松结并于术后12 h开始使用G-CSF皮下注射)、IP组（予以IP行改良再灌注）和G-CSF + IP组（联合应用IP及G-CSF干预）。观察各组术中心电图ST段变化,检测手术前后血常规和心肌钙蛋白I（cTnI）,术后4周行超声心动图检查,测定各组梗死心肌的面积、组织病理结构和细胞凋亡。结果：IP组术中ST段回落快于模型组;G-CSF处理后,实验动物血常规中白细胞明显增高;IP组、G-CSF组及联合治疗组术后7 d的cTnI明显低于模型组;术后4周超声心动图结果显示,IP组、G-CSF组及联合治疗组指标好于模型组,联合治疗组最佳;IP组、G-CSF组及联合治疗组梗死心肌面积均明显低于模型组,梗死周边细胞凋亡程度低、血管密度高,联合治疗组最好。结论：G-CSF联合IP可有效减轻心肌梗死后急性期的再灌注损伤,有利于恢复期的心脏修复。     

Local and remote ischemic preconditioning protect against intestinal ischemic/reperfusion injury after supraceliac aortic clamping

OBJECTIVES:

This study tests the hypothesis that local or remote ischemic preconditioning may protect the intestinal mucosa against ischemia and reperfusion injuries resulting from temporary supraceliac aortic clamping.

METHODS:

Twenty-eight Wistar rats were divided into four groups: the sham surgery group, the supraceliac aortic occlusion group, the local ischemic preconditioning prior to supraceliac aortic occlusion group, and the remote ischemic preconditioning prior to supraceliac aortic occlusion group. Tissue samples from the small bowel were used for quantitative morphometric analysis of mucosal injury, and blood samples were collected for laboratory analyses.

RESULTS:

Supraceliac aortic occlusion decreased intestinal mucosal length by reducing villous height and elevated serum lactic dehydrogenase and lactate levels. Both local and remote ischemic preconditioning mitigated these histopathological and laboratory changes.

CONCLUSIONS:

Both local and remote ischemic preconditioning protect intestinal mucosa against ischemia and reperfusion injury following supraceliac aortic clamping.     

肾缺血预处理保护缺血再灌注损伤心肌的机制

目的:探讨心脏外脏器缺血预处理对心肌保护作用的机制。方法:将动物分为缺血／再灌注(I/R)、经典缺血预处理(CIPC)、肾缺血预处理(KIPC)及超氧化物歧化酶＋肾缺血预处理(SOD+KIPC)4组。比较各组心肌内源性保护物质一氧化氮(NO)含量、5'-核苷酸酶(5'-NT)活性的变化。结果:肾缺血预处理能明显改善左室功能,降低再灌性心律失常发生率及血浆磷脂酶A₂(PLA₂)活性,同时使心肌5'－NT活性、NO含量明显高于I/R组。而在肾缺血预处理前用超氧化物歧化酶处理则肾缺血预处理的心肌保护作用明显弱于KIPC组,与心肌5'－NT活性、NO含量下降相一致。结论:肾缺血预处理对心肌的保护作用可能也与通过调动心肌内源性保护物质的释放有关,氧自由基在介导该类物质的释放中起了重要的作用。     

肾缺血预处理增强心脏的电稳定性

目的：研究肾缺血预处理（ＩＰＣ）对心脏电稳定性的影响和机理。方法：２４只大耳白兔随机分为对照组、肾缺血再灌流（Ｉ／Ｒ）组和肾ＩＰＣ＋Ｉ／Ｒ组。观察肾再灌流２４ｈ时及用垂体后叶素（Ｐｔ）和肾上腺素（Ａｄｒ）后的心电图动态变化以及血中一氧化氮（ＮＯ）和心肌中丙二醛（ＭＤＡ）的浓度改变。结果：用Ｐｔ和Ａｄｒ后，肾Ｉ／Ｒ组缺血性ＳＴ段抬高和心律失常发生率同肾ＩＰＣ＋Ｉ／Ｒ组差异显著；肾ＩＰＣ＋Ｉ／Ｒ组ＮＯ代谢物升高和ＭＤＡ降低同Ｉ／Ｒ组差异显著（Ｐ＜０．０５）；除ＭＤＡ外，上述指标在肾ＩＰＣ＋Ｉ／Ｒ组与对照组间差异无显著。结论：肾ＩＰＣ通过减轻心肌缺血性改变使心脏电稳定性增强；ＮＯ可能通过增加氧自由基的清除和扩血管效应而参与此作用。     

非创伤缺血预处理对大鼠缺血再灌注心肌的作用

目的:确定非创伤性缺血预处理对大鼠缺血/再灌注(I/R)心肌损伤是否具有对抗作用,以扩展缺血预处理的实际应用.方法:采用非创伤性下肢缺血预处理及经典缺血预处理的动物模型,比较两种处理方法对I/R心肌损伤的效应.实验动物分4组:正常对照组(NC,n=8),开胸旷置50 min;缺血/再灌注组(I/R,n=12),结扎冠脉30 min,再灌注20、180 min;经典缺血预处理组(C-IPC,n=12),按经典Murry法复制;非创伤性下肢缺血预处理组(N-WIPC,n=12),捆绑双下肢5 min,松开5 min,反复4次后,阻断冠脉30 min,再灌20、180 min.以左室功能,心肌梗塞范围,血清肌酸激酶(CK)及心肌组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性为观察指标.结果:与I/R组相比,N-WIPC组与C-IPC组均显著缩小I/R后的心肌梗塞范围(P＜0.01);明显恢复I/R后的左室功能(P＜0.05,0.01);减轻自由基对心肌的损害:血清CK,心肌MDA含量显著降低(P＜0.01).N-WIPC组还使心肌SOD活性增高(P＜0.05).结论:非创伤性下肢缺血预处理与经典缺血预处理可诱发同等强度的心肌预处理效应.     

家兔心肌缺血及再灌流对红细胞变形能力的损伤及其防治的实验研究

本文以家兔为对象,利用激光衍射法研究了在结扎冠状动脉左室枝后及放开结扎重新供血造成再灌流时红细胞变形能力的改变情况。结果表明:再灌流对红细胞变形能力的损伤程度比单纯缺血严重得多,这些改变可以引起并加重心肌微循环障碍,导致心肌细胞的进一步损伤,再灌流前给予山莨菪碱和樟柳碱均可以有效地改善红细胞的变形能力。结果提示对心肌梗塞患者及时给予山茛菪碱或樟柳碱可能有助于防止再灌流对红细胞变形能力的损伤。