胆囊癌肝脏转移动物模型的实验研究

目的 建立胆囊癌肝脏转移动物模型,并对其进行初步评估.方法 用脾内接种法建立人胆囊癌细胞系(GBC-SD)的裸鼠肝脏转移模型.接种后第45天行肝脏CT检查,并处死裸鼠后取下肝脏行病理检查.结果 CT检查肝转移率为40%(4/10),探查发现肝转移率为50%(5/10),CT检查的阳性率为80%(4/5),组织病理学证实肝脏瘤结节均为转移瘤.结论 脾内接种法可以成功建立胆囊癌肝脏转移动物模型,CT可以作为初步评估该模型的影像学工具.     

BAMBI基因过表达人结肠癌细胞移植斑马鱼致肝转移模型的构建

目的构建BAMBI基因过表达人结肠癌细胞移植斑马鱼肝转移模型,分析斑马鱼肝内转移性结肠癌细胞BAMBI基因表达水平与肝转移发生率的关联性。方法分别构建BAMBI过表达稳转结肠癌细胞株SW620(BAMBI+组)、空载体红色荧光蛋白基因转染结肠癌细胞株SW620(EV组),分别显微注射到受精后第2天转基因斑马鱼Tg(Apo14∶GFP)胚胎卵黄囊(每组各680条),激光共聚焦荧光显微镜观察、拍摄,采用Image J软件测量转移至斑马鱼肝脏内结肠癌细胞红色荧光表达强度,计算肝转移发生率;采用t检验比较BAMBI+组及EV组斑马鱼肝脏内结肠癌细胞红色荧光表达强度及肝转移发生率的差异。结果与EV组相比,激光共聚焦荧光显微观察显示BAMBI+组斑马鱼肝内结肠癌细胞红色荧光表达量显著增加(t=6.247,P=0.003 3);BAMBI+组斑马鱼肝转移发生率与EV组相比显著增加(t=4.276,P=0.012 9)。结论构建了基因修饰人结肠癌细胞移植斑马鱼致肝转移模型,可较好地模拟活体状态的结肠癌肝转移;BAMBI基因可促进异种移植入斑马鱼的结肠癌细胞发生肝转移。     

大肠癌肝转移的治疗及探讨

目的探讨大肠癌术后肝转移同肿瘤的病理、部位、手术方式、有无肝硬化的关系,发现其肝转移的危险因素,以提高大肠癌的诊治水平。方法回顾1995年～2000年146例大肠癌术后36例肝转移的病例,结合文献进行临床分析。结果36例中31例为高分化腺癌,升结肠6例,横结肠3例,乙状结肠8例,肝转移率分别为33.3%、30%、32%,根治手术肝转移率低。结论高分化腺癌、横结肠癌、升结肠癌、乙状结肠癌、姑息性手术是大肠癌术后肝转移的危险因素。     

结肠癌肝转移模型构建方法的优化

背景：结肠癌转移途径主要有血行转移、腹膜转移和淋巴结转移等,最常转移的器官是肝脏,建立一个简单、合适的动物模型对于研究结肠癌肝转移的生物学行为、癌细胞的异质性、肿瘤转移机制至关重要。目的：通过切脾注射法建立结肠癌肝转移的动物模型。方法：将人结肠癌细胞株HT29孵育培养,通过建立BALB/c小鼠皮下移植瘤与脾脏注射并切除脾脏相结合的方法建立结肠癌肝转移瘤模型,观察肿瘤生长及转移情况,肝转移瘤组织病理学变化,以及肝转移瘤DNA含量和细胞周期。结果与结论：实验采用背侧正中线旁切口进行脾脏注射切脾法成功建立了人结肠癌肝转移瘤模型,成瘤率达8/8（100%）。移植瘤组织切片观察显示肿瘤为腺癌I-Ⅱ级。流式细胞术检查分析DNA倍体为异倍体。该模型为结肠癌转移的生物学研究提供了一个良好的技术平台。     

乙型肝炎表面抗原与胃癌患者肝转移关系的初步探讨

胃癌是常见的消化道肿瘤 ,肝脏是胃癌常见的转移部位 ,而我国是乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)感染的高发国家之一 ,肿瘤病人同时发生ＨＢＶ感染也十分常见 ,ＨＢＶ感染与胃癌肝转移之间是否有关 ,国内未见报道 ,本文就此作初步探讨。1　资料和方法1 .1　临床资料收集本院 1 991年 1月～ 2 0 0 1年 1 2月胃癌 390例 ,其中男 2 80例 ,女 1 1 0例 ,年龄 2 3～ 78岁 ,平均 50 .6岁。本组病例临床上主要症状为上腹部隐痛、腹胀、嗳气、返酸、消化道出血等。病理类型 :高分化 78例 ,中分化 95例 ,低分化 84例 ,未分化 50例 ,粘液腺癌 63例 ,印戒细胞癌 2 …     

转移性人小细胞肺癌裸鼠模型的建立

目的建立转移性人小细胞肺癌(SCLC)的裸鼠模型,探讨其用于人SCLC的治疗研究的可行性。方法 RPMI 1640培养基培养的人SCLC细胞株NCI-H446用无血清培养液重悬成1×107个/mL,取0.1 mL细胞悬液接种于BALB/c-nu裸鼠胫骨结节骨髓腔内,构建裸鼠模型并观察腿部肿瘤生长情况及肺等器官的转移情况。免疫组化染色检测小细胞肺癌标志物CD56及神经上皮干细胞标志物netsin的表达情况。结果经胫骨结节骨髓腔注射的方法注射细胞后裸鼠腿部均形成原位瘤,肺部转移6/6只,肝、脾等脏器未见转移灶。肿瘤组织细胞CD56阳性率>75%,nestin阳性率为4%～12%。结论经胫骨结节骨髓腔注射的方法可以形成弥散性肺部肿瘤,其他各器官则未见肿瘤块,可以为人SCLC实验性治疗的研究提供一种高效的实验模型。     

GM-CSF在肝转移瘤患者中的应用价值及影像学分析

目的 评价持续肝动脉灌注粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）治疗肝转移瘤患者的疗效及应用GM-CSF后的影像学表现.方法 对32例肝转移瘤患者行肝动脉持续灌注GM-CSF.留置肝管行动脉持续灌注GM-CSF 72 h后行肝动脉灌注化疗栓塞,疗程为2～5个周期.观察灌注前后强化CT及数字减影血管造影（DSA）的影像学表现,并对患者的疗效（CR、PR、NC、PD及CR＋PR）进行分析.结果 与术前的上腹部强化CT及DSA造影相比,灌注GM-CSF后强化边缘厚度显著增加（P＜0.05）.32例患者均完成了2～5个周期的治疗,总有效率（CR＋PR）为46.9％,无明显并发症,无一例由于不良反应而中止治疗.结论 GM-CSF可发挥协同抗肿瘤作用,并可促进肝转移瘤周围的炎性细胞浸润.对于乏血供的肝转移瘤患者,行肝动脉持续灌注GM-CSF可为有效的治疗方法.     

人浆细胞瘤Balb/c-nu-hu模型的建立

背景:建立相关动物模型是研究多发性骨髓瘤病理生理机制及药物治疗的重要方法.目的:为研究多发性骨髓瘤细胞在人胎骨微环境内的生长特性,建立新的Balb/c-nu-hu人鼠嵌合的浆细胞瘤动物模型.方法:取孕16周人女性胎儿1 cm左右胎骨植入Balb/c-nu裸鼠皮下,建立新的Balb/c-nu-hu鼠-人嵌合体;胎骨植入3周后将白细胞介素6依赖的人多发性骨髓瘤细胞株XG-7悬液注入胎骨内建立人浆细胞瘤Balb/c-nu-hu模型;观察裸鼠及肿瘤的生长情况.40 d后,取胎骨、肿瘤及裸鼠重要组织行苏木精-伊红染色及抗人CD34、CD59、CD138和VEGF免疫组织化学染色;X射线片前后对比检查模型裸鼠体内胎骨骨密度的变化.结果与结论:胎骨表面及胎骨内见新生血管生成,且具有高度活性;XG-7细胞株能在植入人胎骨的裸鼠体内生长、浸润,形成髓外肿瘤,具有多种与浆细胞瘤相似的病理学特征,其中免疫组织化学结果显示CD138、CD59阳性说明其具有浆细胞表面标记,血管CD34阳性表明其为人源性;模型裸鼠出现恶病质,终末人骨髓瘤细胞浸润播散至鼠外周血及淋巴结,X射线片显示胎骨出现骨破坏.说明Balb/c-nu-hu鼠-人嵌合体模型可作为一种建立肿瘤模型可靠的基础动物载体,利用Balb/c-nu-hu鼠-人嵌合体可以成功建立人浆细胞瘤模型.     

三氧化二砷对人胆囊癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的:观察三氧化二砷(As2O3)对人胆囊癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法:20只皮下接种移植瘤大小相似的BALB/c裸鼠,随机分为0.9%氯化钠液(NS)组(n=10)和As2O3组(n=10)。尾静脉注射NS0.2ml.只-1(NS组)或As2O310mg·kg-1(As2O3组),每日1次,连续7d。21d时处死所有裸鼠,测量肿瘤的重量和体积。结果:NS组瘤重0.992±0.401g、体积(1.50±0.57)mm3,As2O3组瘤重(0.526±0.269)g、体积(0.83±0.39)mm3,瘤重和体积明显下降(P<0.01)。结论:As2O3能明显抑制人胆囊癌裸鼠移植瘤的生长。     

三氧化二砷对人胆囊癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用及其机制

目的：观察三氧化二砷（As2O3）对人胆囊癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用并探讨其机制。方法：20只体质量相似的BALB/c裸鼠,皮下接种胆囊癌移植瘤随机分为0.9%氯化钠液（NS）组（n=10）和As2O3组（n=10）。尾静脉注射NS0.2mL（NS组）或As2O310mg.kg-1（As2O3组）,每日1次,连续7d。21d时处死所有裸鼠,测量肿瘤的质量和体积,同时分别用免疫组织化学法和Western blot法检测细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）的表达。结果：NS组瘤质量0.992±0.401g、体积1.50±0.57mm3,As2O3组瘤质量0.526±0.269g、体积0.83±0.39mm3,两组间均有显著差异（P〈0.01）;免疫组织化学和West-ern blot检测结果显示As2O3组肿瘤组织Cyclin D1的表达明显下降。结论：As2O3能明显抑制人胆囊癌裸鼠移植瘤的生长,可能通过下调Cyclin D1的表达来实现抑瘤生长。     

医用胶粘贴法建立人胃癌裸鼠原位移植模型

目的：建立人胃癌裸鼠原位移植高转移模型。方法：用医用胶将裸鼠皮下实体瘤块粘贴在裸鼠胃壁,定时观察裸鼠全身情况,分不同时期处死,观察其生长及转移特性。结果：裸鼠原位成瘤率100%,术后5-6周原位肿瘤逐渐增大,8-10周局部包块透壁可见,有肝肺等脏器转移。10-12周动物极度消瘦,部分动物腹水形成,逐渐衰竭,濒临死亡。结论：通过胶粘贴法构建人胃癌原位移植转移模型,成功率高,能较好地重现胃癌的临床生长过程,为人类研究胃癌提供了一种较理想的动物模型。     

意外胆囊癌肝转移误诊1例分析

Misdiagnosis of Liver Metastasis of Unexpected Gallbladder Carcinoma: an analysis of 1 case     

可移植性人髓系白血病BALB/c小鼠模型建立

造血干/祖细胞移植已成为迄今为止治疗恶性血液病等最有效措施,而建立骨髓型可移植性白血病小鼠模型将为造血干细胞移植治疗白血病提供实验用动物模型。本实验用K562细胞接种BALB/c裸鼠产生红白血病的小鼠模型。将4-5周龄雌性BALB/c裸鼠,腹腔连续两天注射环磷酰胺(CTX)2mg,第3天腹腔或尾静脉直接接种K562白血病细胞2×105-2×106/只。定时取小鼠尾静脉外周血、骨髓细胞用流式细胞术和RT-PCR分别检测CD45,CD13,CD33抗原及bcr/abl融合基因。结果显示,4-5周龄BALB/c裸鼠无论通过腹部或尾静脉接种,无论有无CTX预处理,当接种K562细胞数大于2×105/只时,均可在BALB/c裸鼠身上产生可移植性人髓系白血病,荷瘤小鼠可存活30-60天。结论:腹腔或尾静脉接种大于2×105细胞/只均可产生人髓系白血病荷瘤小鼠模型,有无CTX2毫克/只的预处理不影响4-5周龄BALB/c裸鼠产生人白血病模型。     

聚乙二醇化干扰素-α抑制人肝癌生长的实验研究

目的：探讨聚乙二醇化干扰素-α抑制人肝癌高转移裸鼠模型LCI-D20肿瘤生长的作用。方法：将人肝癌高转移裸鼠模型LCI-D20随机分为对照组、小剂量常规干扰素-α组、大剂量常规干扰素-α组、小剂量聚乙二醇化干扰素-α组和大剂量聚乙二醇化干扰素-α组。用药4周后行血常规和肝肾功能检查,并观察裸鼠体重变化、肿瘤生长及肝内转移情况。结果：对照组、小剂量常规干扰素-α组、大剂量常规干扰素-α组肿瘤体积分别达到(3293±993)mm~3、(3134±869)mm~3和(2240±1048)mm~3,且发现肝内转移和腹壁浸润,而聚乙二醇化干扰素-α组无肿瘤存活,具有显著差异(P＜0.01)。2种剂量聚乙二醇化干扰素-α组白细胞计数均有下降(P=0.009和P=0.002)。结论：聚乙二醇化干扰素-α能抑制LCI-D20裸鼠模型中肝移植瘤的生长和肝内转移,其作用可能与血清中保持稳定的干扰素治疗浓度有关。     

多西环素对大肠癌裸鼠移植瘤的影响

目的观察金属蛋白酶组织抑制剂（多西环素）对大肠癌裸鼠皮下移植瘤的影响，为大肠癌的治疗寻求一个新的可能治疗途径。方法将10只BALB／C（nu／nu）裸鼠随机分为对照组和实验组，每组5只，将人大肠癌细胞系LoVo细胞种植入裸鼠皮下，建立裸鼠皮下人大肠癌移植瘤模型。对照组应用生理盐水瘤内多点直接注射；实验组应用多西环素瘤内多点直接注射。记录2组裸鼠肿瘤大小，观察肿瘤生长曲线，计算生长抑瘤率。结果第26天肿瘤体积大小和肿瘤生长抑制率：实验组分别为（889．8±80．8）mm^3和49．7％，对照组分别为（1755．8±203．8）mm^3和0，2组比较，差异均有统计学意义（P均〈0．05）。结论多西环素可以抑制大肠癌裸鼠皮下移植瘤的生长，有可能腐用于大肠痛的治疗。     

胆囊窝扩大的MRI征象对肝硬化诊断的价值

目的：评价胆囊窝扩大MRI征象对肝硬化诊断的敏感性和特异性。方法;本文收集临床证实的肝硬化患者61例;同时收集同期无肝硬化病史病例80例作为对照组,将病变组和对照组的病例随机混合,不提供临床病史分别由两位有多年MR诊断经验和医师独立阅片,确定有无胆囊窝扩大征;计算胆囊窝扩大的MRI征象对肝硬化诊断的准确性、敏感性、特异 性、阳性预检值和阴性预检值。结果：（1）医师Ⅰ阅片结果显示：胆囊窝扩大的MRI征象对肝硬化诊断的准确性为86％、敏感性为70％、特异性为98％、阳性预检值为96％;（2）医师Ⅱ阅片结果显示：胆囊窝扩大的MRI征象对肝硬化诊断的准确性为84％、敏感性为74％、特异性为93％、阳性预检值为88％。结论：胆囊窝扩大MRI征象在肝硬化中较常见,可以作为肝硬化诊断的特异征象。     

LMWH对裸鼠胃癌原位模型生长、转移及趋化因子SDF-1表达的影响

【目的】探讨低分子肝素（LMWH）对裸鼠胃癌原位模型生长、转移及趋化因子SDF-1表达的影响。【方法】应用原位移植方法建立裸鼠胃癌原位模型,术后7d将裸鼠随机分为3组：对照组（生理盐水）、化疗组（5-氟尿嘧啶）、LMWH组（低分子肝素钙）,分别每周注药2次,共5周,第6周处死动物,观察裸鼠胃癌原住模型肿瘤转移及生长情况。采用RT—PCR技术检测胃肿瘤组织SDF-1mRNA表达水平。【结果】化疗组、LMWH组肿瘤体积较对照组明显缩小,差异有统计学意义（P〈0．05）;LMWH组胃癌原位模型肿瘤转移率（20％）低于对照组（70％）,差异有统计学意义（P〈0．05）,而与化疗组之间差异无统计学意义（P〉o．05）;LMWH组SDF-1mRNA表达均较对照组和化疗组低,差异有统计学意义（P〈0．05）。【结论】LM—wH可抑制裸鼠胃癌原位模型的肿瘤生长及远处转移,其部分机制可能与降低肿瘤sDF_1的表达有关。     

A549/MTX对映体耐药细胞的裸鼠荷瘤模型的建立

目的利用L型和D型氨甲喋呤（MTX）对映体分别建立人肺腺癌A549细胞株裸鼠耐药模型,为进一步揭示MTX对映体体内活性差异的原因提供实验平台。方法裸鼠皮下分别接种A549、耐药细胞株A549/L-MTX、A549/D-MTX各6×10^6个/0.2ml,观察肿瘤生长特性;瘤体原代培养后四甲基偶氮唑兰（MTT）法检测耐药指数（resistance index RI）;免疫组化（IHC）检测ki-67、多药耐药相关蛋白1（multidrug resistance-associated protein1,MRP1）、survivin变化。结果从肿瘤生长曲线上看瘤体积三者差异有统计学意义（P〈0.05）,A549/L-MTX/nude组体积更小。A549/L-MTX/nude移植瘤RI为4.9,为低度耐药,A549/D-MTX/nude移植瘤RI为14.5,为中度耐药。A549/L-MTX/nude相关蛋白总体表达低于A549/D-MTX/nude,两者表达差异有统计学意义（P均〈0.05）。结论成功建立对MTX两种对映体耐药的A549细胞株裸鼠肿瘤模型,且两种耐药细胞具有不同耐药特性,为研究MTX对映体体内抗肿瘤活性差异提供了较好的实验平台。