喉癌人乳头瘤病毒感染和p53蛋白表达的研究

对４４例喉鳞癌和１６例声带息肉患者采用原位核酸杂交技术探测其人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）６Ｂ，１１，１６，１８型ＤＮＡ同源序列及ＬＳＡＢ免疫组化法探测其Ｐ５３蛋白的表达，结果：（１）喉癌与ＨＰＶ１６／１８杂交阳性率为４３．２％（１９／４４），声带息肉为１２．５％（２／１６）（Ｐ〈０．０５）（２）喉癌ｐ５３蛋白阳性率为５６．８％（２５／４４），声带息肉全部为阴性；（３）喉癌ＨＰＶ１６／１８杂交及ｐ５３蛋白     

MDM 2基因在鼻咽癌中的表达及其与p53蛋白表达、EB病毒潜伏感染的关系

目的：探讨ＭＤＭ２基因在鼻咽癌（ＮＰＣ）中的表达情况及其与ｐ５３蛋白表达、ＥＢ病毒（ＥＢＶ）潜伏感染的关系。方法：运用非同位素原位杂交、免疫组化和多聚酶链反应技术对４６例ＮＰＣ、１２例慢性鼻咽炎症粘膜（ＣＩＮＥ）分别进行ＭＤＭ２ｍＲＮＡ、ＭＤＭ２蛋白、ｐ５３蛋白及ＥＢＶ－ＤＮＡ的检测。结果：４６例ＮＰＣ中,１４例ｍＲＮＡ及ＭＤＭ２蛋白高表达,３８例为ｐ５３蛋白阳性,４３例为ＥＢＶ－ＤＮＡ阳性,１２     

EB病毒特异性DNA酶的纯化制备

目的 纯化ＥＢ病毒特异性ＤＮＡ酶（ＥＢＶ－ＤＮａｓｅ）为鼻咽癌血清学诊断方法－血清ＥＢＶ－ＤＮａｓｅ抗体的检测奠定基础。方法 采用多重纤维素柱层析对用联合化学诱导的方法制备的ＥＢＶ－ＤＮａｓｅ粗提物进行纯化。 结果 在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测中,从粗提物到纯化终产物,蛋白质带逐渐减少直至单一条带。其分子量为５２ｋＤ,其对应的每豪克蛋白质酶单位分别为５．４６,４９．１９,１３４．８６,３９１,２５,９６     

喉癌微血管生成中P53nm23蛋白和血管内皮生长因 …

目的 探讨Ｐ５３、ｎｍ２３蛋白和血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｏｒ,ＶＥＧＦ）在喉癌微血管生成及转移中的作用。方法 通过免疫组化ＳＰ法对４２例喉癌标本中Ｐ５３、ｎｍ２３蛋白、ＶＥＧＦ及微血管密度（ｍｉｃｒｏｖｅｓｓｅｌ ｄｅｎｓｉｔｙ,ＭＶＤ）进行了检测。结果 喉癌中Ｐ５３、ｎｍ２３蛋白及ＶＥＧＦ的阳性表达率分别占４７．６％、５７１％和７１．４％。     

喉癌HPV感染和P＿（53）蛋白表达的研究（摘要）

喉癌ＨＰＶ感染和Ｐ＿（５３）蛋白表达的研究（摘要）秦兆冰，董明敏，吴凯彦，万保罗，银平章为探讨人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）感染和Ｐ５３抑癌基因突变在喉癌发生中的作用及二者的相关性，采用原位核酸杂交技术探测ＨＰＶＤＮＡ６ｂ、１１、１６、１８型同源序列及ＬＳ...     

新疆汉族和维吾尔族鼻咽癌组织的PCR和免疫组化检测比较

目的：了解新疆汉族维吾尔族（维）族鼻咽癌（ＮＰＣ）发病因素的差别。方法：用ＰＣＲ与免疫组化技术对７３例ＮＰＣ组织（汉族４１例,维族３２例）分别进行ＥＢ病毒脱氧核糖核酸（ＥＢＶ－ＤＮＡ）、ＥＢ病毒核抗原（ＥＢＮＡ２）、潜伏膜蛋白（ＬＭＰ－１）检测。     

鼻咽癌患者鼻咽组织和血清中EBV检测

目的：比较血清爱泼斯坦－巴尔病毒（ＥＢＶ）抗体滴定度测定与癌组织ＥＢＶ基因组检测对鼻咽癌（ＮＰＣ）的诊断价值。方法：１４６例患者采用双盲法测定血清ＥＢＶ－ＶＣＡ－ＩｇＡ,ＥＢＶ－ＥＡ－ＩｇＡ和活检组织ＥＢＶ－ＤＮＡ（ＰＣＲ）。全组病例按活检病理检查结果分析：ＮＰＣ组,非ＮＰＣ组（对照组）。结果：ＮＰＣ组中ＥＢＶ－ＤＮＡ（ＰＣＲ）,ＥＢＶ－ＶＣＡ－ＩｇＡ和ＥＢＶ－ＥＡ－ＩｇＡ的阳性率分别为９０．８％     

鼻咽癌组织中p53基因突变及与EBV感染的关系

我们采用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）技术，对ｐ５３基因突变情况进行检测和分析，以探讨ＥＢＶ与ｐ５３基因突变的关系。１　材料与方法标本：２１例鼻咽癌活检组织来自本院耳鼻咽喉科，全部患者未接受过放射治疗。病理检查均为低分化鳞状细胞癌。以５例鼻咽炎组织作对照。新鲜组织标本液氮冷冻，－７０℃冰箱保存。ＤＮＡ提取：按ＤＮＡ提取药盒（中山医科大学达安基因诊断中心提供）方法提取标本组织ＤＮＡ。ｐ５３基因的ＰＣＲ扩增：ｐ５３基因第５、６、７、８外显子引物设计为：ｐ５３－５Ｆ：５′－ｃｔｃｔｇ…     

聚合酶链反应对颈部肿块的EBV检测

目的：探讨聚合酶链反应（ＰＣＲ）对隐匿性鼻咽癌的诊断意义。方法：采用ＰＣＲ检测５８例颈部肿块的细针抽吸标本中的ＥＢ病毒（ＥＢＶ）。结果：３５例颈中、上淋巴结转移癌２８例ＥＢＶ阳性,３例淋巴瘤阴性,４例锁骨上淋巴结转移癌阴性;１６例淋巴结炎性病变１例为弱阳性,１５例均为阴性;该法诊断鼻咽癌的灵敏度为８９．３％,特异性为８６．７％。结论：用ＰＣＲ检测颈部转移癌中的ＥＢＶ－ＤＮＡ,对隐匿性鼻咽癌的诊断具     

鼻咽癌活检组织及外周血白细胞EB病毒DNA的检测及其意义

目的：探讨鼻咽组织、外周血血白细胞ＥＢＶ基因组分布及与ＮＰＣ的关系。方法：采用ＰＣＲ法检测２６例ＮＰＣ,４例癌旁及１４例慢性鼻咽炎鼻 组织吸外周血白细胞中ＥＢＶ ＤＮＡ。同时采用酶免疫法测定血清ＶＣＡ－ＬｇＡ。结果：１．ＮＰＣ、癌旁及鼻咽炎组织ＥＢＶ ＤＮＡ无明显差异。２．ＮＰＣ与鼻咽炎组外周血白细胞ＥＢＶ ＤＮＡ有明显差异,Ｐ〈０．０５。３．ＮＰＣ与鼻咽炎组血清ＶＣＡ－ＩｇＡ之间存在明显差异。Ｐ     

EB病毒感染P53及P16表达与鼻腔咽淋巴环非霍奇金淋巴瘤的关系

目的　观察EB病毒 (Epstin Barrvirus ,EBV)、抑癌基因P5 3、P16在鼻、鼻咽和扁桃体非霍奇金淋巴瘤 (non Hodgkin’slymphoma ,NHL)中的表达 ,并分析其相互间关系。方法　用原位分子杂交检测 3 6例病变组织的EBV DNA、P16mRNA ,用免疫组化技术检测LMP1、P5 3及P16蛋白 ,5例原位杂交检测为EBV阴性的病例用原位PCR检测EBV DNA。结果　① 2 3例 (63 9% )检出EBV DNA ,11例(3 0 6% )检出P16mRNA ;② 10例 (2 7 8% )LMP1阳性 ,7例 (19 4 % )P5 3蛋白阳性 ,8例 (2 2 2 % )P16蛋白阳性 ;③T NHL(16/19例 )明显高于B NHL(6/17例 )的EBV DNA阳性表达。结论　鼻、鼻咽和扁桃体NHL尤其是T NHL有较高比例的EBV感染 ,但未发现EBV感染与P5 3及P16表达之间有明显相关性。     

Epstein-Barr virus DNA is not increased in tonsillar carcinoma

Epstein-Barr virus (EBV) is a known oncogenic virus associated with a wide variety of cancers, including nasopharyngeal carcinoma. Waldeyer's ring, a collection of lymphoid tissues, includes the nasopharynx, pharyngeal, and lingual tonsils. To determine if EBV plays a causative role in carcinomas arising from other tissues in Waldeyer's ring, we examined pharyngeal tonsillar carcinomas for evidence of EBV infection. As previously reported, DNA was extracted from 53 consecutive tonsil cancers, as well as from age- and gender-matched non-cancerous tonsillectomy specimens. Three different sets of primers for discrete exons of EBV were then used to determine if active or latent EBV infection was expressed in the extracted DNA using the polymerase chain reaction (PCR). All positive bands were then sequenced to confirm the presence of amplified EBV fragments. None of the samples showed evidence for active EBV infection. In primers demonstrating latent infection, 1 of 53 (1.9%) of tumors were positive, versus 6 of 53 (11.3%) of the controls. These results indicate that EBV expression is not increased in DNA from tonsil cancers and that EBV infection does not have a causal relationship with tonsil cancer.     

原发性鼻腔非霍奇金淋巴瘤的免疫表型及其与EB病毒的关系

目的:探讨原发性鼻腔非霍奇金淋巴瘤(NHL)的免疫表型特征及其与EB病毒(EBV)感染的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测29例鼻腔NHLCD45RO、CD3ε、CD56、CD20、TIA-1、GranzymeB,确定肿瘤细胞免疫表型以及EBV潜伏膜蛋白(LMP-1);采用原位杂交技术检测EBV编码的RNA(EBER1/2)。结果:CD45RO阳性29例(100.00%),CD3ε、TIA-1及GranzymeB阳性19例(65.52%),CD56阳性17例(58.62%),CD20均阴性;EBER1/2阳性23例(79.31%),LMP-1阳性14例(48.28%)。EBER1/2和LMP-1表达阳性率在外周T细胞淋巴瘤和NK/T细胞淋巴瘤中的差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:鼻腔NHL以NK/T细胞淋巴瘤为多见,EBV感染与鼻腔NHL关系密切,但EBV感染率与鼻腔NHL免疫表型无关,EBV感染在鼻腔NHL的发生、发展中可能起重要作用。     

头颈部非霍奇金淋巴瘤25例临床分析

目的：探讨25例头颈部非霍奇金淋巴瘤(NHL)的临床表现、分期、分型及治疗方法。方法：对我院2000年3月-2004年4月间治疗的25例头颈部NHL进行回顾性分析。结果：25例中,首犯咽淋巴环11例,鼻腔8例,鼻窦1例,颈淋巴结4例,腮腺1例。鼻腔、鼻窦已有3例死亡。结论：根据头颈部NHL的首犯部位、肿瘤分期、组织学分型进行恰当的治疗,可提高治愈率。     

EB病毒在儿童腺样体肥大和扁桃体炎组织内的定量研究及意义

目的:探讨EB病毒在儿童慢性扁桃体炎、腺样体肥大中的流行病学特点及其在儿童腺样体肥大、慢性扁桃体炎疾病发病机制中的作用.方法:采用实时荧光定量PCR技术对52例慢性扁桃体炎、腺样体肥大患儿手术摘除的腺样体、扁桃体组织及血浆标本进行EB病毒定量检测.结果:患有慢性扁桃体炎和(或)腺样体肥大的儿童扁桃体、腺样体组织中EB病毒感染率为51.9%;其中男性患儿EB病毒感染率为50.0%,女性患儿为55.6%,两者差异无统计学意义(P＞0.05).扁桃体组织EB病毒感染率为40.4%,腺样体组织为48.9%,差异无统计学意义(P＞0.05).学龄组(7～14岁)患儿扁桃体和腺样体组织EB病毒感染率为65.5%,明显高于学龄前组(2～6岁)患儿的感染率(34.8%).比较轻、中、重度肥大的腺样体组织中EB病毒-DNA拷贝数发现:重度肥大组EB病毒-DNA拷贝数明显高于其他两组(P＜0.05).52例患儿血浆标本检测发现:EB病毒-DNA拷贝数均在正常范围内(＜1×10~3 copies/ml).结论:腺样体肥大组织与慢性扁桃体炎组织对EB病毒有相同的易感性,男、女性患儿的扁桃体和腺样体组织对EB病毒易感性基本相同,且随着患儿年龄的增长、病程的延长,EB病毒的感染率也会相应增高.腺样体的增生、肥大与EB病毒的感染有一定相关性.     

bcl-2、P 5 3基因及Epstein-Barr病毒在鼻咽癌中的表达

目的探讨鼻咽癌组织中p53、bcl-2、EBV表达情况及与主要临床指标间关系.方法免疫组化检测p53、bcl-2蛋白,多聚酶链反应(PCR)检测EBV.结果慢性炎性组织中p53、bcl-2及EBV阳性率分别为7.7%、23.1%和7.7%,明显低于鼻咽癌组织中的阳性率(分别为75.9%、88.9%和87.0%)(P<0.01).三者在鼻咽癌组织中共同阳性率为72.2%,p53、bcl-2明显正相关(r＝0.78,P<0.01).鼻咽癌伴颈淋巴结转移组p53阳性率(90.0%)明显高于无颈淋巴结转移组(58.3%)(P<0.01),临床Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期p53阳性率(分别为92.9%、78.9%和100%)均明显高于临床I期(38.5%)(P<0.01),且表达强度有增加的趋势.结论p53、bcl-2及EBV可作为鼻咽癌早期诊断的辅助指标之一,p53阳性的鼻咽癌患者较易发生颈淋巴结转移,随着鼻咽癌病程的发展,p53表达率及表达强度均增加,三者在鼻咽癌发生发展中起着重要作用.     

原发性头颈部非霍奇金淋巴瘤临床分析

目的 探讨原发于头颈部的非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma,NHL)的临床及病理特点,为早期诊断提供经验,从而降低误诊率及漏诊率.方法 对51例原发于头颈部,经病理确诊为NHL患者的临床资料进行回顾性分析.结果 原发部位,鼻腔、鼻窦1 9例(37.3%),腭扁桃体14例(27.5%),颈淋巴结8例(15.7%),鼻咽部6例(11.8%).误诊为炎症7例(13.7%),鼻咽癌2例(3.9%),总误诊率17.6%.结论 头颈部NHL恶性程度高,多好发于鼻腔及鼻窦,其次为扁桃体.该病误诊率高,准确的取材活检及免疫组化检查至关重要.     

Detection of Epstein-Barr Virus in Nasopharyngeal Carcinoma by In Situ Hybridization and Polymerase Chain Reaction

The association of Epstein-Barr virus (EBV) with nasopharyngeal carcinoma (NPC) has been shown by various methods. The purpose of this study is to identify the most useful method to detect EBV in NPC. Both polymerase chain reaction (PCR) for EBV-DNA and in situ hybridization for EBV-encoded small RNAs(EBERs) were examined in formalin-fixed, paraffin-embedded NPC specimens. In situ hybridization was performed in 56 cases, and PCR for EBV-DNA was performed in 42 cases. EBV-DNA was detected in 0 of 3 keratinizing squamous cell carcinomas(KSCC), 22 of 24 nonkeratinizing carcinomas (NKC), all 13 undifferentiated carcinomas (UNPC), and 0 of 2 adenocarcinomas (AC). EBERs were detected in 0 of 5 KSCC, 30 of 32 NKC, 16 of 17 UNPC, and 0 of 2 AC. Among them, EBERs was detected in 35 of 42 cases in which PCR was also performed, 0 of 3 KSCC, 22 of 24 NKC, all 13 UNPC, and 0 of 2 AC, respectively. Both results were consistent in 40 of 42 cases. We conclude that both PCR and in situ hybridization are useful to detect EBV in NPC. In situ hybridization has a particular advantage because it can demonstrate the localization of EBV in neoplastic cells. In addition, close association of NKC and UNPC but not KSCC and AC with EBV is suggested.