创伤性脑损伤后大鼠脑创伤区皮层细胞早期凋亡的实验研究

目的探讨不同程度颅脑损伤后大鼠脑创伤区皮层细胞早期凋亡的规律及意义。方法健康成年雄性Wistar大鼠48只,随机分为3组,即轻度组,中度组和重度组。Feeney法制作自由落体颅脑损伤（TBI）动物模型,伤后1h采用流式细胞仪（FCM）碘化丙啶（PI）单染色法检测大鼠脑创伤区皮层细胞亚二倍体比率。结果轻度、中度和重度TBI组的创伤区皮层细胞亚二倍体比率分别为（8.98±1.29）%、（16.13±1.28）%和（20.11±1.40）%,损伤程度越重,亚二倍体比率越高（P〈0.01）。结论不同程度颅脑损伤后大鼠创伤区脑组织细胞早期凋亡存在一定规律,它与脑细胞的变性坏死共同作用引起一系列继发性脑损伤,加重创伤后的脑神经功能障碍。     

超声心动图评价Rho激酶抑制剂治疗缺血性心肌病心力衰竭

目的用多普勒超声心动图评价Rho激酶抑制剂盐酸法舒地尔治疗缺血性心肌病心力衰竭的疗效。方法将80例因缺血性心肌病而导致慢性心力衰竭的患者分为两组,各40例,均采用常规治疗。治疗组同时静脉输注盐酸法舒地尔60 mg,每日1次,疗程1个月。评估两组治疗前后左心室收缩末内径（LVESD）、左室收缩末容积（LVESV）、左室射血分数（LVEF）情况。结果用药1个月后治疗组LVESD、LVESV、LVEF均较对照组明显改善（P〈0.05）。结论在常规治疗基础上加用Rho激酶抑制剂可改善患者心脏收缩功能,且耐受性、安全性良好。     

芬太尼对创伤性脑损伤大鼠脑组织中P物质表达的影响

目的探讨芬太尼对创伤性脑损伤（TBI）大鼠脑组织中P物质表达的影响。方法健康成年雄性Wistar大鼠30只,随机分为假手术组（n=10）、中度TBI组（n=10）及芬太尼组（n=10）。Feeney法制作中度脑损伤大鼠模型,造模0.5h后,断头取脑,做HE染色病理学检查及免疫组织化学染色（PV-6001二步法）。结果假手术组、芬太尼组和TBI组,各组间在创伤区大脑皮层中SP表达的阳性单位不同,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论芬太尼明显抑制创伤后SP的释放,减轻神经源性炎症反应,对损伤脑组织发挥保护作用。     

骨髓间充质干细胞联合血管内皮生长因子对大鼠创伤性脑损伤细胞凋亡的抑制作用

目的探讨骨髓间充质干细胞（BMSC）联合血管内皮生长因子（VEGF）对大鼠创伤性脑损伤细胞凋亡的抑制作用。方法 Wistar大鼠40只,随机分为对照组、单独使用BMSC治疗组、单独使用VEGF治疗组、联合治疗组,4组均采用Feeney自由落体撞击方法造成中度创伤性脑损伤模型。于脑损伤1周后,在立体定向仪下用微量注射器在脑损伤周边部位;单独使用BMSC治疗组注入BMSC,单独使用VEGF治疗组注入VEGF;且联合治疗组同时注入BMSC和VEGF;对照组注射PBS溶液。分别于治疗前后进行NSS评分,于治疗1周后猝死取脑,并进行HE染色,免疫组化Sp法测定bcl-2与bax蛋白的表达,TUNEL法测定细胞凋亡情况。结果在BMSC与VEGF联合治疗组中,bcl-2的表达明显多于单独治疗组及对照组,而bax的表达低于其余各组,联合治疗组中抑制细胞凋亡的蛋白高度表达,而促进细胞凋亡的蛋白低度表达。TUNEL法测定,在联合治疗组中,免疫组化呈棕色的凋亡细胞明显少于单独治疗组及对照组。结论骨髓间充质干细胞移植联合血管内皮生长因子对大鼠中度创伤性脑损伤细胞凋亡具有明显的抑制作用,联合运用的效果优于单独干细胞移植。     

回神颗粒对中度创伤性脑损伤大鼠神经行为学及体重的影响

目的:通过神经损伤评分(NSS)评分和体重测量,探讨回神颗粒减轻TBI的作用机制。方法:应用液压性脑损伤装置建立中度TBI模型,创伤压力为(170±10)k Pa,作用时间为(20±2)ms,随机将大鼠分为6组:正常组、假手术组、模型3 d组、模型7 d组、治疗3 d组、治疗7 d组。治疗3 d组和治疗7 d组于创伤后即刻用2 m L药液(含回神颗粒0.27 g)灌胃一次,此后再分别于每日早晚各灌胃一次,每次2 m L药液。分别于创伤后1 d、3d、7 d对正常组、假手术组、模型7 d组和治疗7 d组进行NSS量表评分;分别于创伤后1 d、3 d对模型3 d组和治疗3 d组进行NSS评分。分别于造模前和取材前称取每只动物的体重。观察NSS评分和体重的变化。结果:与正常组和假手术组比较,模型3 d组、模型7 d组、治疗3 d组、治疗7 d组各时间点NSS评分明显降低(P0.01)。但与模型3 d组和模型7 d组的NSS评分相比较,治疗3 d组和治疗7 d组的NSS评分明显提高,具有显著性差异(P0.01)。与正常组体重比较,模型组动物体重下降,具有明显差异(P0.01);治疗组动物体重无明显下降(P0.05)。比较每组动物造模前和取材前体重,发现模型组体重下降,具有明显差异(P0.01);治疗组体重有所增加,具有明显差异(P0.01)。结论:回神颗粒能明显改善TBI大鼠NSS评分,改善神经功能;促进大鼠的生长发育,减轻脑损伤。     

脑疏宁对创伤性脑损伤大鼠脑组织MMP-2/9表达的影响

目的:观察中药脑疏宁对创伤性脑损伤大鼠基质金属蛋白酶基质金属蛋白酶(MMPs)表达的影响。方法:采用免疫组化方法检测脑组织MMPs蛋白的表达,测定脑组织含水量及伊文思蓝(EB)含量,电镜下观察血脑屏障超微结构改变。结果:创伤组大鼠伤侧脑组织含水量、伊文思蓝(EB)含量及伤灶周围基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平均明显高于假手术组(P<0.01);血脑屏障结构破坏。脑疏宁组脑组织含水量、EB含量及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平均明显低于创伤组(P<0.05,P<0.01);血脑屏障结构较为完整。结论:脑疏宁可通过改善血脑屏障损伤减轻创伤性脑水肿,其保护血脑屏障的作用可能是通过抑制MMP-2和MMP-9蛋白表达实现的。     

受体酪氨酸激酶抑制剂对兔OA模型软骨细胞NO的表达及软骨组织形态的影响

目的：探讨受体酪氨酸激酶抑制剂genistein对兔OA模型软骨细胞NO的表达及软骨组织形态的影响,并探讨其可能的作用机制。方法：参照Hulth法建立兔骨关节炎模型,予以genistein干预后,分别按照0.1 mg.kg-1、0.2 mg.kg-1、0.3 mg.kg-1、0.4 mg.kg-1、0.5 mg.kg-1的给药剂量进行分组,行手术侧关节腔内注射,通过测定各组亚硝酸盐含量检测关节腔内NO的表达水平,同时进行软骨组织形态学检查。结果：0.3 mg.kg-1、0.4 mg.kg-1、0.5 mg.kg-1浓度genistein干预组关节腔内NO的表达水平明显低于对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05）;对软骨组织行H.E/SOFG染色显示,在造模后第4周、第8周与第12周时,genistein干预组与对照组相比,组织损伤均明显减轻,Mankin评分均明显下降,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：受体酪氨酸激酶抑制剂genistein在体内能减少骨关节炎软骨细胞NO的表达,对于延迟关节软骨在组织形态水平的退变是有效的,但是尚不能最终阻止软骨退变发生发展的进程。     

Rho激酶抑制剂与芪苈强心胶囊对慢性心力衰竭患者细胞因子的影响

目的:观察Rho激酶抑制剂、芪苈强心胶囊分别及联合短期应用对慢性心力衰竭患者细胞因子(肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6)水平的作用,并探讨其机制。方法:120例慢性心力衰竭患者(NYHA分级Ⅱ~Ⅲ级)在接受常规心力衰竭治疗的基础上,随机分成4组,分别是空白对照组(30例)(A组),单用Rho激酶抑制剂治疗组(30例)(B组),单用芪苈强心胶囊治疗组(30例)(C组)和Rho激酶抑制剂与芪苈强心胶囊联合治疗组(30例)(D组)共治疗4周。治疗前后测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、BNP,评估心功能。结果:治疗后3个治疗组B、C、D组分别与对照组A组相比TNF-α、IL-6、BNP水平均明显降低(P0.05),治疗组间(B、C、D组间)比较B组与C组间无统计学意义(P0.1),D组较B组、C组均有统计学意义(P0.05)。结论:Rho激酶抑制剂联合芪苈强心胶囊能显著降低慢性心力衰竭患者血清细胞因子TNF-α、IL-6水平,改善心功能,有利于慢性心力衰竭的治疗。     

槟榔碱对骨髓细胞内DNA的影响

目的通过体内骨髓细胞实验,探讨槟榔碱对DNA的损伤作用机制。方法采用AO探针标记,激光共聚焦技术检测槟榔碱对骨髓细胞内DNA和RNA的影响;采用流式细胞仪测定槟榔碱对骨髓细胞周期的影响。结果给予槟榔碱20、10、5mg/kg剂量的染毒组,骨髓细胞内RNA/DNA的荧光像素比值明显高于空白对照组,差异非常显著(P<0.01);骨髓细胞周期与空白对照组相比,G0/G1期细胞比率有非常显著增加(P<0.01),S期细胞比率有非常显著降低(P<0.01),G2/M期细胞比率有非常显著降低(P<0.01)。结论槟榔碱对小鼠骨髓细胞的DNA有一定的损伤作用,具有一定的遗传毒性。     

手十二井穴刺络放血对急性创伤性脑损伤小鼠神经功能及坏死性凋亡相关蛋白表达的影响研究

目的:本研究观察手十二井穴刺络放血对急性创伤性脑损伤(TBI)改善神经功能、减轻脑水肿有效的平台基础上,从抑制坏死性凋亡通路的角度出发,探索手十二井穴刺络放血在改善TBI中的活血化瘀作用及其机制。方法:采用电子控制性脑皮质撞击仪(eCCI),建立小鼠TBI模型,分别于造模后12、24、48、72 h观察手十二井穴刺络放血对TBI小鼠神经功能的影响,于造模后24 h通过HE染色观察手十二井穴刺络放血对TBI小鼠病理损伤的影响,于造模后12、24、48、72 h通过Western blot检测,观察手十二井穴刺络放血对TBI小鼠坏死性凋亡相关蛋白的影响。结果:各组小鼠创伤前mNSS评分比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性;与假手术组相比,模型组的mNSS评分在创伤后12、24、48、72 h均显著升高(P<0.01),井穴放血组的mNSS评分在创伤后12、24、48、72 h均显著低于模型组(P<0.01),Western blot检测发现,与假手术组相比,模型组RIP-1、RIP-3、MLKL蛋白表达在颅脑创伤后6、24、48、72 h均显著升高(P<...     

基于“脑心同治”探讨电针不同介入时间对创伤性脑损伤后认知障碍的影响

目的：观察“脑心同治”电针法的不同介入时间对创伤性脑损伤(TBI)后认知障碍的影响。方法：将80只雄性SD大鼠随机分成假手术组、模型组、电针1组、电针2组和电针3组,每组均为16只。除假手术组外,其余大鼠均制备TBI模型。电针1组、电针2组和电针3组分别在造模后即刻、造模后第3天、造模后第7天开始针刺,治疗持续14 d。观察各组大鼠mNSS神经功能评分、新物体识别实验和Morris水迷宫实验的表现;随后采用HE以及FJB染色法观察各组大鼠损伤灶周围及患侧海马区组织形态变化;Western blot(WB)及免疫荧光检测各组大鼠损伤灶周围IL-1β、IL-18的蛋白表达及分布。结果：与模型组比较,所有电针组均能显著降低mNSS评分,提高大鼠对新物体探索的时间与偏好指数,缩短大鼠逃避潜伏期、提高穿越平台次数,并降低IL-1β、IL-18的表达与分布,差异具有统计学意义(P<0.05)。且FJB染色结果显示电针组大鼠大脑中发生退行性变异的神经元细胞数量明显少于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05),且电针1组与假手术组比较差异无统计学意义(P>0.05),HE染色结果显...     

硫酸镁对急性放射性脑损伤后神经细胞凋亡的影响

目的观察急性放射性脑损伤后大鼠海马区域神经细胞凋亡现象及应用硫酸镁后对所致凋亡的影响。方法建立急性放射性脑损伤的大鼠模型,用透射电镜观察放射性脑损伤后第1天、第3天、第7天、第14天海马区域神经细胞凋亡情况。结果放射性损伤后第1天即可见到神经胶质细胞的凋亡改变,第7天开始明显,持续至第14天,硫酸镁治疗后相应凋亡明显减轻。结论急性放射性脑损伤后神经细胞发生了凋亡,硫酸镁可以部分阻滞凋亡,对急性放射性脑损伤具有一定的保护作用。     

白术多糖对大鼠创伤性脑损伤后脑水肿的影响及其机制探讨

目的 探讨白术多糖对颅脑外伤继发性脑组织水肿的影响及其机制.方法 采用自由落体撞击模型,大鼠随机分为假手术组、模型组、蒸馏水组(溶剂对照)及白术多糖组.每组再根据伤后不同生存时间随机分为3个亚组.取各组动物伤灶区脑组织,分别检测其含水量和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性.结果 模型组、蒸馏水组及白术多糖组各时间点脑组织含水量均较假手术组明显增加(P＜0.01),但白术多糖组各时间点含水量均显著低于模型组及蒸馏水组(P＜0.01).模型组、蒸馏水组及白术多糖组各时间点脑组织iNOS活性均较假手术组明显升高(P＜0.01),但白术多糖组各时间点iNOS活性均显著低于模型组及蒸馏水组(P＜0.01).结论 白术多糖可能通过下调伤灶区iNOS的表达.而减轻创伤性脑损伤后继发性脑水肿的程度.     

Caspase-3抑制剂对蛛网膜下腔出血后早期脑损伤的作用

目的探讨Caspase-3抑制剂在蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中的作用。方法颈内动脉穿刺制作大鼠蛛网膜下腔出血模型。将大鼠随机分成3组：实验组（38只）模型制作后腹腔注射Caspase-3抑制剂Z-VAD-FMK（10μmol/L,0.3 mL）;对照组（38只）注射等体积二甲基亚砜（DMSO）;正常组（16只）未进行任何处理。72 h记录死亡率、神经功能评分、脑水肿、血脑屏障通透性等脑损伤指标;TUNEL染色检测神经元细胞凋亡,免疫组化、Western Blot检测Caspase-3表达。结果 Caspase-3抑制剂可降低大鼠死亡率（4 7.4%vs2 8.9%,P〈0.0 5）,减轻脑水肿,保护血脑屏障,减少Caspase-3蛋白表达及神经元细胞凋亡（P〈0.05）,但对神经功能评分无明显影响（P〉0.05）。结论细胞凋亡在SAH后早期脑损伤中起重要作用,可减轻SAH后早期脑损伤。     

周期素依赖激酶抑制剂对大鼠大脑中动脉缺血后海马迟发性神经元死亡的影响

 目的探讨细胞周期素依赖激酶(CdK)抑制剂--olomoucine对大鼠局灶性脑缺血再灌流后海马迟发性神经元死亡的影响。方法 给予大脑中动脉阻塞再灌流大鼠腹腔注射olomoucine,观察再灌流后3,7 d皮层损伤侧海马半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(caspase-3)和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达水平;同时,应用免疫组织化学方法测定再灌流后3,7d皮层损伤侧海马CAl区神经元细胞核特异性抗原(NeuN)的表达。结果olomoucine能明显抑制大鼠局灶性脑缺血再灌流后海马PCNA蛋白的表达(P＜0.01),降低caspase-3水平(P＜0.01);同时显著减少了海马CAl区神经元的丢失(P＜0.01)。结论研究表明,olomoucine通过抑制细胞增殖活动、减少caspase-3生成,从而降低局灶性脑缺血再灌流后海马迟发性神经元死亡的发生。     

肾安冲剂对阿霉素肾病大鼠T细胞亚群的影响

目的:观察肾安冲剂对阿霉素肾病大鼠T细胞亚群的影响,探讨肾安冲剂对阿霉素肾病大鼠保护作用机制.方法:采用阿霉素尾静脉注射制造肾病综合征大鼠模型.雄性SD大鼠72只,随机分为6组:正常对照组、模型组、肾安冲剂小剂量组、肾安冲剂中剂量组、肾安冲剂大剂量组和泼尼松组,每组12只.造模后开始给药,治疗8周后运用流式细胞仪检测大鼠全血T细胞亚群.结果:模型组阿霉素肾病大鼠CD4 、CD4 /CD8 比值明显低于正常组与各治疗组,各治疗组阿霉素肾病大鼠的CD4 、CD4 /CD8 比值均有不同程度的升高(P<0.05),且以肾安冲剂大剂量组对T细胞亚群的调节作用最好(P<0.05).结论:肾安冲剂通过调节阿霉素肾病大鼠的免疫功能,发挥对阿霉素肾病大鼠的保护作用.     

针刺对创伤性脑损伤大鼠神经损伤的影响

目的:通过观察小胶质细胞表达状态探讨针刺对创伤性颅脑损伤大鼠神经损伤的影响机制。方法:54只SD雄性大鼠按随机数字表分成正常组、模型组和针刺组,每组各18只。参照Feeney自由落体撞击法制备创伤性颅脑损伤大鼠模型。针刺组给予针刺"百会""水沟""风府"透"哑门"、双侧"合谷"穴,每天1次。治疗第3、7、14天后,分别进行改良大鼠神经功能缺损评分(mNSS),HE染色和免疫荧光标记法检测脑损伤的程度和小胶质细胞的表达量,采用酶联免疫法(ELISA)检测血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)和勿动蛋白A(Nogo-A)含量的变化。结果:与正常组比较,模型组第1、3、7、14天mNSS显著升高(P0.01);与模型组比较,针刺组第3、7、14天mNSS显著降低(P0.05,P0.01)。HE染色和免疫荧光标记结果可见,与正常组比较,模型组3个时点的组织结构持续破坏,神经元坏死,小胶质细胞大量活化(P0.05);与模型组比较,针刺组3个时点组织结构破坏程度减轻,小胶质细胞活化减少(P0.05)。与正常组比较,模型组3个时点血清NSE、Nogo-A含量显著升高(P0.01);与模型组比较,针刺组3个时点血清NSE含量显著降低(P0.01),第7、14天血清Nogo-A含量显著降低(P0.01)。结论:针刺可能通过抑制小胶质细胞的表达及活化,继而抑制继发神经损害,促进神经功能恢复。     

HIF-1α及其抑制剂对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时神经细胞凋亡的影响

目的探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）及其抑制剂2-甲氧基雌二醇（2ME2）对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时神经细胞凋亡的影响。方法将120只新生7d龄Wistar大鼠随机分为假手术组（Sham组,n=8）、缺氧缺血模型组（HIBD组,n=56）、2ME2干预组（2ME2组,n=56）,后两组采用Rice法建立模型后,根据断头取脑的时间不同又分为3h、6h、12h、24h、48h、72h和7d7个亚组。应用HE染色观察脑组织的病理变化,免疫组化技术检测HIF-1α、Bax、Bcl-2的表达,TUNEL法计数脑细胞凋亡。结果 HE染色显示2ME2干预后脑组织的损伤减轻;免疫组化显示：HIF-1α在HIBD组于模型制备后3h升高,12h达高峰,之后下降,2ME2组表达趋势和HIBD组相同,表达水平显著下降。与HIBD组比较,2ME2组各时间点的Bcl-2表达显著升高,Bax表达显著降低,TUNEL标记的阳性细胞数明显减少。结论在新生大鼠缺氧缺血急性期使用2ME2抑制HIF-1α的表达,引起Bax/Bcl-2表达量比值降低,凋亡细胞数目减少,改善脑损伤。     

盐酸法舒地尔对急性脑梗死患者血清Rho激酶的影响及与血液流变学相关性

目的观察盐酸法舒地尔对急性脑梗死患者血清Rho激酶的影响及Rho激酶变化与血液流变学的相关性。方法将116例急性脑梗死患者随机分为2组:对照组56例予肠溶阿司匹林片、胞二磷胆碱以及基础用药治疗,治疗组60例在对照组的基础上加用盐酸法舒地尔注射液治疗,于治疗前及治疗后第3,7,14天检测静脉血中Rho激酶和动脉血中血液流变学指标的水平,分析二者相关性。结果治疗组Rho激酶和NIHSS评分在治疗后第14天均明显低于对照组。Rho激酶和血液流变学的水平随治疗时间基本呈动态下降,Rho激酶浓度下降率与全血高切黏度及血浆黏度下降率呈正相关。结论盐酸法舒地尔可降低急性脑梗死患者血液中Rho激酶和血液流变学指标的水平。     

盐酸法舒地尔对急性脑梗死患者血清Rho激酶的影响及与血液流变学相关性

目的观察盐酸法舒地尔对急性脑梗死患者血清Rho激酶的影响及Rho激酶变化与血液流变学的相关性。方法将116例急性脑梗死患者随机分为2组：对照组56例予肠溶阿司匹林片、胞二磷胆碱以及基础用药治疗,治疗组60例在对照组的基础上加用盐酸法舒地尔注射液治疗,于治疗前及治疗后第3,7,14天检测静脉血中Rho激酶和动脉血中血液流变学指标的水平,分析二者相关性。结果治疗组Rho激酶和NIHSS评分在治疗后第14天均明显低于对照组。Rho激酶和血液流变学的水平随治疗时间基本呈动态下降,Rho激酶浓度下降率与全血高切黏度及血浆黏度下降率呈正相关。结论盐酸法舒地尔可降低急性脑梗死患者血液中Rho激酶和血液流变学指标的水平。