MGMT基因启动子甲基化与膀胱尿路上皮癌生物学行为关系的研究

目的 检测膀胱尿路上皮癌组织中O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)基因启动子甲基化状态,探讨MGMT甲基化与其蛋白表达水平以及肿瘤生物学行为之间的关系.方法 应用免疫组织化学SP法和甲基化特异性PCR(MSP)分别检测60例膀胱尿路上皮癌及15例正常膀胱黏膜组织中MGMT蛋白表达情况和MGMT基因启动子甲基化状态.结果 膀胱癌组织中MGMT蛋白阳性表达率为35.0 %(21/60),低于正常膀胱组织(86.7 %,13/15,P<0.01).膀胱癌组织中MGMT甲基化阳性率为45.0 %(27/60),明显高于正常膀胱组织(0.0 %,0/15,P<0.01);MGMT启动子甲基化与其蛋白表达呈负相关(r = -0.453,P<0.01);并且高级别膀胱癌中MGMT甲基化阳性率(70.6 %,12/17)要比低级别膀胱癌高(34.9 %,15/43),(P<0.05),而MGMT甲基化与膀胱癌临床分期无明显关系.结论 MGMT启动子甲基化可能参与了膀胱尿路上皮癌的发生和肿瘤分化,MGMT启动子甲基化有望成为预判膀胱癌预后的重要标记.     

脑胶质瘤患者组织和血清MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子甲基化状态检测

目的 探讨脑胶质瘤患者组织和血清中MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子CpG岛甲基化发生率及相关性.方法 甲基化特异性PCR(MSP)检测39例脑胶质瘤组织样本及32例预处理的脑胶质瘤血清样本中MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子区的甲基化状态.结果 脑胶质瘤组织MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子区甲基化发生率分别为46.2 %、10.3 % 和20.5 %,肿瘤组织中至少有一种基因甲基化的发生率为64.1 % (25/39);在脑胶质瘤患者外周循环血液中检测到了相关基因甲基化系列,并且与组织中基因甲基化发生率明显相关.结论 MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子甲基化是脑胶质瘤发生过程中常见的分子事件,血清中相关基因DNA甲基化检测有可能为脑胶质瘤诊断和个体化化疗提供一种稳定的无创性检测指标.     

脑膜胶质瘤基因MGMT在胶质瘤组织中表达的临床研究

目的 探讨新疆维吾尔族胶质瘤患者肿瘤组织中0（6）-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶（MGMT）表达水平与肿瘤病理级别之间的相关性以及种族因素对胶质瘤组织中MGMT表达水平的影响。方法 运用免疫组化法检测33例维吾尔族胶质瘤患者以及61例汉族胶质瘤患者肿瘤组织中的MGMT表达水平,对其与病理级别之间的相关性和种族因素对胶质瘤肿瘤组织中MGMT表达水平的影响进行分析。结果 61例胶质瘤患者中MGMT阳性率为45.90％,33例维族胶质瘤患者MGMT阳性率为30.30％,两个种族间差异无统计学意义（P＞0.05）。对94例胶质瘤患者肿瘤组织MGMT表达水平与病理级别的相关性进行统计学分析,肿瘤组织MGMT表达水平与病理级别不相关（P＞0.05）。结论 胶质瘤患者肿瘤组织MGMT表达水平与病理级别无明确相关;种族因素对胶质瘤肿瘤组织中MGMT表达水平无明显影响。     

脑胶质瘤SHG-44细胞MGMT基因甲基化状态及其与细胞对烷化剂药物耐药性关系的研究

目的 探讨人脑胶质瘤SHG.44细胞O(6)-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)基因启动子甲基化状态与其蛋白表达以及细胞对烷化剂药物耐药性的相关性.方法取处于对数生长期的人脑胶质瘤SHG-44和U251细胞,分别加入5-氮-2'脱氧胞苷(5-Aza-CdR)培养6 d后收集细胞,同时以未加5-Aza-CdR的正常培养细胞作为对照.提取细胞基因组DNA,采用甲基化特异性PCR(MSP)检测MGMT基因的甲基化状态,并利用蛋白质印迹方法检测MGMT蛋白的表达.将收集的细胞分为3组,分别加入浓度为125、100、75、50、25、15、10μg/ml的尼莫司汀(ACNU)和50、25、15、10、5、2.5、1μg/ml的替莫唑胺(TMZ)以及等量的完全培养液(阴性对照),采用噻唑蓝(MTT)法分别检测细胞对烷化剂药物的敏感性,以细胞存活50%时所对应的药物浓度(IC50值)作为衡量细胞对药物敏感性的指标,实验重复3次.结果正常培养的SHG-44细胞MGMT基因启动子呈甲基化状态,MGMT蛋白表达缺失,对ACNU和TMZ的IC50值分别为30、11μg/ml,表现为对烷化剂药物敏感;用5一Aza-CdR处理后,SHG-44细胞MGMT基因启动子成功脱甲基化,MGMT蛋白恢复表达,其对ACNU和TMZ的IC50值分别升高了2.5和3.1倍(均P<0.05),对烷化剂药物的敏感性发生逆转.而正常培养和5-Aza-CAR处理的U251细胞MGMT基因启动子均呈未甲基化状态,都能表达MGMT蛋白,并且均表现为对ACNU和TMZ烷化剂药物耐药.结论 MGMT基因甲基化状态能稳定地反映细胞诱导MGMT 蛋白表达的能力,并有可能成为预测肿瘤组织对烷化剂化疗药物敏感性的分子标记.     

MGMT启动子与垂体腺瘤侵略性行为及ADC值的相关性研究

目的 探讨垂体腺瘤O-6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)启动子甲基化状态与肿瘤侵略性行为及ADC值的相关性.方法 采用前瞻性研究,选取我院2019年01月至2020年08月收治的垂体腺瘤的患者,所有患者术前接受MRI检查(平扫+增强+解剖弥散),术后对肿瘤组织标本进行苏木精-伊红(HE)染色、免疫组化检查,通过...     

脑胶质瘤SHG-44细胞MGMT基因甲基化状态及其与细胞对烷化剂药物耐药性关系的研究

目的探讨人脑胶质瘤SHG-44细胞O（6）-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶（MGMT）基因启动子甲基化状态与其蛋白表达以及细胞对烷化剂药物耐药性的相关性。方法取处于对数生长期的人脑胶质瘤SHG-44和U251细胞,分别加入5-氮-2＇脱氧胞苷（5-Aza-CdR）培养6d后收集细胞,同时以未加5-Aza-CdR的正常培养细胞作为对照。提取细胞基因组DNA,采用甲基化特异性PCR（MSP）检测MGMT基因的甲基化状态,并利用蛋白质印迹方法检测MGMT蛋白的表达。将收集的细胞分为3组,分别加入浓度为125、100、75、50、25、15、10μg／ml的尼莫司汀（ACNU）和50、25、15、10、5、2．5、1μg/ml的替莫唑胺（TMZ）以及等量的完全培养液（阴性对照）,采用噻唑蓝（MTT）法分别检测细胞对烷化剂药物的敏感性,以细胞存活50％时所对应的药物浓度（IC50值）作为衡量细胞对药物敏感性的指标,实验重复3次。结果正常培养的SHG-44细胞MGMT基因启动子呈甲基化状态,MGMT蛋白表达缺失,对ACNU和TMZ的IC50值分别为30、11μg／ml,表现为对烷化剂药物敏感;用5-Aza-CdR处理后,SHG-44细胞MGMT基因启动子成功脱甲基化,MGMT蛋白恢复表达,其对ACNU和TMZ的IC50值分别升高了2．5和3．1倍（均P〈0．05）,对烷化剂药物的敏感性发生逆转。而正常培养和5-Aza-CdR处理的U251细胞MGMT基因启动子均呈未甲基化状态,都能表达MGMT蛋白,并且均表现为对ACNU和TMZ烷化剂药物耐药。结论MGMT基因甲基化状态能稳定地反映细胞诱导MGMT蛋白表达的能力,并有可能成为预测肿瘤组织对烷化剂化疗药物敏感性的分子标记。     

星形细胞瘤中MGMT甲基化与IDH1突变的相关性

目的 检测星形细胞瘤中DNA修复酶O-6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA-methyltransferase,MGMT)的甲基化状态,分析其与IDH1突变的关系并评估二者对患者预后的影响.方法 采用甲基化特异性PCR(MSP)法检测176例星形细胞瘤中MGMT的甲基化状态;采用直接测序法和免疫组化法检测IDH1突变,并应用Log-rank检验比较不同分子标记对患者生存曲线的影响.结果 138例星形细胞瘤进行MGMT基因甲基化检测,72.46％ (100/138)病例检测结果有效,57％肿瘤发生MGMT高甲基化.Ⅱ、Ⅲ级星形细胞瘤与继发性胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)中MGMT的甲基化率显著高于原发性GBM(P=0.023 2).伴有IDH1突变的星形细胞瘤中MGMT的高甲基化率(29/37)显著高于无IDH1基因突变(28/63)病例(P=0.000 9).MGMT甲基化结合IDH1突变是患者预后较好的分子标记(P=0.000 0).结论 星形细胞瘤中MGMT的高甲基化状态与IDH1突变呈明显正相关;IDH1突变结合MGMT甲基化状态检测能更好地预测胶质瘤患者的预后.     

脑胶质瘤患者MGMT启动子甲基化和IDH1突变与临床预后相关

目的本研究回顾性分析MGMT、IDH1在脑胶质瘤患者中的突变及表达状况,探讨二者共表达与临床预后之间的关系。方法将放射治疗科2017年10月至2019年10月收治的25例脑胶质瘤术后患者纳入本研究;采用Kaplan-Meier法分析生存率;Log-rank法进行单因素分析。结果 MGMT启动子甲基化患者(χ~2=4.22,P0.05)较非甲基化者的总生存期(OS)明显延长,MGMT甲基化患者较非甲基化患者的疾病无进展生存时间(PFS)、IDH1阳性患者的OS、PFS较阴性患者无明显延长。MGMT甲基化联合IDH1突变患者较MGMT非甲基化联合IDH1无突变患者生存期明显延长(P0.05)。结论脑胶质瘤术后患者的MGMT甲基化及IDH1基因水平与OS、PFS显著相关,是影响患者临床预后的重要因素。     

MGMT基因甲基化在肿瘤发生及个体性化疗中的意义

MGMT作为一种DNA修复蛋白,能够移除DNA上鸟嘌呤O6位点的能致突变毒性和细胞毒性的烷基加合物,从而保护细胞对抗烷化基团的损害,是肿瘤耐受烷化剂药物的主要原因。MGMT在不同的肿瘤和肿瘤细胞系中沉默,MGMT基因启动子CpG岛过甲基化是其表观沉默的主要机制。启动子过甲基化相关的MGMT基因沉默与很多人类肿瘤密切相关。首先,MGMT基因沉默可导致肿瘤相关基因转换突变的累积;其次,MGMT基因过甲基化与肿瘤增强对烷化剂药物敏感性之间呈正相关。这些新发现揭示了MGMT基因甲基化在肿瘤的发生、发展和肿瘤治疗中的重要作用。     

哈族食管鳞癌中PLCE1基因启动子甲基化水平的实验研究

目的探讨PLCE1基因启动子甲基化与食管鳞癌发生发展的关系。方法分别用免疫组化(IHC)和甲基化特异PCR(MSP)方法检测51例新疆哈萨克族食管鳞癌及相应癌旁正常组织中PLCE1蛋白表达水平及其启动子甲基化水平,分析其与病理资料相关性;分别用Western blot及MSP检测食管鳞癌细胞在5-aza-dC作用前后PLCE1蛋白表达及启动子甲基化变化情况。结果新疆哈萨克族食管鳞癌组织中PLCE1蛋白表达高于癌旁正常组织,而其基因甲基化水平则较低(P 0.001),且蛋白高表达的癌组织中其甲基化水平低于蛋白低表达的癌组织(P=0.028),PLCE1甲基化水平与其蛋白表达水平具有明显的相关性(χ~2=4.791,P=0.028),并与患者的淋巴结及远处转移(χ~2=7.242,P=0.027)和TNM分期(χ~2=7.883,P=0.019)明显相关;在食管鳞癌细胞系中PLCE1甲基化程度同样与蛋白表达水平成反比,5-aza-dC处理可抑制TE-1和Kyse150的PLCE1甲基化,提高其蛋白表达。结论食管鳞癌组织中PLCE1甲基化低与其蛋白表达高、淋巴结和远处转移及TNM分期相关,5-aza-dC处理可抑制PLCE1甲基化程度,增高其蛋白表达。     

肾透明细胞癌患者肾组织干扰素调节因子6基因启动子区甲基化与总生存率的相关性研究

目的探讨干扰素调节因子6(IRF6)基因启动子甲基化在判断肾透明细胞癌(KIRC)患者预后中的价值。方法收集2016年1月至2020年1月在南京医科大学第一附属医院首诊的50例KIRC患者的原发灶组织, 采用免疫组化法检测其IRF6蛋白的表达情况, 并分析IRF6表达水平与患者生存及肿瘤转移的关系。使用生物信息学方法分别比较KIRC和正常肾组织中IRF6的mRNA及蛋白水平差异, 基于大数据库分析癌和癌旁组织中IRF6基因启动子区甲基化率差异;将IRF6基因启动子区甲基化状态与患者总生存率(OS)进行统计分析, 筛选出呈现显著负相关的区域, 利用细胞系体外验证该启动子区甲基化区域与IRF6转录水平的关系。结果 KIRC组织中IRF6 mRNA和蛋白水平均显著低于正常样本(P<0.05), 该现象在死亡或发生肿瘤转移的KIRC患者中较为突出。KIRC组织中IRF6基因启动子区甲基化程度远高于临近正常肾组织, 并且IRF6基因启动子区甲基化与IRF6 mRNA之间存在显著负相关性(R=-0.52)。IRF6基因启动子区域cg12034118和cg16030177的甲基化程度越高, 患...     

肠道肿瘤组织中C-erbB2基因启动子区CpG岛甲基化状态的分析

目的：探讨肠道肿瘤中致癌基因C-erbB2启动子区CpG岛的甲基化状态。方法收集经病理确诊的40例肠癌患者甲醛固定的肠道肿瘤组织及相应癌旁组织各40份;采用甲基化特异聚合酶链反应(MSP)检测C-erbB2基因启动子区CpG岛甲基化状态。结果肠道肿瘤组织中C-erbB2基因启动子区CpG岛甲基化率(52.5%)低于癌旁组织中存在的甲基化率(75.0%),两者之间差异有统计学意义(<0.05);肿瘤不同分期和有无淋巴结转移组间C-erbB2基因启动子区CpG岛甲基化率差异无统计学意义。结论所检标本显示肠道肿瘤组织与癌旁组织间C-erbB2基因启动子区CpG岛甲基化率差异有统计学意义,提示C-erbB2低甲基化可能是C-erbB2蛋白高表达和肠癌发生的原因之一。     

非小细胞肺癌组织中抑癌基因RUNX3 启动子甲基化与肿瘤侵袭相关基因E-Cad、MMP-7 和TIMP-1 蛋白表达的关系

目的:探讨非小细胞肺癌组织中抑癌基因RUNX3启动子甲基化与肿瘤侵袭相关基因E-Cad、MMP-7和TIMP-1蛋白表达的关系。方法:收集并分析我院2017年1月至2018年1月期间收治入院的65例非小细胞肺癌患者组织,采用巢氏甲基化特异性PCR(n MSP)法检测RUNX3启动子甲基化情况;链霉菌素-生物素过氧化物酶(S-P)染色法检测肿瘤侵袭相关基因E-Cad、MMP-7和TIMP-1蛋白表达并计数,并回顾性分析RUNX3启动子甲基化状态与临床病理特征、肿瘤侵袭相关基因表达的关系。结果:65例NSCLC组织样本中有27例出现RUNX3启动子的甲基化(41. 54%)。RUNX3启动子甲基化与病理类型有关,腺癌(81. 48%)高于鳞癌(18. 52%,P=0. 003);且与临床分期有关(P=0. 003),主要分布于Ⅲ期(55. 56%)和Ⅳ期(33. 33%)。S-P染色并计数结果显示,E-Cad、MMP-7和TIMP-1蛋白表达阳性率分别为56. 92%、46. 15%和52. 31%;且在RUNX3基因启动子甲基化组中阳性表达率与非甲基化组中阳性率相比差异均具有统计学意义(P0. 05)。结论:RUNX3基因启动子的甲基化与NSCLC的侵袭和转移密切相关,有望为NSCLC的临床诊疗提供新的思路。     

MGMT预测结肠腺癌GP方案化疗药敏感性的临床意义

目的探讨结肠腺癌组织中MGMT蛋白表达与GP化疗疗效的关系。方法采用免疫组化SP法检测44例结肠腺癌组织中MGMT的表达,所有患者接受2个周期以上GP化疗方案,分析化疗疗效,并进行随访观察。结果结肠腺癌组织中MGMT阳性率为52.27%(23/44),MGMT表达与肿瘤病理分级相关(P0.05),与患者年龄、性别及肿瘤直径无关(P0.05)。MGMT阳性患者GP方案化疗敏感性明显高于MGMT阴性患者(P0.05);MGMT蛋白在结肠腺癌中的表达在复发组与无复发组差异有显著性(P0.05);结肠腺癌GP方案化疗效果与复发率无明显相关(P0.05)。结论结肠腺癌中MGMT高表达患者对GP方案化疗反应的有效率更高,可作为独立的预后因素,这将有助于筛选适合接受GP进行一线化疗的患者。     

VEGF在新疆维吾尔族胶质瘤患者肿瘤组织中表达的临床研究

目的 探讨新疆维吾尔族胶质瘤患者肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)表达水平与肿瘤病理级别之间的相关性以及民族因素对胶质瘤VEGF表达水平的影响.方法 运用免疫组化法检测33例维吾尔族胶质瘤患者以及61例汉族胶质瘤患者肿瘤组织中的VEGF表达水平,对其与病理级别之间的相关性和种族因素对胶质瘤肿瘤组织中VEGF表达水平的影响进行分析.结果 61例汉族胶质瘤患者肿瘤VEGF阳性率为81.97％,33例维族胶质瘤患者VEGF阳性率为60.61％,两个种族间差异有统计学意义(P＜0.05).分别对两民族胶质瘤组织VEGF表达水平与病理级别的相关性进行统计学分析,汉族患者肿瘤VEGF表达水平与病理级别显著相关(P＜0.05);维吾尔族患者肿瘤VEGF表达水平与病理级别无明显相关(P＞0.05).结论 胶质瘤患者肿瘤组织VEGF阳性率及其表达水平与病理级别之间的相关性均受到种族因素的影响.     

p16、RASSF1A在肝细胞性肝癌患者肿瘤组织及血浆中异常甲基化的检测及临床意义

目的探讨原发性肝细胞性肝癌(HCC)患者肿瘤组织及血浆中p16及RASSF1A启动子区的甲基化状态及其在HCC早期无创诊断中的意义。方法采用甲基化特异性PCR技术检测60例HCC患者肿瘤组织、癌旁组织、血浆及60例正常肝脏患者肝组织及血浆中p16、RASSF1A基因启动子区域的甲基化状态,分析其与肝癌患者临床病理参数之间的关系。结果 60例HCC患者血浆、肿瘤组织及癌旁中p16基因甲基化率分别为68.3%(41/60)、63.3%(38/60)和41.7%(25/60);RASSF1A基因异常甲基化检出率分别为73.3%(44/60)、70.0%(42/60)和36.7%(22/60);60例正常肝脏患者肝组织及血浆p16、RASSF1A未检测到基因启动子区域的甲基化,差异有统计学意义(P=0.000)。HCC患者外周血浆和癌组织中p16、RASSF1A基因的甲基化率与患者年龄、性别、AFP、有无肝炎病毒感染(HBV)、有无肝硬化、Child分级、肿瘤个数、包膜完整与否、有无癌栓、是否复发、病理分级、肿瘤分期无统计学相关性。结论 HCC患者肿瘤组织及血浆DNA中可检测到RASSF1A基因和p16基因的甲基化,外周血p16基因和RASSF1A基因的甲基化检测对肝癌筛查有重要意义,可能成为HCC新的肿瘤分子标记物。     

MGMT及P53在脑胶质瘤组织中的表达及其生物学意义

目的探讨MGMT及P53蛋白在人脑胶质瘤中的表达及其与肿瘤发生和恶性度的关系.方法对39例人脑胶质瘤标本用免疫组化法检测MGMT和P53蛋白的表达,观察两者的相互关系及其和肿瘤恶性度间的关系.结果不同恶性程度胶质瘤间MGMT的阳性表达率无明显区别(p＝0.496745),但表达强度却明显不同(p＝0.018781),两者呈明显的负相关(r＝-0.629,p<0.05).P53蛋白的阳性表达率(p=0.027648)和表达强度(p=3.5×10-118)在不同恶性程度肿瘤间都有明显差异,与肿瘤的恶性程度呈正相关(r＝0.575,p<0.05).MGMT的阳性表达强度和P53蛋白的阳性表达强度呈明显的负相(r=-0.750,p<0.05).结论 MGMT表达减弱和P53表达增强与脑胶质瘤的发生及其恶性程度有一定关系.     

痰标本FHIT、P16、MGMT、RASSF1A、APC基因甲基化在肺癌诊断中的作用

目的 探讨肺癌患者痰标本中FHIT、P16、MGMT、RASSF1A和APC等抑癌基因启动子异常甲基化及其联合检测在肺癌筛查及早期诊断中的价值.方法 采用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)法,检测47例肺癌组织及对应的痰标本FHIT、P16,MGMT、RASSF1A和APC基因启动子区甲基化状态.24例肺良性疾病患者痰标本作为对照.结果 47例肺癌组织标本中FHIT、P16、MGMT、RASSF1A、APC基因启动子区甲基化检出率分别为40.4%(19/47)、53.2%(25/47)、36.2%(17/47)、21.3%(10/47)和38.3%(18/47);对照的痰标本中五者甲基化检出率分别为38.3%(18/47)、48.9%(23/47)、36.2%(17/47)、17.0%(8/47)和29.8%(14/47),两组甲基化检出率存在着一致性[P>0.05;κ(0.8～1.0)].24例肺良性病变痰标本中未检测到任何异常甲基化,与肺癌组比较差异有统计学意义(P<0.05).五项指标联合检测可明显提高肺癌检测的灵敏度(80.9%)和特异度(100.0%).FHIT和P16基因痰标本甲基化检出率与患者吸烟指数有相关性(P<0.05).结论 痰标本中多个肺癌相关基因甲基化联合检测有望成为肺癌筛查、早期诊断简便有效的指标.     

乳腺癌中p16INK4a和视网膜母细胞瘤基因甲基化状况及其表达

目的 研究乳腺癌及癌旁增生组织中p16INK4a和视网膜母细胞瘤(RB)基因启动子区域的甲基化状况,并探讨基因异常甲基化与蛋白表达及其临床意义.方法 采用甲基化特异性PCR方法 对46例乳腺癌、22例癌旁增生组织及7例正常乳腺组织中p16INK4a和RB基因启动子区域甲基化状况进行检测,并采用免疫组织化学SP法对p16INK4a蛋白表达情况进行相应检测.结果 乳腺癌、癌旁增生组织和正常乳腺组织中p16INK4a基因的甲基化率分别为23.9%(11/46)、18.2%(4/22)、1/7;RB基因的甲基化率分别为10.8%(5/46)、9.1%(2/22)、0(0/7);肿瘤组织、癌旁增生组织和正常乳腺组织中p16INK4a基因、RB基因甲基化率差异均无统计学意义(P>0.05).正常乳腺组织、癌旁增生组织、乳腺癌中p16INK4a蛋白表达阳性率分别为7/7、60.8%(28/46)和81.8%(18/22),三者之间差异无统计学意义(P>0.05);肿瘤组织中p16INK4a蛋白表达与肿瘤分级相关(P<0.05);肿瘤组织中p16INK4a甲基化状况与其蛋白表达、肿瘤分级、ER表达阴性具有相关性(P<0.05),与肿瘤大小、淋巴结转移、年龄均不相关;RB基因甲基化状态与肿瘤分级、肿瘤大小、ER表达及年龄均无相关性,但与淋巴结转移相关(P<0.05).结论 p16INK4a基因异常甲基化可能在乳腺癌发生过程中作用有限,但在肿瘤的演进中发挥作用;RB基因甲基化检测对于分析乳腺癌进展及预后情况可能有一定参考价值;p16INK4a基因甲基化是p16INK4a蛋白失表达的机制之一.     

乳腺癌中p16INK4a和视网膜母细胞瘤基因甲基化状况及其表达

目的 研究乳腺癌及癌旁增生组织中p16INK4a和视网膜母细胞瘤(RB)基因启动子区域的甲基化状况,并探讨基因异常甲基化与蛋白表达及其临床意义.方法 采用甲基化特异性PCR方法 对46例乳腺癌、22例癌旁增生组织及7例正常乳腺组织中p16INK4a和RB基因启动子区域甲基化状况进行检测,并采用免疫组织化学SP法对p16INK4a蛋白表达情况进行相应检测.结果 乳腺癌、癌旁增生组织和正常乳腺组织中p16INK4a基因的甲基化率分别为23.9%(11/46)、18.2%(4/22)、1/7;RB基因的甲基化率分别为10.8%(5/46)、9.1%(2/22)、0(0/7);肿瘤组织、癌旁增生组织和正常乳腺组织中p16INK4a基因、RB基因甲基化率差异均无统计学意义(P>0.05).正常乳腺组织、癌旁增生组织、乳腺癌中p16INK4a蛋白表达阳性率分别为7/7、60.8%(28/46)和81.8%(18/22),三者之间差异无统计学意义(P>0.05);肿瘤组织中p16INK4a蛋白表达与肿瘤分级相关(P<0.05);肿瘤组织中p16INK4a甲基化状况与其蛋白表达、肿瘤分级、ER表达阴性具有相关性(P<0.05),与肿瘤大小、淋巴结转移、年龄均不相关;RB基因甲基化状态与肿瘤分级、肿瘤大小、ER表达及年龄均无相关性,但与淋巴结转移相关(P<0.05).结论 p16INK4a基因异常甲基化可能在乳腺癌发生过程中作用有限,但在肿瘤的演进中发挥作用;RB基因甲基化检测对于分析乳腺癌进展及预后情况可能有一定参考价值;p16INK4a基因甲基化是p16INK4a蛋白失表达的机制之一.