深圳汕头地区呼吸道感染患儿人偏肺病毒的检出及病原学初步研究

目的：了解人偏肺病毒（hMPV）在深圳汕头地区的感染情况及临床特征。方法收集2010年10月～2012年6月呼吸道感染住院患儿及健康体检儿童鼻咽抽吸物及咽拭子标本共1217例,采用 RT-PCR方法对其进行 hMPV基因筛查,随机选取5份扩增阳性产物进行核酸测序,将所得序列与 GenBank中的序列进行比较和进化树分析。同时,对阳性标本的临床资料进行分析。结果1137份感染患儿标本中检测到hMPV 51份（阳性率4.49％）,2,3,4月为发病高峰,感染患儿主要在3岁以下,占检出率的80.4％,5份阳性标本基因序列与 GenBank 中公布的多株 hMPV N 基因同源性达80.8％～98.4％。进化树分析显示分属于两个不同的基因进化族。51例阳性患儿临床症状均表现为发热、咳嗽、喘息,临床诊断主要为支气管肺炎24例,喘息型肺炎17例,毛细支气管炎9例,上呼吸道感染1例。80例健康体检儿童的呼吸道标本均未检测到 hMPV特异基因片段。结论 hMPV是引起深圳汕头地区3岁以下儿童呼吸道感染的重要病原体之一,并有一定的季节性,其感染无特异的临床表现。流行的 hMPV株存在两种不同基因型。     

咽拭子与鼻咽抽吸液标本检测呼吸道感染患儿hRSV-DNA的比较研究

目的探讨比较反转录PCR(RT-PCR)法检测呼吸道感染患儿咽拭子和鼻咽抽吸液标本人呼吸道合胞病毒(hRSV)DNA的敏感性。方法收集200例急性呼吸道感染患儿的呼吸道标本(同时收集咽拭子和鼻咽抽吸液),应用针对hRSV的M基因保守区域的PCR引物进行hRSV基因片段检测,对阳性的标本进行比较分析。结果 200例患儿的呼吸道标本中(咽拭子和鼻咽抽吸液),共检出70例hRSV阳性标本,阳性率为35.0%。其中在鼻咽抽吸液标本中检出69例hRSV阳性标本,阳性率为34.5%;咽拭子标本中,共检出67例hRSV阳性标本,阳性率为33.5%;66例在咽拭子及鼻咽抽吸液中均检出hRSV,阳性率为33.3%。结论应用RT-PCR法检测hRSV,在咽拭子与鼻咽抽吸液标本间,阳性率差异无统计学意义。     

2016－2017年云南省禽类相关外环境禽流感病毒监测结果分析

  目的  对2016 — 2017年度云南省5类场所禽流感病毒监测结果进行分析,了解禽流感病毒分布情况,同时评估人感染禽流感病毒的风险,为云南省禽流感防控工作提供依据。  方法  选取全省16个市（州）共139个监测点,采集6类环境标本827份,采用荧光定量PCR方法对标本进行甲型及H5、H7、H9亚型流感病毒检测,χ2检验用于结果分析,同时对甲型流感阳性标本进行病毒分离及亚型鉴定工作。  结果  827份外环境标本中,共检出甲型流感阳性样本221份,阳性率26.27%,H5亚型阳性5份,阳性率0.60%,H9亚型阳性182份,阳性率22.00%,H5、H9亚型混合阳性7份,阳性率0.85%,甲型未分型27份,阳性率3.26%。 不同地区之间甲型流感病毒阳性率差异有统计学意义（χ2＝122.043,P＜0.001）,位居前3的依次为文山州（70.00%）、保山市（58.49%）和怒江州（47.83%）;鸡胚分离到禽流感病毒亚型有H5N1、H5N2、H9N2等,其中H9N2毒株107株,占95.53%,H5N2毒株2株,H5N6毒株2株,各占1.79%,H5N1毒株1株占0.89%;不同监测场所之间甲型流感病毒阳性率差异有统计学意义（χ2＝127.920,P＜0.001）,其中以城乡活禽市场环境禽流感病毒阳性率高,活禽批发市场次之;不同标本类型之间甲型流感病毒阳性率差异有统计学意义（χ2＝51.689,P＜0.001）,其中清洗禽类的污水阳性最高,宰杀或摆放禽肉案板表面的擦拭标本次之。  结论  云南省外环境中禽流感病毒以H9亚型为主,H5亚型少量存在,混合感染多见,应积极采取综合性预防控制措施。     

427例下呼吸道感染住院患儿肺炎支原体感染分析

目的 分析我院下呼吸道感染住院患儿肺炎支原体(MP)感染状况.探讨近年来MP感染在下呼吸道感染儿童中的流行规律.方法 采用实时定量聚合酶链反应(PCR)法检测427例下呼吸道感染患儿呼吸道鼻咽深部分泌物、肺泡灌洗液及咽拭子MP DNA含量,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清MP IgM.结果 427例下呼吸道感染患儿中MP DNA阳性206例(48.2%),MP DNA含量5.01×102～3.66×107copies/ml.≤3岁(211例)、>3～6岁(73例)和>6岁(143例)组MP感染阳性分别为55例(26.1%)、43例(58.9%)和108例(75.5%);MP DNA阳性患儿中肺炎患儿94.2%(194/206).MP全年每月阳性率>29.2%,秋冬季感染呈现高峰(阳性率>60.0%).实时定量PCR与ELISA检测法结果一致性良好(Kappa=0.798.P<0.05).结论 MP是近年来住院惠儿呼吸道感染的主要病原体,下呼吸道感染尤其是肺炎中感染率较高;随年龄增长阳性检出率逐渐上升;感染与季节密切相关.     

2007-2008年北京地区儿童手足口病的病原学分析

目的 通过病毒分离和鉴定了解2007-2008年春夏北京地区手足口病的病原学特征,为手足口病防治工作提供科学依据.方法 分别于2007年4-8月及2008年5-9月收集256例手足口病患儿的咽拭子和疱疹液标本共356份,其中咽拭子255份(包括10份重症患儿标本),疱疹液标本101份.将所有标本接种Vero细胞进行病毒分离,分离阳性的毒株用RT-PCR进行鉴定;对10份重症患儿标本除病毒分离外,还直接进行RT-PCR检测病毒核酸.结果 256例被检测患儿中188例为肠道病毒阳性,阳性率为73.4%.356份标本中共分离到239株肠道病毒,总阳性率为67.1%.其中疱疹液标本分离阳性率为75.2%(76/101),咽拭子标本分离阳性率63.9%(163/255),但两种标本接种细胞后出现病变的速度没有差别.重症患儿标本病毒分离阳性率50%(5/10).2007年的45例病毒分离株经肠道病毒通用引物PCR检测均为阳性,分型PCR显示,其中CA16占95.6%(43/45),EV71占4.4%(2/45);而2008年的143例病毒分离株经肠道病毒通用引物PCR检测142例为阳性,PCR分型显示,EV71占82.4%(117/142),CA16占16.8%(24/142).10份重症患儿标本直接分型检测结果均为EV71.结论 北京儿童手足口病病原体以EV71和CAV16为主,2007年与2008年流行的优势型别不同,2007年主要为CA16,而2008年主要为EV71.本组重症手足口病患儿的病原均为EV71.     

2007-2008年北京地区儿童手足口病的病原学分析

目的 通过病毒分离和鉴定了解2007-2008年春夏北京地区手足口病的病原学特征,为手足口病防治工作提供科学依据.方法 分别于2007年4-8月及2008年5-9月收集256例手足口病患儿的咽拭子和疱疹液标本共356份,其中咽拭子255份(包括10份重症患儿标本),疱疹液标本101份.将所有标本接种Vero细胞进行病毒分离,分离阳性的毒株用RT-PCR进行鉴定;对10份重症患儿标本除病毒分离外,还直接进行RT-PCR检测病毒核酸.结果 256例被检测患儿中188例为肠道病毒阳性,阳性率为73.4%.356份标本中共分离到239株肠道病毒,总阳性率为67.1%.其中疱疹液标本分离阳性率为75.2%(76/101),咽拭子标本分离阳性率63.9%(163/255),但两种标本接种细胞后出现病变的速度没有差别.重症患儿标本病毒分离阳性率50%(5/10).2007年的45例病毒分离株经肠道病毒通用引物PCR检测均为阳性,分型PCR显示,其中CA16占95.6%(43/45),EV71占4.4%(2/45);而2008年的143例病毒分离株经肠道病毒通用引物PCR检测142例为阳性,PCR分型显示,EV71占82.4%(117/142),CA16占16.8%(24/142).10份重症患儿标本直接分型检测结果均为EV71.结论 北京儿童手足口病病原体以EV71和CAV16为主,2007年与2008年流行的优势型别不同,2007年主要为CA16,而2008年主要为EV71.本组重症手足口病患儿的病原均为EV71.     

1379例儿童肺炎支原体快速培养鉴定结果分析

目的探讨肺炎支原体(MP)快速鉴定培养在儿童MP感染早期的临床诊断价值。方法采用MP快速鉴定培养基对本院2008年1月至2009年12月患急性呼吸道感染的1379例患儿咽拭子标本进行MP培养检测。结果 1 379例急性呼吸道感染患儿的咽拭子标本MP培养阳性494例,总阳性率35.82%;其中男性阳性率36.48%,女性阳性率35.11%,男、女比较差异无统计学意义(P0.05)。在各年龄组中,4～8岁组阳性率最高(45.72%),2岁组最低(17.23%),两组间比较差异有统计学意义(P0.05)。1年中,11月至次年1月阳性率最高(42.62%),5～7月阳性率最低(23.74%),两组间比较差异有统计学意义(P0.05)。结论 MP快速鉴定培养基检测肺炎支原体感染总检出率较高,结果准确、简便、快速,为临床尽快诊断肺炎支原体感染具有重要的参考价值,可作为一般实验室诊断MP感染的首选试验。     

肺炎支原体快速鉴定培养基在儿童支原体感染快速诊断中的应用

目的探讨肺炎支原体(M P)快速培养基在儿童M P感染早期诊断中的价值。方法应用M P快速培养法对西安地区2005年1月~12月3 753例急性下呼吸道感染患儿的咽拭子标本进行M P培养检测,EL ISA法检测其中1 710例患儿血清中M P-IgM抗体。结果3 753例急性下呼吸道感染患儿咽拭子标本中M P培养阳性556例,总阳性率为14.81%。1 710例患儿血清中M P-IgM阳性215例,阳性率12.57%;M P培养阳性266例,阳性率15.56%,两种检测方法M P阳性率无明显差异(P>0.05)。结论M P快速液体培养法简便快速,对儿童M P感染的早期诊断具有重要的参考价值,适合一般实验室开展应用。     

福州地区急性呼吸道感染患儿呼吸道合胞病毒检测及亚型分析

目的:分析福州地区2006-2007年冬春季我院收治急性呼吸道感染患儿呼吸道合胞病毒(RSV)及其亚型流行情况。方法:采用RT-PCR方法检测176例急性呼吸道感染患儿的鼻咽拭子中RSV并进行亚型鉴定分析。结果:(1)在176例标本中,RSV阳性28例(15.9%)。其中急性下呼吸道感染阳性率为38%,显著高于急性上呼吸道感染的4%(!2=33.15,P<0.05)。(2)28例RSV阳性标本中,A亚型23例(82%),B亚型4例(14%),不明分型者1例(4%);上、下呼吸道感染组患儿间RSV亚型分布差异无显著性(P>0.05),都以A型为主。(3)RSV阳性患儿的年龄主要以3岁以下为主。结论:RSV是婴幼儿急性下呼吸道感染的重要病原体;福州地区2006-2007年冬春季RSV两种亚型同时流行,以A亚型为主。     

大足地区儿童呼吸道病毒感染病原学分析

目的了解大足地区住院患儿常见呼吸道病毒感染病原体及其感染特点。方法对2013年2月至2014年4月共7 403例因呼吸道感染收治住院患儿进行回顾性分析,采用直接免疫荧光法检测患儿鼻咽分泌物中的7种常见呼吸道病毒,同时检测患儿肺炎支原体感染情况。分析不同性别、年龄段、季度患儿病毒感染率及合并肺炎支原体感染情况。结果 (1)7 403份标本中检测出病毒阳性1 315例(17.76%),各病毒阳性率分别为呼吸道合胞病毒(RSV)8.63%、腺病毒(ADV)1.49%、流感病毒A(IVA)1.99%、流感病毒B(IVB)1.24%、副流感病毒(PIV)Ⅰ1.35%、PIVⅡ0.41%、PIVⅢ2.66%。检出肺炎支原体阳性750例(10.13%)。(2)不同性别呼吸道病毒感染差异无统计学意义(χ2=0.746,P0.05),而不同年龄及季节呼吸道病毒感染差异有统计学意义(χ2=58.124,P0.01;χ2=428.724,P0.01)。(3)检出病毒混合感染阳性标本17例(0.23%)。单一病毒合并肺炎支原体感染168例(13.11%),IVA、IVB及PIVⅡ型感染合并肺炎支原体感染率较高,分别为18.75%、25.27%和17.86%。结论儿童呼吸道病毒感染率与年龄和季节密切相关,且病毒感染后患儿合并肺炎支原体感染率较高。     

昆明地区患尖锐湿疣的性工作者人乳头瘤病毒基因分型研究

目的分析患尖锐湿疣的性工作者人乳头瘤病毒(HPV)的基因分型。方法该地区确诊为尖锐湿疣的性工作者78例,采用核酸分子快速杂交基因芯片技术对尖锐湿疣患者进行HPV分型检测。结果 78例患者中HPV-DNA阳性率88.5%(69/78),其中男性阳性率为97.8%(45/46),女性阳性率为75.0%(24/32),男性与女性的HPV-DNA阳性率比较差异有统计学意义(χ2=9.633,P<0.05)。69例HPV-DNA阳性标本总共检出10个HPV亚型,分别为6、11、18、16、53、58、31、52、39、33亚型,检出率最高的亚型为6型,其次为11亚型。69例HPV-DNA阳性标本中,单一亚型感染43例,占62.3%;2个亚型感染(二重感染)26例,占37.7%。45例男性HPV-DNA阳性标本中二重感染12例,占26.7%;24例女性HPV-DNA阳性标本中二重感染14例,占58.3%,不同性别的HPV-DNA阳性标本二重感染所占比例比较差异有统计学意义(χ2=6.693,P<0.05)。结论该地区患尖锐湿疣的性工作者人乳头瘤病毒基因分型以低危型6型、11型为主。     

1284例肺炎支原体快速鉴定培养及耐药性分析

目的探讨肺炎支原体(MP)快速鉴定培养和药敏试验对儿童肺炎感染早期的鉴别诊断及耐药特征,为临床合理使用抗生素提供依据。方法采用MP快速鉴定培养药敏试剂盒对1 284例急性呼吸道感染的患儿咽拭子标本进行MP快速鉴定培养与药敏试验。结果 1 284例咽拭子标本MP培养阳性294例,阳性率22.90%;其中男性患儿阳性率22.26%,女性患儿阳性率23.33%,男、女比较差异无统计学意义(P>0.05)。一年中,10～12月阳性率最高(27.97%),其次为1～3月(25.83%);MP对阿奇霉素、左氧氟沙星、加替沙星和司帕沙星的敏感率高;对罗红霉素的耐药率最高。结论 MP快速鉴定培养药敏试剂盒检测肺炎支原体感染具有检出率高、操作简便快速等优点,可作为一般实验室诊断MP感染的首选试验,为临床尽快诊断肺炎支原体感染和指导临床用药具有重要的意义。     

人肠道病毒D68型在儿童急性呼吸道感染中的临床特征与分子生物学特征分析

目的 了解人肠病毒D68 (EV-D68)在儿童急性呼吸道感染(acute respiratory tract infection,ARTI)中的临床特征及分子流行病学特征. 方法 采集2014年3月至2016年3月年深圳市妇幼保健院住院及门诊年龄1月至14岁符合急性呼吸道感染(ARTI)患儿共13 472份咽拭子分泌物,使用EV通用核酸试剂盒进行肠道病毒检测,EV病毒通用核酸阳性标本通过RT-PCR扩增并测序分型. 结果 在13 472份鼻咽部拭子标本中,EV阳性病例1 222例,阳性率为9.10％,EV-D68感染患儿7例,阳性率0.05％,其VP1扩增序列分离的5株D68均与进化簇1病毒序列具有高同源性,2例与进化簇2有高同源性. 结论 EV-D68可能是急性呼吸道感染的一种新的主要病原体,感染高峰季节可能在秋冬季节,以急性下呼吸道感染(acute lower respiratory tract infections,ALRTI)为主要表现.     

湘潭地区6537例呼吸道感染儿童病毒抗原七联检的结果分析

目的 通过对2020年至2021年湘潭市中心医院就诊的6 537例急性呼吸道感染儿童(0～14岁)行抗原检测,回顾性分析各类病毒在我院就诊儿童呼吸道感染中的分布情况,为儿童呼吸道感染的早期诊治提供流行病学依据;同时与2020年之前两年的感染情况进行对比,分析近两年病原体检出率与既往的变化。方法 采集患儿鼻咽拭子,采用直接免疫荧光法(DFA)检测7种呼吸道病毒抗原,包括A型流感病毒(FluA)、副流感病毒1型(PIV1)、B型流感病毒(FluB)、副流感病毒3型(PIV3)、副流感病毒2型(PIV2)、呼吸道合胞病毒(RSV)和腺病毒(ADV)。结果 6 537例急性呼吸道感染患儿中,1 289例呼吸道病毒抗原检测结果为阳性,阳性率为19.15%,其中两项检测结果同时为阳性7例。以合并RSV感染最常见,占总阳性标本的0.54%;阳性率最高的是RSV(10.63%),其次为PIV 1(3.44%), PIV 3(2.29%),Flu B(1.48%),Flu A(0.67%), ADV(0.52%),PIV2(0.12%)。小于1岁组与1～4岁组、4～7岁组、7～14岁组儿童七项检出率比较...     

儿童呼吸道EB病毒感染IgM抗体与病毒DNA的相关性分析

目的 研究不同年龄段儿童呼吸道感染EB病毒(EBV)IgM抗体与病毒DNA的相关性.方法采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测1 062例患儿的血清标本中的EBV-IgM,同时用荧光探针PCR法检测患儿咽拭子标本中的EBV-DNA,对不同年龄段结果利用软件SPSS11.5进行χ2检验分析.结果 1 062例患儿EBV-DNA阳性率为46.61%,EBV-IgM阳性率6.78%,二者比较差异有统计学意义(P＜0.01);EBV-DNA各年龄段分组检测中,阳性率分别为21.05%、40.91%、65.71%、50.00%,≤1岁的低龄患儿阳性率最低(21.05%),与其他组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 不同年龄段的儿童由于免疫系统发育处于不同阶段,对EB病毒的免疫应答可能存在差异.     

胶体金免疫层析法对呼吸道合胞病毒抗原快速检测结果分析

目的分析胶体金免疫层析法对呼吸道合胞病毒(RSV)抗原快速检测的灵敏度和特异度。方法用RSV抗原检测试剂盒(胶体金免疫层析法)对197例疑似RSV感染患者的鼻咽抽吸物或鼻咽拭子标本进行检测,以反转录聚合酶链反应(RT-PCR)核酸检测结果为参考,比较胶体金免疫层析法对不同类型标本和不同年龄组患者的灵敏度。结果 197例患者标本中经RT-PCR检测,95例(48.2%)为阳性。以RT-PCR核酸检测结果为标准,胶体金免疫层析法的灵敏度和特异度分别是34.7%和100%。该方法对鼻咽抽吸物的阳性检出率较鼻咽拭子高(36.2%对8.6%,P<0.01),鼻咽抽吸物标本的灵敏度明显高于鼻咽拭子(22.1%对12.6%)。RSV检出率与年龄呈负相关(P<0.01),1岁以下患儿的阳性检出率最高(29.5%),而在>5岁患儿中阳性检出率为0。结论胶体金免疫层析法对1岁以下幼儿的鼻咽抽吸物中的RSV有较好检测效果,可辅助临床进行早期筛查。但鉴于该方法灵敏度较低,且适用于5岁以下儿童,临床上还需用RT-PCR对RSV进行确认和补充检测,以免漏诊。     

快速鉴定培养法及直接药敏试验检测小儿感染肺炎支原体的临床应用

目的：评价快速鉴定培养法及直接药敏试验检测小儿感染肺炎支原体的临床应用,探讨肺炎支原体的临床感染特征,为临床提供行之有效的诊疗依据。方法选取安康市中心医院2012年1月至2013年4月门诊及住院的急性呼吸道感染患儿2993例,采集患儿咽拭子标本做肺炎支原体快速鉴定培养及直接药敏试验。结果2993例患儿共检出肺炎支原体感染者370例,阳性率为12．36％。在肺炎支原体感染患儿中,以0～＜1岁的感染率最高,阳性率为20．6％。0～＜1岁、1～＜3岁、3～＜6岁及6～14岁4个年龄段患儿的阳性感染率的差异有统计学意义（χ^2＝114．02,P＜0．05）。370株肺炎支原体对6种抗菌药物呈现不同程度的敏感性,也伴着一定的耐药性的出现。结论肺炎支原体快速鉴定培养及直接药敏试验的特异性和灵敏度均能够达到临床要求,检测技术操作简单,标本易获取,检测结果可以为临床诊疗提供科学依据,值得推广应用。     

温州地区急性呼吸道感染住院患儿流感病毒感染状况调查

目的了解温州地区急性呼吸道感染（ARI）住院患儿流感病毒（IFV）感染的情况。方法对2003年1月至2006年6月温州地区5972例ARI住院患儿用直接免疫荧光法检测鼻咽分泌物中的IFVA、IFVB抗原。结果送检标本5972例,IFV阳性156例（2.6%）,其中IFVA136例（87.2%）,IFVB20例（12.8%）。2003年度和2005年度IFV阳性检出率均为4.2%,显著高于2004年（χ^2=69.857,P=0.000）;1~3岁年龄组IFV阳性检出率3.8%,〉3岁年龄组IFV阳性率3.7%,均显著高于〈1岁年龄组（χ^2=8.842,P〈0.05）。结论温州地区ARI住院患儿IFV感染以1岁以上儿童为主,IFVA常见,流行季节以夏秋季为主,每次仅持续1~2个月;IFVB检出率低,流行趋势难确定。     

2011～2012年武汉地区柯萨奇病毒A16型VP1基因的遗传进化分析

目的了解武汉地区手足口病(HFMD)患儿柯萨奇病毒A16型(CA16)的基因型及重组特点。方法收集2011年4月至2012年3月武汉地区1 844例HFMD患儿的咽拭子标本,用实时荧光定量PCR检测CA16核酸,阳性标本进行病毒分离,对分离株进行VP1基因序列测序,选择2株来自重症和1株来自轻症患儿的CA16病毒株构建VP1序列系统进化树并分析其全基因组序列的重组特点。结果 1 844例HFMD患儿的咽拭子标本中分离出42株CA16,VP1序列系统进化分析显示,所有分离株均属于B1亚型,其中13株属于B1a亚群,29株属于B1b亚群。重组分析表明,3株CA16分离株均为亲本株CA16 A型毒株FY18/AH/CHN/2008和EV71 A型毒株Hubei-09/HB/CHN/2009型间重组所产生,重组交叉位点为基因组P2区2A和2B基因交界处。结论武汉地区的CA16分离株均为B1亚型,其中B1b亚群占明显优势,且CA16分离株存在亲本株CA16A型和EV71 A型毒株的型间重组。