异种移植中转基因动物策略研究进展

近年来 ,在同种移植研究的基础上 ,异种移植的研究也进行了大量的工作 ,突出的成绩表现在异种移植免疫障碍阶段的划分和定义 ,即超急排斥反应、急性血管排斥 (有时也称延迟排斥 )、细胞排斥或慢性排斥、生理功能及其它。根据异种移植免疫学理论 ,利用转基因技术 ,建立转基因动物克服超急免疫排斥是异种移植研究的又一进步 ,显示转基因动物具有很大的发展前景 ,使异种移植走进临床成为可能。本文将就近年异种移植免疫学理论及根据其机制、利用转基因动物克服免疫排斥研究状况作一综述。     

异种移植领域转基因动物补体调节蛋白高效特异性表达研究进展

随着异种移植理论的发展，逐渐认识到转基因动物的修饰应主要针对其血管内皮细胞组织，并在建立转基因动物中构建特异的转录调控元件，获得补体调节蛋白在转基因动物血管内皮细胞组织特异性高效表达。本文就近几年有关异种移植领域转基因动物补体调节蛋白高效特异性表达方面研究进展作一综述。     

异种移植领域转基因动物补体调节蛋白高效特异性表达研究进展

随着异种移植理论的发展 ,逐渐认识到转基因动物的修饰应主要针对其血管内皮细胞组织 ,并在建立转基因动物中构建特异的转录调控元件 ,获得补体调节蛋白在转基因动物血管内皮细胞组织特异性高效表达。本文就近几年有关异种移植领域转基因动物补体调节蛋白高效特异性表达方面研究进展作一综述     

异种移植血管内皮细胞组织特异性表达人CD59转基因小鼠的建立

目的建立用于异种移植研究血管内皮细胞组织特异性表达人CD59转基因小鼠。方法采用受精卵显微注射技术，将含有人ICAM-2启动子、人CD59基因第1个内含子、人CD59 cDNA、BGH polyA终止信号的外源基因导入小鼠受精卵的原核中。选取注射后仍健康的受精卵移植入假孕母鼠的输卵管中待分娩。聚合酶链反应（PCR）及Southern blot确定外源基因整合阳性转基因小鼠。流式细胞术用于外源基因蛋白质水平表达检测。免疫组织化学方法观察人CD59在转基因小鼠心脏、肝脏、肾脏等器官表达分布情况。结果产仔130只，9只外源基因整合阳性。整合率6％（9／130）。6只获得蛋白质水平表达。蛋白质水平表达强度为人CD59在人白细胞表达强度的80％至95％，转基因效率5％（6／130）。免疫组织化学检测显示人CD59在转基因小鼠心脏、肝脏、肾脏组织有较强表达，且表达限于血管内皮细胞。结论成功地建立了用于异种移植研究血管内皮细胞组织特异性表达人CD59转基因小鼠。     

转基因猪异种移植抗排斥研究进展及其潜在风险

随着免疫学的飞速发展和功能强大的免疫抑制药物的不断涌现 ,器官移植已成为许多终末期器官疾患的主要治疗措施之一 ,降低了患者因为单一或少数器官严重受损、失去功能而导致死亡的危险性 ,并极大地提高了患者的生活质量。但是 ,目前临床同种器官移植面临着越来越严重的供器官短缺局面 ,促使人们开始认真地考虑异种移植。在众多的候选动物中 ,猪的脏器大小 ,生理和代谢方面与人类近似 ,易于培植 ,价格较低而社会阻力又相对较小 ,所以是公认的最适合用作异种移植供体的物种。一、人体对猪器官排斥的主要类型及其机制(一 )超急性排斥 (ｈｙｐ…     

转人CRP基因在异种移植中的研究

目的：研究转入补体调节蛋白（CRP）DAF、MCP和CD59基因对抑制人补体激活从而克服超急性排斥反应的作用。方法：利用显微注射建立转人衰变加速因子（hDAF)小鼠和猪的模型和转梁hMCP及hCD59真核表达质粒的猪内皮细胞（EC）,研究小鼠和猪EC表达抑制人补体激活的人补体调节蛋白（CRP）对异种移植超急性排斥反应的抑制作用。结果（1）转人DAF基因小鼠心脏用新鲜人血连续丛外灌注,转基因组心脏搏动时间（174．6min)比对照组（106．5min)明显延延长。（2）转hDAF基因猪心脏异位移植给猕猴、移植心最长存活90h,受者死亡前移植心仍有功能,移植心病理检查未见超急性排斥反应病理改变。（3）转DAF基因基因猪EC死亡率在不同浓度血清时均明显低于对照组,在转hDAF基因猪EC上再分别转染hMCP及hCD59真核表达质粒,转hDAF hMCP或hDAF hCD59在不同血清浓度时EC死亡率较单纯hDAF组明显下降（P＜0．05）。结论,转人DAF及MCP、CD59补体调节蛋白基因能克服人对异种器官或组织的超急性排斥反应。     

异种抗原及相关策略在异种移植的研究进展

异种抗原在异种移植免疫排斥反应中发挥重要作用。单纯针对异种抗原的策略，可抑制或减轻排斥反应得到完全基因工程动物是异种移植成的最佳途径。本文就异种抗原的实质、分布和作用进行了介绍，并综述了针对异种抗原的各种策略及研究趋势。     

异种移植的研究进展

供体器官和细胞的匮乏限制了临床同种移植的发展.开展以猪为供体的异种移植研究是缓解供体短缺的重要方法.目前,猪的胰岛细胞、神经元细胞、肝细胞和角膜移植已初步应用于临床,但实体器官移植,如心脏、肝脏、肾脏等仍存在较大的免疫障碍和生理屏障,距离临床应用尚有不小的差距.随着表达一种或多种人的免疫和凝血调节基因猪的出现,异种移植研究取得显著进展,受体和移植器官的存活时间明显延长,而种间交叉感染的风险也较低,但免疫排斥和生理屏障仍是阻碍异种移植进入临床应用的最大障碍.本文就当前异种移植临床前研究的最新进展作一综述,希望能为相关研究者提供一些参考.     

异种移植的细胞免疫排斥反应

现代外科技术和免疫抑制治疗的发展,使同种器官移植受体的存活时间越来越长,而供体短缺成为阻碍同种移植发展的首要难题.开展异种移植研究,用来源广泛且功能完备的动物器官代替人体器官进行移植治疗,是解决供体短缺的有效方法[1].猪的繁殖速度快,各项生理指标与人类近似,且伦理学争论较小,因而目前大多数研究者倾向将小型猪作为异种器官移植研究的供体[2].然而,以猪作为供体的异种移植术后存在免疫排斥反应、生理屏障及潜在交叉感染三大问题,其中免疫排斥反应是目前困扰异种器官移植发展的最主要问题.随着α-1,3-半乳糖基转移酶基因敲除猪和转染人补体调节蛋白编码基因小型猪的成功克隆,异种移植的超急性排斥反应已基本解决,但以细胞免疫应答为主的急性排斥反应仍是异种器官移植应用于临床之前必须克服的免疫障碍.参与异种急性排斥反应的免疫细胞种类繁多,发生机制复杂,目前尚缺乏有效的防治手段.本文就异种急性细胞排斥反应的研究进展进行评述,希望为异种器官移植的临床研究提供参考.     

猪作为异种移植器官供者的研究近展

器官移植已成为救治多种器官功能衰竭患者有生命的有效措施之一,而临床上器官来源严重不足。现有研究资料表明,猪因其器官的大小、生理特征等最为适合作为人体异种器官移植的供者,其主要障碍是人体预存的天然抗体与猪器官细胞表面抗原结合,激活补体,引发超急性排斥,克服这种障碍的研究目前主要集中于受者修饰和供者修饰两方面,后者主要是繁殖转基因猪,使得不表达或少量表达与天然抗体结合的抗原,或使转基猪表达人体补体抑制蛋白,抑制补体活化,防止发生超急性排斥。     

异种抗原及相关策略在异种移植的研究进展

异种抗原在异种移植免疫排斥反应中发挥重要作用。单纯针对异种抗原的策略 ,可抑制或减轻排斥反应得到完全基因工程动物是异种移植成的最佳途径。本文就异种抗原的实质、分布和作用进行了介绍 ,并综述了针对异种抗原的各种策略及研究趋势     

补体系统在异种移植中作用的研究进展

补体系统在异种移植超急性排斥反应中的作用已基本被阐明。通过转基因方法使猪血管内皮细胞表达人补体调节蛋白，可以避免发生异种移植超急性排斥反应。但移植过程中的缺血再灌注损伤却不可避免，补体介导的血管内皮细胞激活可以引起急性血管性排斥反应，并影响移植物的长期存活。本文就补体系统在异种移植领域的研究进展作一综述。     

异种移植免疫排斥的研究进展

异种移植是解决人体器官严重短缺的重要思路.随着对异种移植排斥和人畜共患感染性疾病的深入研究,以及α-1,3-半乳糖苷转移酶基因敲除猪的成功构建,以猪为供体的异种移植与临床应用之间的距离正在逐渐缩短.阻碍异种移植发展的主要障碍仍是免疫排斥反应.本文试就目前异种免疫排斥的研究进展进行综述,希望对未来的临床异种移植研究提供参...     

补体系统在异种移植中作用的研究进展

补体系统在异种移植超急性排斥反应中的作用已基本被阐明。通过转基因方法使猪血管内皮细胞表达人补体调节蛋白,可以避免发生异种移植超急性排斥反应。但移植过程中的缺血再灌注损伤却不可避免,补体介导的血管内皮细胞激活可以引起急性血管性排斥反应,并影响移植物的长期存活。本文就补体系统在异种移植领域的研究进展作一综述。     

异种移植的研究进展

目的总结异种移植的研究现状与进展。方法复习国内外关于异种移植研究的相关文献并进行综述。结果超急性异种排斥反应是异种移植面临的巨大问题,器官或组织的供体经过基因修饰后,在一定程度上可以减轻超急性异种排斥反应。由于不同的器官具有不同的特性,目前异种器官移植移植物的存活时间存在较大差异。结论通过对相关异种移植实验研究的分析,可以全面地了解异种移植的研究背景,为异种移植提供合适的研究方向。将经基因修饰的动物作为异种器官或组织的供体,有望使移植物避免或减轻超急性异种排斥反应。     

克服异种移植免疫排斥的研究进展

目的 综述克服异种移植免疫排斥的方法.方法 广泛查阅近年国内外克服异种移植免疫排斥的相关文献,并进行总结与分析.结果 目前对异种移植免疫排斥机制和分子生物学技术的研究,为解决异种移植免疫排斥提供了新的思路.结论 异种器官移植应用于临床仅是时间问题.     

五指山小型猪近交系异种移植产业化研发进展

为了早日实现五指山小型猪（WZSP）近交系异种移植产业化目标,努力推进近交繁育获得近交系,同时开展克服异种移植免疫排斥和猪内源性逆转录病毒（PERV）传染生物安全性两大难题的研发内容。本文从WZSP近交系双基因敲除克隆猪繁育成功、猪-猴异种角膜内皮移植取得突破性进展、WZSP近交系PERV无传染性群体建立、WZSP近交系是理想的动物模型和异种移植供体等方面,介绍WZSP近交系异种移植产业化的研发进展。     

异种胰岛移植研究进展

对于1型糖尿病(胰岛素依赖型糖尿病),使用胰岛素治疗虽能有效控制血糖,但不能防止其并发症的发生与发展。胰腺移植存在着创伤大、并发症多和供者不足等缺点,而胰岛移植较胰腺移植具有简单、安全、不良反应轻等优点,仅需占胰腺2%的B细胞即可控制血糖。然而,临床同种胰岛移植的开展受到供者严重短缺和移植物排斥反应的限制。异种胰岛来源广泛,特别是猪胰岛,可以解决供者来源短缺的问题。近年来,随着免疫隔离技术和免疫耐受技术的进展,使异种胰岛移植成为可能。     

不同理化方法处理异种肌腱移植的动物实验

异种肌腱移植的动物实验已在国外悄然兴起 ,有成功也有失败的报告[1 ,2 ] 。为验证异种肌腱移植的可行性 ,我们选用山羊四肢肌腱为供移植肌腱 ,作不同处理后修复家兔跟腱缺损 ,进行生物力学、免疫组织化学及组织学检查。一、材料与方法1 .实验动物 :移植肌腱供体动物 :山羊 2只 (雌雄各 1只 ) ,体重分别为 2 8.5ｋｇ和 34 .0ｋｇ。取其四肢肌腱后分为 4等份 ,分别进行以下处理 :(1 )含庆大霉素生理盐水浸泡 1ｈ作为新鲜移植 ;(2 )置于 - 80℃低温冰箱冷冻 2 4ｈ;(3)ＣＭ液(含乙二胺四乙酸、碘乙酸、叠氮钠各0 .0 1ｍｏｌ/Ｌ)浸出 ;(4) 0 .2 …