不同理化因素对人芽囊原虫体外存活的影响

目的观察不同理化因素对人芽囊原虫体外生存和发育的影响. 方法将人芽囊原虫感染者新鲜粪便定量分成若干份,分装于有盖小平皿中,设自然因素及常用消毒剂试验组,用直接涂片法镜检,以原虫数量和细胞活度为指标,观察自然因素（温度、湿度、紫外线、渗透压）和化学消毒剂（HCl、酒精、碘酒、新洁而灭）组人芽囊原虫的生长发育情况,记录实验结果并照像. 结果低温、高温、干燥及消毒剂均可致人芽囊原虫数量减少,细胞活度降低,而紫外线照射和低渗对原虫数量和细胞活度无明显影响. 结论低温、高温、干燥和常用消毒剂对体外人芽囊原虫有抑制或杀灭作用.     

人芽囊原虫研究的一些进展

人芽囊原虫(Blaslocystis hominis)于1912年被正式命名以来,长期被误认为是一种对人体无害的肠道酵母菌。近年来,认为人芽囊原虫是一种广泛寄生于人体和灵长类动物肠道内的寄生原虫,1990年何建国等在广州地区从婴儿腹泻粪便标本中检出我国第1例人芽囊原虫,并对该虫进行了体外培养、超微结构观察、临床治疗的体外     

3种培养基体外培养人芽囊原虫的效果观察

目的　观察人芽囊原虫在 3种培养基中的生长繁殖情况 ,以探讨最佳的培养方法。　方法　从大学生粪便中分离人芽囊原虫 ,转种至 3种不同培养基 ,定时观察人芽囊原虫的生长繁殖情况 ,根据原虫密度评价培养效果。　结果培养 96h后 ,Locke’s鸡蛋血清 (LES)双相培养基中的人芽囊原虫密度最高 ,改良Jones单相液体培养基次之 ,Locke’s琼脂血清 (LAS)双相培养基原虫密度最低 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;观察 3种培养基中的原虫密度高峰持续时间分别为 3 60h、96h和 72h ,最长存活时间分别为 5 5 2h、3 3 6h和 168h。　结论　Locke’s鸡蛋血清双相培养基较适用于人芽囊原虫体外增殖培养。     

人芽囊原虫在不同培养基中生长状况的观察

目的筛选培养人芽囊原虫的最适培养基。方法将同一株人芽囊原虫阳性粪便标本以2×105细胞/管接种至RPMI1640、199和LES培养基中,加入20%小牛血清及青、链霉素,pH值为7.5,放置厌氧罐中于37℃恒温培养,每24h计数,每6d转种1次。观察人芽囊原虫在3种培养基中的存活时间、虫体密度和虫体形态。结果人芽囊原虫在RPMI1640培养基中存活时间最长、虫体密度最高,虫体以空泡型多见;在LES培养基中存活时间最短、虫体密度最低,但虫体形态清晰、规则;在199培养基中存活时间和虫体密度均介于前两者之间。结论RPMI1640培养基适宜人芽囊原虫的生长繁殖,为人芽囊原虫体外培养的首选培养基;LES培养基中虫体形态清晰、规则,可用于人芽囊原虫的形态学研究;199培养基也可用于人芽囊原虫的体外培养,但不作为首选。     

人芽囊原虫保存方法的初步研究

目的 观察冻存剂、温度等因素对人芽囊原虫活力的影响，探索理想的人芽囊原虫保存方法。 方法 从患者阳性粪便中分离人芽囊原虫，分装到2 ml无菌冻存管内，分别加入10%二甲基亚砜（dimethylsulfoxide, DMSO）、40%丙三醇（GL）和15%乙二醇（EG）作冻存剂，放置于不同的温度下保存，用台盼蓝染色法和原虫培养法测定细胞的活力和增殖能力。 结果 虫体在室温（18 ℃～20 ℃）下可存活3周，在4 ℃～6 ℃存活不到1周。加入冻存剂后，置－20 ℃和液氮（－196 ℃）下可存活3个月以上。用40% GL作冻存剂，于液氮低温下冻存的虫体保存半年后复苏， 活力仍达41.7%，培养72 h后多见分裂相细胞。 结论 应用40% GL作为冻存剂， 在液氮中低温保存人芽囊原虫效果较佳。 4 ℃不适于保存人芽囊原虫。     

云南腾冲人类免疫缺陷病毒携带者人芽囊原虫感染的流行病学特征及影响因素分析

目的了解云南腾冲市人类免疫缺陷病毒(HIV)携带者人芽囊原虫感染的流行病学特征、基因型分布及影响因素。方法采用横断面调查的方法在云南省腾冲市某二级甲等医院收集HIV携带者的粪样,提取粪样人芽囊原虫DNA,PCR扩增人芽囊原虫小亚基核糖体RNA(SSU-RNA)基因,对PCR阳性者测序确认,并构建进化树进行基因分型。采用调查问卷收集研究对象基本信息,采用单因素和logistic回归分析HIV携带者人芽囊原虫感染的影响因素。结果共收集HIV携带者粪样324份。PCR结果显示,12份粪样扩增出人芽囊原虫SSU-RNA基因的目的条带,大小约1 100 bp,人芽囊原虫检出率为3.7%。进化树基因分型结果显示,ST1型、ST3型、ST4型、ST7型、ST12型人芽囊原虫感染者分别为3、2、3、3、1例。单因素分析结果显示,与HIV携带者人芽囊原虫感染有关的影响因素为日常饮用水类型(χ~2=4.398,P0.05)、家中饲养家畜(χ~2=7.448,P0.05)、经常性接触动物(χ~2=6.276,P0.05)、CD4~+细胞计数(χ~2=4.414,P0.05)和HIV-RNA病毒载量(χ~2=11.829,P0.05)。Logistic回归分析结果显示,日常直接饮用自来水(χ~2=6.595,P0.05)、家中饲养家畜(χ~2=6.740,P0.05)、CD4~+细胞计数≤500个/μl(χ~2=3.864,P0.05)、HIV-RNA病毒载量50 copies/ml(χ~2=9.561,P0.05)是HIV携带者感染人芽囊原虫的危险因素。结论云南腾冲市HIV携带者人芽囊原虫感染率为3.7%,其基因分型有5型,日常直接饮用自来水、家中饲养家畜和免疫功能低下是HIV携带者感染人芽囊原虫的主要影响因素。     

赣州市人芽囊原虫感染的流行病学调查分析

目的 了解赣州市人芽囊原虫病流行情况.方法 随机抽取江西省赣州市5个县(市)20个调查点,调查不同人群、6种家禽家畜人芽囊原虫感染率,粪检采用生理盐水涂片法.采集生活污水饮用水及自然水源水样,用自然沉淀法查人芽囊原虫污染程度.结果 共检查不同人群1336人,查出人芽囊原虫感染99人,感染率为7.41%.采集5种家禽家畜粪便628份,查出人芽囊原虫67份,平均感染率为10.67%.调查3种水体标本304份,阳性11份,占3.62%.结论 赣州市人群与6种家禽家畜均存在人芽囊原虫感染,3种水体均受到人芽囊原虫污染.     

芽囊原虫致病机制的研究进展

芽囊原虫(Blastocystis)是常见的寄生于人和动物肠道的原生生物,但它是否具有致病性一直存在争议。临床调查发现,芽囊原虫感染与肠易激综合征(irritable bowel syndrome, IBS)、炎症性肠病(inflammatory bowel disease, IBD)以及免疫功能低下相关。芽囊原虫通过粪-口传播,主要寄居部位是盲肠和结肠,且芽囊原虫感染能引起细胞因子(IFN-γ、IL-12和TNF-α)上调及不同程度的肠道病理变化,但其致病机制尚不明确。近年来许多体外研究提出了芽囊原虫的几种致病机制,包括降解紧密连接蛋白引起肠上皮细胞通透性增加、细胞凋亡、上调肠道上皮细胞内的促炎细胞因子以及下调诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)。本文就芽囊原虫致病机制的最新研究进行综述。     

安徽阜阳HIV阳性者合并人芽囊原虫感染及其影响因素分析

目的 了解安徽省阜阳市HIV阳性者合并人芽囊原虫感染情况及其影响因素。方法 采用横断面调查的方法对安徽省阜阳市开发区309名HIV阳性者进行问卷调查, 并采集其粪便和血液样本用于人芽囊原虫、 CD4+ T淋巴细胞和细胞因子检测。采用单因素分析和Logistic回归分析对影响HIV和人芽囊原虫合并感染的因素进行分析。结果 在309名参与调查的HIV阳性者中, 302人参与粪样检测, 286人参与问卷调查, 同时参与2项检测者263人。调查发现, HIV阳性者合并人芽囊原虫感染率为17.11%, 其中女性感染率为21.90%, 明显高于男性 （11.90%）（P < 0.05）。在HIV合并人芽囊原虫感染影响因素Logistic回归模型分析中, 仅营养状况良好 （OR = 0.263, 95% CI： 0.073,0.945） 有统计学意义。结论 HIV阳性者合并人芽囊原虫感染率较高, 营养状况好坏可能是影响合并感染的原因之一。     

人芽囊原虫的形态观察及致病性研究

为探讨人芽囊原虫的形态及其致病性,采用３０°斜面鸡蛋培养基对人芽囊原虫进行体外培养,在光学显微镜和扫描电镜下观察其形态和致病性。在形态观察中可见空泡型、阿米巴型和颗粒型 ３ 种形态,并证实有出芽生殖和颗粒形虫体增殖现象。以不同数量培养４８ ｈ 的圆形空泡型虫体感染小白鼠观察其致病性。结果显示, Ｄ 组（空白对照组）和 Ａ 组（感染数为 １０４ ／只）在肠粘膜上未发现虫体; Ｂ组（感染数为２０４ ／只）和 Ｃ组（感染数为 ３０４ ／只）在肠粘膜上发现虫体并能够致肠粘膜损伤,提示对肠粘膜损伤的轻重程度与人芽囊原虫感染数量有关。     

3种培养基中芽囊原虫生长状况观察

目的观察芽囊原虫在不同培养基中的生长状况,筛选合适的芽囊原虫培养方法。方法将10份芽囊原虫阳性粪便分别接种至Jone’s液、vitro液、1640 3种培养基中培养,选取生长情况良好、虫密度高的一份粪便传代培养后等量接种至3种不同的培养基中,每24 h计数虫体数量一次,连续观察10 d,并观察芽囊原虫的形态学变化和生长情况。结果10份粪便分别接种至3种培养基中培养,48 h后发现1640和Jone’s液中的虫密度高于vitro液。同一份粪便接种至3种不同培养基中连续观察10 d,结果表明3种培养基中虫体生长呈规律变化,均在接种后3、6、9 d出现生长高峰;Jone’s液中芽囊原虫密度最高。vitro液中观察到的虫体形态最清晰,且富有活力;Jone’s液中能观察到虫体多种繁殖状态。结论Jone’s液适于芽囊原虫的生长繁殖,可作为首选培养基;vitro液可作为观察芽囊原虫生长情况的首选培养基。     

Evidence of waterborne transmission of Blastocystis hominis

A cross-sectional study was performed in February 2001 to evaluate the prevalence and risk factors of Blastocystis hominis infection in army personnel who resided in an army base in Chonburi, Thailand. A total of 904 army personnel were enrolled in this study. Short-term in vitro cultivation was used to detect B. hominis in stool samples. In this population, B. hominis was the parasite most frequently found, and was identified in 334 of 904 stool specimens (36.9%). A significant association between B. hominis infection and symptoms was identified that might emphasize the role of B. hominis as a human pathogen. After adjustment for potential confounders, significantly increased risk of being infection with B. hominis was associated with being a private, working in a specific unit, and consuming unboiled drinking water. Thus, waterborne transmission of B. hominis infection was indicated at this army base. However, other modes of transmission cannot be ruled out.     

Cytopathic effects of Blastocystis hominis on Chinese hamster ovary (CHO) and adeno carcinoma HT29 cell cultures

Blastocystis hominis isolates from asymptomatic carriers and symptomatic patients were cultured in vitro , purified from the co-cultivated bacterial flora and tested for cytopathic effects on monolayers of Chinese Hamster Ovary (CHO) cells and Adeno Carcinoma HT29 cells. In the case of the CHO cells, living B. hominis cells and B. hominis cell lysates were able to cause significant cytopathic effects, which were dependent on the concentration of cells employed. Destruction of the cell monolayers was observed to the same extent with patient isolates derived from healthy or symptomatic B. hominis carriers. HT29 cells were less susceptible: B. hominis cells and cell lysates caused only minor effects which were not statistically significant. Culture filtrates of B. hominis exhibited cytopathic potential on CHO and HT29 cells; however, the control which consisted of filtrates from Robinson's cultures in which B. hominis failed to grow showed similar effects, too. Therefore the culture supernatants could not be proven to produce a specific cytopathic effect on CHO and HT29 cells.     

安徽省阜阳市HIV/AIDS患者人芽囊原虫感染 流行特征及危险因素

目的　调查安徽省阜阳市HIV/AIDS患者人芽囊原虫感染情况及其危险因素。方法　2016年采用横断面调查方法对安徽省阜阳市HIV/AIDS感染者进行问卷调查，收集调查对象一般人口学信息、社会经济状况、生产生活方式信息。采集调查对象粪便，通过PCR方法检测粪便基因组中人芽囊原虫DNA以判定感染状况；同时采集调查对象血液，检测其中CD4+T淋巴细胞数量和HIV病毒载量。采用单因素分析和多因素logistic回归分析对HIV/AIDS患者人芽囊原虫感染的危险因素进行分析。结果　本研究共招募398名HIV/AIDS病例，平均年龄为49.3岁、平均体重为55.9 kg、平均身高为164.4 cm。人芽囊原虫感染率为6.78%，不同性别（[χ2] = 1.589，P = 0.207）、受教育程度（[χ2] = 0.508，P = 0.776）、婚姻（[χ2] = 0.419，P = 0.811）和职业（[χ2] = 2.744，P = 0.615）患者感染率差异均无统计学意义。人芽囊原虫感染者和非感染者年龄（t = 0.370，P = 0.712）、身高（t = 1.587，P = 0.113）、体重（t = 0.516，P = 0.606）、CD4+ T淋巴细胞数量（t = 1.187，P = 0.230）和HIV病毒载量（t = 0.193，P = 0.496）差异均无统计学意义。饮用非自来水[OR = 6.554， 95% CI：（1.876，22.903）]和养狗[OR = 5.895，95% CI：（2.017，17.225）]是HIV/AIDS患者感染人芽囊原虫的危险因素。结论　安徽省阜阳市HIV/AIDS患者人芽囊原虫感染率较高，饮用非自来水和养狗是该人群人芽囊原虫感染的危险因素。     

安徽省阜阳市HIV/AIDS患者人芽囊原虫感染 流行特征及危险因素

目的　调查安徽省阜阳市HIV/AIDS患者人芽囊原虫感染情况及其危险因素。方法　2016年采用横断面调查方法对安徽省阜阳市HIV/AIDS感染者进行问卷调查,收集调查对象一般人口学信息、社会经济状况、生产生活方式信息。采集调查对象粪便,通过PCR方法检测粪便基因组中人芽囊原虫DNA以判定感染状况;同时采集调查对象血液,检测其中CD4+T淋巴细胞数量和HIV病毒载量。采用单因素分析和多因素logistic回归分析对HIV/AIDS患者人芽囊原虫感染的危险因素进行分析。结果　本研究共招募398名HIV/AIDS病例,平均年龄为49.3岁、平均体重为55.9 kg、平均身高为164.4 cm。人芽囊原虫感染率为6.78%,不同性别（[χ2] = 1.589,P = 0.207）、受教育程度（[χ2] = 0.508,P = 0.776）、婚姻（[χ2] = 0.419,P = 0.811）和职业（[χ2] = 2.744,P = 0.615）患者感染率差异均无统计学意义。人芽囊原虫感染者和非感染者年龄（t = 0.370,P = 0.712）、身高（t = 1.587,P = 0.113）、体重（t = 0.516,P = 0.606）、CD4+ T淋巴细胞数量（t = 1.187,P = 0.230）和HIV病毒载量（t = 0.193,P = 0.496）差异均无统计学意义。饮用非自来水[OR = 6.554, 95% CI：（1.876,22.903）]和养狗[OR = 5.895,95% CI：（2.017,17.225）]是HIV/AIDS患者感染人芽囊原虫的危险因素。结论　安徽省阜阳市HIV/AIDS患者人芽囊原虫感染率较高,饮用非自来水和养狗是该人群人芽囊原虫感染的危险因素。     

重庆市江津区社区医院住院人群人芽囊原虫感染情况及其影响因素分析

目的　了解重庆市江津区住院人群人芽囊原虫感染情况及其影响因素。方法　采用横断面调查的方法对重庆市江津区某社区医院住院人群进行问卷调查，并采集粪便和血液样本，进行镜检和PCR检测。采用单因素分析和logistic回归分析对人芽囊原虫感染的影响因素进行分析。结果　共调查198名住院患者，人芽囊原虫感染率为10.61%（21/198），女性感染率（12.10%）高于男性（8.11%），但差异无统计学意义。10 ~ 20岁年龄组感染率最高，为19.23%；其次为60岁以上年龄组，为17.74%；20 ~ 40岁年龄组患者感染率最低，为2.38%；不同年龄组患者人芽囊原虫感染率差异有统计学意义（[χ2] = 9.538，P = 0.035）。家庭厕所为旱厕的患者人芽囊原虫感染率显著高于家庭厕所为水冲厕所的患者（33.30%和9.10%；[χ2] = 4.908，P = 0.027）。感染的人芽囊原虫基因型有ST1、ST3、ST6和ST7 4种基因型，以ST6和ST3型为主，分别占47.62%（10/21）和38.10%（8/21）；其中男性感染的基因型仅有ST3型和ST6型。多因素logistic回归分析结果显示，家庭中是否饲养宠物是影响人芽囊原虫感染的重要因素之一[OR = 3.798，95% CI（1.245，11.581），P < 0.05]。结论　重庆市江津区社区住院人群人芽囊原虫感染率较高，主要基因型为ST6型和ST3型，饲养宠物可能是影响人芽囊原虫感染的主要因素之一。     

重庆市江津区社区医院住院人群人芽囊原虫感染情况及其影响因素分析

目的　了解重庆市江津区住院人群人芽囊原虫感染情况及其影响因素。方法　采用横断面调查的方法对重庆市江津区某社区医院住院人群进行问卷调查,并采集粪便和血液样本,进行镜检和PCR检测。采用单因素分析和logistic回归分析对人芽囊原虫感染的影响因素进行分析。结果　共调查198名住院患者,人芽囊原虫感染率为10.61%（21/198）,女性感染率（12.10%）高于男性（8.11%）,但差异无统计学意义。10 ~ 20岁年龄组感染率最高,为19.23%;其次为60岁以上年龄组,为17.74%;20 ~ 40岁年龄组患者感染率最低,为2.38%;不同年龄组患者人芽囊原虫感染率差异有统计学意义（[χ2] = 9.538,P = 0.035）。家庭厕所为旱厕的患者人芽囊原虫感染率显著高于家庭厕所为水冲厕所的患者（33.30%和9.10%;[χ2] = 4.908,P = 0.027）。感染的人芽囊原虫基因型有ST1、ST3、ST6和ST7 4种基因型,以ST6和ST3型为主,分别占47.62%（10/21）和38.10%（8/21）;其中男性感染的基因型仅有ST3型和ST6型。多因素logistic回归分析结果显示,家庭中是否饲养宠物是影响人芽囊原虫感染的重要因素之一[OR = 3.798,95% CI（1.245,11.581）,P < 0.05]。结论　重庆市江津区社区住院人群人芽囊原虫感染率较高,主要基因型为ST6型和ST3型,饲养宠物可能是影响人芽囊原虫感染的主要因素之一。     

The effects of salt concentration and growth phase on MRSA solar and germicidal ultraviolet radiation resistance

The extensive use of antimicrobial drugs has led to the widespread emergence of resistant bacterial strains. One such organism, methicillin-resistant Staphylococcus aureus, is now found extensively in both healthcare facilities and diverse community settings such as households, correctional facilities, and athletic teams. The importance of ultraviolet radiation as an adjunctive therapy to reduce bioburden and improve wound status in patients has been documented. An in vitro study to assess the effects of different types of ultraviolet radiation on antibiotic-resistant strains was conducted to provide information that will aid in the development of rational UV irradiation medical protocols. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus was found to be sensitive to both germicidal (ultraviolet C) and solar (ultraviolet A and B) ultraviolet radiation (ultraviolet C substantially more lethal). For both types of ultraviolet radiation, as the medium concentration of sodium chloride increased, the methicillin-resistant Staphylococcus aureus cells exhibited increased sensitivity. It also was shown for both types of ultraviolet radiation that kill curves were comparable for log and stationary phase methicillin-resistant Staphylococcus aureus cells. Photoreactivation was observed for Pseudomonas aeruginosa PAO-1 but not for methicillin-resistant Staphylococcus aureus when ultraviolet C was applied to log phase cells. The Gram-negative Pseudomonas aeruginosa PAO-1 was considerably more sensitive than the Gram-positive methicillin-resistant Staphylococcus aureus to ultraviolet C radiation. The experiments reveal that medium composition exerts a substantial effect on methicillin-resistant Staphylococcus aureus ultraviolet resistance and that this species lacks photoreactivation capacity. This suggests that in a clinical setting, eradication of the bacterium may be achieved at far lower doses of ultraviolet radiation than would be indicated by treatment protocols that do not account for ionic conditions.