miR-146a介导PI3K/Akt信号通路抑制肝星状细胞诱导的肝纤维化

目的探讨微小RNA(miR)-146a在转化生长因子-β1 (TGF-β1)诱导的肝星状细胞活化中的作用,并通过磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)通路观察其对肝纤维化的影响。方法采用四氯化碳(CC1_4)建立肝纤维化大鼠模型,检测大鼠血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)和Ⅰ型胶原(Ⅰ-C)水平,Masson染色观察肝组织病变,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测肝组织miR-146a表达,蛋白免疫印迹实验(Westem blot)检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、PI3K和磷酸化(P)-Akt蛋白表达。HSC (肝星状细胞)-T6细胞分为Normal组、TGF-β1组、TGF-β1+miR-NC组和TGF-β1+miR-M组。TGF-β1+miR-NC组和TGF-β1+miR-M组分别转染miR-146a mimics阴性对照物和miR-146a mimics,然后除Normal组外,其余各组采用TGF-β1诱导HSC-T6细胞。四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察细胞增殖情况,Real-time PCR法检测miR-146a表达,Western blot法检测α-SMA、Ⅲ-C、Ⅰ-C、PI3K和p-Akt蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠肝组织胶原沉积明显增加,纤维增生显著;血清HA、LN、PCⅢ和Ⅳ-C水平显著升高;肝组织miR-146a表达明显降低;而PI3K和P-Akt蛋白表达明显增加。TGF-β1组和TGF-β1+miR-NC组HSC-T6细胞各指标差异均无统计学意义。与TGF-β1+miR-NC组比较,TGF-β1+miR-M组miR-14表达明显增加,细胞活性、α-SMA表达、Ⅲ-C和Ⅰ-C均明显降低,PI3K和P-Akt蛋白表达明显下调。结论 miR-146a能够抑制TGF-β1诱导的肝星状细胞活化,其抗肝纤维化机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路有关。     

肝复康对PDGF介导的肝星状细胞信号转导的分子机制

目的：通过观察中药肝复康含药血清对肝星状细胞（HSC-T6）细胞株Ⅰ、Ⅲ型胶原、α-SMA基因表达的影响。探讨其抗纤维化的作用机制。方法: 常规方法制备肝复康含药血清，并用不同浓度肝复康含药血清干预HSC-T6细胞株，以逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）观察分析Ⅰ、Ⅲ型胶原、α-SMA mRNA表达的变化。以Western blotting检测ERK蛋白在不同干预情况下的表达。结果: 经肝复康含药血清处理，可下调HSC-T6细胞株Ⅰ、Ⅲ型胶原、α-SMA mRNA表达以及ERK蛋白表达水平，不同浓度含药血清作用强度也有所不同。结论: 中药肝复康对肝纤维化具有明显的抑制作用，其作用机制可能是通过非特异性干扰PDGF功能，抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原、α-SMA mRNA的转录，以达到抗纤维化的作用。     

氯喹对体外活化肝星状细胞自噬与胶原代谢的影响

目的:研究不同浓度的自噬抑制剂氯喹(CQ)对活化的大鼠肝星状细胞系HSC-T6中Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响及可能机制。方法:应用转化生长因子β1(TGF-β1)活化HSC-T6细胞,给予CQ干预24 h。实验分组为:control组、TGF-β1组、TGF-β1+CQ(15μmol/L)组、TGF-β1+CQ(30μmol/L)组和TGF-β1+CQ(60μmol/L)组。采用Western blot技术检测微管相关蛋白轻链3(LC3)比值LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、自噬靶蛋白P62、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、基质金属蛋白酶13(MMP-13)、金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)和TIMP-2的表达情况;免疫细胞化学检测Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达;RT-q PCR检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、MMP-13、TIMP-1和TIMP-2mRNA的表达变化。结果:CQ干预后LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值明显升高且呈剂量依赖性;P62蛋白表达TGF-β1+CQ组均显著高于TGF-β1组(P0.01)。TGF-β1组的Ⅰ、Ⅲ型胶原表达量较control组显著增加,TGF-β1+CQ组较TGF-β1组也有明显增加。α-SMA的表达在TGF-β1组和TGF-β1+CQ组均显著高于control组(P0.05),而TGF-β1组和TGF-β1+CQ各组之间无显著差异。MMP-13表达在TGF-β1+CQ组较TGF-β1组显著下降(P0.05);TIMP-1和TIMP-2在TGF-β1+CQ组较TGF-β1组显著升高(P0.05),且呈剂量依赖性。结论:自噬抑制剂CQ能显著增加HSC-T6细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达并呈剂量依赖性,这可能与其上调TIMP-1及TIMP-2的表达并抑制MMP-13表达有关。     

缺氧在肝星状细胞激活中的作用机制

目的:探讨缺氧在肝星状细胞(HSC)激活中的作用机制.方法:缺氧培养大鼠HSC株HSC-T6,逆转录PCR检测HIF-1α、TGF-β1、Ⅰ型胶原mRNA的表达,Westren blot检测α-SMA表达.缺氧/常氧下,加TGF-β1中和抗体、HIF-1α诱导剂氯化钴(CoCl2)或抑制剂2-甲氧雌二醇(2ME2),逆转录PCR检测HSC-T6表达Ⅰ型胶原mRNA的变化.结果:缺氧能诱导HSC-T6表达HIF-1α、TGF-β1、Ⅰ型胶原mRNA及α-SMA蛋白;常氧下CoCl2能诱导HSC-T6表达Ⅰ型胶原mR-NA,TGF-β1中和抗体及2ME2能减弱缺氧诱导HSC-T6表达Ⅰ型胶原mRNA,但表达量仍高于常氧培养.结论:缺氧能激活HSC,分泌Ⅰ型胶原,增加细胞外基质沉积,其作用机制既依赖于TGF-β的胞内信号传导机制,也与HIF-α介导的信号传导有关,在肝纤维化形成中起着举足轻重的作用.     

RNA干扰抑制肝星状细胞CTGF表达对细胞外基质分泌的影响

目的：利用pEGFP质粒载体构建介导结缔组织生长因子(CTGF)短发夹RNA表达的质粒，筛选有效的抑制序列后，研究其对HSC-T6中TGF-β₁、CTGF及细胞外基质表达的影响。方法:1.分别设计3对针对CTGF的有小发夹结构的两条DNA序列及1对非特异对照序列，构建重组体成功后转染HSC-T6，24 h后通过RT-PCR及Western blotting分析HSC-T6 CTGFmRNA及蛋白表达水平，筛选出有效抑制CTGF表达的序列。2.将已构建并筛选出有最高抑制效率的pEGFP-CTGFshRNA转染HSC-T6 ，培养24、48 h后用RT-PCR和/或Western blotting检测各组细胞中TGF-β₁、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原基因的表达;放免法分析细胞上清液中Ⅲ型前胶原、IV型胶原、透明质酸和层黏连蛋白的含量。结果:将构建成功的3组pEGFP-CTGFshRNA转染肝星状细胞后，筛选出两组能高效抑制CTGF表达的序列; pEGFP-CTGFshRNA能明显抑制HSC-T6 CTGF、Ⅰ型、Ⅲ型胶原mRNA及蛋白的表达，降低上清液中Ⅲ型前胶原、IV型胶原、透明质酸和层黏连蛋白的含量(P<0.01或P<0.05)，而对TGF-β₁的基因表达则无影响。结论:pEGFP-CTGFshRNA能高效抑制肝星状细胞中CTGF及细胞外基质的表达;CTGFshRNA介导的RNA干扰有望对慢性肝病所致肝纤维化具有治疗潜力。     

沙利度胺对大鼠TNBS结肠炎肠壁纤维化的影响及其机制

目的：探讨沙利度胺对大鼠2,4,6-三硝基苯甲酸（2,4,6-trinitrobenzene sulphonic acids,TNBS）结肠炎肠壁纤维化的影响及其机制。方法：将60只Sprague-Dawley大鼠随机分为正常组、模型组、治疗组及对照组,每组15只。除正常组外,其余各组给予TNBS灌肠诱导大鼠结肠炎模型后,治疗组每日给予沙利度胺灌胃。28d后处死所有大鼠取病变结肠组织,病理切片行HE染色及Masson染色,观察和评估结肠损伤及纤维化程度。Elisa及Western印迹检测TGF-β1,Ⅰ型及Ⅲ胶原,MMP-2,MMP-9及组织金属蛋白酶抑制剂（tissue inhibitors of metalloproteinases,TIMP-1）的表达水平。结果：与正常组相比,模型组大鼠结肠组织发生了明显的纤维化改变,TIMP-1,TGF-β1,Ⅰ型及Ⅲ胶原表达水平显著升高（均P〈O．05）;MMP-2及MMP-9蛋白的表达水平下降（均P〈O．05）。治疗组大鼠结肠纤维化程度较模型组显著改善,TIMP-1,TGF-β1,Ⅰ型及Ⅲ胶原水平较模型组下降（均P〈0．051;MMP．2及MMP-9蛋白水平较模型组升高（均P〈0．05）。与对照组相比,模型组上述指标差异无统计学意义（均P〉O．05）。结论：沙利度胺能够明显减轻大鼠TNBS结肠炎的肠壁纤维化程度,其主要作用机制是通过抑制TGF-β1的表达,从而抑制胶原的生成,并调节细胞外基质的生成降解平衡而达到抑制纤维化的作用。     

蓝莓对大鼠肝纤维化模型中转录因子KLF11表达的影响

目的:观察蓝莓对肝纤维化模型中抗纤维化转录因子Krüppel样因子11(KLF11)的影响,探讨其可能的机制。方法:40只健康同周龄SD大鼠被随机分为正常对照组、蓝莓对照组、模型组和蓝莓预防组,每组10只,使用四氯化碳制作肝纤维化模型。测定各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、Ⅳ型胶原、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、透明质酸(HA)和层粘连蛋白水平;Masson和HE染色对肝组织进行病理学检查;Western blot和免疫组织化学染色检测肝组织中KLF11的蛋白表达,Western blot检测肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达; real-time PCR检测肝组织中KLF11和Ⅰ型胶原(ColⅠ)的mRNA表达情况。结果:与正常对照组比较,模型组KLF11蛋白表达显著降低(P<0.01),而α-SMA蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,蓝莓预防组KLF11的mRNA表达显著升高(P<0.01)而ColⅠ的mRNA表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,其它各组大鼠血清ALT、AST、HA和PCⅢ水平...     

甘肃产藏药五脉绿绒蒿有效部位对肝纤维化疗效和TGF-β1表达的影响

目的:观察甘肃产藏药五脉绿绒蒿有效部位对肝纤维化大鼠TGF-β1表达的影响.方法:在给药的基础上,采用sc CCl4、喂饲高脂低蛋白复合饲料并饮用20％乙醇来复制肝纤维化动物模型,6周后对大鼠肝组织免疫组化染色,检测TGF-β1的表达,同时检测血清中AST、ALT和TGF-β1的水平以及肝组织中Hyp的含量.结果:复合因素肝纤维化造模结束后,与模型对照组比较,甘肃产藏药五脉绿绒蒿醇提物、黄碱组以及总黄酮能明显降低血清ALT、AST以及肝组织中Hyp与胶原蛋白的含量,显著降低血清与肝组织中TGF-β1的表达,同时发现总黄酮的作用有一定的量效关系.结论:甘肃产藏药五脉绿绒蒿醇提物及其中的总黄酮对CCl4复合因素诱导的肝纤维化大鼠具较好的保护作用,对TGF-β1表达的抑制作用可能是其作用机制之一.     

BMSCs调节TGF-β1/Smad通路对肝硬化大鼠免疫调节功能的作用研究

目的：探究BMSCs调节TGF-β1/Smad通路对肝硬化大鼠免疫调节功能的作用。方法：36只大鼠随机分为对照组、模型组和BMSCs组,每组12只。模型组和BMSCs组大鼠通过四氯化碳构建肝纤维化模型,BMSCs组大鼠尾静脉注射BMSCs(3×10~6个)。检测各组大鼠肝功能指标,HE和Masson染色检测肝组织损伤和纤维化情况,流式细胞术检测外周血中Th17细胞和Treg比例。Western blot、RT-qPCR检测胶原蛋白(Col)Ⅰ、ColⅢ、TGF-β1和Smad水平。结果：模型组大鼠ALT、AST、纤维化水平、肝组织ColⅠ、ColⅢ、TGF-β1和Smad mRNA和蛋白水平显著高于对照组(P<0.05)。BMSCs组ALT、AST、纤维化水平、肝组织ColⅠ、ColⅢ、TGF-β1和Smad mRNA和蛋白水平显著低于模型组(P<0.05)。模型组大鼠Th17细胞占比和Th17/Treg显著高于对照组,Treg水平显著低于对照组(P<0.05)。BMSCs组Th17水平和Th17/Treg显著低于模型组,Treg水平显著高于模型组(P<0.05...     

促红细胞生成素抑制TGF-β诱导的大鼠心肌成纤维细胞增殖

目的 探讨促红细胞生成素在大鼠心肌成纤维细胞(CFs)增殖中的作用.方法 培养大鼠CFs.实验分为对照组(control)、TGF-β刺激组(TGF-β终浓度为5μg/L)和重组人促红细胞生成素(rhEPO,5 000 U/L)干预组:1h后加入TGF-β.24 h后计数细胞并采用MTT法观察细胞增殖;免疫细胞化学及Western blot法检测α-SMA表达,观察细胞转化;羟脯氨酸定量检测细胞胶原含量;Western blot法检测细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及MMP-2、MMP-9表达.结果 与对照组比较,TGF-β使细胞明显增殖(P＜0.05),Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白合成(P＜0.05)、α-SMA表达(P＜0.05)、细胞MMP-2、MMP-9表达增多(P＜0.05).使用重组人促红细胞生成素(rhEPO)干预后,CFs增殖、α-SMA表达及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白合成较TGF-β组均显著降低(P＜0.05),MMP-2、MMP-9表达进一步增多(P＜0.05).结论 生理剂量EPO可抑制TGF-β诱导的大鼠CFs增殖、转化及胶原的合成,促进胶原降解.     

替米沙坦对2型糖尿病大鼠心肌保护作用及机制

目的探讨替米沙坦对2型糖尿病大鼠心肌的保护作用及细胞因子机制。方法30只雄性SD大鼠随机分为三组：正常对照组（C组）10只,糖尿病模型组（D组）10只,替米沙坦组（T组）10只,各组大鼠均在12周末结束实验。免疫组化方法检测心肌组织中TGF-β1,HGF蛋白及Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达。电镜观察左室心肌。结果与C组比较,D组心肌细胞内线粒体数目增多,肌原纤维灶性变性、溶解,肌原纤维间间隙增宽。与D组相比,T组心肌细胞内线粒体数目减少,肌原纤维灶性变性、溶解减轻。与C组比较,D组,T组TGF-β1,HGF,CollagenI和CollagenⅢ表达均显著升高（P〈0.01）。与D组相比,T组TGF-β1,CollagenI和CollagenⅢ表达均低于D组（P〈0.05）;T组HGF蛋白表达显著高于D组（P〈0.01）。结论替米沙坦能够改善糖尿病大鼠心肌超微结构,可能与降低心肌中TGF-β1蛋白,升高HGF蛋白表达有关。     

大鼠肝纤维化与microRNA-181a调控肝星状细胞自噬的关系

目的:观察四氯化碳(CCl4)诱导肝纤维化(HF)大鼠肝脏结构的改变、肝组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、微小RNA-181a(microRNA-181a)、自噬标志性蛋白LC3-II/-I和beclin-1水平及胶原沉积的变化,以及mi?croRNA-181a对TGF-β1诱导大鼠肝星状细胞(HSCs)自噬的作...     

肝卵圆细胞对肝纤维化大鼠肝组织TGF-β/Smad信号通路的影响

目的:探讨肝卵圆细胞(HOCs)对肝纤维化(HF)大鼠肝组织TGF-β/Smad信号通路蛋白表达的影响。方法:采用CCl4和复方因素制备HF大鼠模型,取模型组大鼠分离纯化HOCs,从门静脉植入HF大鼠肝组织内,连续观察30d,同时以五灵胶囊为阳性对照。在植入后8d、15d、23d、30d各组大鼠尾静脉采血,酶法测定血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT),实验结束取肝组织Masson染色观察肝组织形态学变化,Western blotting检测肝组织Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(ERK)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-ERK)、转化生长因子β受体Ⅰ(TβRI)、转化生长因子β受体Ⅱ(TβRⅡ)、果蝇MAD类似基因2/3(Smad2/3)、果蝇MAD类似基因7(Smad7)蛋白的表达。结果:HOCs植入组与五灵胶囊组在植入后15d、23d、30dAST、ALT水平显著降低;肝组织胶原纤维增生程度明显减轻;肝组织表达ERK、p-ERK、TβRI、TβRⅡ蛋白作用显著降低,表达Smad7的作用显著增加。结论:植入HOCs可阻止大鼠HF的进展,其作用机制可能与其抑制肝组织内TGF-β/Smad信号通路p-ERK、TβRⅠ、TβRⅡ蛋白的表达有关。     

病毒性肝炎患者血清中肝纤维化标志物的检测及分析

目的探讨病毒性肝炎患者血清中肝纤维化标志物的水平及意义。方法酶标法检测基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）和转化因子-β1（TGF-β1），放免法检测转化因子α（TGF-α）、透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、Ⅳ型胶原（C-Ⅳ）和层粘蛋白（LN）。结果病毒性肝炎患者血清中TIMP-1、HA、PCⅢ、C-Ⅳ和LN水平与对照组比较明显升高（P〈0.01）；MMP-1、TGF-β1，水平与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论病毒性肝炎患者血清中肝纤维化标志物中TIMP-1、HA、PCⅢ、C-Ⅳ和LN具有较好的临床价值，MMP-1、TGF-β1价值欠佳。     

护肝合剂对慢性乙型肝炎患者PBMC功能的影响

目的观察护肝合剂对慢性乙型肝炎患者肝功能、外周血单个核细胞（PBMC）功能的影响。方法治疗组50例．在一般治疗的基础上加用护肝合剂，对照组15例用甘草酸二胺氯化钠溶液、门冬氨酸鸟氨酸、灯盏花素等进行一般治疗。分离培养治疗前后外周血单核细胞，加入植物血凝素（PHA），培养48h后，1500r／min离心10min，收集上清液-20℃保存，统一检测IFN-y，IL-10含量。采用流式细胞仪检测治疗前后外周血CD8^＋CD28^＋T细胞亚群。结果治疗组谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST），黄疸指数（TBIL）复常率均明显优于对照组（P〈0．05，P〈0．01，P〈0．01）。治疗组治疗后IFN-y显著升高（P〈0．05），IL-10显著下降（P〈0．05），对照组升高不显著（P〉0．05）。CD8^＋CD28^＋T细胞亚群治疗组较对照组显著升高（P〈0．05），且治疗组治疗前后亦显著升高（P〈0．05）。结论护肝合剂能够改善肝功能，提高慢性乙型肝炎患者Th1细胞免疫。     

肝纤维化大鼠转化生长因子β1／Smad蛋白的动态表达及意义

目的探讨转化生长因子TGF—β1／Smad信号通路在实验性肝纤维化发生中的作用。方法50只健康雄性SD大鼠分为2组：正常组和模型组,模型组大鼠利用40％CCl4油剂诱导形成肝纤维化模型,于6周及9周观测肝标本的病理,免疫组化法检测肝组织TGF—β1／Smad蛋白表达。结果①肝组织病理：与正常组比较,模型组大鼠肝组织都有不同程度的炎症和纤维化产生。模型组纤维化程度较正常对照组明显,差异有统计学意义（P〈0．05）;②TGF—β1／Smad基因蛋白：免疫组织化学检测显示,与正常对照组相比,模型组大鼠肝脏中TGF—β1、转化生长因子βI型受体（TβR—I）、Smad2、3、Smad,蛋白表达均显著增强（P〈0．01）,模型组大鼠肝脏TGF—β1、TβR-I、Smad。和Smad,之间存在正相关关系（P〈0．05或0．01）;模型组大鼠肝脏纤维化分级与TGF—β1、TβR—I、Smad2/3和Smad,之间存在正相关关系（P〈0．05或0．01）。结论肝组织TGF—β1／Smad蛋白表达水平与肝纤维化程度相关,TGF-β1／Smad信号的增强可能促进了肝纤维化的进展。     

Ad-BMP-2和Ad-TGF-β1共转染人退变椎间盘髓核细胞对细胞外基质代谢的影响

目的探讨骨形态发生蛋白腺病毒表达载体（Ad—BMP-2）和转化生长因子-β1腺病毒表达载体（Ad—TGF—β1）共转染人退变椎间盘髓核细胞后对aggrecan和Ⅱ型胶原合成的影响。方法人退变椎间盘髓核细胞体外分离培养至第2代。为检测转入目的基因后蛋白表达情况,将其分为空白对照组、目的基因组和共转染组,细胞分别转染Ad—BMP-2（50MOI）、Ad-TGF-β1（50 MOI）及共转染（各50 MOI）,再用Western blot方法检测转染后细胞目的蛋白的表达;为探讨目的基因对细胞外基质代谢的影响,将研究对象分为空白对照组（A组）、Ad—BMP-2100 MOI（B组）、Ad-TGF—β1100 MOI（C组）、Ad-BMP-2和Ad-TGF—β1各50 MOI（D组）,用ELISA法分别检测转染第3天和第6天细胞上清液中aggrecan和Ⅱ型胶原的蛋白表达量。RT-PCR检测第6天髓核细胞内Ⅱ型胶原和aggrecan的mRNA的表达水平。应用方差分析比较组间差异,以P〈0．05表示差异有统计学意义。结果在转染目的基因载体后,目的蛋白表达增加。在转染后第3天和第6天各转染组细胞培养基中aggrecan和Ⅱ型胶原蛋白表达量高于对照组（P〈0．01）,与转染单个基因组相比,共转染组的aggrecan和Ⅱ型胶原蛋白表达量明显增加（P〈0．01）;并且在转染后第6天共转染组髓核细胞内aggrecan和Ⅱ型胶原mRNA表达也明显增加（P〈0．01）。结论转染Ad-BMP-2、Ad-TGF-β1能促进aggrecan和Ⅱ型胶原合成,同时上调aggrecan和Ⅱ型胶原mRNA的表达;共转染Ad-BMP-2和Ad-TGF-β1对细胞外基质的mRNA和蛋白合成有协同作用。     

穿心莲内酯对肺纤维化大鼠BALF中细胞因子和肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响

目的:探讨穿心莲内酯灌胃对博来霉素(BLM)致肺纤维化大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α、TGF-β1浓度和肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响。方法:取健康雄性SD大鼠90只,随机分为生理盐水(NS)组、BLM组、泼尼松(Pred)组、不同剂量穿心莲内酯组(即穿A组62.5mg/kg、穿B组125 mg/kg、穿C组250 mg/kg),各组大鼠15只,分别气管内灌注BLM(BLM组、Pred组、穿A组、穿B组、穿C组)或NS(NS组)后,每天给予NS(NS组、BLM组)、Pred(Pred组)或穿心莲内酯(穿A组、穿B组、穿C组)灌胃,各组分别于气管内灌注药物后第7、14、28天处死大鼠5只。用HE、Masson染色观察肺泡炎症和纤维化改变;实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应检测肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达;酶联免疫吸附试验测定BALF中TNF-α、TGF-β1浓度;同时监测肾功能指标血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)及肝功能指标血丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)。结果:肝肾功能监测显示:不同剂量穿心莲内酯组、NS组、BLM组、Pred组所监测的AST、ALT、BUN、Cr比较,差异无统计学意义(P>0.05)。NS组大鼠肺组织未发现肺泡间隔水肿、炎性细胞浸润和纤维化形成。BLM组第7天时肺泡腔内可见大量炎性细胞浸润,第14天时肺泡炎仍存在,但炎症细胞明显减少,肺泡间隔内成纤维细胞明显增多,肺泡结构破坏,肺泡隔增宽,第28天时炎症较前减轻,肺纤维化程度加重,部分肺泡腔消失,形成严重纤维化。穿A组病理形态改变与BLM组相似。Pred组、穿B组、穿C组大鼠第7天有较多的炎症细胞浸润及局部聚积,第14天和第28天的纤维化病理改变均较BLM组、穿A组明显减轻。NS组各个时间点BALF中TGF-β1、TNF-α含量均明显低于同时间点BLM组、Pred组、穿A组、穿B组、穿C组BALF中的浓度(P<0.05)。BLM组3个时间点BALF中TGF-β1、TNF-α含量较Pred组、穿B、穿C组高(P<0.05)。与BLM组比较,穿A组BALF中TGF-β1、TNF-α含量无统计学意义。NS组各个时间点肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达均明显低于同时间点BLM组、Pred组、穿A组、穿B组、穿C组肺组织中的表达(P<0.05)。BLM组3个时间点Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达较Pred组、穿B组、穿C组高(P<0.05)。与BLM组比较,穿A组肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达无统计学差异。结论:穿心莲内酯灌胃可减轻BLM致肺纤维化大鼠肺泡炎和肺纤维化程度,降低肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达,降低BALF中TNF-α、TGF-β1浓度,且对肝肾无明显毒副作用。