广东省弓形虫及弓形虫病研究

近20年来，广东省在弓形虫及弓形虫病研究作了不少工作。本从弓形虫在广东发现及生物学特性，弓形虫循环抗原及抗体检测，弓形虫核酸检测及虫株分子差异性，弓形虫基因的体外扩增，克隆，表达与免疫4个方面进行概括。     

小鼠淋巴细胞体外抗弓形虫作用的实验研究

目的：了解小鼠淋巴细胞体外抗御弓形虫速殖子的效果。方法：采用大鼠脾细胞培养技术，以乙酰螺旋霉素作为阳性对照，观察淋巴细胞本身以及加入扁桃酸(MA)后，对虫体侵入淋巴细胞及在淋巴细胞内增殖的影响。结果：与其他体细胞相比较，淋巴细胞在受到弓形虫侵害时，仍可抑制和杀灭弓形虫。当存在免疫作用的情况下，安全剂量的MA抑制弓形虫侵入的作用不显著，但抑制细胞内弓形虫增殖的作用显著。结论：以细胞介导的免疫作用是宿丰抗弓形虫感染的重要因素，因此，应注重提高机体的细胞免疫，同时加用药物，以增强机体抗虫的效果。     

心肺脑复苏步骤及药物治疗的新进展

传统的急救方法和用药习惯在临床治疗中常引起诸多不良反应,为了解决这些问题,目前对急危重患者所实施抢救的方法、用药习惯都逐步作出了修订或改进."2005心肺复苏指南"对上述问题又提出了进一步的建议,本文阐述了心肺脑复苏术的一些新规则及药物治疗的部分新进展、新观念,供同行参考.     

IL-2在体内抗弓形虫作用机制的研究

为观察ＩＬ－２在小鼠体内抗弓形虫中的作用,应用＾３Ｈ－尿嘧啶（＾３Ｈ－Ｕ）特异性标记的弓形虫在小鼠腹腔巨噬细胞（ＭＰＭ）内的增殖实验及＾１２５Ｉ－尿嘧啶核苷（＾１２５Ｉ－ＵｄＲ）标记的细胞毒实验,观察ＩＬ－２的抗弓形虫作用。结果：ＩＬ－２对ＭＰＭ的抗弓形虫作用及对ＩＦＮ－γ诱导的ＭＰＭ抗弓形虫作用无明显影响;ＩＬ－２体内应用可明显增强小鼠抗急性弓形虫感染的能力,延长小鼠生存时间;ＩＬ－２治疗组小鼠     

吞噬细胞活性氧在抗弓形虫中的作用

弓形虫是一种专性细胞内寄生原虫，也是最常见的机会性感染病原体之一。研究发现，吞噬细胞在宿主抗弓形虫感染的免疫方面起重要作用，其杀虫机制是通过释放活性氧对弓形虫细胞膜及大分子物质造成氧化损伤。本文介绍小鼠、大鼠及人类吞噬细胞杀灭弓形虫或抑制其增殖的机理。     

免疫金银染色法检测抗弓形虫抗体

免疫金银染色法检测抗弓形虫抗体张阳根解放军第１７５医院漳州３６３０００弓形虫病是一种广泛流行的人畜共患疾病，多数为隐性感染及临床症状的非典型性，使得其病原学诊断不易成功。目前常用的方法有ＥＬＩＳＡ．ＩＦＡＴ、ＩＨＡ等［１～３］，但都存在一定的局限性，...     

抗乙型肝炎病毒HDV核酶的研究新进展

乙型肝炎病毒(HBV)是严重威胁人类健康的一种病毒，特别是在我国约有1．2亿人为HBV携带者，占世界的1／3。对已感染HBV者，常用的化学及免疫疗法通常无效。今年来，研究者试图利用反义技术，通过在基因表达水平上抑制HBV的复制，来达到治疗HBV感染的目的。核酶是具有RNA裂解活性的RNA分子，能特异地结合并切割靶RNA分子。HDV核酶是唯一在人体细胞天然具有裂解活性的核酶类型，研究将HDV核酶作为HBV的反义抑制剂可能有着其独特的优势。本文就HDV核酶靶位点的筛选、病毒载体导入系统、靶向性分子的构建等热点问题的研究新进展予以综述。     

药物治疗扩张型心肌病的新进展

扩张型心肌病是引致心脏增大、心功能不全、心律失常等常见的原因之一．虽至今其病因仍不明，但随着检查技术的发展，诊断为扩张型心肌病的病人则越多，故对其病因的寻找、治疗方案的研究亦在积极的发展、β受体阻断剂、生长激素等能更有效地改善症状，其中β受体阻断剂更可能对可疑病因作出治疗，本文综述了扩张型心肌病各种药物治疗的新进展．     

广西1980—1995年弓形虫病的病原学和血清学研究

本文报告了１９８０年—１９９５年间广西人畜弓形虫病的病原学与血清学研究结果。从病人和病猪血液标本中分离出弓形虫株。分离率分别为３．０３％和１．６５％。弓形虫株的冷冻保存结果显示，在液氮中可保存２３０ｄ，普通冰箱（４℃）中１５ｄ，还具感染力。缓慢冻存和快速冻存弓形虫的复苏率分别为８９．２９％和３１．２５％。应用鸡胚制备弓形虫抗原和盐析法提纯小白鼠感染腹水抗原，作ＩＨＡ检测血清抗体，二者的符合率为１００％。共建立ＥＬＩＳＡ，ＴＳＳＥＩＳ、ＴＳＳＩＦＡ、ＩＨＡ和ＤＴ等５种实验诊断方法。ＥＬＩＳＡ法的敏感性和特异性最高，值得推广使用。应用ＩＨＡ对人畜血清标本进行弓形虫抗体调查，３１个县市居民１１２８１人中，抗体阳性率为５．７４％。男女间无明显差异，８０岁以上年龄组和５０岁年龄组的阳性率高于其他年龄组。此外对职业、民族和城乡分布也作了调查。调查３１个县市２４种动物共４９５３头，平均阳性率为１６．５２％，以猪、牛、鼠的阳性率较高。     

分子生物钟研究新进展

纽约大学的Damel Foyer和Charles Peskin教授等人，发展出哺乳动物细胞内生物钟的模型，能显示为了达成有效的24小时韵律，分子与DNA间所进行的快速交互作用。他们也发现细胞内若缺乏此类分子，生物钟将会失控。     

抗流感病毒药物的新进展与临床应用

流感是发病率较高的病毒性疾病,临床上仍难于治疗.虽然应用了流感疫苗,流感导致的发病率和死亡率还是很高.所以有效抗流感药物的研发就变得十分重要和紧迫.     

抗弓形虫P30单克隆抗体的制备及其抗虫作用观察

制备抗弓形虫天然P30、重组P30的单克隆抗体(mAb),并研究它们对虫体的影响,为弓形虫病诊断及保护性抗原鉴定奠定基础。采用弓形虫天然P30、重组P30及全虫抗原(对照)分别免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,筛选稳定分泌高滴度mAb的杂交瘤细胞株。用ELISA法测定mAb亚类和效价;通过SDS-PAGE和West-ern blot进行特异性鉴定;Giemsa染色观察杂交瘤细胞的染色体数目;利用扫描电镜及间接荧光抗体试验(IFAT)观察mAb对弓形虫的杀伤作用及其靶抗原定位。结果表明,筛选出2株(2B3、1H6)特异性较好、能稳定分泌mAb的杂交瘤细胞株。Western blot结果显示,2B3、1H6产生的mAb与弓形虫全抗原的阳性反应带均在30 000 Mr处;mAb亚类均属IgM,其效价(ELISA)分别为:2B3 1∶102 400、1H6 1∶51 200;2株细胞的染色体数均在100条以上。电镜观察与mAb作用后的弓形虫虫体聚集、肿胀,膜变厚,表面出现缺口和空洞,甚至虫体变形、破碎。抗弓形虫天然P30的mAb能识别重组体pET-30a-P30的表达蛋白。成功制备了抗弓形虫天然P30、重组P30的mAb,可进一步用于弓形虫病诊断及保护性抗原鉴定研究。     

双氢青蒿素治疗急性弓形虫感染小鼠疗效的进一步观察

本实验对双氢青蒿素治疗小鼠急性弓形虫感染的疗效进行了进一步考察。小鼠腹腔内感染 RH株弓形虫速殖子 2× 1 0 3,8h后给予单独双氢青蒿素 75mg/kg· d和双氢青蒿素 75mg/kg· d联合磺胺嘧啶钠1 0 0 mg/kg· d灌喂小鼠治疗 ,每日 2次 ,疗程 1 5天 ,观察小鼠存活率 ,并于感染后第 9、 1 5、 3 1天取小鼠腹水及肝脏进行虫体 PCR检测。双氢青蒿素联合磺胺嘧啶钠组小鼠存活率达 93 % ,与单独磺胺嘧啶钠 ( 2 0 0mg/kg·d)组存活率 ( 69.3 % )及单独双氢青蒿素 ( 75mg/kg·d)组存活率 ( 0 % )都有显著性差异 ( P<0 .0 5,P<0 .0 1 )。 PCR检测可见小鼠腹水或腹腔冲洗液中除联合治疗组外 ,其余各组均可检测出虫体DNA,但只有对照组和单独双氢青蒿素组小鼠的肝脏中可检测出虫体 DNA。结论 ( 1 )双氢青蒿素联合磺胺嘧啶钠以上述方式治疗小鼠急性弓形虫感染产生了协同作用 ,比两药单独治疗对小鼠的保护作用更好 ,能更快地清除腹腔中的弓形虫 ,并更有效地防止停药后的复发。( 2 )单独双氢青蒿素采用以上方案疗效不理想 ,只能延长小鼠存活时间。( 3 )以上各种治疗方案除单独双氢青蒿素组外 ,都可较好地清除小鼠肝脏中的虫体。( 4)本研究为双氢青蒿素临床治疗急性弓形虫感染提供了更具体、合理、有效的用药方案     

弓形虫MIC8基因对弓形虫病的免疫保护性研究

目的观察弓形虫MIC8基因对弓形虫病免疫保护性的效果。方法用PCR方法扩增弓形虫MIC8基因,定向克隆到真核表达质粒pEGFP-N1中,构建重组表达载体pEGFP-MIC8;MIC8-EGFP转染293T细胞,荧光显微镜观察表达情况;然后分别用质粒pEGFP-MIC8、pEGFP-N1空载体及生理盐水肌肉注射免疫BALB/c小鼠,共免疫3次,末次免疫3周后用弓形虫RH株速殖子感染免疫小鼠。结果 PCR扩增弓形虫MIC基因序列正确,构建的重组表达载体pEGFP-MIC8鉴定正确,荧光显微镜下观察到重组质粒能够在293T细胞中表达。弓形虫攻击感染后,质粒pEGFP-MIC8免疫小鼠与对照组相比,小鼠的存活时间有一定的延长。结论构建的真核表达重组质粒pEGFP-MIC8对抗击弓形虫攻击感染能够激发一定的免疫保护性。     

固相免疫吸附凝集法检测抗弓形虫抗体

弓形虫病是一种人畜共患疾病，广泛流行于世界各地，对人类危害最大的是孕妇感染可引起新生儿多种先天畸形，智力发育缺陷和视力障碍等。我们在已有诊断方法［１，２］的基础上，试用了固相免疫吸附凝集法检测抗弓形虫抗体，简介如下。１　材料和方法１－１　抗原　参照文献［３］制备。１－２　弓形虫体颗粒抗原　经过滤除去宿主细胞和组织块的弓形虫，用ＰＢＳ洗涤三次，１％福尔马林固定，将弓形虫体调浓度为７×１０７／ｍｌ，冰箱保存备用。１－３　血清标本　弓形虫抗体阳性控制血清（由江苏省农科院牧医所提供）。弓形虫抗体待测血清…     

药物治疗扩张型心肌病的新进展

扩张型心肌病是引致心脏增大、心功能不全、心律失常等常见的原因之一.虽至今其病因仍不明,但随着检查技术的发展,诊断为扩张型心肌病的病人则越多,故对其病因的寻找、治疗方案的研究亦在积极的发展.β受体阻断剂、生长激素等能更有效地改善症状,其中β受体阻断剂更可能对可疑病因作出治疗,本文综述了扩张型心肌病各种药物治疗的新进展.     

霍乱毒素佐剂联合弓形虫ESA鼻内免疫小鼠抗弓形虫感染作用

目的 观察霍乱毒素（cholera toxin,CT）佐剂和弓形虫排泄-分泌抗原（ESA）鼻内免疫小鼠诱导的抗弓形虫感染作用。方法 6周龄BALB/c小鼠60只,随机分为3组,每组20只。分别用PBS 20μl、ESA 20μg或CT 1.0μg＋ESA 20μg每只滴鼻免疫2次,间隔2周。末次免疫后14 d,用4×104个弓形虫速殖子每只灌胃攻击所有小鼠,观察小鼠健康及死亡情况。速殖子攻击后30 d,计数肝、脑组织内弓形虫速殖子。结果 CT作为佐剂联合弓形虫ESA滴鼻免疫小鼠的健康状况明显好于PBS组和ESA组,存活率（95%）也显著高于PBS组（55%）。与PBS组相比,CT＋ESA组肝和脑组织内速殖子数分别减少了80.19%（P〈0.001）和78.24%（P〈0.005）。CT作为佐剂联合ESA滴鼻免疫小鼠诱导了高水平的黏膜免疫应答和系统免疫应答。结论 CT作为佐剂联合弓形虫ESA滴鼻免疫小鼠诱导的免疫应答可有效抵抗弓形虫速殖子攻击。     

中枢神经系统疾病与弓形虫感染相关性的研究进展

弓形虫是引起人兽共患寄生虫病的重要病原之一。国内外有不少资料表明,神经系统疾病与弓形虫感染关系密切,且中枢神经系统病变是该病最为严重的一种类型。本文主要从弓形虫病的致病机制、临床表现、诊断及其与中枢神经系统疾病的关系、防治作一综述。     

孤独症药物治疗新进展

自 1 94 3年美国儿童精神病医生 Kanner首次报道了1 1例孤独症至今 ,已经历了半个多世纪 ,有关孤独症的研究在不断发展 ,在药物治疗方面也有新的发现。下面将药物治疗的最新情况进行介绍。1　五羟色胺拮抗剂有关研究发现部分孤独症患者外周血和尿中 5 -羟色胺水平升高 ,随着临床症状的改善 ,血中 5 -羟色胺水平下降 ,提出了孤独症 5 -羟色胺假说 ,推测具有降低 5 -羟色胺水平的药物可能对某些孤独症有治病作用。1 .1　利醅酮 ( risperidone)　属于非典型抗精神病药 ,为选择性单胺能拮挤剂 ,因与多巴胺能的 D2 受体和 5 -羟色胺能的 5 -HT2…     

弓形虫IgM抗体检测方法的研究

本文以鼠抗人μ链单克隆抗体捕获被测人血清中ＩｇＭ抗体，再以辣根过氧化物酶标记的弓形虫抗原进行直接酶联免疫吸附试验，检测人血清中特异性抗弓形虫ＩｇＭ抗体，并以阻断试验证实该方法的特异性。与风疹病毒ＩｇＭ抗体阳性血清，巨细胞病毒ＩｇＭ抗体阳性血清和类风湿因子等无交叉反应。与进口试剂盒以酶联免疫吸附试验双夹心法（ＤＳ－ＥＬＩＳＡ－Ｔｏｘ－ＩｇＭ）进行比较检测了临床血清样品１０５３份，两者阳性符合率为９５．５６％，ＤＳ－ＥＬＩＳＡ阴性血清在Ｄ－ＥＬＩＳＡ法亦阴性，而且后者灵敏度略高。酶标记抗原和包被抗体的酶标板在４℃中保存６个月仍稳定。试剂盒操作简便，快速，适用于弓形虫病的早期诊断。