消化道恶性肿瘤患者CD4^＋ CD25^＋ Treg的检测及意义

目的：探讨消化道恶性肿瘤患者外周血CD4^＋ CD25^＋调节性T细胞（Regulatory T cell,Treg）水平的特点及其临床意义。方法：采用流式细胞术对60例消化道恶性肿瘤患者与30名健康体检者的外周血CD4^＋ CD25^＋Treg水平进行检测。结果：消化道恶性肿瘤外周血CD4^＋ CD25^＋ Treg占总T细胞7.16%±3.37%,与对照组CD4^＋ CD25^＋ Treg4.52%±1.76%比较有显著性差异（P〈0.05）。结论：恶性肿瘤患者外周血CD4^＋ CD25^＋Treg水平的升高,与恶性肿瘤免疫功能低下及肿瘤的发生、发展密切相关。     

宫颈癌患者外周血CD2^＋细胞表达的检测及意义

目的：探讨宫颈癌患者外周血CD2^＋细胞表达水平及临床意义。方法：应用流式细胞术检测40例宫颈癌患者及30例宫颈上皮内瘤变（cervical intra-epithelial neoplasia,CIN）患者外周血CD2^＋细胞百分率,以30例子宫肌瘤患者作为正常对照。结果：宫颈癌患者外周血CD2^＋细胞百分率水平明显低于CIN组及正常对照组,差异均具有统计学意义（P〈0.05）。结论：CD2^＋的表达与宫颈癌的发生、发展有关,可作为宫颈癌患者治疗及评价预后的参考指标。     

慢性肝脏疾病中CD3^-CD161^＋NK和CD3^＋CD161^＋NKT细胞亚群的变化研究

目的探讨CD3^-CD161^＋NK、CD3^＋CD161^＋NKT细胞在慢性肝炎／肝硬化及肝细胞癌患者肝脏组织及外周血中表达及意义。方法利用流式细胞仪对31例肝细胞癌患者、59例慢性肝炎／肝硬化患者肝脏组织及外周血、15例正常肝脏组织、48例正常人外周血中的CD3^-CD161^＋NK和CD3^＋CD161^＋NKT进行定量分析。结果慢性肝炎／肝硬化组CD3^-CD161^＋NK细胞[（13．4±1．3）％]和肝细胞癌癌周组CD3^-CD161^＋NK细胞[（16．7±4．8）％]及远离肝癌组的肝脏组织CD3^-CD161^＋NK细胞[（22．0±4．4）％]与正常肝脏组织CD3^＋CD161^＋NK细胞[（35．1±7．2）％]相比,肝细胞癌癌周肝脏组织内含量最低（t值分别为2．301、2．137、2．034,P〈0．05）;外周血中肝细胞癌组CD3^-CD161^＋NK细胞f（11．6±6．3％）]、CD3^＋CD161^＋NKT细胞[（14．7±6．2）％]与慢性肝炎／肝硬化组CD3^-CD161^＋NK细胞[（10．8±1．7）％]、CD3^＋CD161^＋NKT细胞[（12．5±0．8）％]、正常对照组CD3^＋CD161^＋NK细胞[（7．5±0．8）％]、CD3^-CD161^＋NKT细胞[（13．8±1．7）％]相比肝癌组CD3^-CD161^＋NKT细胞含量最高（t值分别为2．134,2．099,P〈0．05）,肝癌组CD3^＋CD161^＋NKT细胞含量最高（t值分别为2．125,2．154,P〈0．05）。结论由于NK细胞及NKT细胞数量减少或／和活性降低,使肿瘤细胞逃逸了免疫监视,可能促进了肿瘤的发生、发展及转移。     

肝癌患者射频消融与手术前后外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的变化及意义

目的：探讨肝癌患者接受射频消融或手术治疗前后外周血中CD4^＋、CD25^＋调节性T细胞水平的变化及意义。方法：分析35例原发性肝细胞肝癌患者射频消融治疗前和治疗后1周外周血中CD4^＋、CD25^＋调节性T细胞水平变化,并与20例原发性肝细胞肝癌手术切除患者外周血中CD4^＋、CD25^＋调节性T细胞水平进行对比分析。另外检测10例因患胆囊结石行胆囊切除患者手术前后的CD4^＋、CD25^＋调节性T细胞水平作为对照。结果：所有肝癌患者在射频消融治疗后7d外周血中CD4^＋、CD25^＋调节性T细胞水平降低,而手术组明显升高,对照组无明显变化。结论：采用射频消融治疗肝癌,可以改善患者的细胞免疫状态。     

手足口病患儿T淋巴细胞亚群与CD3^＋CD4ˉCD8ˉ双阴性调节性T细胞的检测及其临床意义

目的探讨外周血T淋巴细胞亚群及CD3^＋CD4ˉCD8ˉ双阴性调节性T细胞在手足口病病人发病中的临床意义。方法采用流式细胞术检测了46例手足口病患者以及17例健康体检者外周血T细胞亚群CD3^＋、CD3^＋CD4ˉCD8^＋、CD3^＋CD4^＋CD8^＋、CD3^＋CD4^＋CD8ˉ与CD3^＋CD4ˉCD8ˉ双阴性调节性T细胞水平。结果与正常对照组相比,手足口病患者组CD3^＋、CD3^＋CD4ˉCD8’、CD3^＋CD4ˉCD8ˉ双阴性调节性T细胞的百分率降低（P值分别为0．008、0．050、0．025）。CD3^＋CD4^＋CD8^＋、CD3^＋CD4^＋CD8ˉ百分率以及CD4／CD8比值差异无统计学意义（P值分别为0．847、0．775、0．149）,以上各细胞亚群的百分率以及CD4／CD8比值在年龄与性别方面差异无统计学意义。结论手足口病患者CD3^＋CD4ˉCD8ˉ双阴性调节性T细胞、CD3^＋、CD3^＋CD4ˉCD8^＋异常变化提示其免疫功能异常。     

不同结核病患者CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞表达的变化

目的分析不同结核病患者体内CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞（Tr）表达的变化,探讨其在结核病免疫中的作用。方法对33例结核病患者以及同期30例健康体检者运用流式细胞术检测其外周血CD4^＋CD25“。“和CIM^＋CD25^＋Foxp3^＋Tr表达情况。结果结核组CD4^＋CD25^high和CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Tr检测结果分别为（8．84±2．55）％、（6．30±1．38）％,高于对照组（7．09±1．09）％、（5．22±0．64）％,差别有统计学意义（t=3．57,4．01,P〈0．01）;痰涂阳患者CD4^＋CD25^high和CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Tr检测结果分别为（10．52±3．27）％、（7．18±1．77）％,高于痰涂阴患者（8．21±1．94）％、（5．97±1．06）％,两组问差别均具有统计学意义（t=2．51,2．42,P〈0．05）;初治患者和复治患者间CD4^＋CD25^high和CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋检测结果无统计学意义（t=0．03,0．02,P〉0．05）。结论结核病患者体内CD4^＋CD25^high和CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Tr检测结果高于健康人群,提示患者体内存在免疫系统抑制状态。     

乙型肝炎患者外周血单核细胞CD14^＋CD16^＋亚群及HLA-DR的检测及其意义

目的：通过检测乙型肝炎患者外周血单核细胞各亚群分布情况以及HLA—DR表达水平,探讨慢性乙型肝炎患者外周血中CD14^＋CD16^＋单核细胞及HLA-DR的表达特点,以及与疾病进程之间的关系。方法：利用流式细胞仪（FCM）检测50例慢性乙型肝炎患者,其中21例免疫耐受（IT）患者、29例免疫活化（IA）患者,及31例正常人外周血CD14、CD16、HLA—DR的表达。同时调查肝功能、乙肝五项和血清HBVDNA等相应临床资料。结果：免疫活化组（IA）的CD14^＋CD16^＋亚群比率明显高于正常对照组和免疫耐受组（IT）（P〈0．01）;单核细胞CD14^＋CD16^＋亚群HLA．DR表达明显高于CD14^＋CD16^＋亚群（P〈0．01）;乙型肝炎患者CD14^＋CD16^＋单核细胞比率与ALT呈正相关（r=0．876,P〈0．01）,与HBVDNA载量成负相关（r=-0．267,P〈0．01）。结论：CD14^＋CD16^＋单核细胞可能在乙型肝炎患者外周血中参与调节针对HBV的免疫反应,CD14^＋CD16^＋单核细胞与HBV复制和肝脏炎症之间存在相关性,因此检测单核细胞CD14^＋CD16^＋亚群及HLA-DR水平对于了解乙型肝炎患者疾病进程具有重要的临床应用价值。     

CD28在多发性硬化患者CD8^＋淋巴细胞的表达

目的：探讨CD28在多发性硬化（MS）患者CD8^ 淋巴细胞的表达水平。方法：流式细胞仪测定16例复发期MS患者和20例对照组外周血淋巴细胞CD28^ 、 CD8^ 、CD28^-和CD8^ CD28^ 的百分率.结果：复发期MS患者淋巴细胞CD8^ CD28^－百分率低于对照组，CD28^ 和CD8^ CD28^ 的百分率与对照组无明显差异；甲基强的松龙治疗对CD28^ 、CD8^ 、CD28^ 和CD8^ CD28^ 的百分率无影响。 结论：参与MS的发病的CD8细胞是CD8^ CD28^-细胞。     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞及其功能

CD4^＋CD25^＋T细胞亚群具有免疫调节功能，是机体内调节性T细胞（regulatory T cells，Tr）的主要类型，于1995年首次由Sakaguchi等提出。CD4^＋CD25^＋Tr的免疫学特点是免疫无反应性和免疫抑制性，可以通过下调机体的免疫应答维持对自身和非自身抗原的免疫耐受，CD4^＋CD25^＋Tr数量低下和功能紊乱可导致多种自身免疫性疾病，另外，它们在某些严重的炎症性疾病和下调肿瘤免疫应答中也起重要作用。对这类细胞生物特性的深入研究将有助于我们对临床有关疾病机制的理解及新型治疗策略的制定。     

CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞在与原因不明反复自然流产的相关性研究

目的探讨外周血中CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Tr）在原因不明反复自然流产（URSA）发病中的作用。方法应用三色荧光标记流式细胞术检测21例原因不明反复自然流产妇女（URSA组）、20例正常妊娠妇女（正常对照组）外周血中CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Tr及T细胞亚群水平的表达情况。结果URSA组妇女外周血中CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Tr表达率为（1.36±0.61）%,明显低于正常对照组（5.59±1.02）%,两组比较差异显著（P（0.05）,但两组相比较外周血中T细胞亚群CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋/CD8^＋水平无显著差异（P（0.05）。结论原因不明反复自然流产的发生可能与患者外周血中CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Tr数量减少有关。     

艾滋病患者外周血CD127^＋T细胞的检测

目的探讨艾滋病患者外周血CD8^＋CD127^＋T细胞的变化情况。方法选择艾滋病患者58例和正常人18例，采用流式细胞分析方法检测CD127在CD8阳性细胞上的表达情况。结果在艾滋病患者外周血中，CD4^＋细胞比例（7．98％）明显低于正常人（53．5％），CD8^＋细胞比例（86．22％）明显高于正常人（36．02％），CD4／CD8比值（0．10）明显低于正常人（1．52），CD127^＋CD8^＋CD3^＋细胞比例（20．53％）明显低于正常人（67．85％）。结论CDl27在CD8阳性T细胞上表达的减少可能是导致艾滋病患者免疫功能缺陷的原因之一。     

慢性疲劳综合征患者外周血淋巴细胞亚群及CD25^＋调节性T细胞表达的研究

研究慢性疲劳综合征（CFS）患者外周血淋巴细胞亚群及CD25＋调节性T细胞的表达情况。使用流式细胞仪检测84例CFS患者（CFS组）、50例健康体检者（健康对照组）外周血淋巴细胞亚群（T细胞、CD4＋T细胞、CD8＋T细胞、B细胞、NK细胞）及CD25＋调节性T细胞的表达情况。结果显示,CFS组与健康对照组的T细胞、CD8＋T细胞百分率以及CD4＋/CD8＋比值无显著差别（P〉0.05）;而CFS组NK细胞、CD4＋T细胞及CD25＋调节性T细胞百分率显著增高,B细胞百分率显著降低（P〈0.05）。结论：慢性疲劳综合征患者外周血淋巴细胞各亚群比例异常,提示其免疫功能失衡,而CD25＋T调节性细胞可能在该病进程中有重要意义。     

转化生长因子-β参与CD4^＋CD25^＋调节性T细胞诱导的发育研究进展

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Treg）足一类具有免疫调节功能的淋巴细胞,在维持机体免疫耐受和免疫应答稳态方面发挥重要作用。转化生长因子β（TGF—β）与CD4^＋CD25^＋Treg的发育分化和功能有着密不可分的关系,虽然作用机理尚不完全明了,但其重要性毋情置疑。     

慢性乙型肝炎患者外周血CD4＋CD25＋、CD8＋CD28＋淋巴细胞的变化及与病毒载量的关系

目的：研究慢性乙型肝炎患者外周血CD4＋CD25＋、CD8＋CD28＋淋巴细胞的表达变化及与病毒载量的关系。方法：利用流式细胞术检测50例慢性乙型肝炎患者外周血CD4＋CD25＋、CD8＋CD28＋淋巴细胞的表达率和绝对数,并与正常对照组30例进行比较;荧光定量PCR检测慢性乙型肝炎患者HBV核酸的载量,并与CD4＋CD25＋、CD8＋CD28＋淋巴细胞的表达进行相关分析。结果：慢性乙型肝炎患者的CD4＋CD25＋表达率和细胞数分别为（15.60±5.86）%和（0.34±0.13）×109/L,明显高于正常对照组（P〈0.01）;而CD4＋CD25-、CD8＋CD28＋为（21.13±5.32）%、（0.47±0.19）×109/L和（9.49±2.57）%、（0.21±0.07）×109/L,均低于正常对照组（均P〈0.01）;不同病毒载量的慢性乙型肝炎患者CD4＋CD25＋T细胞与病毒载量均呈正相关（r分别为0.552、0.588,P均〈0.01）,而CD8＋CD28＋T细胞与病毒载量均无相关性（r分别0.275、-0.092,P均〉0.05）。结论：慢性乙型肝炎患者细胞毒T细胞（CD8＋CD28＋）减少,免疫调节细胞的增加与慢性乙型肝炎患者病毒长期存在,病程迁延不愈有关。     

CD4^＋CD25^＋T细胞与移植免疫耐受

调节性T细胞是机体维持自身耐受的重要组成部分.CD4^＋CD25^＋T细胞以持续高表达CD25为特征,可通过细胞间直接接触或分泌TGF-β、IL-10来发挥抑制功能.它广泛参与自身免疫耐受、肿瘤免疫、移植免疫.现就其发育、特性、发挥功能的机制以及在移植免疫耐受中的作用和应用前景作一综述.     

过继转输TSA诱导的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞对不明原因复发性流产的治疗作用

目的观察过继转输TSA诱导的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋Treg）对不明原因流产的作用机制及妊娠预后的影响。方法以雌性CBA/J×雄性BALB/c为正常妊娠模型,以雌性CBA/J×雄性DBA/2J为自然流产模型,使用免疫磁珠方法分选雌性CBA/J小鼠脾脏CD4^＋CD25^＋Treg细胞,并使用流式细胞术检测分选纯度。采用TSA对流产孕鼠外周CD4^＋/CD25^-T细胞Foxp3基因特定位点进行表观修饰,以实现Foxp3稳定、持久的表达,并将CD4^＋Treg分别转输至流产模型孕4d（着床期）的雌性CBA/J孕鼠,于孕14d分别观察宿主孕鼠的胚胎吸收率。结果与对照组比较,过继转输TSA诱导的CD4^＋CD25^＋Treg细胞的宿主孕鼠的胚胎吸收率（11.27%）显著下降。结论孕早期过继转输TSA诱导的CD4^＋CD25^＋Treg细胞疗法能诱导宿主母胎免疫耐受,有利于妊娠的维持。     

RA患者外周血CD8＋CD28-和CD4＋CD25＋调节性T细胞的表达及疾病活动性指标相关性分析

目的：检测类风湿性关节炎（RA）患者外周血CD8＋CD28-、CD4＋CD25＋调节性T细胞亚群,探讨其与临床活动性指标的关系。方法：采用流式细胞术检测台州医院RA患者外周血CD8＋CD28-、CD4＋CD25＋ T细胞亚群比例,探讨调节性T细胞与RA活动性、类风湿因子（RF）、免疫球蛋白（Ig）、C反应蛋白（CRP）、补体C3、抗CCP抗体、抗核抗体（ANA）、血小板（PLT）及血沉（ESR）的关系。结果：活动期RA患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞亚群比例显著低于正常对照组（P〈0.01）,但稳定期RA患者与正常对照组结果差异无统计学意义（P〉0.05）。活动期和稳定期RA患者CD8＋CD28-与正常对照组相比较,结果无统计学意义（P〉0.05）;CD4＋CD25＋与CRP密切相关（r=-0.593,P〈0.05）,CD8＋CD28-与ESR相关系数呈弱相关。CD4＋CD25＋和CD8＋CD28-细胞与RF、IGG、C3、ANA、anti-CCP和PLT未见明显相关性。结论：活动期RA患者外周血CD4＋CD25＋ T细胞亚群比例减少,CD4＋CD25＋ T细胞可能与类风湿性关节炎疾病进展有关。     

胃肠肿瘤患者外周血树突状细胞功能失调与CD4+CD25+T细胞失衡的临床意义

目的：探讨胃肠肿瘤（GIC）患者外周血单个核细胞（PBMCs）来源树突状细胞（DCs）和CD4^＋CD25^＋T细胞（Tregs）的免疫功能状态，以及其与肿瘤临床病理分期和手术的关系。方法：收集早期胃肠癌（Ⅰ／Ⅱ期）患者术前、术后第7天以及晚期癌（Ⅲ／Ⅳ期）患者外周血，以健康成人外周血为对照。提取单个核细胞（PBMCs），流式细胞术（FACS）分别检测Tregs占CD4^＋T细胞的比例。PBMCs经贴壁法分离提取DCs，经rhGM。CSF、rhIL-4体外扩增培养至第5天，获得未成熟DCs（imDCs），FACS检测表型；imDCs经rhTNF-α诱导培养至第7天，获得成熟DCs（mDCs），MTT法和ELISA法分别检测mDCs与自体T细胞混合培养时mDCs刺激T细胞增殖能力以及上清液中IFN-γ的含量。结果：晚期胃肠癌患者imDCs表型HIA-DR、CD80及CD86均显著低于健康成人和早期癌患者（P〈0．01）；早期胃肠癌术后第7天患者imDC8表型HIA-DR及CD86表达显著低于健康成人（P〈0．05）。晚期胃肠癌患者mDCs刺激自体T细胞增殖及分泌IFN-γ的能力与健康成人相比均有所减弱（P=0．073，P=0．182）CD4^＋T细胞中Tregs的比例显著低于健康成人和早期癌患者（P〈0．001）；早期胃肠癌患者术后Tregs比例略低于术前（P=0．148）及健康成人（P=0．068）。HLA-DR、CD86表达与Tregs比例呈负相关性。结论：胃肠肿瘤患者尤其晚期和术后患者外周血DCs功能失调以及Tregs失衡可能和机体抗肿瘤细胞免疫耐受密切相关。     

传染性单核细胞增多症患儿CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的检测

传染性单核细胞增多症（IM）是一种儿童较常见的传染性疾病，我们对我院儿科及感染内科自2005年1月至2008年2月收治的51例患儿进行CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）测定，以探讨其免疫功能与疾病的关系，报道如下。     

CD4+ CD25+调节性T细胞AICD机制的研究

目的探讨CD4^＋CD25^＋调节性T细胞活化诱导的细胞死亡（AICD）发生的机制。方法CD4^＋CD25^＋T细胞以磁性细胞分离器（MACS）从BALB／c小鼠或DO11．10小鼠的静息T细胞分离纯化。体外细胞增殖抑制实验证实其免疫调节作用。CD4^＋CD25^＋T细胞的AICD以CD3／CD28单克隆抗体活化或以特异性OVA323-339肽、抗原提呈细胞活化等两种方法获得。CD4^＋CD25^＋T细胞凋亡相关基因的表达通过实时定量PCR检测。流式细胞仪检测细胞的凋亡率。进一步观察FasL中和抗体、TRAIL中和抗体及caspase抑制剂zVAD-fmk对CD4^＋CD25^＋T细胞凋亡的影响。结果MACS成功分离CD4^＋CD25^＋T细胞，纯度可达98％，该细胞可特异性表达Foxp3基因，能明显抑制效应性T细胞的体外增殖。CD3／CD28抗体以及OVA特异性抗原活化8d的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞AICD达39％～45％。活化前后的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞死亡受体家族表达发生明显变化；FasL、TRAIL中和抗体及zVAD-fmk可明显抑制CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的凋亡。结论FasL／Fas及其他凋亡相关分子可能参与了CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的凋亡。