60例丙型肝炎病毒感染者血清自身抗体水平测定分析

目的了解丙型肝炎患者血清中自身抗体检测的检出率,探讨自身免疫在丙型肝炎病毒感染中的意义。方法采用间接免疫荧光法,对60例丙型肝炎病毒感染者血清进行抗核抗体(ANA)检测,应用聚合酶链反应定量检测血清HCV-RNA含量。结果 HCV感染者类风湿因子(RF)、ANA的阳性率均明显高于正常对照组(P<0.01);HCV感染中,丙氨酸氨基转移酶(ALT)增高组其RF、ANA阳性率明显高于ALT正常组(P<0.0 5);HCV-RNA阳性组其RF、ANA阳性率明显高于HCV-RNA阴性组(P<0.05)。结论 HCV在机体感染过程中可诱导自身免疫反应,使体内产生多种自身抗体,其检出率与肝脏损伤程度和病毒的复制水平有关,自身抗体的检测对患者实施个体化治疗具有重要临床价值。     

丙型肝炎病毒核酸定量测定的临床价值

目的　研究丙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒核酸(HCV-RNA)载量与抗-HCV含量以及丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平之间的相关性与符合性。方法　用FQ-PCR法检测128份怀疑HCV感染的血清中的HCV-RNA,同时检测ALT和抗-HCV。结果　128份样本中HCV-RNA阳性率为53.9%(69/128);抗-HCV阳性率为62.5%(80/128);ALT异常率为51.0%(65/128)。HCV平均载量为8.52×105 拷贝/ml血清。抗-HCV滴度和ALT异常随着HCV-RNA载量升高而增加。结论　用FQ-PCR法检测HCV-RNA可以确定(1)抗HCV与抗-HBs不同,不是中和抗体,(2)高滴度抗-HCV血清具有传染性。(3)抗-HCV滴度与HCV-RNA浓度之间呈正相关性r=0.952, P<0.001,且有符合性和互补性,(4)对慢性丙型肝炎长期抗-HCV阳性,若出现HCV-RNA阴性或阳性可以鉴别活动性、复制性程度,(5)是评价丙型肝炎抗病毒治疗效果的重要指标。     

血清B淋巴细胞活化因子与HCV感染者疾病进展相关性的研究

目的:通过检测丙型肝炎病毒(HCV)感染者血清B淋巴细胞活化因子(BAFF)水平,探讨血清BAFF含量与HCV感染后疾病进程的相关性。方法:选取180名HCV感染者及40名健康对照者,应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中BAFF含量,荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测HCV感染者血清中HCV-RNA的水平,并结合HCV感染者临床情况分析。结果:HCV感染者血清中BAFF水平为(36.9±5.36)μg/L,较健康对照组显著增高(P<0.01);各临床分期HCV感染者中,血清BAFF的表达有明显差异,其中丙肝后肝癌组>丙肝后肝硬化组>丙肝慢性感染组>丙肝携带组;HCV病毒载量的对数值与血清BAFF水平无明显相关性(P>0.05)。结论:HCV感染者血清BAFF水平与疾病进展明显相关。     

抗HCV阳性的各类肝病患者HCV-RNA、抗-GOR及其与ALT关系

目的: 观察HCV感染者抗-GOR、HCV-RNA及其与丙氨酸氨基转移酶(ALT)的关系。方法: 对69例抗-HCV阳性的慢性丙型肝炎、肝硬化、肝癌患者检测HCV-RNA、抗-GOR水平,并与ALT水平进行比较。结果: 慢性丙型肝炎、肝硬化、肝癌患者HCV-RNA阳性率分别为59.4%、61.9%和56.3%;抗-GOR的阳性率分别为71.9%、66.7%和68.8%。ALT>40 u/L组与ALT ≤ 40 u/L组抗-GOR和HCV-RNA阳性率均有显著性(P<0.005和P<0.05)。结论: 抗-GOR检测有助于HCV的诊断,抗GOR阳性率与ALT水平相关。     

乙型肝炎后肝硬化患者血清IL-18和IL-10水平检测的临床意义

目的探讨乙型肝炎后肝硬化患者血清白细胞介素-18(IL-18)和白细胞介素-10(IL-10)的水平变化及临床意义。方法随机抽取急性乙型肝炎66例,慢性乙型肝炎68例,86例肝炎后肝硬化患者(Child-Pugh分级A 24例、B 37、C 25)及正常对照组50例。采用ELISA双抗体夹心法检测血清IL-18和IL-10水平。结果急、慢性乙型肝炎和乙型肝炎后肝硬化患者血清IL-18水平明显高于正常对照组,血清IL-10水平明显低于正常对照组(P<0.05);且随急、慢性乙型肝炎和乙型肝炎后肝硬化患者随着病情的进展,血清IL-18水平升高、血清IL-10水平下降(P<0.01);Child-Pugh A、B、C级三组肝硬化患者血清IL-18和IL-10水平也有显著统计学差异(P<0.05);肝硬化患者血清IL-18和IL-10呈负相关(P<0.01)。结论检测不同Child-Pugh分级肝炎后肝硬化患者血清IL-18和IL-10的水平可作为监测病情演变的可靠指标之一,并为临床设计治疗方案提供了新的思路。     

慢性丙型肝炎病毒感染患者血清IL-35表达水平及其意义

目的:通过检测慢性丙型肝炎病毒(HCV)感染者血清中白细胞介素-35(IL-35)的表达水平,探讨IL-35在HCV持续感染致病机制中的作用。方法:用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测263例慢性丙型肝炎患者和117例健康体检者的血清IL-35水平,并对不同临床诊断的HCV患者间的IL-35水平进行比较分析,同时分析IL-35与ALT、AST、TBIL、ALB和HCVRNA的相关性。结果:HCV感染者血清IL-35水平明显增高,高于健康对照者,其中HCV相关的肝癌IL-35水平最高3926.1(297.2~4129.1)pg/ml,明显高于肝硬化2497.1(117.2~3491.3)pg/ml和慢性肝炎组1987.6(89.69~2987.3)pg/ml。结论:HCV感染者血清中IL-35水平明显升高,提示IL-35在HCV持续感染的免疫致病机制中起着一定作用,为临床诊断和治疗HCV感染提供了一种思路。     

慢性病毒性肝炎血清白细胞介素-8水平测定及意义探讨

采用 EL ISA法检测 15 3例各类慢性肝病患者血清 IL-8水平。结果 ,血清 IL-8水平随 CH病变程度加重而呈递增趋势 ,但 AL C及 CSH组 IL-8水平较 CH中、重度组有所下降 ( P<0 .0 5 ) ;合并细菌感染者血清 IL-8水平明显高于未合并感染者( P<0 .0 1) ,感染者中 ,晚期肝病组与 CH组相比血清 IL-8水平无显著性差异 ( P>0 .0 5 ) ;按病原学分类 ,血清 IL-8水平依次为CHB C>CHC>CHB,且 CHB C和 CHC均与 CHB组有统计学差异 ( P<0 .0 5 )。因此 ,血清 IL-8检测有助于判断慢性病毒性肝炎肝损害严重程度 ,但其水平高低相对于合并细菌感染和肝损害严重程度而言与前者关系更为密切。此外 ,血清 IL-8明显升高可能与慢性 HCV感染较慢性 HBV感染更易发展为肝硬化 ,肝癌的特点有关     

不同临床类型HCV感染者外周血CD4+CD25+调节性T细胞分布比例

目的:研究丙型肝炎病毒(HCV)感染后不同临床类型感染者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的分布比例。方法:流式细胞术检测59例不同临床类型HCV感染者(慢性丙型肝炎35例、丙型肝炎肝硬化14例、HCV感染后痊愈者10例)及33例健康对照者的外周血CD4+CD25+调节性T细胞。结果:慢性丙型肝炎、丙型肝炎肝硬化、HCV感染后痊愈者和健康对照者外周血CD4+CD25+调节性T细胞分布比例的差异有统计学意义(F=13.944,P<0.001),慢性丙型肝炎和丙型肝炎肝硬化组明显高于HCV感染后痊愈和健康对照组。HCV慢性感染者、丙型肝炎肝硬化患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞分布比例与HCV RNA载量呈正相关(r=0.780和0.870,P<0.05)。结论:外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平影响HCV感染后疾病进程。     

Th1/Th2细胞因子在丙型肝炎慢性化中的作用

目的探讨Th1/Th2细胞因子在丙型肝炎慢性化中的作用。方法用ELISA法检测15例慢性丙型肝炎(简称慢丙肝)、10例丙肝后肝硬化(简称肝硬化)、6例丙肝相关性肝癌患者和18例健康人群血清IL-10、IL-12、干扰素γ(IFN-γ)水平,放射免疫分析法检测IL-4水平,另外检测血清谷丙转氨酶(ALT)以及总胆红素(TBIL)水平。结果各组患者IL-4、IL-10水平明显高于正常对照组,IL-12、IFN-γ水平明显低于对照组;3组患者间比较,IL-4水平没有明显差别,IL-10水平随着病情的发展逐渐升高(肝癌组>肝硬化组>慢丙肝组),IL-12、IFN-γ水平在肝癌组明显低于慢丙肝组和肝硬化组。结论Th1/Th2失衡可以引起丙型肝炎慢性化,并与肝细胞性肝癌的发生密切相关。     

慢性HBV感染者血清I L-1 2 I FN-γ和I L-1 0的检测及其临床意义

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)慢性感染者血清白细胞介素-12(IL-12)、干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-10(IL-10)检测的临床意义.方法分离97例HBV慢性感染者血清,其中41例血清丙氨酸转移酶(ALT)水平正常,56例血清ALT水平异常.采用双抗体夹心ELISA方法检测血清IL-12,IFN-γ和IL-10水平.结果 HBV慢性感染者血清ALT正常组和ALT异常组的血清IFN-γ水平分别为(16.62±15 15)和(24.91±48.68)ng/L,均比正常对照组水平(6.25±2.22)ng/L显著增高(均P＜0.01);ALT异常组血清IL-10及IL-12水平分别为(16.80±7.96)和(60.18±72.59)ng/L,也都明显高于正常对照组水平(8.45±4.56)和(34.10±15 55)ng/L(分别P＜0.01、P＜0.05);ALT异常组血清IL-10水平与ALT正常组水平(8.78±3.31)ng/L比较差别有显著性意义(P＜0.01).结论 HBV慢性感染者血清IL-12、IFN-γ和IL-10水平升高可能与免疫病理性肝损伤有关.     

慢性丙型肝炎自身免疫发病机制的研究

To explore the autoimmune pathogenesis of chronic hepatitis C virus(HCV) infection. Anti-GOR, antinuclear antibodies(ANA), thyroglobulin antibody(TGA), thyroid microsome antibody(TMA), serum levels of soluble Fas(sFas), and peripheral blood lymphocyte(PBMC) subsets and their apoptosis were measured in chronic HCV infection by using immunity assay and flow cytometry, respectively. The results showed that the positive rates of anti-GOR, ANA and TMA/TGA were significantly higher in chronic HCV-infected patients than those in normal controls(P < 0.01, respectively). In comparison with chronic HBV infected patients, anti-GOR and ANA were also significantly increased in chronic HCV infected patients(P < 0.01, P < 0.05, respectively). The serum levels of sFas were significantly higher in chronic HCV infection than those in healthy donors(P < 0.01). The apoptosis percentage of PBMCs and CD3+ cell was all increased in chronic HCV infection (vs normal controls P < 0.05). However, the apoptosis percentages of CD4+ T and CD19+ B cells in PBMCs were significantly decreased in patients with anti-GOR positive as compared with anti-GOR negative(P < 0.01, P < 0.05). The results indicate that autoimmune reactions and the imbalance of lymphocyte apoptosis exist during chronic HCV infection. Decreasing of the apoptosis of CD4+ T and CD19+ B lymphocytes may be the important reasons for the mechanism of autoimmune pathogenesis of chronic HCV infection. Increased serum levels of sFas may be responsible for the decrease of the apoptosis in a part of lymphocytes in chronic HCV infection.     

慢性丙型肝炎自身免疫发病机制的研究

为探讨慢性丙型肝炎自身免疫的发病机制 ,用免疫学方法检测慢性HCV感染者、慢性HBV感染者和健康献血员的血清抗GOR ,ANA和TGA/TMA ,另检测部分慢性HCV感染者和健康献血员血清可溶性Fas(sFas)水平 ;用间接免疫荧光和流式细胞术检测部分慢性HCV感染者和健康献血员外周血淋巴细胞亚群及其凋亡百分率。结果显示 :慢性HCV感染者抗GOR ,ANA和TGA/TMA的阳性率及血清sFas浓度较正常对照组显著增高 (均为 P >0 .0 1) ,较慢性HBV感染者的抗GOR和ANA阳性率亦显著增高 (P <0 .0 1和P <0 .0 5 ) ;慢性HCV感染者PBMCs及CD+ 3 T淋巴细胞凋亡明显高于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ,其抗GOR阳性者CD+ 4T淋巴细胞及CD+ 19B淋巴细胞凋亡比抗GOR阴性者明显减少 (P <0 .0 1和P <0 .0 5 )。表明 :慢性HCV感染者存在自身免疫反应及淋巴细胞凋亡不均衡现象 ;CD+ 4T细胞及CD+ 19B细胞凋亡的减少在慢性HCV感染诱导的自身免疫反应中起重要作用。血清sFas水平升高可能是部分淋巴细胞凋亡减少 ,导致自身免疫的原因之一。     

慢性丙型肝炎患者血清白介素-8表达水平与基因型及抗病毒治疗的相关性

目的    探讨慢性丙型肝炎患者血清白介素-8（IL-8）水平与丙型肝炎病毒(HCV)感染、基因型及抗病毒治疗的关系。方法    对74例慢性丙型肝炎患者应用基因芯片法进行基因型检测,应用双抗体夹心ABC- ELISA法检测患者血清IL-8。比较不同基因型患者之间IL-8水平的差别,观察了抗病毒治疗12周后IL-8水平的变化。结果    慢性丙型肝炎患者及健康对照组血清IL-8水平分别为(42.95±50.00) pg/mL及(11.06 ± 1.39 )pg/mL（P＜0.01）;基因1b型慢丙肝患者（46例）及基因2a型患者（28例）IL-8水平分别为(52.72±60.67 )pg/mL及(26.93±13.97 )pg/mL（P＜0.05）。抗病毒治疗后HCV RNA转阴者,其IL 8水平由(41.20±25.89 )pg/mL 降至(23.89± 10.59 )pg/mL（P＜0.01）。结论    慢丙肝患者血清IL-8水平较健康对照组明显升高,且以感染HCV基因1b型者更明显。抗病毒治疗HCV RNA阴转后,其IL-8水平明显回降。     

HCV及其与HBV重叠感染患者血清HCVRNA检测的临床意义

目的探讨HCV及其与HBV重叠感染患者血清HCV RNA检测的临床意义。方法收集我院HCV感染及其与HBV重叠患者血清标本共179例,分为慢性丙型肝炎组（n=101）、肝硬化组（n=45）和肝癌组（n=33）。采用ELISA法检测血清抗HCV,用荧光定量PCR检测HCV RNA;对重叠感染HCV和HBV的31例患者同时检测HBVDNA。结果 179例患者抗HCV的总阳性率为97.8%,高于HCV RNA的阳性率（69.8%）（P〈0.01）。肝硬化组和肝癌组HCV RNA的阳性率分别为82.2%和84.8%,高于慢性丙型肝炎组阳性率64.4%（P〈0.05）。HCV与HBV重叠感染组的HCV RNA的阳性率为48.4%,低于单纯HCV感染组的HCV RNA阳性率（71.6%）（P〈0.05）。HCV与HBV重叠感染患者的HBV DNA阳性率为35.5%,也显著低于单纯HBV感染患者阳性率（76.7%）（P〈0.01）。HCVRNA阳性组ALT异常率（60.8%）高于HCV RNA阴性组（35.2%）（P〈0.05）。结论对HCV感染相关的不同疾病患者联合检测抗HCV、HCV RNA和ALT,对于HCV和HBV重叠感染者同时检测HBV DNA,有利于疾病的明确诊断、病情观察及预后判断。     

原发性肝癌与HBV、HCV感染关系

目的：了解乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）在原发性肝细胞癌（HCC）发生中的作用以及两种病毒的相互关系。方法：168例HCC组和182例正常组的配对对照研究。结果：HCC组中HBV-DNA和HCV-RNA阳性率分别为74.4%及11.9%,显著高于对照组的10.4%和3.3%,HBV-DNA或HCV-RNA阳性以及两者均阳性时发生HCC的相对危险度分别为52.7、30.2和84.0。此外,原发性肝癌还与既往肝硬化史、家族肝癌史有关,且以男性高发。结论：原发性肝癌的发生受多种因素影响,尤其HBV和（或）HCV慢性感染是主要危险因素之一。HBV感染除可能有直接致癌作用外,还可与HCV有协同致癌作用。     

慢性肝病患者血清MMP-3、TIMP-1水平在肝纤维化进程中的临床意义

目的 观察慢性乙型肝炎后肝病患者血清MMP-3、TIMP-1水平变化,探讨其在慢性肝病肝纤维化进程中的临床意义.方法 采用ELISA方法检测25例慢性乙型肝炎患者、53例乙型肝炎后肝硬化患者、31例肝癌患者及27例正常对照者血清MMP-3、TIMP-1水平.结果 与正常对照组比较,肝硬化代偿期患者血清MMP-3水平明显增高（P〈0.01）,肝硬化失代偿期患者和肝癌患者血清TIMP-1水平及TIMP-1/MMP-3比值明显增高（P〈0.05）;慢性乙型肝炎MMP-3、TIMP-1水平及TIMP-1/MMP-3比值均升高（P〈0.01）.肝硬化失代偿期与代偿期比较,血清MMP-3水平明显下降,TIMP-1/MMP-3比值则明显增高（P〈0.01）.结论 TIMP-1、MMP-3作为对肝纤维化评价的血清指标,联合检测比单独检测TIMP-1更具实用价值.TIMP-1、MMP-3在临床上对肝纤维化的监测和治疗效果的评价具有无损伤及快速便捷的优势,动态检测可作为评估慢性肝病患者肝纤维化进程及治疗效果的有效指标.     

慢性HBV和HCV合并感染患者肝损害的血清学改变

目的了解乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)合并感染的患者肝损害的血清学改变特点。方法收集225例慢性肝病(包括慢性乙型肝炎,慢性丙型肝炎,乙、丙肝病毒合并感染引起慢性肝炎或肝硬化,肝炎后肝硬化)患者的肝穿病理标本;所有病例均常规检测肝功能、血清HBVDNA、HBV血清标志物、血清HCVRNA,抗-HCV。所有肝活检标本均用10%中性福尔马林固定,石蜡包埋,做苏木素-伊红染色,进行肝炎分级分期,HBsAg、HBcAg免疫组化,HBVDNA、HCVRNA原位杂交检测。结果①重度慢性肝炎患者:HBV/HCV合并感染的患者(B加C组)谷-丙转氨酶(ALT)、谷-草转氨酶(AST)、总胆红素(TB)、直接胆红素(DB)水平与HCV单独感染(C组)患者相比差异无显著性(P>0.05),而比HBV单独感染的患者(B组)低(P<0.05)。②非重度慢性肝炎患者:三组的血清学改变差异无显著性(P>0.05)。③C组与B加C组患者的发病年龄相似(P>0.05),但明显大于B组患者(P<0.01)。④单独感染组发病的病程长短差异无显著性(P>0.05),但比合并感染组长,与单纯感染组相比,合并感染组发展为重肝的时间要短(P<0.01)。结论在重度慢性肝炎的患者中,肝功能损害的血清学指标(AST、ALT、TB、DB)不能很好地反映肝内损害严重度。与单纯感染组相比,HBV与HCV合并感染组发展为重度肝炎的时间要短。     

Clinical observation of serum IL-18, IL-10 and sIL-2R levels in patients with chronic hepatitis C pre- and post antiviral treatment

Objective To discuss the roles of serum interleukin-18 (IL-18), interleukin-10 (IL-10) and soluble interleukin-2R (sIL-2R) in the pathogenesis of chronic hepatitis C and to observe the effects of interferon (IFN) on the above- mentioned serum cytokines. Methods The levels of above- mentioned cytokines were detected in 10 healthy individuals, 24 asymptomatic hepatitis virus C (HCV) carriers and 27 patients with chronic hepatitis C ( before and after IFN treatment) using enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). Results The levels of the cytokines in patients with chronic hepatitis C are higher than in healthy people （P&lt;0.05) and in asymptomatic HCV carriers（P&lt;0.05). The values of the cytokines show a significant positive correlation to ALT （P&lt;0.05). Levels of tested cytokines decreased observably after IFN treatment （P&lt;0.05). The grades of the serum levels for sIL-2R and IL-10 before IFN treatment （from high to low） were categorized accordingly: non-response group＞ partial- response group ＞complete- response group （P&lt;0.05). Conclusions The tested cytokines co-participate in the pathogenesis of chronic hepatitis C, and can be used to evaluate the effect of IFN on the immune state of organisms. Furthermore, sIL-2R and IL-10 are important for predicting the anti-viral efficacy of IFN.     

丙型肝炎患者血清IL-6、IL-12与HCV含量变化及相关性研究

目的:探讨丙型肝炎患者血清IL-6、IL-12水平的变化以及在丙型肝炎发病机制中的作用。方法:分别应用ELISA法检测52例丙型肝炎患者(其中轻度18例,中度19例,重度15例)血清的IL-6、IL-12浓度,荧光定量PCR检测HCV RNA含量,同时测定ALT水平,然后分析它们之间的关系,并与15名正常健康人作对照。结果:丙型肝炎患者血清IL-6、IL-12、ALT和HCV RNA水平均非常显著地高于正常对照组(P<0.01),相关性分析表明,丙型肝炎患者血清中的ALT、HCV病毒含量均与IL-6、IL-12浓度呈正相关。结论:丙型肝炎患者血清IL-6、IL-12水平高低与HCV病毒含量有关,并且与肝脏的损伤程度密切相关。     

慢性HCV感染患者外周血CD81、CD4表达的观测

目的    研究慢性丙型肝炎病毒（HCV）感染患者外周血CD81、CD4的表达,探讨CD81对患者机体免疫系统的调节作用。方法    选择HCV感染患者55例(感染组),健康对照25例（健康对照组）,采用流式细胞术检测其外周血CD81、CD4的表达水平,ELISA法检测血清中白介素 2（IL 2）的含量, RT-PCR法检测血清中HCV RNA的含量。结果    感染组CD81分子的表达水平与血清中HCV RNA的含量呈正相关（r=0.474, P＜0.01）。感染组外周血淋巴细胞中CD81+细胞和CD3+CD4+T细胞中CD3+CD4+CD81+T细胞的数量均高于健康对照组（P＜0.01）,且二者呈正相关（r=0.581, P＜0.01）;感染组CD3+CD4+T细胞的数量和血清中IL 2的含量均显著低于健康对照组（P＜0.05）,且两者呈正相关（r=0.378,P＜0.05）。结论    HCV感染后,HCV RNA的持续存在可能促进细胞表面CD81分子的表达;CD81分子高表达的同时,伴随CD3+CD4+T细胞数量降低,且分泌的细胞因子IL-2减少,参与患者机体的免疫调节。