角质形成细胞在表皮黑素单位中的作用

人类黑素细胞位于表皮基底层 ,单个黑素细胞通过其树突与 2 5～ 35个不同分化阶段的角质形成细胞发生联系 ,这种独立的解剖学结构被定义为表皮黑素单位[1] 。黑素细胞的主要功能是合成黑素 ,通过树突将黑素颗粒输送给其相联系的角质形成细胞 ,使皮肤维持正常肤色 ,免受紫外线及光致癌因子的损害。角质形成细胞在表皮黑素单位中的作用目前存在着两种不同的假说。Ｇｏｒｄｏｎ等认为角质形成细胞通过旁分泌释放细胞因子影响黑素细胞[2 .3 ] 。角质形成细胞衍生的调节黑素细胞的细胞因子包括 :白细胞介素 1(ＩＬ 1)、白细胞介素 6 (ＩＬ 6 )…     

毛囊黑素干细胞研究进展

位于毛囊中的黑素干细胞在人和动物的皮肤附件系统中起着黑素细胞储存库的作用。在哺乳动物,黑素干细胞负责向毛母质提供黑素细胞,活化的黑素细胞向毛干的角质形成细胞提供黑素。在人类,黑素干细胞一方面可为毛母质提供黑素细胞,如生长期毛母质中的黑素细胞、斑秃毛发再生中毛母质的黑素细胞等;另一方面可为脱色的表皮提供黑素细胞,如白癜风复色、表皮烧伤或擦伤后的复色。所以,对毛囊黑素干细胞的深入理解在研究色素变化和相关疾病方面具有重要的意义。     

黑素合成及相关细胞的研究进展

黑素细胞、角质形成细胞、淋巴细胞、神经细胞与黑素合成机制息息相关;黑素合成的研究与白癜风等皮肤病的发生紧密相连,本文综述了皮肤黑素合成的机制及与黑素合成相关的黑素细胞、角质形成细胞、T淋巴细胞、神经细胞等细胞之间的关系,为今后黑素合成机制的进一步研究提供理论依据.     

氧化苦参碱对细胞共培养体系中酪氨酸酶及黑素的影响

目的探讨氧化苦参碱对人表皮黑素细胞与角质形成细胞共培养体系酪氨酸酶活性及黑素生成的影响。方法培养人表皮黑素细胞并及人表皮黑素细胞与角质形成细胞共培养体系，利用四甲基偶氮唑蓝（MTr）还原法测定细胞活力，采用酶学方法测定酪氨酸酶活性，475nm比色法测定黑素含量。结果100μmol／L、500μmol／L和1000μmol／L氧化苦参碱对于黑素细胞及共培养细胞酪氨酸酶活性及黑素生成均有较强的剂量相关性抑制作用，500μmol／L及1000μmol／L氧化苦参碱与对照组相比有显著差异（P〈0．01）。结论氧化苦参碱对于共培养体系酪氨酸酶活性及黑素生成有较强的剂量相关性抑制作用。     

木犀草素在细胞共培养体系中对酪氨酸酶及黑素的影响

目的研究木犀草素对人表皮共培养体系（黑素细胞与角质形成细胞）酪氨酸酶活性及黑素生成的影响。方法培养人表皮黑素细胞和人表皮黑素细胞与角质形成细胞共培养体系,利用四甲基偶氮唑蓝（MTT）还原法测定细胞活力,490nm比色法测定酪氨酸酶活性,475nm比色法测定黑素含量。结果 0.5μmol/L、0.75μmol/L和1μmol/L木犀草素对于黑素细胞及共培养细胞酪氨酸酶活性及黑素生成均有较强的剂量相关性增强作用,0.75μmol/L及1μmol/L木犀草素与对照组相比差异有统计学意义（P〈0.01）。结论木犀草素对于共培养体系酪氨酸酶活性及黑素生成有较强的剂量相关性增强作用。     

人表皮黑素细胞与角质形成细胞体外共培养模型的构建

目的：体外构建人表皮黑素细胞与角质形成细胞直接接触的共培养模型。方法：胰酶消化包皮的表皮,分别获取纯化的角质形成细胞和黑素细胞,将第3代角质形成细胞接种于培养瓶中,48 h后以1∶10（表皮黑素细胞∶角质形成细胞）的比例接种黑素细胞。结果：黑素细胞与角质形成细胞混合培养5 d后,培养瓶瓶底培养物逐渐变为浅灰色,继续培养,颜色逐渐加深;倒置显微镜下观察到黑素细胞与角质形成细胞共同存活,细胞生长良好,并通过树突发生联系。结论：成功构建了黑素细胞与角质形成细胞直接接触的混合培养模型,为进一步研究色素问题奠定了基础。     

正常人角质形成细胞和黑素细胞体外共培养体系的建立

目的体外建立正常人表皮角质形成细胞和黑素细胞直接接触的共培养体系。方法分别培养角质形成细胞和黑素细胞,体外建立角质形成细胞和黑素细胞直接接触的共培养模型,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法、紫外分光光度计检测、左旋多巴(L-Dopa)染色、免疫组织化学染色及透射电镜观察对共培养体系中的黑素细胞和角质形成细胞进行生物学鉴定。结果单独培养时,角质形成细胞呈圆形、"铺路石样"生长,黑素细胞呈两极或多级树突状生长;角质形成细胞和黑素细胞按一定比例混合培养后,2种细胞均迅速增殖,黑素细胞树突多为3～5个,与数十个角质形成细胞呈团块状生长,形成类似黑素单元的结构。共培养体系中的黑素细胞和角质形成细胞具备正常的生物学功能。结论角质形成细胞和黑素细胞直接接触的共培养体系为黑素细胞提供了更接近生理状态的体外研究模型。     

不含佛波酯和霍乱毒素条件下体外培养小儿正常表皮黑素细胞的实验研究

 【目的】 研究探索不含佛波酯、霍乱毒素条件下小儿正常表皮黑素细胞培养与扩增技术,鉴定黑素细胞合成黑素与产生表面抗原的功能,为开展小儿白癜风以及先天性表皮色素减退等疾病的细胞移植治疗提供可靠的实验依据。【方法】获取15例正常儿童的皮肤组织,分离提取黑素细胞, 应用M2培养基并添加bFGF进行黑素细胞培养与增殖, 采用DOPA染色法、黑素细胞表面抗原(MART-1)荧光特异性抗体结合实验鉴定体外培养黑素细胞的细胞纯度、合成黑素与表达细胞表面抗原的生物学功能。【结果】 15例健康儿童自体黑素细胞培养成功率为100%, 未见成纤维细胞、角质形成细胞污染, 增殖培养3 ~ 5代后的细胞数量即可达到移植要求数量级(8 ~ 10)万/cm2,并可连续传平均20代。黑素细胞DOPA染色阳性,浓度均匀,纯度高,并可与特异性MART-1抗体相结合。【结论】 应用M2培养基在不添加佛波酯、霍乱毒素条件下进行的黑素细胞增殖培养, 获得的黑素细胞生长状态、细胞数量比较理想,黑素细胞具有合成黑素的能力,能成功表达黑素细胞表面抗原。     

壬二酸对人黑素细胞和鼠黑素瘤B16细胞黑素合成功能的影响

目的 建立体外培养的正常人表皮黑素细胞系，检测壬二酸对人表皮黑素细胞和鼠黑素瘤B16细胞黑素合成的影响。方法 体外人表皮黑素细胞和鼠黑素瘤B．。细胞培养，TRP-1染色观察壬二酸作用后，细胞形态的变化；测定壬二酸对人表皮黑素细胞和鼠黑色素瘤B16细胞酪氨酸酶活性及黑素含量变化观察壬二酸的脱色素作用。结果 壬二酸作用于人表皮黑素细胞后，可见细胞树突明显减少；壬二酸作用于B16细胞后，细胞形态无明显改变。壬二酸抑制人表皮黑素细胞和鼠黑素瘤B16细胞的酪氨酸酶活性，细胞黑素合成减少，而且具有浓度依赖性。结论 壬二酸对体外培养的人表皮黑素细胞和鼠黑素瘤B16细胞的酪氨酸酶活性及黑素生成都有抑制作用，可临床应用于治疗色素性疾病。     

白茶、玫瑰花及玳玳花提取物对体外培养黑素细胞功能的影响

[目的]观察白茶、玫瑰花及玳玳花提取物（祛斑因子A、B）对体外培养的正常人表皮黑素细胞功能及角质形成细胞和黑素细胞共培养体系中黑素小体转运的影响。[方法]制备含药血清,建立正常人表皮黑素细胞体外培养体系,采用4-甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定黑素细胞增殖,酪氨酸酶多巴速率氧化法测定酪氨酸酶活性,NaOH裂解法测定黑素生成量,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测黑素细胞酪氨酸酶mRNA的表达,Pull-down法检测黑素细胞GTP-RhoA和GTP-Rac1蛋白的表达;建立正常人角质形成细胞和黑素细胞的体外共培养体系,流式细胞术检测共培养细胞体系中黑素转运的情况。[结果]与空白血清对照组相比,祛斑因子A、B可显著抑制酪氨酸酶活性;祛斑因子A可显著降低酪氨酸酶mRNA的表达。祛斑因子A中、低剂量可抑制树突结构蛋白的表达。祛斑因子A高、中、低剂量及祛斑因子B均可抑制黑素小体的转运。[结论]为祛斑因子用于色素性疾病的保健防治提供一定的实验依据。     

α-黑素细胞刺激素对皮肤黑素合成的调控作用

皮肤色素异常是整形美容外科常见的问题，目前还无较好的解决方法，主要是对皮肤色素沉着的机制还不完全清楚。近年来，逐步认识到α-黑素细胞刺激素(α-melanocyte-stimulating hormone，α-MSH)与黑素的合成有密切关系。α-MSH通其黑素细胞表面受体-黑皮素-1受体(melanocortin-1 receptor，MC-1R)结合，使黑素细胞内酪氨酸酶的表达增加、活性增强，黑素合成增加并优先刺激优黑素细胞的合成；α-MSH还可促进黑素细胞的增生和树突形成及黑素小体的转运，同时α-MSH对黑素细胞的免疫保护作用及与其他外源性刺激因素协同作用而调控皮肤的色素沉着过程。α-MSH的内源性拮抗剂刺鼠信号蛋白(ASIP)可明显减弱其黑素合成作用，降低皮肤的着色能力。随着对α-MSH调控黑素合成作用的更进一步了解，必将为解决临床上获得性色素沉着或色素脱失性疾病提供一种新的治疗方法。     

雌二醇及中波紫外线在豚鼠皮肤色素沉着形成中的作用及其机制

目的：研究雌二醇和中波紫外线( UVB)辐射对豚鼠背部棕色皮肤中黑素代谢的影响,探讨雌激素及UVB在皮肤色素沉着中的作用。方法选取健康花色豚鼠,设立溶媒对照组、UVB照射组、雌二醇处理组和雌二醇预处理后UVB照射组(雌二醇+UVB组);雌二醇浓度设为3．67×10-5、3．67×10-4、3．67×10-3 mol/L;UVB 照射剂量统一为500 mJ/cm2。采用皮肤在体共聚焦激光扫描显微镜(简称皮肤CT)以及透射电子显微镜等观察雌二醇和UVB对黑素小体合成及降解的影响。结果①一定浓度雌二醇可加深豚鼠皮肤色素沉着,且随着雌二醇浓度的递增,沉着程度逐渐加深(P<0．05)。② UVB照射组豚鼠皮肤色素沉着较未照射组明显增加(P<0．05)。③ UVB照射后豚鼠表皮角质形成细胞中自噬体增加,而雌二醇处理后自噬体减少。结论雌二醇及UVB照射均可促进豚鼠皮肤色素沉着,其机制可能与促进黑素小体合成有关,黑素小体的降解异常也参与了豚鼠皮肤色素沉着的形成。     

Response of melanoma cells to α- MSH and cAMP stimulation

Summary A melanotic clone of the Claudmann S-91 melanoma was treated with 2 × 10^™7M α-MSH and 10^™3M cAMP. By fluorometric assay and electron microscopy it was found that these agents enhanced melanin content and melanosomes in cytoplasm, inhibited cell growth and incuced morphologic alterations, such as appearance of hypertrophy and dendrite-like formation.     

异常黑素小体在恶性黑素瘤诊断中的意义

应用透射电镜对17例恶性黑素瘤(MM)进行观察,并以30例色素痣作对照,重点探讨异常黑素小体在MM诊断中的价值。14例MM包括2例无色素性MM中找到异常黑素小体,2例含色素及1例无色素性MM中未找到异常黑素小体;4例先天性痣中发现异常黑素小体。结果提示:异常黑素小体对MM的诊断有重要参考价值,但以往对其意义估价过高,作者认为MM的透射电镜诊断需结合其它超微结构改变综合判断。     

引起社区获得性皮肤软组织感染的病原菌分布及主要致病菌的药物敏感性分析

目的了解该地区社区获得性皮肤软组织感染的病原菌分布，以及主要致病菌对抗菌药物的敏感性特征。方法对57例门诊就诊的皮肤软组织感染患者的脓液或创面分泌物进行细菌培养和鉴定，对主要致病菌进行药物敏感性分析。结果从57例皮肤软组织感染患者的标本中检测出51株病原菌，葡萄球菌属是主要致病菌，该菌属仅对青霉素和红霉素表现有较高的耐药性，对常用抗生素的敏感性明显高于医院感染的葡萄球菌；未发现耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌。结论该地区社区获得性皮肤软组织感染的主要病原菌为葡萄球菌，未发现耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌流行。门诊治疗皮肤软组织感染的经验性用药可首选一代头孢菌素或喹诺酮类药物。     

具有防晒祛色素作用的天然中草药筛选初探

目的：通过多种方法从大量天然中草药中筛选出一组具有防晒祛色素作用的中草药，为色素增加性皮肤病的治疗提供一新途径。方法：首先联合中医古籍和现代文献筛选出一组可能具有防晒祛色素作用的中草药，然后应用紫外分光光度法在200 nm-400 nm波长内扫描药物UVA和UVB段紫外吸光度值、蘑菇酪氨酸酶活性抑制法在酶标仪490 nm波长处检测产物吸光度值（A490）和DPPH自由基清除法测定药物DPPH清除率和DPPH半清除率（IC50）。结果：从中医古籍和现代文献筛选出人参、当归、茯苓、川芎、防风、白术、苡仁、桔梗、槐花、芦荟、黄芩、白芨、栀子、白芷、黄芪共15味中草药。其中槐花、芦荟、白芷UVA吸光度高于对照组（P＜0.01），黄芩、槐花、芦荟UVB吸光度高于对照组（P＜0.05）；芦荟、白术、槐花、茯苓、白芨和人参的酪氨酸酶抑制率较高，而芦荟和白术酪氨酸酶抑制作用较对照组强（P＜0.05）；上述中药对DPPH均有不同程度的清除作用，槐花、黄芩DPPH清除率和IC50接近于对照组（P 〉0.05）。最终筛选出人参、茯苓、白术、苡仁、桔梗、黄芪、黄芩、槐花、芦荟和白芨10味中草药。结论：本实验筛选出的10味中草药具有广谱紫外线吸收功能、抑制酪氨酸酶活性和抗自由基氧化作用，可为进一步色素增加性皮肤病的预防和治疗实验奠定重要基础。     

皮肤洗消剂PF2009对化学毒剂的消毒作用

目的 通过检测皮肤洗消剂PF2009对化学毒剂的体外消毒效率,对皮肤洗消剂PF2009的消毒效果进行评价.方法 将皮肤洗消剂PF2009按比例分别同梭曼(GD)、维埃克斯(VX)、芥子气(HD)混合,采用色谱分析法或T-135法于不同作用时间检测化学毒剂的剩余量.将皮肤洗消剂PF2009及其基质分别按相同比例与GD、V...     

Significance of aberrant melanosomes in the diagnosis of malignant melanoma

In order to clarify the significance of the aberrant melanosomes in thediagnosis of malignant melanoma,17 cases of malignant melanoma were studied with elec-tron microscopy,and 30 cases of nevus were studied likewise for comparison.Aberrantmelanosomes were present in 12 cases of pigmented and 2 cases of amelanotic malignantmelanoma.They were also found in 4 cases of congenital nevus.The findings suggest thatthe presence of aberrant melanosomes is of significance for the diagnosis of malignantmelanoma but this has been overemphasized.It is believed that the diagnosis of malignantmelanoma depends upon a comprehensive judgement of all the ultrastructural findings un-der electron microscopy.     

体外循环心内直视手术麻醉1800例回顾

我院自1958年6月开展体外循环心内直视手术麻醉,至今已累积1800例。麻醉方法:1958～1974年为吸入麻醉138例,1975～1982年为吗啡麻醉373例,1983～1987年为芬太尼麻醉1289例。无麻醉死亡。我们的体会是:麻醉的重点和难点在麻醉诱导置管;切皮、纵劈胸骨手术刺激最强;灌注前心脏直接受刺激易激惹,各大血管插管分流易造成心律紊乱及低血压。原则上要分阶段用药,预防为主。