米非司酮对人宫颈癌裸鼠移植瘤放疗敏感性及其NF-κBp65蛋白表达的影响

目的探讨米非司酮(MIF)对宫颈癌裸鼠移植瘤放疗敏感性的影响及其作用机制。方法建立人宫颈癌裸鼠移植瘤模型,筛选32只荷瘤裸鼠,随机分为对照组、放疗组、MIF组、MIF+放疗组4组,每组8只。定期测肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线;处死裸鼠,取瘤体组织,TUENL法检测肿瘤组织细胞凋亡;Western blotting检测各组NF-κBp65蛋白表达水平并进行定位、半定量分析。结果与其他各组相比,MIF+放疗组的裸鼠肿瘤体积下降最明显(P<0.05),细胞凋亡指数最高,肿瘤组织中NF-κB p65蛋白表达水平较单纯放疗组下降明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 MIF可通过抑制NF-κB活性,促进细胞凋亡,增强人宫颈癌裸鼠移植瘤的放疗敏感性。     

siRNA-STAT3对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用

目的:探讨pSilencer1.0-U6-siRNA-STAT3重组质粒抑制人卵巢癌SKOV3细胞裸鼠皮下移植瘤生长及诱导肿瘤细胞凋亡的作用。方法:应用人卵巢癌细胞株SKOV3对15只裸鼠构建卵巢癌移植瘤模型,随机分为生理盐水对照组、空质粒对照组、重组质粒组。联合电转染技术向裸鼠移植瘤内注射重组质粒,每隔5天重复注射1次,每4天测量各组裸鼠皮下移植瘤体积。采用TUNEL法检测肿瘤组织细胞的凋亡情况。结果:重组质粒瘤内注射对卵巢癌移植瘤生长有明显的抑制作用,与两个对照组比较重组质粒组裸鼠移植瘤生长速度明显减慢(P<0.01)。TUNEL染色显示重组质粒组癌组织有大量细胞凋亡。结论:pSilencer1.0-U6-siRNA-STAT3重组质粒能有效诱导人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤组织中细胞凋亡,抑制肿瘤生长。     

地塞米松诱导裸鼠宫颈癌移植瘤凋亡的实验研究

目的:探讨地塞米松对宫颈癌Hela细胞裸鼠移植瘤生长及凋亡的作用。方法:BALB/C裸鼠皮下接种宫颈癌Hela细胞,腹腔内注射不同剂量地塞米松15~250mg/kg,测量肿瘤体积观察肿瘤生长情况,用透射电镜及原位细胞凋亡检测(TUNEL)的方法对肿瘤细胞的凋亡进行检测。结果:不同剂量地塞米松体内注射均可抑制宫颈癌Hela细胞裸鼠移植瘤的生长,并能诱导肿瘤细胞凋亡,与对照组相比肿瘤生长速度减慢,体积明显缩小(P<0·001),凋亡小体明显增多;不同剂量地塞米松对肿瘤生长的影响有差异,当剂量<62·5mg/kg时,疗效随剂量增加而增加,凋亡小体逐渐增多,肿瘤生长更加缓慢,各组间有明显差异(P<0·001);剂量为62·5~125mg/kg时,肿瘤生长及凋亡发生与剂量无明显的关系;当剂量>125mg/kg时,疗效随剂量增加而降低,凋亡小体逐渐减少,肿瘤生长速度加快,各组间有明显差异(P<0·001)。结论:地塞米松体内能诱导裸鼠宫颈癌移植瘤凋亡发生,显著抑制肿瘤生长,并存在一定程度的剂量依赖效应。     

沉默生存素基因联合放疗对裸鼠移植人肝癌的抑瘤效应

目的 探讨RNA干扰(RNA interference,RNAi)生存素(Survivin)基因联合X射线照射对裸鼠移植人肝癌细胞SMMC-7721的抑瘤效应。方法 肿瘤局部注射脂质体包裹的靶向Survivin基因的RNA干扰质粒后,接受5Gy X射线照射,观察各组裸鼠治疗后不同时间肿瘤体积和平均存活时间,以免疫组化染色法检测肿瘤组织Survivin、增殖细胞核抗原(Proliferation Cell Nuclear Antigen,PCNA)表达和肿瘤间质微血管密度,以TUNEL法检测肝癌细胞凋亡。结果 治疗后第3~21d,RNA干扰联合放疗组肿瘤体积明显低于对照组、RNA干扰组和放疗组。RNA干扰联合放疗组裸鼠平均存活时间明显长于对照组、RNA干扰组和放疗组。治疗结束后第1天,RNA干扰联合放疗组裸鼠肿瘤增殖活性和微血管密度明显低于RNA干扰组和放疗组,且凋亡细胞百分数明显升高。结论 RNA干扰Survivin基因联合放疗可有效地抑制裸鼠移植人肝癌细胞增殖和血管生成,促进细胞凋亡,其抑瘤效应明显优于放疗和RNA干扰治疗。     

STAT3信号转导通路调控人宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡的机制

目的:探讨信号传导和转录激活因子3(Stat3)通路与人宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡的关系,明确以Stat3为靶向的信号传导通路调控Hela细胞增殖、凋亡的分子机制。方法:人宫颈癌Hela细胞用酪氨酸激酶(JAK)抑制剂AG490处理,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖;流式细胞仪(FCM)测细胞凋亡及细胞周期;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测JAK2、Stat3、磷酸化Stat3(p-Stat3)、CyclinD1、Survivin的表达。结果:人宫颈癌Hela细胞中Stat3、p-Stat3、JAK2呈阳性表达。AG490呈时间和剂量依赖的方式抑制Hela细胞的增殖,促进其凋亡(P<0.05)。Western blot检测显示p-Stat3、CyclinD1、Survivin的表达水平随作用剂量的增大而逐渐下降(P<0.05),Stat3的表达未见明显变化(P≥0.05)。结论:Stat3信号转导通路与宫颈癌Hela细胞的增殖、凋亡密切相关,可能通过其下游靶基因蛋白CyclinD1、Survivin发挥作用。阻断Stat3信号通路可能为宫颈癌的防治提供一种新的策略。     

芳香化酶抑制剂对人子宫内膜癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的探讨芳香化酶抑制剂对人子宫内膜癌裸鼠移植瘤的抑制作用。方法 ER+/PR+人子宫内膜癌细胞株RL-952种植于BALB/c雌性裸鼠,成人子宫内膜癌裸鼠移植瘤模型,根据干预药物的不同随机分为四组,阿那曲唑组、甲地孕酮组、阿那曲唑+甲地孕酮组、空白对照组,观察移植瘤生长体积及Survivin的表达。结果阿那曲唑组、阿那曲唑+甲地孕酮组给药后瘤体增长相对缓慢;Survivin表达增强,但在各组中的表达差异无统计学意义。结论芳香化酶抑制剂能抑制子宫内膜癌移植瘤的生长,其生长抑制作用较甲地孕酮强;但两者联用时,其生长抑制作用无明显增强。因各组瘤体间无临床分期差异,检测Survivin的表达未出现差异。     

三仙保宫汤对小鼠宫颈癌U14细胞抑制作用的研究

目的:观察三仙保宫汤、顺铂(cisplatin,DDP)及其两者联合应用对小鼠宫颈癌细胞株U14移植瘤的抑制作用及凋亡诱导作用,并初步探讨三仙保宫汤的抗肿瘤作用机制。方法:随机分为模型对照组、顺铂组、三仙保宫汤组、三仙保宫汤联合顺铂组,分别给予不同药物干预21天,并采用免疫组织化学法检测各组肿瘤组织中Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。。结果:三仙保宫汤联合顺铂组的作用优于单药组。结论:1.三仙保宫汤具有明显抑制小鼠宫颈癌移植瘤生长的作用,其联合顺铂组肿瘤组织的Bax蛋白表达率明显高于单独用药。     

亚砷酸对人鼻咽癌裸鼠移植瘤的生长及survivin、PTEN表达的影响

目的研究亚砷酸(As2O3)对人鼻咽癌CNE-2裸鼠移植瘤与survivin、PTEN的作用,探讨该药物的抗肿瘤机制。方法建立人鼻咽癌裸鼠移植瘤模型,随机分为Na Cl组、As2O3组和DDP组,观察裸鼠移植瘤生长情况;采用免疫组织化学方法检测survivin、PTEN的表达。结果 As2O3组和DDP组瘤体积和瘤重均明显低于Na Cl组,survivin蛋白的表达均低于Na Cl组,PTEN蛋白的表达均高于Na Cl组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论亚砷酸可抑制人鼻咽癌CNE-2裸鼠移植瘤的生长,此作用可能与下调survivin、上调PTEN的表达相关。     

猴头菇多糖联合顺铂抗肺腺癌的作用研究

目的:探讨猴头菇多糖(HEP)联合顺铂(DDP)抑制肺腺癌的作用。方法:采用MTT法检测不同浓度HEP分别作用肺腺癌细胞株48 h、72 h的细胞抑制率,不同浓度DDP作用肺腺癌细胞株48 h的细胞抑制率,及HEP联合DDP作用肺腺癌细胞株48 h的细胞抑制率。设对照组、HEP组、DDP组和联合组,观察HEP联合DDP对移植瘤的作用,采用ELISA法检测各组裸鼠血清中IL-2水平。结果:HEP对肺腺癌细胞具有一定的抑制作用,且具有时间和浓度依赖性。DDP能显著抑制肺腺癌细胞。HEP可以促进DDP对于肺腺癌细胞和裸鼠移植瘤的抑制作用,可减轻DDP对裸鼠体重的影响。HEP组和联合组小鼠血清中IL-2水平显著高于DDP组。结论:猴头菇多糖可有效增强顺铂的抗肺腺癌作用,并减轻其不良反应。     

双歧杆菌对实验性大肠癌的预防及诱导细胞凋亡的作用

目的　探讨青春型双歧杆菌对实验性大肠癌的预防作用及其防瘤机制。方法　以裸鼠大肠癌移植瘤为动物模型,预先用双歧杆菌注射于裸鼠腹腔,观察移植瘤的生长速度,同时利用透射电镜、原位末端标记技术及免疫组化技术观察大肠癌裸鼠移植瘤的超微结构、凋亡细胞密度以及ｂｃｌ２、ｂａｘ 蛋白表达率及其阳性细胞密度。结果　双歧杆菌预防组大肠癌移植瘤的生长速度显著慢于对照组; 此外双歧杆菌预防组移植瘤组织中可见多量处于不同凋亡时期的瘤细胞,其凋亡细胞密度、ｂａｘ 蛋白表达率以及阳性细胞密度均显著高于肿瘤对照组,而ｂｃｌ２ 蛋白的表达情况则相反。结论　青春型双歧杆菌能显著预防大肠癌的发生与发展,并能诱导其细胞凋亡。     

人宫颈鳞状细胞癌裸鼠移植模型的建立及分析

目的:采用裸鼠腹部皮下移植感染高危型HPV人宫颈鳞癌组织的方法,建立宫颈癌动物模型,研究其在裸鼠体内的成瘤性,并探讨其生物学特性。方法:取中分化及高分化人宫颈鳞状细胞癌癌组织两块分别接种于裸鼠腹部皮下,以建立人宫颈癌裸鼠模型,比较两组荷瘤鼠成瘤率、一般特性和移植瘤生长情况,85天后处死裸鼠,切除肿块做病理切片;PCR(聚合酶链式反应)检测肿瘤组织、外周血和肝等脏器HPV DNA表达情况。结果:接种后两组小鼠分别于第42天及第49天在接种部位可见结节,第80天后肿瘤块平均体积分别为(38.0±5.1)mm3、(30.2±4.6)mm3,肿瘤移植成功率分别为80%及60%,移植瘤生长以局部浸润为主,未见转移瘤。组织学检查所有移植瘤与种植前肿瘤组织病理检查结果一致,HPV DNA呈阳性,且为高危型人乳头瘤病毒HPV16、18型阳性,亦与原宫颈癌病人HPV16、HPV18感染一致;外周血与肝等脏器HPV DNA呈阴性。结论:裸鼠人宫颈癌组织模型成瘤率较高,且分化程度越低其成瘤率越高,操作简便,成本低,且保留了HPV感染生物学特性,为探索宫颈癌的发病机制和临床治疗提供了重要的科研工具。     

RIM-19的表达对人子宫颈癌细胞移植瘤血管生成的影响

目的:通过裸鼠体内实验探讨GRIM-19对子宫颈癌细胞血管生成的影响。方法:采用western blot检测GRIM-19和VEGF的mRNA和蛋白水平表达情况。将HeLa/Control、HeLa/GRIM-19接种到裸鼠皮下检测荷瘤情况,利用免疫组化法计数微血管密度。结果:HeLa/GRIM-19细胞接种肿瘤生长速度明显减慢(P<0.01)。移植瘤蛋白检测发现GRIM-19表达升高,而VEGF的表达降低。HeLa/Control移植瘤的微血管密度是72±9.3/mm2,而HeLa/GRIM-19的微血管密度为32±4.7/mm2,两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论:GRIM-19表达可以抑制子宫颈癌细胞的微血管生成,可能是子宫颈癌治疗的新靶点。     

他莫昔芬对裸鼠移植性人肝癌细胞生长的影响

目的观察他莫昔芬对裸鼠移植性人肝癌细胞生长的影响及应用他莫昔芬后裸鼠肿瘤组织内雌激素受体指标的变化,为他莫昔芬用于肝癌治疗提供实验依据。方法BALB/cA-nu雄性裸鼠26只,背部皮下接种HepG2人肝癌细胞建立裸鼠肝癌模型,14天后成瘤裸鼠随机分成对照组和他莫昔芬治疗组;给药30天后检测各组移植瘤的体积和重量;病理学常规检查,并采用免疫组化检测肿瘤组织内雌激素受体的表达。结果与对照组相比,他莫昔芬治疗组裸鼠肿瘤的体积、重量明显减少(P<0.05),肿瘤内雌激素受体的表达明显减少。结论他莫昔芬通过与肝癌细胞膜上的雌激素受体结合,阻止雌激素作用的发挥,从而抑制肝癌细胞的增殖。     

酒石酸锑钾对人结肠癌裸鼠移植瘤增殖细胞核抗原的影响

目的 探讨酒石酸锑钾（potassium antimony tartrate,PAT）对人结肠癌移植瘤裸鼠模型抑瘤及凋亡诱导作用.方法 60只裸鼠皮下注射结肠癌细胞株SW480建立移植瘤模型,随机分为4组（n=15）.分别为生理盐水组、5-氟尿嘧啶（5-Fu）50 mg/（Kg·d）组、酒石酸锑钾组[（20 mg/（Kg·d）和40 mg/（Kg·d）],给药15 d,每3日测量肿瘤大小1次,绘制肿瘤生长曲线;末次给药24 h后,免疫组织化学法检测结肠癌细胞增殖细胞核抗原（PCNA）的表达.结果 使用PAT后,肿瘤体积增长较慢,PAT处理组细胞PCNA表达[（63.63±8.88）%,（59.13±6.15）%,（33.38±12.76）%]较对照组[（69.88±8.81）%]明显下调（P〈0.05或P〈0.01）.结论 PAT能有效抑制结肠癌细胞生长和诱导结肠癌细胞凋亡.     

白藜芦醇预防性给药诱导裸鼠胃癌移植瘤细胞凋亡的观察

目的研究白藜芦醇预防性给药诱导裸鼠胃癌移植瘤细胞凋亡的作用。方法用胃癌MGC-803细胞株建立裸鼠胃癌移植瘤模型,通过白藜芦醇预防性给药,采用瘤体体积计算、透射电镜及原位末端标记染色（TUNEL）方法观察不同剂量白藜芦醇对裸鼠胃癌移植瘤的生长和细胞凋亡的影响。所有数据均以（x±s）表示,数据分析采用SPSS13.0软件,多组间均数比较采用单因素方差分析,用SNK-q检验进行两两比较,P〈0.05为差异有统计学意义。结果白藜芦醇中、高剂量组能明显抑制裸鼠胃癌移植瘤的生长,抑制率达到49.38%（P〈0.05）;电镜观察白藜芦醇各用药组出现凋亡细胞的典型形态;TUNEL法检测模型组、白藜芦醇低、中和高剂量组的凋亡细胞阳性表达率（%）分别为（14.254±4.344）,（31.270±4.461）,（44.082±3.436）和（58.809±4.060）（P〈0.01）,随着白藜芦醇用药剂量的增加,肿瘤细胞凋亡率上升。结论通过预防性给药,白藜芦醇能够抑制裸鼠胃癌移植瘤的生长,诱导裸鼠胃癌移植瘤细胞发生凋亡。     

拓扑替康和顺铂联合化疗对子宫内膜癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的:观察拓扑替康、顺铂及二者联合对子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法:建立裸鼠移植瘤模型,成瘤后40只裸鼠随机分为4组,顺铂组:3 mg/kg;拓扑替康组:5 mg/kg;联合用药组:顺铂3 mg/kg+拓扑替康5 mg/kg;对照组:生理盐水。腹腔注射药物,每4天1次,共4次。测量肿瘤体积、绘制肿瘤生长曲线、计算抑瘤率,用流式细胞术检测肿瘤细胞生长周期。结果:抑瘤率分别为顺铂组41.53%、拓扑替康组34.12%、联合用药组90.53%,联合用药组的抑瘤率明显高于顺铂组及拓扑替康组(P<0.05)。联合用药组G0/G1期细胞数量明显高于拓扑替康组、对照组(P<0.05)。结论:联合应用拓扑替康和顺铂抑制子宫内膜癌的作用强于单独应用拓扑替康、顺铂。     

EGCG对人前列腺癌裸鼠移植瘤生长和间隙连接蛋白43表达的影响

目的研究表没食子儿茶素没食子酸脂（EGCG）对前列腺癌裸鼠移植瘤生长和间隙连接蛋白43（Cx43）表达的影响,探讨EGCG防治前列腺癌的作用机制。方法分别采用四甲基偶氮唑蓝法、膜联蛋白／碘化丙锭双标流式细胞术和划痕标记荧光染料传输技术,体外观察不同浓度的EGCG（10、20、40mg/L）对人前列腺癌PC-3细胞的生长抑制率、凋亡率、细胞间间隙连接通讯功能（GJIC）的变化。采用PC-3细胞建立裸鼠皮下移植瘤动物模型,随机分为对照组和不同剂量的EGCG组（10、20、40mg/kg）,14d后称量移植瘤体重并计算抑瘤率,DNA原位缺口末端标记法和免疫组织化学分别检测凋亡指数（AI）和肿瘤微血管密度（MVD）,半定量逆转录聚合酶链反应检测移植瘤组织cx43mRNA的表达水平。结果20mg/L和40mg／L的EGCG均能明显抑制PC-3细胞的生长[（22．33±4．62）％,（38．67±5．67）％VS（3．47±0．31）％,P〈0．01]和诱导细胞凋亡[（7．84±1．37）％,（24．53±2．28）％V8（2．17±0．70）％,P〈0．01],并增强细胞间的GJIC功能。不同剂量的EGCG均能抑制裸鼠前列腺癌移植瘤生长,促进肿瘤细胞凋亡,减少肿瘤血管生成。（20、40mg/kg）EGCG能显著上调移植瘤组织Cx43mRNA的表达（0．58±0．08,0．80±0．07V80．42±0．04,P〈0．01）。EGCG对前列腺移植瘤的抑制作用、诱导细胞凋亡和上调Cx43表达的效应均随剂量的增加而增强,呈剂量依赖性（P〈0．05）。结论EGCG能上调Cx43在裸鼠前列腺癌组织中的表达和增强Cx43介导的间隙连接通讯功能,从而有效抑制前列腺癌移植瘤的生长。     

裸鼠乳腺癌的超声研究

目的研究裸鼠乳腺癌的超声表现特点,为人乳腺癌的超声诊断提供有效依据。方法采用MCF-7细胞株建立裸鼠乳腺癌瘤模型,待原位移植后第23天用超声观察其图像的特点,并与人乳腺癌的特点进行对比分析。结果裸鼠乳腺癌平均大小7.4mm×5.6mm;椭圆形,内部低回声,分布均匀,境界清晰和尚清晰;并与人乳腺癌之特点有许多不同。结论裸鼠乳腺癌的生长仅23天,而人乳腺癌的生长数月至数年,两者图像之特点有许多不同。对<10mm或很早的原位癌超声缺乏特征性指标而易误诊为良性肿瘤。     

人卵巢癌荷瘤裸鼠两种皮下移植瘤模型的构建及生长特性的比较

目的:构建人卵巢上皮癌裸鼠皮下移植瘤动物模型,并对实体瘤组织块移植及细胞悬液移植的肿瘤模型及其生长特性进行了一系列比较研究,以期为研究卵巢癌的发病机制及靶向治疗措施确定体内实验的最佳模型,并提供充分的理论依据。方法:随机选择10只6～8周龄的裸鼠,分为实体瘤组织块移植组和细胞悬液移植组,每组各5只。通过显微外科手术将瘤体小块接种到裸鼠腋下皮肤,将另一部分瘤体碾碎制成细胞悬液,将1×107个/ml的细胞悬液0.2 ml裸鼠腋下皮肤内注射。动态追踪两组肿瘤模型的生长情况及体内肿瘤的转移情况,处死荷瘤鼠取出肿瘤组织后做病理学检查。结果:全部裸鼠均皮下成瘤,成功率为100%。组织块接种的裸鼠肿瘤生长速度比细胞接种的裸鼠明显快,接种21天后处死裸鼠,组织块接种组比细胞接种组明显增大,两组肿瘤平均体积差异有统计学意义(P<0.05)。通过尸检发现所有裸鼠均未出现淋巴及其他器官的转移,病理学检查提示两组裸鼠移植瘤都具有人卵巢癌组织学特征。结论:构建了人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,两种方法建立的动物模型均可用于从整体水平对卵巢癌进行相关研究,是理想的卵巢癌动物模型。人卵巢癌组织块接种法构建的动物模型更适合用于周期较短的实验研究。