指血乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶活性同步测定法

本文根据全血的血红蛋白含量(X)与红细胞压积容量(Y)的高度相关性的回归方程式(Y=0.149 8X+22.4835),以及用硫酸奎尼丁作为丁酰胆碱酯酶(BChE)的特异性抑制剂,建立了指血乙酰胆碱酯酶(AChE)和BChE活性的同步测定法。本法测定全血的AChE和BChE活性分别相当于经典法的100.9±6.4％和106.5±7.9％,同步测定指血AChE和BChE的CV分别为0.38％和0.82％(n=10);具有简便、快速、精确的特点,并有减轻病人痛苦和降低成本等优点,适于临床检验推广使用。     

应用亲和层析分离纯化人小脑乙酰胆碱酯酶的初步研究

目的 分离纯化小脑乙酰胆碱酯酶（AChE)。材料和方法 采用ConA和B10亲和层析法纯化小人脑AChE，以纯化的人小脑AChE为免疫原，免疫6只BALB/c小鼠制备小鼠抗人小脑AChE抗血清，并检测其与电鳐AChE和人红细胞膜AChE的交叉免疫反应性。结果 SDS-PAGE还原状态下呈一条主带，相对分子质量为67000，比活性为373U/mg。结论 免疫亲和层析法操作简单，可快速纯化人小脑AChE。     

应用亲和层析分离纯化人小脑乙酰胆碱酯酶的初步研究

目的分离纯化人小脑乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）。材料和方法采用ＣｏｎＡ和民Ｂ１０亲和层析法纯化人小脑ＡＣｈＥ。以纯化的人小脑ＡＣｈＥ为免疫原，免疫６只ＢＡＬＢ／ｃ小鼠制备小鼠抗人小脑ＡＣｈＥ抗血清，并检测其与电鳐ＡＣｈＥ和人红细胞膜ＡＣｈＥ。Ｅ的交叉免疫反应性。结果ＳＤＳ－ＰＡＧＥ还原状态下呈一条主带，相对分子质量为６７０００，比活性为３７３Ｕ／ｍｇ。结论免疫亲和层析法操作简单，可快速纯化人小脑ＡＣｈＥ。     

胆碱酯酶检测的临床研究进展

胆碱酯酶(cholinesterase,ChE)又称为酰基胆碱水解酶,以多种同工酶形式存在于体内,按照酶水解底物的专一性、水解速度的差异、对抑制剂敏感性以及组织分布特点,将体内ChE分为两种:一种为乙酰胆碱酯酶(AChE,也称真胆碱酯酶),人AChE是膜结合蛋白质,以多种分子形式存在,主要分布于神经组织,如脑白质和灰质、神经节内的神经细胞和神经肌肉接头,还分布于红细胞和血清等非神经组织中.     

有机磷农药中毒后血乙酰胆碱酯酶与丁酰胆碱酯酶活性变化关系

目的观测有机磷农药中毒后全血、红细胞的乙酰胆碱酯酶和血清丁酰胆碱酯酶活性变化情况,分析乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶之间的相关性。方法①体外实验:以新鲜人血制备红细胞和血清,等量酶原中分别加入不同浓度的敌敌畏进行染毒后,观测全血、红细胞乙酰胆碱酯酶和血清丁酰胆碱酯酶染毒前后活性变化情况。②动物实验:将雄性Wistar大鼠随机分为3组,每组10只,3组按中毒程度轻、中、重分别予敌敌畏2mg/kg、5mg/kg、7mg/kg进行肌注染毒,观测大鼠染毒前后血中全血、红细胞乙酰胆碱酯酶和血清丁酰胆碱酯酶活性变化情况。结果敌敌畏中毒后,全血、红细胞乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶活性均出现降低,并且活性抑制变化趋势基本是平行的,两酶之间呈正相关关系,但反映的中毒程度存在差异。结论有机磷农药中毒时,不应以乙酰胆碱酯酶的分级诊断标准作为丁酰胆碱酯酶的分级诊断标准,可用乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶之间的差异系数加以修正。     

胆碱酯酶两种方法测定比较

目的:研究胆碱酯酶测定两种方法对检测有机磷农药中毒的影响。方法:分别用丁酰胆碱(以下称丁法)和乙酰胆碱(以下称乙法)作底物,检测丁酰胆碱酯酶和乙酰胆碱酯酶。并对300例结果进行了分析,结果:异常率(少于参考值)丁法为2.3%;乙法为1.6%,经χ2检验,两者无明显差异。结论:两种方法均可作为有机磷农药中毒指标。     

羊水乙酰胆碱酯酶凝胶电泳法产前诊断神经管缺陷

本文应用羊水乙酰胆碱酯酶聚丙烯酰胺凝胶电泳法对375例羊水进行测定,其中正常妊娠羊水305例,神经管缺陷羊水37例及其它异常情况32例,全部得到了正确诊断。同时还研究了羊水乙酰胆碱酯酶的来源。通过此方法与羊水AFP及总胆碱酯酶的比较,认为此方法为产前诊断NTDs的最佳方法。     

胎儿胃食管角乙酰胆碱酯酶阳性神经分布

用Ｋａｒｎｏｖｓｋｙ－Ｒｏｏｔ法，观察到胎儿胃食管角肌间丛、粘膜下丛、，上皮丛内有丰富的乙酰胆碱酯酶（ＡｃｈＥ）阳性神经。是丛和粘膜下丛内有深当析大型多极形、卵圆形ＡｃｈＥ阳性神经元，数量少，布于丛的周缘，也有染色浅的中小型圆形ＡｃｈＥ了性神经元在丛内密集分布。本文还与胃食管角邻近的食管壁内的神经形态比较。     

乙酰胆碱酯酶的磁效应研究

目的：建立光纤光度法测定乙酰胆碱酯酶(AchE)活性的方法。方法：以酶的催化活性为检测指标,研究磁场对酶活力的影响。结果：影响程度与磁场强度、磁化时间及温度有关。结论：为磁场调控酶开辟了新途径。     

大鼠胚胎小脑的发育学研究

用Ｎｉｓｌ染色法对大鼠胚胎１４、１６、１８及２０ｄ小脑进行形态学观察。结果表明：胚胎１６ｄ以前小脑由室管膜层、外套层及边缘层构成。胚胎１８ｄ开始出现典型的皮层结构。外颗粒层由较密集的深染细胞组成，数目随着胎龄的增加而增多。蒲氏层由较大淡染细胞组成，数目随着胎龄的增加而逐渐减少。颗粒层内细胞成份较复杂，细胞密度随胎龄增加呈下降趋势。     

小脑出血31例临床分析

目的 :进一步提高小脑出血的诊治水平。方法 :回顾性总结 31例小脑出血患者的症状、体征、影像学表现及治疗。结果 :本组病人以恶心呕吐、眩晕和共济失调为常见临床表现 ,而头痛和颈项强直仅分别见于 5 1.6 %和32 .3%的病人。出血量 <15mL者 2 1例 ,全部内科保守治疗 ,预后良好。出血量≥ 15mL者 10例 ,内科保守治疗 3例 ,其中 1例死于再出血 ;外科血肿清除治疗 7例 ,2例术后死于心肾功能衰竭。本组病人中无脑梗塞者的治愈率高于合并有脑梗塞者 ,差异有显著性。结论 :凡突发恶心呕吐、眩晕和行走不稳的病人 ,虽无头痛、颈项强直 ,均应警惕小脑出血的可能。小脑半球出血量 <15mL者主张内科保守治疗。出血量大伴重要脏器疾病者预后差 ;有脑梗塞者恢复较差。     

小脑语言功能的fMRI初步评价

目的利用磁共振功能成像（fMRI）技术初步探讨小脑的语义辨别功能。方法共9名受试者参加实验,fMRI刺激模式为Block Design,刺激材料通过听觉呈现,基线静息期要求受试者被动听机器扫描时的声音,以此作为控制任务。共进行两次实验,实验1任务期要求受试者仔细听无意义假词词组。实验2任务期要求听真词词组,并对词性（具体词还是抽象词）做出心理判断。结果所有受试者均完成了实验要求,且头动范围小于一个像素大小。fMRI实验1激活的脑区包括：双侧颞上回（包括Brodmann第22区、42区）、双侧额下回、双侧运动区及左侧角回。fMRI实验2激活的脑区包括：双侧颞上回（包括Brodmann第22区、42区）、双侧额下回、双侧运动区及左侧角回、右侧小脑半球。在左侧额下回激活的强度和范围上,实验2明显〉实验1。结论f胀I对小脑语言功能研究具有很大的价值,通过9例正常人研究发现小脑的激活与词语语义辨别有关。     

不同品种实验兔虹膜酪氨酸酶基因序列和表达量的变化

目的从酪氨酸酶基因序列和表达量两个方面探讨酪氨酸酶与家兔虹膜颜色表型的关系。方法通过PCR扩增和测序检测4个具有不同颜色性状的家兔品种的酪氨酸酶基因外显子序列多态性;通过荧光定量PCR检测酪氨酸酶基因表达水平。结果白化品种日本大耳白兔和獭兔的TYR基因序列在第1118个碱基处都由C突变为A,并导致编码蛋白在373位,即最后一个N-糖基化位点发生由Thr到Lys的突变。白毛黑眼兔和青紫兰兔在第870个碱基处全部发生由A到T的无义突变。在白毛黑眼兔种群的所有个体和獭兔种群的部分个体中都发现TYR基因序列在第91个碱基处发生G到A的突变,导致氨基酸序列第31位处Val到Met的变异。经内参基因GAPDH的校正,TYR基因在白毛黑眼兔和青紫兰兔中表达水平显著高于在日本大耳白兔和獭兔中的表达水平(P0.01)。而在白毛黑眼兔和青紫兰兔之间、日本大耳白兔和獭兔之间,TYR基因的表达差异没有显著性。结论家兔TYR基因突变可能大幅度降低TYR基因表达,导致酪氨酸酶功能低下,从而影响虹膜颜色表型。     

VitC对丙烯酰胺诱导小脑损伤的保护作用

目的　探讨大剂量VitC对丙烯酰胺 (ACR)诱导小鼠脑损伤的保护作用。方法　连续小鼠腹腔注射不同剂量ACR(2 5mg/kg·d)为染毒组 ,VitC组在小鼠染毒的同时腹腔注射VitC(5 0mg/kg·d) ,正常对照组以等量生理盐水注射。在用药第 5天、10天分离小脑采用硫巴比妥酸法 (TBA)测定过氧化脂质 (LPO)的含量 ,采用逆转录 聚合酶链反应检测鼠纤粘连蛋白 (fibronectin ,Fn)基因的表达。结果　ACR组小脑LPO与正常对照组比较均有显著差异 (P <0 .0 5 ) ;且低剂量ACR组 (第 5天、10天 )之间 ,VitC组与ACR组比较均有显著性差异 (P <0 .0 5 )。ACR组Fn基因表达明显上调 ,VitC组Fn表达下降。结论　ACR神经毒性与氧自由基增多密切相关 ,VitC能够减轻ACR神经毒作用。ACR对Fn基因表达的影响 ,可能介导其神经毒作用。     

一氧化碳、甲苯、正壬烷间断暴露对小鼠全血乙酰胆碱酯酶活性的影响

目的:探讨不同浓度一氧化碳、甲苯、正壬烷间断暴露对小鼠全血乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的影响。方法:以20日龄雄性Wistar小鼠为实验对象,随机分组,每组12只。将每组小鼠暴露于预先设定好的一定浓度某种气体的密闭动物实验舱中(用色谱分析法检测舱室中气体浓度,保持浓度恒定)。暴露时间为每天4 h,持续暴露10 d。一氧化碳设置2个浓度,即57.25、114.50 mg/m3;甲苯设置3个浓度,即94、188、376 mg/m3;正壬烷设置3个浓度,即131、262、524 mg/m3。对照组气体为空气。第10天暴露完成后,将小鼠处死,取全血测AChE活性。AChE活性的测定采用硫代乙酰胆碱-硫代双硝基苯甲酸比色测定法[1]。结果:(1)不同浓度一氧化碳作用对小鼠全血AChE活性的影响:57.25 mg/m3组和114.50 mg/m3组与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01)。(2)不同浓度甲苯对小鼠全血AChE的影响:94 mg/m3组AChE活性低于对照组,但差异无统计学意义;188 mg/m3组和376 mg/m3组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。(3)不同浓度正壬烷对小鼠全血AChE活性的影响:3个浓度组AChE活性与对照组相比差异均无统计学意义。结论:一氧化碳、甲苯可降低小鼠全血AChE活性,对神经系统有一定的抑制作用,并显示有剂量效应关系趋势;本实验浓度的正壬烷对小鼠全血AChE活性影响不明显。     

泌乳母兔体重变化及相关因素的研究

21只泌乳母兔根据其产仔数分为5个小组，进行一个月的饲养试验，试验结果表明，泌乳期间母兔的体重变化与产仔数关系各组差异不显著（P＞0．05），与仔兔的增重呈正相关（r＝0．898）。母兔产仔后20日龄体重降到最低点，以后母兔体重开始逐渐恢复，而窝产仔数与个体初生重呈负相关（r＝-0．849）。     

大鼠胚胎小脑提取液蛋白质成分分析

目的：探讨不同胎龄大鼠小脑组织所含蛋白成分的差异。方法：制备１６ｄ、１８ｄ胚胎（Ｅ１６、Ｅ１８）及新生１ｄ（Ｐ１）大鼠小脑提取液（ｃｅｒｅｂｅｌｌｕｍｅｘｔｒａｃｔｓ，ＣＥ），采用ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定ＣＥ内的蛋白成分差异。结果：Ｅ１６和Ｅ１８ＣＥ含有Ｐ１ＣＥ所没有的蛋白带，分子量分别约为２５．８，４５．１，８９．１和１７９．５ｋｄ。结论：为寻找新的神经营养因子提供了线索，并为选择最佳移植物供体提供了依据。     

成年大鼠小脑差异表达基因的克隆

目的 分析成年大鼠小脑基因与新生大鼠小脑基因的差异表达并获取新的表达序列标签。方法 成年大鼠小脑来源的cDNA为受检者（tester）,新生大鼠小脑的cDNA为驱动者（driver）,进行差减杂交,经克隆、获得成年大鼠小脑差减杂交为。结果 共挑选出54个阳性克隆质粒,测序得到56个不同基因片段序列,其中有16个是大鼠中首次测得的表达序列标签,并被GenBank收录（BG946773～BG946788）。结论 用差减杂交法建立差异表达基因文库可快速筛选未知表达序列标签。