二甲氨基乙醇和复方氨基酸溶液对衰老 大鼠皮肤胶原代谢和自由基的影响

目的 探讨真皮内注射二甲氨基乙醇（DMAE）和复方氨基酸溶液（AA）对皮肤胶原代谢和自由基的影响.方法 80只大鼠随机分成衰老治疗组（60只）、衰老对照组（10只）和正常对照组（10只）.皮下注射半乳糖制备衰老模型.衰老治疗组从第18天开始,在两侧臀部真皮内分别注射0.2％ DMAE＋AA、0.1％ DMAE＋AA、0.2％ DMAE、0.1％ DMAE、AA、生理盐水（NS）,每周1次,连续4周.观察各组皮肤苏木精-伊红染色法（HE）切片组织学变化并测定皮肤中含水量、超氧化物歧化酶（SOD）活力、羟脯氨酸（HYP）和丙二醛（MDA）含量.结果 0.2％DMAE＋ AA组、0.1％ DMAE＋AA组表皮、真皮厚度和胶原纤维面积均高于衰老对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.0.2％ DMAE＋AA组、0.1％ DMAE＋ AA组与其他各衰老组相比,HYP含量增加、SOD活力升高、MDA含量降低,其组间差异具有统计学意义（P＜0.05）.正常对照组、0.2％ DMAE＋AA组、0.1％DMAE＋ AA组之间HYP含量差异无统计学意义（P＞0.05）.各组大鼠皮肤含水量差异无统计学意义（P＜0.05）.结论 真皮内注射0.2％ DMAE＋AA、0.1％ DMAE＋AA能显著增加表皮、真皮厚度和胶原纤维面积及HYP含量,提高SOD活力、降低MDA含量,表明其有清除皮肤自由基、提高抗氧化能力和促进皮肤胶原代谢的作用,从而延缓皮肤衰老.     

二甲氨基乙醇和复方氨基酸溶液对衰老大鼠皮肤Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达的影响

目的依据中胚层疗法理念,观察真皮内注射二甲氨基乙醇（Dimethylaminoethano,DMAE）和复方氨基酸溶液（compound amino acid injection,AA）对D-半乳糖（D-galactose,D-gal）诱导的化学性衰老大鼠皮肤Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达的影响。方法80只Wistar大鼠随机分为正常对照组、衰老对照组和衰老治疗组。衰老治疗组从注射D-gal后第18天开始,在大鼠两侧臀部皮肤分别皮内注射0．2％DMAE＋AA、0．1％DMAE＋AA、0．2％DMAE、0．1％DMAE、AA、生理盐水（NS）,1次／周,连续4周。观察各组皮肤组织学变化、真皮厚度、羟脯氨酸（Hydroxyproline,Hyp）、Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白mRNA和成纤维细胞增殖细胞核抗体（proliferating cell nuclea antigen,PCNA）表达水平的变化。结果真皮内注射0．1％DMAE＋AA、0．2％DMAE＋AA可使衰老大鼠真皮厚度、Hyp、Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达水平显著增加（P〈O．05）,而对PCNA表达无显著影响（P〉O．05）。结论真皮内注射0．2％DMAE＋AA、0．1％DMAE＋AA可促进衰老大鼠皮肤Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白合成,显著增加真皮厚度和胶原蛋白含量,具有一定延缓皮肤衰老的作用。     

真皮内注射二甲氨基乙醇对大鼠衰老模型胶原合成代谢的影响

目的:探讨真皮内注射二甲氨基乙醇(DMAE)复合制剂(赛雷弗 ?)对D-半乳糖诱导的亚急性衰老大鼠皮肤胶原合成代谢的影响。 方法:2014年4—10月,在青岛大学解剖教研室进行实验研究。30只Wistar雄性大鼠分为衰老对照组、衰老治疗组、正常组,每组各10只。衰老对照组、衰老治疗组两组颈背部皮下...     

人参皂苷Rg3对HT-29细胞株MMP-9和TIMP-1表达的影响

目的:研究人参皂苷Rg3对HT-29结肠癌细胞株细胞增殖及对MMP-9和TIMP-1表达的影响,探讨其抑制肿瘤细胞侵袭、转移的机制.方法:分别用低剂量(25 μg/mL)、中剂量(50 μg/mL)和高剂量(100 μg/mL)人参皂苷Rg3及对照(0 μg/mL,DEME培养液和DMSO助溶剂)培养HT-29细胞24 h、48 h、72 h,采用RT-PCR方法检测MMP-9 mRNA和TIMP-1 mRNA表达,MTT法检测肿瘤细胞增殖的抑制率.结果:人参皂苷Rg3可以抑制HT-29细胞MMP-9 mRNA的表达,抑制作用随着剂量的增加及时间的延长而增强;可以促进HT-29细胞TIMP-1 mRNA的表达,促进作用随着剂量的增加及时间的延长而增强;对HT-29细胞生长的抑制作用与随着药物浓度的增加及作用时间的的延长而增强.结论:人参皂苷Rg3抑制HT-29结肠癌细胞株MMP-9的表达,促进TIMP-1的表达,并具有抑制肿瘤细胞生长的作用.     

强脉冲光对大鼠皮肤TIMP-1表达的影响

目的:观察强脉冲光(IPL)对大鼠皮肤基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响,探讨光子嫩肤的分子生物学机制。方法:选择15只SD大鼠,每只选三个部位用强脉冲光照射,采用同一照射参数,能量密度34J/cm2,分为三个脉冲,脉宽各为4ms、5ms、6ms,脉冲延时为20ms及25ms。照射后第1、3、5、7、15、30天分别于治疗及非治疗部位切取皮肤样本,免疫组化染色(SABC法)观察。结果:照射后第1天TIMP-1无表达,第3天时出现表达并逐渐增强,第15天时达到高峰,至第30天时表达仍处于较高水平,非治疗部位染色阴性。结论:强脉冲光照射皮肤后可引起TIMP-1表达的增加,提示TIMP-1在光子嫩肤过程中对皮肤的重塑起重要作用。     

TGF-β1对UVA照射人皮肤成纤维细胞MMP-1和MMP-3 mRNA表达的影响

目的：研究转化生长因子-β1（tansforming gowth fctot-beta1,TGF-β1）对长波紫外线（ultrayiolet A,UVA）照射人皮肤成纤维细胞基质金属蛋白酶-1（matrix metalloproteinase-1,MMP-1）和基质金属蛋白酶-3（matrix metalloprotein ase-3,MMP-3）mRNA表达的影响,探讨TGF-D,对皮肤成纤维细胞的光保护机制。方法：通过体外培养人皮肤成纤维细胞,加入不同浓度TGF-β1（0．1、1、10ng／m1）预处理细胞后UVA15J／cm^2照射诱导细胞光老化,用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测成纤维细胞增殖活性,半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）测定MMP-1、MMP-3 mRNA表达。结果：UVAI5J／cm^2照射前给予不同剂量TGF-β1预处理,随TGF-β1剂量增加成纤维细胞增殖活性明显提高,MMP-1、MMP-3 mRNA表达随着TGF-β1剂量增加而降低。结论：TGF-β1可提高UVA照射体外培养成纤维细胞增殖活性,减少UVA照射体外培养的皮肤成纤维细胞MMP-1、MMP-3 mRNA表达,减少其对胶原的降解,对UVA照射皮肤成纤维细胞起保护作用。     

止消通脉宁对KKAy小鼠肾纤维化及MMP-2/TIMP-1mRNA表达的影响

目的:探讨止消通脉宁对自发性2型糖尿病KKAy小鼠肾纤维化及TIMP-1/MMP-2mRNA表达的影响。方法:将SPF级16周龄雄性KKAy小鼠50只按血糖值随机分为模型组、缬沙坦组、止消通脉宁高、中、低剂量组,另设10只C57bl/6J小鼠为正常组,连续灌喂给药,观察记录小鼠一般状况,4周后处死小鼠,取血和肾组织,检测血清BUN、Scr值,肾组织HE、PAS、Masson染色,用实时荧光定量PCR法检测肾组织中TIMP-1/MMP-2mRNA的相对表达量。结果:与模型组比较,止消通脉宁高剂量组尿蛋白有下降的趋势,肾功能得到改善,肾脏病理损伤减轻,肾组织TIMP-1/MMP-2mRNA水平均显著降低(P<0.05)。结论:中药复方止消通脉宁能够抑制自发性2型糖尿病KKAy小鼠肾组织TIMP-1/MMP-2mR-NA表达,减轻肾纤维化程度,这可能是其防治DN的作用机制之一。     

强脉冲光对大鼠皮肤MMP-1表达的影响

目的观察强脉冲光对大鼠皮肤金属蛋白酶-1(MMP-1)表达的影响,探讨光子嫩肤的分子生物学机制。方法选择15只SD大鼠,每只选3个部位用强脉冲光照射,采用同一照射参数,能量密度34J/cm2,分为3个脉冲,脉宽各为4、5、6ms,脉冲延时为20ms及25ms。照射后第1、3、5、7、15、30天分别于照射及非照射部位切取皮肤样本,免疫组化染色,光镜下观察。结果照射后第1天MMP-1即见表达,第7天表达至高峰,第15天表达开始减弱,第30天皮肤全层的表达处于较低水平,非照射部位染色阴性。结论强脉冲光照射大鼠皮肤后可引起MMP-1表达的增加,提示MMP-1在光子嫩肤过程中对皮肤的重塑起到一定的作用。     

苯那普利对糖尿病大鼠肾组织中MMP-9和TIMP-1表达的影响

基质金属蛋白酶（MMPs）是一组Zn^2＋依赖性内肽酶，主要参与细胞外基质的降解、转运、组织重塑，MMP-9是MMPs家族中最大的成员，主要降解Ⅳ型胶原，在一定的病理条件下对细胞的迁移、侵袭、活化及动脉硬化的形成，血管重塑起重要作用。特别是MMPs与金属蛋白酶组织抑制因子（TIMPs）的平衡状态（MMPs／TIMPs）决定了人体的生理及某些疾病的发生和发展 .     

基质金属蛋白酶家族在骨关节炎软骨组织中表达的研究

[目的]观察骨关节炎关节软骨中MMP-7、MMP-9、MMP-13和TIMP-1的表达,探讨其与软骨退变的关系及可能的作用机制。[方法]选取20例因骨关节炎行关节置换的软骨组织,常规HE染色观察其组织学形态,ABC免疫组化法观察关节软骨MMP-7、MMP-9、MMP-13和TIMP-1的表达,2例因意外受伤截肢患者的正常膝关节软骨标本作为对照。统计采用Mann-Whitney U非参数检验及相关分析。[结果]骨关节炎关节软骨出现裂隙、纤维化,软骨细胞增多、排列紊乱,并出现大量簇聚软骨细胞和肥大软骨细胞。MMP-7和MMP-13在正常软骨全层均呈低表达,但在退变软骨中的表达则明显增多,光密度值行U检验,两组差异有显著性(P<0.01)。在正常与OA软骨的浅层,MMP-9和TIMP-1的表达无显著性差异(P>0.05);但在深层软骨中,OA软骨MMP-9和TIMP-1的表达较正常软骨明显增多,两组差异有显著性(P<0.01)。[结论]MMP-7,13在OA软骨全层表达均多于正常软骨;MMP-9,13仅在OA软骨深层出现过多表达。MMPs与TIMPs的失衡是导致关节软骨发生组织学退变的原因之一。     

强脉冲光对培养的人成纤维细胞表达MMP-1和TIMP-1的影响

目的：观察强脉冲光照射对体外培养的成纤维细胞表达基质金属蛋白酶（MMP-1）和基质金属蛋白酶组织抑制因子（TIMP-1）的影响，探讨IPL嫩肤作用的分子生物学机制。方法：采用能量密度分别为20、25、30J／cm^2的强脉冲光对培养的人成纤维细胞进行照射，于照射后24h及48h应用ELIsA法测定上清液中MMP-1和TIMP-1的表达并与对照组比较。结果：照射24h后25及30J／cm^2组上清液中检测到的MMP-1、TIMP-1含量轻度升高；48h时各能量组MMP-1均升高，但各组间并无显著性差异。TIMP-1随能量的升高而含量增高。结论：强脉冲光照射成纤维细胞后可引起MMP-1，TIMP-1表达的增加，但是TIMP-1的增加远远大于MMP-1的增加，提示IPL嫩肤作用的生物学机制可能与成纤维细胞产生的TIMP-1增加有关。     

强脉冲光对大鼠皮肤MMP-1表达的影响

目的观察强脉冲光对大鼠皮肤金属蛋白酶-1（MMP-1）表达的影响，探讨光子嫩肤的分子生物学机制。方法选择15只SD大鼠，每只选3个部位用强脉冲光照射，采用同一照射参数，能量密度34J／cm^2，分为3个脉冲，脉宽各为4、5、6ms，脉冲延时为20ms及25ms。照射后第1、3、5、7、15、30天分别于照射及非照射部位切取皮肤样本，免疫组化染色，光镜下观察。结果照射后第1天MMP-1即见表达，第7天表达至高峰，第15天表达开始减弱，第30天皮肤全层的表达处于较低水平，非照射部位染色阴性。结论强脉冲光照射大鼠皮肤后可引起MMP-1表达的增加，提示MMP-1在光子嫩肤过程中对皮肤的重塑起到一定的作用。     

人全厚皮片移植裸鼠模型烧伤后 MMP-1、TIMP-1、TGF-β1的表达

目的研究基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)、转移生长因子-1(TGF-β1)在烧伤创面愈合至瘢痕(HS)形成过程中的表达、关系和作用.方法将人的正常全厚皮肤移植于裸鼠,待其完全存活后造成深Ⅱ度烧伤创面.用免疫组织化学染色的方法,观察MMP-1、TIMP-1、TGF-β1在烧伤创面愈合至HS形成全过程中的表达.结果 MMP-1于烧伤后第2天出现,第3～15天表达较强,第28天已下降到基底值.TIMP-1于烧伤后第2天出现,一直持续到烧伤后5个月HS形成,其表达类似于MMP-1的接触界面模式,但无MMP-1规则,且在血管周围有明显的分布.TGF-β1于烧伤后12 h出现,一直持续到烧伤后5个月HS的形成.三种因子在不同结构的接触界面表达明显.结论在创伤愈合的炎症期和增生期,MMP-1和TIMP-1两种力量处于动态平衡;在重塑期,TIMP-1通过抑制MMP-1的表达减少胶原降解,从而诱导HS形成.TGF-β1在创伤愈合过程中广泛和长期的表达模式,与它对细胞功能广泛的调节作用一致,与它对MMP-1的抑制作用也一致.     

苦参碱对肾小管间质MMP-3和TIMP-1的影响

目的:观察苦参碱对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型肾小管间质MMP-3和TIMP-1表达水平的影响,初步探讨其对小管间质纤维化的作用机制.方法:实验分为正常组(A组)、假UUO组(B组)、UUO组(C组)、苦参碱低剂量治疗组(D组)、苦参碱高剂量治疗组(E组)和福辛普利对照组(F组).运用免疫组化技术观察第7 d、14 d各组大鼠的MMP-3和TIMP-1表达水平,采用Pearson分析方法分析二者在C组中的相关性.结果:在C组和各药物组中,MMP-3表达水平在第7 d、14 d均显著低于A组和B组(P<0.05),但各药物组的表达水平明显高于C组(P<0.05);TIMP-1在A组和B组的表达最低,各药物组的表达水平显著低于C组(P<0.05);MMP-3 和TIMP-1在E组与F组间均无统计学差异(P>0.05);MMP-3与TIMP-1在C组的免疫组化半定量分析呈显著负相关(P<0.01).结论:苦参碱可部分恢复肾小管间质MMP-3的表达,降低TIMP-1的表达,延缓肾小管间质纤维化的进程.     

大肠癌组织中基质金属蛋白酶-9、基质金属蛋白酶抑制剂-1的表达及对微血管生成和肿瘤转移的影响

目的　探讨基质金属蛋白酶 -9(MMP -9)与基质金属蛋白酶抑制剂 -1(TIMP -1)在大肠癌中的表达及其与血管生成 ,侵袭转移之间的关系。方法　采用免疫组化S -P法 ,检测 46例大肠癌组织中MMP -9,TIMP -1的表达和微血管密度之间的关系。结果　MMP -9的表达与肿瘤的分化程度、浸润深度、Dukes分期及淋巴结转移明显相关 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ;TIMP -1的表达与Dukes分期、淋巴结转移明显相关 ( P <0 .0 5或 P <0 .0 1) ;MMP -9表达阳性的大肠癌组织微血管密度 (MVD)值明显高于表达阴性者 (P <0 .0 1)。结论　MMP -9、TIMP -1的表达和微血管生成与大肠癌侵袭转移密切相关     

MMP-9和TIMP-1在人结核性淋巴结中的表达及临床意义

目的探讨基质金属蛋白酶9(MMP9)及其组织抑制物(TIMP1)在人结核性淋巴结中的表达及其临床意义。方法免疫组化SP法检测MMP9和TIMP1蛋白在20例活动性淋巴结结核、20例陈旧性结核性淋巴结病灶和20例慢性非特异性淋巴结炎中的表达,采用图象分析技术对免疫组化结果进行定量分析。结果MMP9和TIMP1在三组淋巴结病变均有表达,其中MMP9在活动性淋巴结结核的肉芽肿、坏死周围炎性区呈强表达,在非特异性淋巴结炎和陈旧性结核病灶呈弱表达。MMP9,TIMP1及MMP9/TIMP1在活动性结核组表达显著高于非特异性淋巴结炎和陈旧性结核病灶(均为P<0.01),在单纯活动性淋巴结核组和合并活动性肺结核组表达无显著性差异(均为P>0.05)。结论MMP9、TIMP1高表达可能在结核性淋巴结炎发病机制中发挥重要作用,MMP9/TIMP1失衡可能预示疾病进展和结核播散。     

MMP-2、MMP-9、TIMP-1在血管成形术后再狭窄中的表达及其意义的实验研究

目的观察PTA后MMP-2、MMP-9和TIMP-1在血管壁各层随时间的演变规律,探讨其在血管再狭窄过程中的表达及意义。方法48只大鼠制作成颈动脉再狭窄动物模型,选取30只内膜增生满意的标本,分别代表动脉损伤后1、3、7、14、28、42天6个观察时间点,对胶原纤维进行Masson染色。MMP-2、TIMP-1、PCNA进行免疫组织化学染色,MMP-9进行免疫组织化学和原位杂交两种染色。分析它们的表达与内膜增生和血管重塑的关系。结果正常血管不表达MMP-9mRNA及蛋白,损伤后第3天中膜、外膜mRNA表达达高峰,第7天内膜表达达高峰。MMP-9蛋白第7天内膜表达达高峰,且阳性细胞率高于中膜和外膜。第14、28天,血管壁各层表达逐渐下降至基线水平,内膜的阳性细胞主要集中在新生内膜靠近管腔的一侧。内膜MMP-2表达高峰出现晚至第14天,且近内弹力板处MMP-2也有明显的表达。正常血管壁不表达TIMP-1,损伤后第3天,中膜和外膜表达达高峰。第7天,新生内膜表达达高峰,中膜和外膜仍有较高水平表达。结论MMP-9、MMP-2、TIMP-1参与再狭窄,内膜MMP-9表达与早期增殖的细胞向内膜迁移形成新生内膜有关。MMP-2表达与晚期内膜形成、内膜重塑有关。TIMP-1的表达对内膜增生和重塑没有直接作用,其表达升高是机体为适应MMPs升高做出的代偿反应,在维持自身平衡中起作用。