中国人群LW血型基因多态性的研究

本研究探讨中国人群Landsteiner—Wiener（LW）血型基因的多态性。随机采集深圳市血液中心160名非血缘关系无偿志愿捐血者外周血样EDTA抗凝血标本，并提取DNA。对这160例DNA标本直接进行LW血型基因的第一外显子测序分析，同时用优化的LWa／LWb等位基因PCR—SSP方法进行了的基因分型。结果表明：在对这160例捐血者基因组DNA的分子生物学研究中发现LW血型等位基因均为LWa纯合子。结论：在中国人群中LWa等位基因更常见，本次研究中100％的献血者LW血型等位基因均为LWa，目前还未发现LWb等位基因。     

深圳献血人群Duffy血型基因多态性的研究

目的建立Duffy血型的分子生物学检测方法,研究深圳献血人群Duffy血型基因多态性。方法在2011年8～11月本中心900名无血源关系献血者标本中,用卡式微柱凝胶抗球蛋白方法鉴定Duffy血型表现型,建立Duffy血型的基因分型方法 PCR-SSP法及PCR产物直接测序法,对900例标本DNA进行PCR-SSP法检测,其中50例做Duffy血型基因编码区域序列测定。结果血清学结果为Fy(a+b-)855例,Fy(a+b+)43例,Fy(a-b+)2例,Fy(a-b-)0例。900例Duffy血型PCR-SSP法基因分型结果与血清学表现型完全一致。50例FY基因编码序列部分测序结果与血清学、PCR-SSP法吻合,表现型FY(a+b-)标本测序结果可见FY基因第2外显子第125位核苷酸碱基为纯合子G;表现型FY(a-b+)标本测序结果为第125位核苷酸碱基为纯合子A。结论 Duffy血型PCR-SSP基因分型方法及PCR产物直接测序法可以正确地鉴定Duffy基因型,适用于Duffy血型基因多态性的研究。深圳地区Fya的基因频率为0.973 9,Fyb的基因频率为0.026 1。     

中国汉族人群Diego血型基因频率调查研究

1955年首先在委内瑞拉的一个新生儿溶血病患者的母亲体内发现抗Dia。1967年发现对应的抗Dib。在国内外的众多血站中都曾报导过由抗体Dia抗体引起的溶血性输血反应和新生儿溶血病。抗Dib非常罕见，但同样能引起新生儿溶血病和溶血性输血反应。中国台湾Dia血型抗原的表现频率为3．2％，中国香港发现有抗Dia的新生儿溶血病，认为中国香港Dia抗原的表型频率为4．4％。抗Dib比较少见，在我国华北地区曾发现一个家系中3个人为Di（a＋b-），其中一人血清中就有抗Dib抗体，国内也有由抗Dib抗体引起的溶血反应的实例。     

中国汉族人群红细胞MNS血型系统M、N抗原数量表达的研究

目的 探讨中国汉族人群不同个体红细胞M、N血型抗原数量的表达情况.方法 从962例中国汉族献血人群中随机选取MM型、MN型、NN型各50例,以血型血清学、PCR-SSP基因分型技术确定血型,应用流式细胞术分析M抗原和N抗原表达量.结果 962例献血者中MM型占24.01%、MN型占47.19%、NN型占28.79%.选取的150例样本基因分型与血清学结果完全相符.MM型个体间M抗原平均荧光强度极差为432.78;MN型个体间M抗原平均荧光强度极差为425.06;MN型个体间N抗原平均荧光强度极差为6.38;NN型个体间N抗原平均荧光强度极差为35.74.MM型的M抗原数量约为MN型的2.686倍;NN型的N抗原数量约为MN型的4.268倍.结论 中国汉族人群M或N抗原数量的表达在不同个体间差异明显.     

GYP mRNA基因可变剪接对MNS血型糖蛋白GPA和GPB在细胞表面定位的影响

目的 分析MNS血型相关基因GYPA、GYPB mRNA剪接体多态性,探讨各种剪接体编码的GPA和GPB蛋白异构体的亚细胞定位与MNS血型抗原表达的相关机理。方法 随机选取无偿献血者10份血液,提取外周血总mRNA,反转录为cDNA后,以巢式PCR方法扩增GYPA、GYPB基因的开放阅读框并进行Sanger测序,碱基序列与GYPA(NCBI:NM＿002099)、GYPB(NCBI:NM＿002100.5)比对。得到的GYPA、GYPB开放阅读框的野生型及各种剪接异构体编码序列后,通过融合PCR技术分别与绿色荧光蛋白(GFP)编码基因融合并克隆后转染到HEK293细胞进行过表达,通过聚焦激光扫描显微镜监测GPA-GFP和GPB-GFP融合荧光蛋白的亚细胞定位。结果 2例标本的GYPA mRNA中缺失外显子1与外显子2,预测的GPA蛋白异构体缺失2～26位氨基酸,GYPB mRNA全长序列完整。6例标本的GYPA mRNA完整,GYPB mRNA中缺失外显子2,预测的GPB蛋白异构体缺失13～45位氨基酸,其他外显子序列完整。1例标本的GYPA mRNA完整,GYPB mRNA的外显子5...     

海南省黎族人群12个红细胞稀有血型系统抗原基因的多态性研究

目的:探索海南省黎族人群 Duffy、Diego、Kidd、Dombrock、MNS、Lutheran、Kell、Colton、Scianna、Yt、Knops 和Indian等12个红细胞血型系统主要抗原基因频率的分布特征.方法:采用聚合酶链式反应-序列特异性引物法(PCR-SSP)对214名海南省黎族人群12个红细...     

中国人群MN血型中M、N等位基因多态性的研究

目的:检测血型糖蛋白GPA相关基因GYPA中全部外显子与部分内含子碱基序列,探讨中国人群MN血型中M、N等位基因的多态性。方法:随机选取国籍为中国人的无偿献血者225人份的血液样本,以血型血清学方法鉴定M、N血型表现型;自行设计引物,直接测序相关样本GYPA基因的exon-1~7全长碱基序列以及intron-1~7中部分碱基序列,根据序列中碱基的变异分析M、N基因的多态性。结果:M、N血型的基因定型与血清学检测结果一致;根据intron-1中-9位,exon-2中1、22、34、35、56位,intron-2中23位,intron-3中55位,intron-4中63位,intron-5中1373、1374、1375位,intron-6中55、189、190位和exon-7中712位等的变异,可以把M、N基因细分为M101、M102、M103、M201、M202、N101、N102、N103、N104、N201;同时,本研究发现在G YPA基因的intron-2中42、54位突变与59、60位间插入碱基T的变异;intron-3中-28、-29、-65、-102位等基因位点存在新的变异。结论:MN血型中M、N基因具有多态性,中国人群GPA相关基因G YPA的各外显子、部分内含子的结构特点揭示了中国人群的M、N血型基因的多态性,为临床输血、人类群体遗传学及分子生物学的研究提供相关的基础。     

中国汉族人群MN血型相关基因gypa分子多态性的研究

本研究探讨中国汉族人群MN血型相关基因gypa的多态性。随机选取中国汉族人群中无血缘关系的无偿献血者202人份,以血清学方法鉴定样本的MN血型表现型。根据GenBank的NG-007470基因参照序列设计gypa第2外显子引物,对202人份的DNA进行PCR扩增,同时对扩增产物进行直接测序。结果表明:所有样本的gypa第2外显子第1、56位碱基均发生了变异,其中MN表现型杂合子主要以1A>C、22T/C、34A/G、35T/G、56T>C的形式存在;MM表现型纯合子主要以1A>C、22C、34G、35T、56T>C的形式存在;NN表现型纯合子主要以1A>C、22T、34A、35G、56T>C的形式存在。结论:中国汉族人群MN血型相关基因的多态性主要由gypa第2外显子的第1、22、34、35、56共5个位点的多态性所决定,其中第1、56位为非功能性SNP位点。     

深圳地区汉族无偿献血人群Kidd血型系统基因多态性的分子遗传学研究

目的 探讨深圳地区汉族无偿献血人群Kidd血型系统基因多态性的分子遗传学背景.方法 采用简单随机抽样法选择2015年1月至2015年12月于深圳市血液中心无偿献血的74例汉族献血者为研究对象.采用红细胞尿素溶血试验及常规血清学方法鉴定献血者的Kidd血型表型.采用PCR扩增JK基因第4～11外显子及部分内含子片段,并且采用直接测序法对PCR扩增产物进行序列分析.结果 ①74例献血者的Kidd血型表型分别为Jk(a+b+)37例,Jk(a+b-)16例,Jk(a-b+)21例,未筛查出稀有Kidd血型表型Jk(a-b-).②74例献血者的DNA样本均成功扩增JK基因第4～5外显子、第6外显子、第7外显子、第8～9外显子、第10外显子、第11外显子区域.③DNA序列分析结果显示,37例Jk(a+b+)表型献血者DNA样本中,JK基因存在第9外显子c.838G＞A和第7内含子c.664-68C＞T杂合突变.21例Jk(a-b+)表型献血者DNA样本中,JK基因为c.838AA和c.664-68CC纯合型,而16例Jk(a+b-)表型献血者DNA样本中,JK基因为c.838GG和c.664-68TT纯合型.74例献血者DNA样本中,JK基因均为第8内含子c.811+84TT纯合型.结论 深圳地区汉族献血人群Kidd血型系统中,除存在JK基因第9外显子c.838G＞A(p.Asp280Asn)突变以外,还存在第7内含子c.664-68C＞T碱基置换,该突变可能与JKa/JKb基因多态性相关.并且JK基因第8内含子均为c.811+84TT纯合型,其在中国人群中属于常见的基因型.     

上海地区汉族人群9个红细胞血型系统42种稀有血型抗原的基因多态性

目的研究上海地区汉族临床输血人群9个红细胞血型系统42种抗原基因的多态性分布,以提高配合性输注的能力,减少输血反应。方法采用PCR—SSP方法对114例上海地区汉族临床输血成年人群进行42种稀有血型抗原基因分型。结果Lutheran和Kidd血型系统抗原基因频率分别为：Lua=0,Lub=1．0000,Aua=0．9254,Aub=0．0746,Jka=0．4781,Jkb=0．5219。Gerbich、Chido—Rodgers、Knops、Indian、Ok、Gil、Cromer血型系统抗原基因频率不具有多态性,Gerbieh血型系统基因型均为GE2GE3GE4,Chido—Rodgers血型系统基因型均为C4AC4BCh1Ch6Rg1Rg2,Khops血型系统基因型均为KnaKnaMcCaMcCaSIaSIa,Indian血型系统基因型均为InbInb,Ok血型系统基因型均为0kaOka,Gil血型系统基因型均为Gil（-）Gil（-）,Cromer血型系统基因型均为Cr（a＋）Esa（＋）IFC（＋）WesbUMC（4-）Dra（＋）Tca。经Х^2检验,结果符合Hardy—weinberg遗传定律。结论上海地区人群Lutheran和Kidd血型系统抗原基因频率具有多态性,而Gerbieh、Chido—Rodgers、Knops、Indian、Ok、Gil、Cromer血型系统抗原基因频率呈单态性分布。     

中国汉族人群ABO血型系统基因分型研究与应用

目的 研究中国汉族人群ABO基因多态性，并将基因分型技术用于解决临床输注中血型血清学难题：方法 快速盐析法提取外周血中的DNA，采用聚合酶链反应—序列特异性引物(PCR—SSP)基因方法对ABO血型定型，并且在吸收放散试验、唾液血型物质凝集抑制等血清学试验基础上，用PCR—SSP法扩增疑难ABO血型的等位基因：结果 在中国汉族符合Hardy—Weeinberg平衡的随机群体(260人)中，检出O1、B、A101(A267c)和A102／103(A467r)四种等位基因，其基因频率分别为、0.5827,0．1．846、0.0096、0.2231：在疑难血型鉴定中6份血清学定为A2的标本中，只有2例基因分型确定为A201O1，其余均为A102／A103O1型，在一家系疑难血型鉴定中，兄弟三人均为类孟买型，ABO基因分型分别为A102B、A102B、A102O1.结论 ABO RCR—SSP基因分型是一种方便、快速、可靠的技术，与血型血清学相比有着显著优势：研究发现中国汉族人群A2等位基因构成与国际报道的基因构成存在差异。     

中国浙江人群中Lewis血型相关的FUT3基因多态性初步研究

为研究中国浙江人群中Lewis血型相关的FUT3基因多态性,以血清学方法鉴定183例随机样本的Lewis表型,将其中39例Le（a-b-）以及选取的Le（a＋b-）、Le（a-b＋）和Le（a＋b＋）各3例进行FUT3基因全编码区序列分析,并对各种可能的复合杂合基因型进行单倍体序列分析.结果显示,真正的Lewis阴性表型在中国浙江人群中比例约为10.4%,在48例直接测序样本中发现59T＞G、202T＞C、314C＞T、508G＞A和1067T＞A等5个变异位点;单倍体分析显示,除功能性的Le等位基因外,发现5种非功能性的le等位基因,分别为le^59（59T＞G）;le^1067（1067T＞A）;le^59,1067（59T＞G和1067T＞A）;le^59,508（59T＞G和508G＞A）和le^202,314（202T＞C和314C＞T）.结论：在浙江人群中,FUT3非功能性等位基因具有较为广泛的遗传多态性.     

中国汉族人群Diego血型基因频率调查研究

目的调查研究中国汉族人群的Diego血型基因频率分布。方法用血型血清学方法对1577例非相关的献血者进行Diego血型的筛选鉴定,并对部分标本进行基因分型和基因测序。结果1577例标本Diego血型血清学鉴定结果,Dia+b-1例,Dia+b+47例,Dia-b+1529例。结论汉族人群DI1基因频率为0.0155,DI2基因频率为0.9845。     

成都地区献血人群Kell等9个血型系统抗原基因分型研究

目的了解成都地区献血人群Kell等血型系统抗原基因的多态性分布。方法采用PCR-SSP方法对332名成都地区汉族献血者的Kell(KEL)、MNS(NMS)、Diego(DI)、Scianna(SC)、Dombrock(DO)、Colton(CO)、Duffy(FY)、Lutheran(LU)、Kidd(JK)等9个血型系统的22个抗原基因分型。结果成都地区汉族献血者Kell、Kidd、Duffy等血型系统抗原基因频率:KEL为K=0.000 0、k=1.000 0;MNS为m=0.575 2、n=0.424 6、S=0.0376、s=0.962 2,单体型MS=0.028 3、Ms=0.546 9、NS=0.009 3、Ns=0.415 3;DI为Dia=0.040 7、Dib=0.959 3;SC为Sc1=1.000 0、Sc2=0.000 0;DO为Doa=0.066 3、Dob=0.933 7;CO为Coa=1.000 0、Cob=0.000 0;FY为Fya=0.951 8、Fyb=0.048 2;LU为Lua=0.000 0、Lub=1.000 0,Aua=0.893 1、Aub=0.106 9;JK为Jka=0.442 8、Jkb=0.557 2。结论成都地区汉族献血人群中MNS、DI、DO、FY、LU和JK基因频率分布具有多态性,KEL、SC和CO基因频率呈单态性分布。     

广西贵港地区人群 MN 血型等位基因多态性的调查研究

目的　探讨广西贵港地区人群 MN 血型等位基因的分布特点。方法　收集 2018 年 9 月～ 2019 年 6 月期间广西贵港地区随机人群 300 人份血样,采用血型血清学方法鉴定其 MN 表现型,同时提取血样中的 DNA,对 MN 血型相关基因 GYPA 的 exon-2 序列扩增后测序,分析广西贵港地区人群 MN 等位基因的多态性并与中国西安、新疆、贵州、广东等地区随机人群的 MN 血型基因频率作比较。结果　广西贵港地区人群的 MN 血型血清学定型与基因测序结果完全一致,300 例 MN 血型血清学鉴定中,MM 表型为 140 例,MN 表型为 121 例,NN 表型为 39 例;M 基因频率为 0.668,N 基因频率为 0.332。通过数据比较分析可知广西贵港地区人群基因各型的构成比与国内其他地区人群不同,MN 血型抗原在不同个体中存在明显的剂量效应。结论　广西贵港地区人群 MN 血型基因具有独特的多态性,了解这种多态性有助于广西贵港地区临床的安全输血,预防新生儿溶血性疾病,为广西贵港地区人类群体遗传学特征及分子生物学的研究奠定基础。     

上海地区汉族人群红细胞稀有血型系统抗原基因的多态性研究

目的研究上海地区汉族临床输血人群8个红细胞稀有血型系统19种抗原基因多态性分布,提高配合性输注的能力。方法应用PCR-SSP方法进行血型抗原基因分型。结果Diego,Dombrock,Duffy血型系统抗原基因频率分别为：Di^a=0.0351,Di^b=0.9649;Do^a=0.0614,Do^b=0.9386;Fy^a=0.9649,Fy^b=0.0351,Fy=0;均具有多态性。而Kell,Yt,Scianna,L-W,Colton血型系统抗原基因频率分布为单态性。经χ2检验,均符合Hardy-weinberg遗传定律。结论上海地区汉族临床输血人群Diego、Dombrock、Duffy血型系统抗原基因频率具有多态性,随机临床输血抗原不合率分别是0.0654、0.1086、0.0654,应引起高度重视。     

Rh阴性血型者Del表型和RhD基因的检测

目的 初步探讨中国汉族人群Rh阴性血型者Del表型与RhD基因之间的关系。方法 对67例血清学方法检测为Rh阴性的供血者样本进行吸收放散试验以检测Del型，并扩增RhD基因的外显子3，4，5，7，10，检测RhD基因存在情况。结果 吸收放散试验表明67例样本中Del型22例，占32．8％，非Del型45例，占67．2％。在所有表型为ccee,ccEe的38例RhD(-)个体中，Del试验均为阴性，RhD基因完全缺失；而在表型为Ccee或CcEe的29例RhD(-)个体中，22例Del试验阳性，其中20例携带完整的RhD基因，2例有部分RhD基因；7例Del试验阴性，其中6例携带部分RhD基因，1例D基因完全缺失。结论 中国汉族人群中Rh阴性血型者RhD基因的存在及多态性多由Del引起。     

中国人群RhD阴性个体中D基因多态性的研究

目的 建立RHD基因分型技术，分析中国人群RhD阴性个体的RHD基因多态性分布状况。方法 设计8对特异性引物扩增RHD7个外显子(3，4，5，6，7，9，10)和内含子4，应用PCR—SSP技术，对l15例经常规血清学试验和吸收放散试验鉴定的“Rh阴性个体”，进行D基因多态性的研究。结果 l15例RhD阴性个体，用吸收放散试验检测后分成2组，一组被确认为RhD阴性表现型共88例(76．5％)，另一组是Del(放散)表现型共27例(23．5％)。应用PCR—SSP法对l15例RhD阴性个体作RHD内含于4检查，结果Del型个体都显示有RHD内含于4；对l15例中的17例进一步作RHD的7个外显子的鉴定，其中6例Del带有完整的RHD基因，ll例经吸收放散试验确认为RhD阴性表现型的个体则显示4种情况：7例全部缺失RHD基因，2例(1例ccEe和1例Ccee)带有完整的RHD基巴，1例缺失RHD的第5外显子和1例仅携带第10外显子。结论 PCR—SSP技术可用于RHD基因的研究。常规血清学鉴定的RhD阴性中存在较高比例的Del型，且有可能带有完整的RHD基因。而被吸收放散试验确认为RhD的阴性个体有可能携带RHD基因并显示出多态性，这些个体中有Rhc抗原表达，有别于献中认为全局RhC抗原表达的报告。     

部分地区ABO、Rh和MN血型系统抗原表现型及基因频率的分布调查

限于版面,本刊对近年来12篇有关红细胞血型抗原表现型调查的文章进行了综合,ABO、MN和RhD血型系统的抗原表现型频率是实际观察值,基因频率为推算值,结果见表1.