丙肝病毒核心抗原试剂检测进展

丙肝病毒(HCV)核心抗原是HCV结构蛋白之一，其血清中的滴度和HCV RNA水平密切相关。目前使用的HCV抗体诊断试剂和核酸检测技术存在诸多问题。随着HCV核心抗原检测系统的不断完善，该系统将有可能取代抗体和核酸检测，成为筛选献血者HCV的检测项目。     

丙肝病毒核心抗原检测对于丙型肝炎诊断的价值

目的通过同时检测丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)和丙型肝炎抗体(HCV-Ab)两项指标,且对HCV-cAg阳性但HCV-Ab阴性的标本进一步做HCV-RNA定量检测,探讨HCV-cAg检测对于丙型肝炎诊断的意义。方法对90例HCV-Ab阳性的感染者血清以及391例丙氨酸氨基转移酶(ALT)升高但HCV-Ab阴性的高危人群血清同时检测HCV-cAg,其中高危人群组中有2例为阳性,对其做HCV-RNA定量检测。结果 90例丙肝抗体阳性组中,34例为HCV-cAg阳性,阳性率为37.78%;391例丙肝抗体阴性的高危人群组中,2例为HCV-cAg阳性,阳性率为0.51%,此2例经HCV-RNA定量检测确证为1例阳性,1例阴性。结论丙型肝炎病毒核心抗原检测能够有效缩短窗口期,操作简便,费用低廉,在临床上具有很好的推广前景。     

抗丙肝病毒核心抗原单克隆抗体的研制与初步鉴定

用基因工程重组技术获得的丙肝病毒（ＨＣＶ）核心蛋白抗原与鼠血清白蛋白交联后免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠,用杂交瘤技术成功地建立了四株稳定分泌抗核心抗原单克抗体的杂交瘤细胞。试验结果表明,该４株ＭｃＡｂ与免疫抗原及核心区Ｃ３３肽,ＣＰ９、ＣＰ１０抗原有较强的抗原－抗体反应,与ＨＣＶ ＮＳ３,ＮＳ４、ＮＳ５无反应性,在竞争ＥＬＩＳＡ中,对ＨＣＶ－ＩｇＧ阳性血清有较好的抑制作用。４株ＭｃＡｂ中３株为ＩｇＧ２ａ亚     

丙肝病毒核心抗原检测的临床价值及其与HCV-RNA、ALT、AST的关系研究

目的 探讨丙肝病毒核心抗原(HCV-cAg)检测的临床价值及其与HCV-RNA、ALT、AST的关系。方法 留取112例HCV-cAg检测阳性标本,205例丙肝病毒核心抗体(HCV-Ab)阳性标本,利用实时定量PCR法测定HCV-RNA,同时进行肝功能(ALT、AST)检测。结果 112例HCV-cAg阳性和205例HCV-Ab阳性标本中,HCV-RNA阳性分别为95例(阳性率84.8%)和142例(阳性率69.3%),前者显著高于后者(P0.05);前者肝功能异常70例(占62.5%),后者肝功能异常95例(占46.3%),前者显著高于后者(P0.05)。HCV-cAg结果S/CO值增高与HCV-RNA 阳性率和肝功能异常率呈正相关。结论 HCV-cAg检测阳性结果与HCV-RNA符合率高,并能够反应肝功能损伤程度,HCV-cAg检测对辅助临床诊疗具有重要的价值。     

探讨丙肝病毒核心抗原检测的临床应用价值

目的：应用酶联免疫法分别检测丙肝病毒核心抗原（HCV-cAg）和抗体（HCV-Ab）,HCVRNA定量检测,了解丙肝病毒核心抗原检测的意义。方法：对来自住院及门诊的200例样本HCV-cAg和HCV-Ab检测,阳性者用反转录多聚酶链反应（RT-RNA）证实。结果：160例样本中HCV-cAg阳性52例（32.5%）,HCVRNA阳性94例（58.7%）;40例样本中HCV-Ab阳性5例（12.5%）,HCVRNA阳性5例（12.5%）。结论：HCV核心抗原检出时间早于抗体,对术前HCV筛查的患者联合应用更具有临床价值。     

丙肝病毒核心抗原试剂检测进展

丙肝病毒(HCV)核心抗原是HCV结构蛋白之一,其血清中的滴度和HCV RNA水平密切相关。目前使用的HCV抗体诊断试剂和核酸检测技术存在诸多问题。随着HCV核心抗原检测系统的不断完善,该系统将有可能取代抗体和核酸检测,成为筛选献血者HCV的检测项目。     

150例丙肝患者病毒核心抗原检测的临床分析

病毒性肝炎是由肝炎病毒引起的严重危害人类健康的传染性疾病，最常见的为甲型病毒性肝炎、乙型病毒性肝炎、丙型病毒性肝炎种主要经血传播的传染病，其严重威胁人们的身体健康，目前尚无特殊的防治方法。目前我国阻断丙型肝炎传播的主要方法是酶联免疫吸附法（ELISA）检测丙型肝炎抗体（抗-HCV）筛选供血源。然而抗-HCV的出现是在HCV感染后的6—12周（窗口期），所以抗-HCV阴性并不能排除携带HCV具有传染性的可能。     

丙型肝炎病毒核心抗原检测试剂盒的临床应用评价

目的采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测丙型肝炎病毒核心抗原（HCVcAg）。方法对苏州市吴中人民医院2011年2月至2012年2月的2 523份输血、手术前住院患者血清标本进行抗-HCV初、复检检测。将初、复检均阳性的其中10份、仅初检阳性的15份和仅复检阳性的17份血清标本分别采用ELISA检测HCVcAg和采用RT聚合酶链反应（RT-PCR）检测HCV。结果 ELISA检测HCVcAg阳性结果为4份（40%）。32份仅初检或复检抗-HCV阳性标本采用ELISA检测HCVcAg阳性6份,阳性率为18.75%。采用RT-PCR荧光定量检测HCV 10份初、复检抗-HCV均阳性的血清标本结果均为阳性,32份仅初检或复检抗-HCV阳性标本采用RT-PCR荧光定量检测HCV阳性5份,阳性率为15.63%。结论 HCVcAg的敏感性与RT-PCR荧光定量检测HCV类似,能对HCV的感染作出早期诊断。     

HCVRNA定量及HCV核心抗原和丙氨酸氨基转移酶结果分析

目的分析丙型肝炎病毒(HCV)RNA定量检测结果与HCV核心抗原及丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测结果的相关性。方法收集涪陵监狱卫生所94例住院和门诊患者血清,采用逆转录聚合酶链反应荧光探针法定量检测标本中的HCV RNA,同时采用酶联免疫吸附试验检测HCV核心抗原,采用全自动生化分析仪检测ALT水平。结果 94例样本中HCV RNA阳性率为56.4%(53/94),HCV核心抗原阳性率为53.2%(50/94),经统计学分析,两种方法的阳性率差异无统计学意义(P>0.05),符合率为84.9%(45/53);ALT异常率为62.3%(33/53),随着HCV RNA含量的升高而增加。结论 HCV RNA定量检测结合HCV核心抗原及ALT检测,可帮助临床了解HCV在体内的复制水平及肝脏的炎性反应状态,以指导临床用药及疗效观察。     

游离前列腺特异性抗原与总前列腺特异性抗原的检测及临床应用

前列腺癌（PC）是老年男性的主要常见恶性肿瘤之一而前列腺特异性抗原（PSA）是对前列腺癌监测和评估的重要指标。虽然PSA水平在前列腺癌明显增加，但在前列腺其他良性疾病也会增高，所以单凭血清PSA水平变化对PC的早期诊断、预后判定是不够理想的。近年来的研究犤１、２犦认为，PSA在血清中以多种形式存在，其主要与蛋白酶抑制物形成复合物，但还有少量未结合的PSA即游离PSA（fP－SA），其比值对区分前列腺增生（BPH）和PC有非常重要意义。为此，我们采用化学发光技术对１５３份血清标本进行了血清fPSA，PSA测定并求出比值…     

HCV-IgG、HCV-cAg与HCV-RNA对丙型肝炎诊断的评价

目的评价丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)、丙型肝炎病毒抗体(HCV-IgG)及丙型肝炎病毒RNA(HCV-RNA)3种检测方法在丙型肝炎实验室诊断中的意义。方法收集84例丙型肝炎疑似患者和87例健康对照者血清,采用ELISA法检测HCV-cAg和HCV-IgG,实时荧光定量聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测HCV-RNA。结果 84例丙型肝炎疑似患者中HCVIgG阳性率为84.5%,HCV-cAg阳性率为13.1%,HCV-RNA阳性率为52.4%;71例HCV-IgG阳性患者中HCV-RNA阴性35例,假阳性率为49.3%,11例HCV-cAg阳性患者中HCV-RNA阴性5例,假阳性率为45.5%;44例HCV-RNA阳性的丙型肝炎确诊患者中HCV-IgG假阴性率为18.2%,HCV-cAg假阴性率为86.4%;HCV-cAg和HCV-IgG联合检测的假阴性率为13.6%,真阳性率为100.0%。结论 HCV-cAg和HCV-IgG在丙型肝炎的实验室诊断中均存在一定的假阴性和假阳性,将二者联合检测或在必要时与HCV-RNA三者联合检测可降低漏诊率。     

HCV核心抗原酶联免疫检测与HCV—RNA定量检测敏感性的比较

[目的]比较ELISA法测定总HCV—cAg与荧光定量PCR法测定HCV—RNA两种检测方法对诊断HCV感染的敏感性,分析HCV—cAg ELISA法诊断试剂的重要意义。[方法]ELISA法测定血清样本中的HCV抗体,改进型ELISA法测定血清样本中的HCV—cAg,实时荧光定量PCR法测定血清样本中的HCV—RNA,阳性样本经重复实验确认。[结果]通过用HCV抗体检测试剂对门诊病人或献浆员进行筛查,获得HCV抗体阳性血清样本264例。对这些病例别进行ELISA法测定总HCV—cAg实验和荧光定量PCR法测定HCV—RNA实验,测到HCV—cAg阳性病例101例,HCV—RNA阳性病例115例。经统计学分析,两种检测方法的敏感性差别不太大（0．01〈P〈0．05）。[结论]HCV—cAgELISA法检测和HCV—RNA定量检测具有相近的敏感性,日存某种稗序上HCV—cAg ELISA法榆测可以作为HCV—RNA定量榆测的有效替代。     

丙型肝炎病毒总抗原检测用于病程监测的研究

目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)总抗原检测方法在丙肝病程监测方面的临床意义。方法对来本院就诊的40位丙肝患者于治疗前、治疗1个月时、治疗3个月时、治疗6个月(停药)时,停药6个月后等不同时期进行采血,收集血清或血浆标本,用抗-HCV检测试剂盒(酶联免疫法)、HCV核酸(RNA)扩增(PCR)荧光定量检测试剂盒、HCV总抗原检测试剂盒(酶联免疫法)进行检测。结果从患者确认感染丙肝到治疗结束抗-HCV检测均呈阳性,而HCV-RNA检测和HCV总抗原检测会随着病程的变化而变化。本次共检测了189例标本(40位患者不同时期标本总例数),其中HCV-RNA阳性51例,该51例阳性标本中,HCV总抗原检测阳性44例,阳性检出率为86.27%;138例HCV-RNA阴性标本,有3例HCV总抗原检测为阳性(2.2%)。2种方法比较,差异无统计学意义(χ2=1.6,P>0.05)。HCV总抗原检测其OD值会随着病程的变化而相应改变,可以较好地反应丙肝患者的病程状况。结论 HCV总抗原检测方法在丙肝病程监测方面具有很好的临床意义,适合在缺少荧光定量PCR检测能力的中小医院使用,可在一定程度上替代HCV-RNA检测,对抗-HCV阳性患者作进一步的验证检测或补充,更好地应用于丙肝患者的病程监测。     

鸭肝组织中DHBV cccDNA的实时荧光定量PCR方法的建立

目的 建立基于DHBV病毒正、负链缺口区设计引物、沉淀蛋白结合的DNA、酶切消化残留线性DNA的DHBVcccDNA荧光定量PCR方法.方法 根据DHBV cccDNA和rcDNA结构的不同,将引物设计在DHBV DNA负链缺口的两侧.采用十二烷基硫酸钾蛋白质沉淀法分离肝组织中cccDNA和rcDNA.并对提取的DNA进行紫外定量,按照每2UPSAD消化500ng cccDNA,计算PSAD的用量,酶切消化残存的线性DNA.以pBR322/2DHBV Core重组质粒为PCR标准品,通过优化反应体系和扩增条件,建立检测DHBV cccDNA的SYBR Green I实时荧光定量PCR方法,并进行方法学考察和实际应用.结果 优化的PCR扩增产物电泳后可见239 bp的DNA片段,与目标片段长度相同.标准曲线回归方程Y=-4.085 7X＋48.805,R2=-0.997 6.方法的灵敏度为103 copies/ml,线性范围可达103～108 copies/ml.方法特异性强,未检出DHV,HBV及E coli DNA.对已感染DHBV的鸭肝组织检测DHBV cccDNA,进行定量,含量从0.36～1733.08 copies/diploid genome.其中分布最广的是10～99 copies/dioploid genome.DHBV cccDNA占总DHBV DNA的比例平均仅为3.86％,范围从0.01％～13.3s％.结论 根据DHBV cccDNA与rcDNA的结构和理化性质的差异,设计能够特异性扩增DHBV cccDNA的荧光定量PCR方法,方法灵敏度高、特异度强,可广泛应用于DHBV和HBV抗病毒治疗策略的相关研究中.     

丙型肝炎病毒核心抗原检测在丙型肝炎筛检中的应用

目的探讨丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)对丙型肝炎(简称丙肝)筛查的意义。方法收集2014年10月至2015年10月8 000例门诊及住院患者,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HCV-cAg、丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab),并对HCVcAg或HCV-Ab阳性标本采用聚合酶链反应(PCR)法检测HCV-RNA进行确诊。结果以HCV-cAg或HCV-Ab阳性为标准,从8 000例血清样本中初步筛查出阳性样本82例,经HCV-RNA确证,其中HCV-RNA阳性73例,阴性9例,HCV-cAg的灵敏度及特异度分别为45.83%和99.98%,HCV-Ab的灵敏度及特异度分别为94.44%和99.90%,联合检测HCV-cAg与HCV-Ab的灵敏度及特异度分别为100.00%和99.86%。结论在丙肝筛检工作中,HCV-cAg与HCV-Ab二者有互补性,联合检测HCV-cAg与HCV-Ab有助于提高HCV筛查率。     

丙型肝炎患者外周血NKT细胞含量变化特征的研究

目的探讨丙型肝炎病毒感染者外周血NKT细胞含量变化的特征。方法应用FITC标记的TcR Vα24单克隆抗体和PE标记的TcR Vβ11单克隆抗体对丙型肝炎病毒感染者外周血进行标记,流式细胞仪检测TcR Vα24/TcRVβ11双阳性NKT细胞的含量。结果抗-HCV＋、HCV RNA＋组NKT细胞明显低于抗-HCV＋、HCV RNA-组和对照组（P〈0.01）;抗-HCV＋、HCV RNA-与正常对照组的NKT细胞无显著性差异（P〉0.05）。结论NKT细胞数量减少不利于丙型肝炎病毒的清除。     

抗HCV分片段酶联免疫检测试剂的临床评价

在克隆表达了丙型肝炎病毒不同区抗原（HCV－C、NS－3、NS－4、NS－5）的基础上，研制出抗HCV抗体分片段酶联免疫检测试剂。对该试剂特异性、灵敏度进行了临床评价。结果显示该试剂具有良好的特异性和灵敏度。     

Role of Hepatitis C Virus (HCV) core antigen in improving blood transfusion safety in high prevalence,resource limited countries,a step forward

Objective

The aim of the present study was to evaluate the efficacy of hepatitis C virus [HCV] core Ag as an alternative affordable test in resource limited countries blood banks.