三阴性乳腺癌组织中干细胞CD44~+/CD24~(-/low)表型与预后的关系

目的探讨CD44~+/CD24~(-/low)表型在三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)中的表达情况及其与三阴性乳腺癌的临床病理特征及预后的关系。方法从青岛市中心医疗集团乳腺癌数据库中筛选出2008年1月至2009年12月53例三阴性乳腺癌病人的石蜡标本,同时随机选取53例同时期相应临床分期的非三阴性乳腺癌(NTNBC)病人的石蜡标本。应用免疫组化技术进行CD44、CD24染色,将CD44~+/CD24~(-/low)表型在两组病人中的表达情况进行统计学分析,探讨其与三阴性乳腺癌的临床病理特征及预后的关系。结果 CD44~+/CD24~(-/low)(+)在TNBC组中为54.71%,明显高于NTNBC组(45.28)(P0.05)。在TNBC组,临床病理分期Ⅲ期在CD44~+/CD24~(-/low)(+)中有15例(28.30%),高于CD44~+/CD24~(-/low)(-)(9.43%)(P0.05);局部复发率在CD44~+/CD24~(-/low)(+)和CD44~+/CD24~(-/low)(-)中分别为24.52%和5.66%(P0.05);远处转移率分别为16.98%和3.77%(P0.05)。TNBC组中,CD44~+/CD24~(-/low)(+)5年OS(62.00%)、DFS(51.00%)均低于CD44~+/CD24~(-/low)(-)5年OS(80.00%)、DFS(75.00%),两组间的差异有统计学意义。结论 CD44~+/CD24~(-/low)的高表达可能与三阴性乳腺癌的复发、转移及预后差有相关性。     

CD44+/CD24-/low在乳腺癌中表达及其临床意义

目的 观察乳腺癌中CD44+/CD24-/low的表达与临床病理特征的关系及其对预后的影响.方法 应用双染免疫组织化学检测144例乳腺癌与30例乳腺良性肿瘤或正常乳腺组织中CD44+/CD24-/low的表达,收集并分析患者的临床病理和随访资料.结果 CD44+/CD24-/low在乳腺良性肿瘤或正常乳腺中表达率为0%～8%,乳腺癌中表达率为0%～75%.67例(46.5%)乳腺癌患者CD44+/CD24-/low表型的细胞>10%,余77例(53.5%)≤10%.CD44+/CD24-/low的表达高低在淋巴结转移(P<0.01)、病理分期(P<0.01)、HER-2表达(P<0.01)以及复发(P<0.01)上差异有统计学意义.CD44+/CD24-/low高表达的肿瘤复发时主要表现为远处转移,尤其是骨转移.CD44+/CD24-/low高表达和低表达的5年无病生存率为65%和82%(P<0.01),5年总生存率为68%和86%(P<0.05),差异有统计学意义.结论 CD44+/CD24-/low的表达可能与乳腺癌的转移有关,有可能作为评估乳腺癌患者预后的参考指标.     

乳腺癌组织CD44+CD24-/low细胞含量检测及其临床意义

目的 探讨乳腺癌组织中CD44+CD24-/low干细胞比例与各项临床指标的相关性.方法 新鲜乳腺癌组织标本68例.机械-酶法制成细胞悬液,流式细胞术检测CD44+CD24-/loe细胞的含量,探讨其含量与肿瘤分期、免疫组织化学、远处转移等的相关性.结果 (1)68例乳腺癌组织中的CD44+CD24-/low腺癌干细胞比例为0.1%～15.2%.(2)除ER组和远处转移组CD44+CD24-/low细胞的含量差异有统计学意义(P<0.05)外,年龄、肿瘤分期、腋窝淋巴结转移等组别,CD44+CD24-/low细胞的含量差异均无统计学意义(P>0.05).结论 CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞比例与ER阴性表达、癌肿侵袭性和预后等临床指标明显相关.     

乳腺癌组织CD44+CD24-/low细胞含量检测及其临床意义

目的 探讨乳腺癌组织中CD44+CD24-/low干细胞比例与各项临床指标的相关性.方法 新鲜乳腺癌组织标本68例.机械-酶法制成细胞悬液,流式细胞术检测CD44+CD24-/loe细胞的含量,探讨其含量与肿瘤分期、免疫组织化学、远处转移等的相关性.结果 (1)68例乳腺癌组织中的CD44+CD24-/low腺癌干细胞比例为0.1%～15.2%.(2)除ER组和远处转移组CD44+CD24-/low细胞的含量差异有统计学意义(P<0.05)外,年龄、肿瘤分期、腋窝淋巴结转移等组别,CD44+CD24-/low细胞的含量差异均无统计学意义(P>0.05).结论 CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞比例与ER阴性表达、癌肿侵袭性和预后等临床指标明显相关.     

乳腺癌组织CD44+CD24-/low细胞含量检测及其临床意义

目的 探讨乳腺癌组织中CD44+CD24-/low干细胞比例与各项临床指标的相关性.方法 新鲜乳腺癌组织标本68例.机械-酶法制成细胞悬液,流式细胞术检测CD44+CD24-/loe细胞的含量,探讨其含量与肿瘤分期、免疫组织化学、远处转移等的相关性.结果 (1)68例乳腺癌组织中的CD44+CD24-/low腺癌干细胞比例为0.1%～15.2%.(2)除ER组和远处转移组CD44+CD24-/low细胞的含量差异有统计学意义(P<0.05)外,年龄、肿瘤分期、腋窝淋巴结转移等组别,CD44+CD24-/low细胞的含量差异均无统计学意义(P>0.05).结论 CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞比例与ER阴性表达、癌肿侵袭性和预后等临床指标明显相关.     

门静脉高压症脾功能亢进患者CD4~+CD25~+CD127~(low/-)调节性T细胞和Foxp3的表达及其意义

目前,对门静脉高压症脾功能亢进患者肿大脾脏的免疫功能状况及其调节机制尚不清楚.本研究采用流式细胞术和免疫组化法检测门静脉高压症脾功能亢进患者外周静脉血和脾脏组织中CD4~+CD25~+CD127~(low/-)调节性T细胞及Foxp3的表达,目的在于探讨自然调节性T细胞与门静脉高压症脾功能亢进时脾脏免疫功能的关系,研究调节脾脏免疫功能的可能机制.     

CCL5对MCF-7中细胞增殖能力及CD44~+/CD24~-亚群比例的影响

目的 观察外源性趋化因子5(CCL5)对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及CD44+/CD24-亚群比例的影响,探讨其在乳腺癌进展过程中的作用.方法 噻唑蓝(MTT)比色法检测浓度为10、50、100、500 μg/L的外源性rhCCL5(recombinant human CCL5)作用0、24、48 h后MCF-7细胞增殖水平的变化,流式细胞仪检测CD44~+/CD24~-亚群比例的变化.结果 rhCCL5作用48 h后MCF-7细胞增殖水平高于对照组(P＜0.05),并呈浓度依赖趋势;且高于作用24、0 h后细胞的增殖水平(P＜0.05).50、500μg/L rhCCL5处理MCF-7细胞后升高了细胞株中CD44~+/CD24~-亚群的比例,分别为对照组的5.68和6.05倍(P＜0.05).结论 外源性CCL5可以明显升高MCF-7细胞的增殖水平以及CD44~+/CD24~-亚群的比例,这种作用可能是其诱导乳腺癌进展的机制之一.     

HBV携带者外周血CD4+CD25+CD127low/-调节性T淋巴细胞表达与病毒载量及肝脏病理的相关性

目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)携带者外周血CD4+ CD25+ CD127low/-调节性T淋巴细胞(Treg)的表达水平与HBV载量及肝脏病理的相关性.方法 连续选取2012年10月至2014年2月浙江省嘉兴市第一医院收治的46例慢性HBV携带者,并选择23名健康体检者作为对照组.用流式细胞术检测HBV携带者和健康体检者外周血CD4+ CD25+ CD127low/-Treg的表达.对46例HBV携带者在B型超声引导下行肝穿刺病理检查,同时采用实时荧光定量PCR法测定HBV DNA载量.组间差异比较采用独立样本t检验,相关性分析采用Spearman秩相关或Pearson直线相关.结果 46例HBV携带者的CD4+ CD25+ CD127low/-Treg水平为(5.11±1.47)％,健康对照组为(3.46±1.23)％,两组比较差异有统计学意义(￡=4.629,P＜0.01).HBV携带者外周血HBV DNA载量为(6.21±1.98)lg拷贝/mL,CD4+ CD25+ CD127low/-Treg水平与HBV DNA载量呈正相关(r=0.405,P＜0.01).46例HBV携带者肝穿刺病理显示,炎症分级≥G2者占45.65％ (21/46),纤维化分期≥S2者占34.78％ (16/46).HBV携带者外周血CD4+CD25+CD127low/-Treg表达水平与肝组织炎症活动及纤维化程度呈负相关(r=-0.434和-0.452,P＜0.05).结论 CD4+ CD25+ CD1271ow/-Treg的表达与乙型肝炎病情的慢性化和肝组织损伤程度有关.     

CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)调节性B细胞在复发性流产合并抗磷脂综合征患者中的表达及意义

目的探讨调节性B细胞(Breg)在复发性流产(RM)合并抗磷脂综合征(APS)中的作用。方法应用流式细胞术检测11例对照女性、18例复发性流产合并抗磷脂综合征患者(APS/RM)和37例无抗磷脂综合征的复发性流产患者(Non-APS/RM)外周血CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi) Breg细胞比例及表达IFN-γ或TNF-α的辅助性T细胞(Th)的比例。结果与对照组相比较,CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi) Breg细胞比例在APS/RM组[(3.42±1.31)%vs.(7.16±1.28)%,P0.01]和Non-APS/RM组[(4.79±1.10)%vs.(7.16±1.28)%,P0.01]显著降低,外周血表达IFN-γ的Th细胞比例在APS/RM组[(29.20±8.01)%vs.(20.60±2.63)%,P0.01]和Non-APS/RM组[(25.00±6.06)%vs.(20.60±2.63)%,P0.01]中均显著增高,表达TNF-α的Th细胞比例在APS/RM组[(46.30±7.36)%vs.(29.70±3.94)%,P0.01]和Non-APS/RM组[(39.70±9.35)%vs.(29.70±3.94)%,P0.01]中亦显著增高。与Non-APS/RM组相比,外周血CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi) Breg细胞比例在APS/RM组显著降低(P0.01),而表达IFN-γ或TNF-α的Th细胞比例显著增加(P0.05)。相关性分析结果显示,在对照组中CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi) Breg细胞比例与表达IFN-γ(r2=0.38,P0.05)或TNF-α(r2=0.49,P0.05)的Th细胞比例呈显著负相关性,而在APS/RM组和Non-APS/RM组中无显著相关性(P0.05)。结论 APS/RM患者存在明显免疫失衡,即表达IFN-γ或TNF-α的Th细胞比例显著增加,可能与CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi) Breg细胞表达减低导致的免疫抑制功能不足有关。     

白细胞介素-6诱导CD44＋CD24－／low肿瘤干细胞生成促进乳腺癌MCF7细胞辐射抵抗的研究

目的：上皮-间充质转化（EMT）能诱导 CD44＋CD24－／low乳腺癌干细胞的产生,白细胞介素-6（IL-6）是很强的 EMT 诱导因子,探讨 IL-6是否通过诱导 CD44＋CD24－／low细胞的产生,从而促进乳腺癌 MCF7细胞的辐射抵抗。方法含50 ng／ml IL-6的培养基培养 MCF7细胞,流式细胞术检测 CD44＋CD24－／low乳腺癌干细胞标记的变化,实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）及Western blot 检测 EMT 标记分子的表达水平,进一步利用流式细胞术从诱导组中分选出 CD44＋CD24－／low细胞,克隆形成实验检测分选后细胞的辐射抵抗能力。结果IL-6能诱导 MCF7细胞发生间充质样转化,诱导5 d 后 CD44＋CD24－／low细胞显著富集,诱导形成的 CD44＋CD24－／low细胞的辐射抵抗能力显著提高。结论IL-6诱导了 CD44＋CD24－／low 乳腺癌干细胞的产生,从而促进MCF7细胞的辐射抵抗。     

性激素与CD4~+CD25~+调节性T细胞的相关性及在肾移植免疫耐受中的作用研究

目的:为明确肾移植术后因供肾、受肾性别差异而排斥反应发生率不同,移植肾存活率不同而进行性激素水平的研究,明确性激素与CD4~+CD25~+调节性T细胞(CD4~+CD25~+Treg)的相关性及在肾移植免疫耐受中的作用。方法:选取正常对照组、肾移植组患者各20例,用ELISA法测定外周血性激素睾酮(T)、雌二醇(E_2)水平,用流式细胞术(FCM)测定CD4~+CD25~+Treg占CD~+T细胞比值。结果:肾移植术后女性E_2水平逐渐由高变低,男性T水平逐渐由低变高,CD~+CD25~+Treg水平也随时间相关性而逐渐升高,以单因素方差分析发现:E_2水平平稳期与正常对照组比较无显著差异(P0.05);T平稳期与正常对照组比较无显著差异(P0.05);肾移植男性受者早期2周内调节T细胞水平与正常值比较有明显差异(P0.05),门诊随访肾移植达2年患者其调节t细胞与正常对照组无明显差异(P0.05)。T与CD4~+CD25~+Treg术后均依时间相关性而逐渐上升,以直线相关性分析发现两者有明显相关性(P0.05)。结论:肾移植术后随着下丘脑-垂体-性腺轴的恢复,患者性激素水平及CD4~+CD25~+Treg水平均逐渐恢复正常。排除体重、年龄、透析时间、HLA配型、缺血时间、术后糖皮质激素、免疫抑制剂治疗方式等因素的影响,T与CD4~+CD25~+Treg有明显相关性,男性在肾移植术后不仅可以通过雄激素直接抑制效应T细胞发挥主要免疫抑制作用,还可以通过增加CD4~+CD25~+Treg水平来发挥次要免疫抑制作用。     

不同分期前列腺癌患者外周血CD4~+ CD25~+ Foxp3~+调节性T细胞的变化及与胰岛素抵抗的相关性

目的 :观察不同分期前列腺癌患者外周血单个核细胞CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的变化及与胰岛素抵抗的关系。方法:采用流式细胞术检测62例前列腺癌患者(患者组,临床TNM分期Ⅰ期5例、Ⅱ期16例、Ⅲ期21例、Ⅳ期20例)外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数目,计算CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞占CD4+T淋巴细胞的百分率;并检测其空腹胰岛素及空腹血糖水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);采用ELISA法测定外周血胰岛素样生长因子1(IGF-1)水平,分析CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞与胰岛素抵抗的相关性,并与42例健康体检者进行对照。结果:与健康对照组相比,前列腺癌患者HOMAIR明显升高(6.68±1.66 vs 3.68±1.42),IGF-1水平明显下降[(96.39±21.21)ng/ml vs(164.56±30.58)ng/ml],PBMC CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T淋巴细胞的百分率[(13.88±0.96)%vs(5.33±0.65)%]及CD4+CD25+Foxp3+Treg绝对值[(3.55±0.29)×107vs(1.99±0.78)×107]明显升高(P0.05,P0.01)。患者PBMC CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T淋巴细胞的百分率及CD4+CD25+Foxp3+Treg绝对数﹑HOMA-IR均随TNM分期逐渐加重而增加,IGF-1逐渐下降;相关性分析表明:CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T及CD4+CD25+Foxp3+Treg绝对数均与HOMA-IR呈明显正相关(r分别为0.689、0.722,P0.01),与IGF-1呈明显负相关(r分别为-0.896、-0.747,P0.01)。结论:前列腺癌患者存在不同程度的胰岛素抵抗,且随着疾病程度的加重,外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数目和比例及胰岛素抵抗逐渐加重;CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞可能通过调节胰岛素抵抗参与其形成和发展。     

大肠癌中CD44V6、CD44s表达与nm23-H1表达相关性及临床意义

目的　了解CD4 4V6 、CD4 4s、nm2 3-H1 在结直肠癌组织、移行粘膜及正常粘膜间的表达 ,探讨它们与结直肠癌侵袭与转移的关系。方法　运用免疫组化SABC法测定CD4 4V6 、CD4 4s、nm2 3-H1 在癌组织、癌远端 3cm处的移行组织及正常结直肠组织中的表达 ,同时记录有关的临床病理指标。结果　CD4 4V6 、、CD4 4s、nm2 3-H1 阳性表达率分别在癌组织中为 70 .18%、4 2 .11%及 5 4 .39%与移行组织中 12 .0 2 %、89.4 7%、91.2 %及正常结直肠组织中 0、10 0 %、94 .74 % ,其差别有显著性 (P <0 .0 5 )。CD4 4V6 表达与肿瘤侵袭深度、Dukes分期及淋巴结转移正相关 ,nm2 3-H1 表达与Dukes分期、淋巴结转移呈负相关 (P <0 .0 5 )。CD4 4s在移行粘膜与正常组织表达有显著差别 (P <0 .0 5 )。结论　结直肠癌组织CD4 4V6 表达增多 ,CD4 4s及nm2 3-H1 表达降低。CD4 4V6 及nm2 3-H1 与结直肠癌的侵袭与转移有关 ,CD4 4V6 变化较nm2 3-H1 在前。直肠癌手术时癌远端至少应切除 3cm长的肠管     

CD4+ CD25+ CD127dim/-调节性T细胞细胞在乳腺癌患者外周血中的表达及意义

近年来,乳腺癌的发病率明显升高[1],乳腺癌癌细胞的免疫应答调节机制备受重视.本研究旨在探讨CD4+CD25+ CD127dim/-调节性T细胞细胞在乳腺癌患者外周血中的表达及意义. 一、材料与方法 1.研究对象:采集遵义医学院附属医院甲状腺乳腺外科2011年7月至12月有完整病历资料病理确诊的30例女性乳腺肿瘤患者术前外周静脉血1 ml;同期两次另取2例乳癌女性患者外周静脉血10 ml.采集标本时所有患者均未行治疗,排除其他疾病干扰,静脉血以乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝.     

门静脉高压症脾亢患者外周血CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞含量与免疫功能研究

目的 研究门静脉高压症(PHT)脾亢患者外周血CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞(Treg)与CD3+、CD4+、CD8+T细胞的表达变化.探讨脾脏免疫功能改变及其可能的调节机制.方法 PHT脾亢患者20例(脾亢组),健康成人18例(对照组),采用流式细胞术检测外周血中CD4+CD25+CD127low/-Treg及CD3+、CD4+、CD8+T细胞的表达变化.结果 脾亢组外周血中CD4+CD25+CD127low/-Treg占CD4+T细胞的比例为(5.3±3.0)%,明显高于对照组的(2.5±0.9)%(P<0.01).脾亢组CD3+、CD4+、CD8+T细胞含量均低于对照组(P<0.05).CD4+CD25+CD127low/-Treg的含量与CD3+T细胞比例呈负相关(r=-0.630,P<0.01),与CD4+T细胞比例呈负相关(r=-0.561,P<0.05).结论 PHT脾功能亢进患者CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞表达量增多,可能对脾脏免疫功能的调节有重要作用.     

肾移植术后测定外周血CD3/HLA-DR及CD3/CD(16+56)的临床意义

目的探讨肾移植患者术后外周血ＣＤ３／ＨＬＡ－ＤＲ及ＣＤ３／ＣＤ（１６＋５６）的变化及其意义。方法提取患者的外周血淋巴细胞,加入双荧光标记的鼠抗人单克隆抗体ＣＤ３／ＣＤ（１６＋５６）、ＣＤ３／ＨＬＡＤＲ,流式细胞分析仪进行测定。结果术前患者的ＣＤ＋３／ＣＤ＋（１６＋５６）、ＣＤ－３／ＣＤ＋（１６＋５６）及ＣＤ－３／ＨＬＡＤＲ＋高于健康人,而ＣＤ＋３／ＣＤ－（１６＋５６）和ＣＤ＋３／ＨＬＡＤＲ－低于健康人;术后３天肾功能稳定者的全部淋巴细胞亚群下降,尤以ＣＤ＋３／ＣＤ＋（１６＋５６）为著;术后排斥者的ＣＤ－３／ＣＤ＋（１６＋５６）、ＣＤ＋３／ＣＤ＋（１６＋５６）、ＣＤ－３／ＨＬＡＤＲ＋及ＣＤ＋３／ＨＬＡＤＲ＋较稳定者显著升高,而急性肾小管坏死者的上述４个指标异常增高,是排斥组的２倍。结论术后动态测定ＣＤ３／ＨＬＡＤＲ和ＣＤ３／ＣＤ（１６＋５６）有助于急性排斥和急性肾小管坏死的早期诊断及鉴别诊断,对及时治疗和抗排斥疗效的评价具有一定意义     

前列腺癌患者外周血中CD4~+CD25~(high)调节性T细胞及调节因子TGF-β1和COX-2的表达

目的:通过检测前列腺癌患者以及健康志愿者外周血中CD4+CD25high调节性T细胞、TGF-β1及COX-2的表达,初步探讨CD4+CD25high调节性T细胞在前列腺癌发病机制中的作用及其与TGF-β1和COX-2的相关性。方法:应用流式细胞术检测30例前列腺癌患者治疗前后(其中前列腺癌局限组11例,非局限组19例)及20例健康志愿者外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+CD25high调节性T细胞占CD4+T细胞的比例;应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其外周血清中TGF-β1和COX-2的表达。对前列腺癌患者上述指标进行术前术后对比分析,另对CD4+CD25high调节性T细胞与TGF-β1及COX-2的相关性进行分析;并探讨上述指标在前列腺癌患者局限组和非局限组间是否存在差异性。结果:流式细胞术检测显示,前列腺癌患者治疗前PBMC中CD4+CD25high调节性T细胞占CD4+T细胞的比例为(18.32±7.49)%,高于健康志愿者对照组(7.77±1.86)%(P<0.05)。前列腺癌患者治疗后其比值为(17.34±5.87)%,较治疗前稍减低,但两者相比无显著差异(P>0.05)。ELISA检测外周血清中TGF-β1和COX-2显示,前列腺癌组分别为(215.97±55.16)ng/ml和(6.88±5.14)ng/ml,对照组分别为(149.75±47.11)ng/ml和(5.65±2.69)ng/ml;前列腺癌患者外周血清中TGF-β1的表达水平高于健康志愿者对照组(P<0.05),COX-2的表达水平与对照组无显著差异(P>0.05)。通过多重线性回归分析表明,前列腺癌患者PBMC中CD4+CD25high调节性T细胞的表达与血清中TGF-β1和COX-2的表达无显著相关。前列腺癌局限组和非局限组外周血中CD4+CD25high调节性T细胞、TGF-β1及COX-2的表达均无显著性差异(P>0.05)。结论:前列腺癌患者PBMC中CD4+CD25high调节性T细胞可能参与前列腺癌的发生,其增殖机制与血清中TGF-β1和COX-2的表达无关,可能与肿瘤本身及肿瘤局部微环境相关。