去泛素化酶的研究及其进展

泛素-蛋白酶体途径（ubiquitin—proteasome pathway）是细胞内一个重要的蛋白质降解调节系统。通过对底物蛋白的多聚泛素化并经蛋白酶体降解,可以影响或调节多种细胞活动,包括：基因转录、细胞周期调节、免疫反应、细胞受体功能及肿瘤生长、炎症过程等。该途径也是一个被严格调控的可逆过程,其中去泛素化酶的调节就是一个重要的环节。目前研究证实,细胞内广泛存在许多去泛素化酶（deubiquitinating enzymes,DUBs）,主要分为以泛素羧基末端水解酶家族和泛素特异性加工酶家族为主的5种类型。     

去泛素化酶OTULIN研究进展

泛素化是指以泛素为信号分子,与靶蛋白共价结合的一种有序的、多样的翻译后修饰方式,广泛存在于真核生物,对机体生长发育、基因转录、DNA损伤修复、蛋白质翻译、信号传导、细胞增殖、分化等多种细胞生物学功能起重要作用.线性泛素链是一种新型泛素化修饰.目前,去泛素化酶OTULIN是唯一可特异性降解线性泛素链的去泛素化酶,参与调节...     

泛素特异性加工酶2的研究进展

泛素特异性加工酶2(ubiquitin-specific protease 2,USP2)是一种重要的去泛素化酶,通过特异性识别靶蛋白,使靶蛋白去泛素化并阻碍其降解,以调控细胞内靶蛋白数量和活性,从而参与细胞功能的调节.USP2-45及USP2-69是USP2基因选择性剪接而形成的两种不同亚型,在不同组织、细胞和不同发育阶段均有表达,且与细胞周期调控,骨骼肌纵向生长、肌细胞分化、离子通道、生精作用及生物钟调控等关系密切.本文结合当前研究进展,系统阐述USP2的两种亚型的结构、分布及功能,为进一步研究USP2与疾病的关系打下理论基础.     

组蛋白泛素化、去泛素化以及与其他组蛋白修饰间的“串扰”

组蛋白泛素化、去泛素化是重要的组蛋白修饰方式,在基因转录调控、细胞周期及DNA损伤修复等过程中发挥着重要作用。组蛋白的泛素化及去泛素化修饰与组蛋白的其他共价修饰具有密切的联系,相互之间存在复杂的"串扰(crosstalk)"。组蛋白通过各种修饰之间的"串扰"形成精密的"组蛋白密码",精细地调控着细胞核内重要的DNA事件。本文主要概述了组蛋白泛素化、去泛素化以及它们与其他组蛋白修饰间的"串扰",揭示了组蛋白泛素化、去泛素化与其他组蛋白共价修饰的内在联系。     

去泛素化酶BRCC36功能的研究进展

 BRCC36蛋白是一种可特异性水解K63位点聚泛素化链的蛋白质,它广泛存在于多种真核生物体内,可识别多种不同的底物蛋白,参与多种细胞病理生理过程。与DNA损伤修复、细胞信号的转导、细胞周期控制具有密切联系,在肿瘤发生、血管生成、心脏抗损伤过程中发挥重要作用。本文就BRCC36蛋白的最新研究情况做一综述,为临床研究多种疾病的新型治疗靶点提供必要的信息。     

E3泛素连接酶β-TrCP1在肿瘤中的研究进展

β-转录重复包含蛋白1(β-transducin repeat containing protein 1,β-TrCP1)是一种E3泛素连接酶的底物识别亚基,能特异性识别泛素化底物,在细胞增殖、信号转导以及细胞周期进程中发挥重要作用。β-TrCP1蛋白表达异常或功能失调常使泛素化修饰异常,影响多种肿瘤的发生、发展。该文现对β-TrCP1在恶性肿瘤中的作用及相关分子机制进行综述。     

泛素羧基末端水解酶37

泛素羧基末端水解酶37(ubiquitinC-terminalhydrolase37,UCH37或称UCH-L5)是泛素-蛋白酶体系统中去泛素化酶家族的一员.UCH37与蛋白酶体的一个亚单位19S调节颗粒密切相关,可上调转化生长因子β(transforminggrowthfactor-β,TGF-β)通路并且可抑制细胞凋亡.UCH37在多种肿瘤中有异常表达,在阿尔茨海默症、糖尿病肾病的发病机制中或许也起到一定作用.关于UCH37/USP14抑制剂的研究为抗肿瘤药物提供了一个新靶点.     

泛素特异性蛋白酶与肿瘤关系的研究

随着泛素化与肿瘤之间的关系越来越明朗,这一关系的反向调控过程,即去泛素化,最近也开始备受关注.目前认为,去泛素化酶在调控与肿瘤相关的许多途径当中有重要作用.而泛素特异性蛋白酶是去泛素化酶家族中的一个亚家族,与肿瘤发生有着不可替代的联系.该文主要从细胞周期调控、DNA损伤修复、信号通路调控等方面来介绍泛素特异性蛋白酶与肿瘤发生和治疗的关系.     

泛素羧基末端水解酶L3及其与疾病和肿瘤的相关性

去泛素化酶(deubiquitinating enzymes,DUBs)在调节细胞内稳态、细胞分化和凋亡等过程中,均扮演着重要角色。泛素羧基末端水解酶L3(ubiquitin C-terminal hydrolases L3,UCH-L3)是去泛素化酶家族中,半胱氨酸蛋白酶类的一种,可以催化靶蛋白短肽链上附着的多余的完整泛素分子的脱落,从而实现对靶蛋白的调控以及泛素分子的循环再利用。目前对该水解酶的研究还不充分,但其在多种疾病以及肿瘤中的高表达情况,说明在疾病、肿瘤发生发展中起着重要的作用。本文将针对该水解酶及其与疾病和肿瘤的相关性作一综述。     

泛素羧基末端水解酶-1的研究进展

泛素羧基末端水解酶-1（UCH-L1），又名蛋白基因产物9.5，是泛素-蛋白酶体系统中的重要成员，它除了去泛素化作用外，还具有泛素连接酶和稳定细胞内泛素单体的功能。UCH-L1通过泛素相关途径调节细胞的增生、分化和凋亡，并可能参与与之相关的神经退行性疾病、肿瘤等的发生发展过程。最近UCH-L1的特异性底物的发现为探讨其作用的具体机制开辟了新的途径。     

去泛素化酶通过肿瘤坏死因子-α途径对小鼠心肌衰老的作用

目的探讨去泛素化酶(CYLD)在小鼠心肌细胞衰老中的作用及机制。方法选取野生型FVB(WT)小鼠和CYLD过表达(CYLD+/+)小鼠构建自然衰老模型。2月龄雄性WT小鼠(WT-2M, n=10)和CYLD+/+小鼠(CYLD-2M, n=10)作为年轻组, 普通饲养17.5月(WT-17.5M, CYLD-17.5M, n=10)作为年老组。小动物超声检测心功能[左室短轴缩短率(LVFS)、左室射血分数(LVEF)], 蛋白免疫印迹检测心肌组织衰老相关蛋白p53、p21、p16表达水平, 实时荧光定量PCR(qPCR)检测心肌组织衰老相关分泌表型(SASP) [细胞因子白介素-1β(IL-1β)、基质金属蛋白酶3(MMP3)、趋化因子CXCL1(CXCL1)]转录水平。转录组测序检测CYLD调控心肌细胞衰老的信号通路, 对肿瘤坏死因子α(TNF-α)通路行qPCR验证。结果与WT-17.5M小鼠比较, CYLD-17.5M小鼠心功能LVEF和LVFS值增高(均P<0.05);p53、p21、p16蛋白表达水平减低(均P<0.05), IL1B、MMP3、CXCL1转录水平...     

去泛素化酶BRCC36对DNA损伤修复及信号转导的调节机制

生物界DNA双链断裂（DSB）是细胞周期中时常发生的重要DNA损伤事件,无论是在正常生理情况下的减数分裂重组与细胞衰老、还是在端粒功能失调、缺氧、热休克、电离辐射（IR）以及某些细胞毒性药物的作用下均可诱导其发生.为了维持基因组的稳定性和完整性,细胞可通过启动活化一系列DNA损伤应答反应（DDR）来感知DNA的损伤并协调细胞周期检测点蛋白的激活、启动细胞凋亡和DNA修复过程.近来研究显示,以特异性水解靶蛋白上K63-Ubs的去泛素化酶BRCC36为核心的细胞内蛋白复合体在DSB修复过程中具有十分重要的作用,参与了多种心血管疾病及肿瘤的发生发展,本文对其近来的研究进展作一综述.     

泛素-蛋白酶体途径及意义

泛素-蛋白酶体途径介导的蛋白降解是机体调节细胞内蛋白水平与功能的一个重要机制。负责执行这个调控过程的组成成分包括泛素及其启动酶系统和蛋白酶体系统。泛素启动酶系统负责活化泛素,并将其结合到待降解的蛋白上,形成靶蛋白多聚泛素链,即泛素化。蛋白酶体系统可以识别已泛素化的蛋白并将其降解。此外,细胞内还有另一类解离泛素链分子的去泛素化蛋白酶形成反向调节。泛素-蛋白酶体途径涉及许多细胞的生理过程,其调节异常与多种疾病的发生有关。     

泛素结合结构域在泛素化底物鉴定中的应用

泛素化(Ubiquitylation)是目前真核细胞内已知的最复杂的翻译后修饰。泛素化底物的识别需要一类特异性受体蛋白介导,这些受体蛋白往往包含一个或多个泛素结合结构域(UBDs)。UBD-泛素间的特异性结合决定了泛素化底物功能的特异性。目前已发现20多种UBDs超家族可识别泛素化底物上的特异性功能团进而传递信号。因此深入了解UBD的识别机制对新UBD的发现及泛素化底物的鉴定具有重要意义。     

泛素结合酶UbcH10与肿瘤（文献综述）

泛素结合酶UbcH10（Ubiquitin—conjugating enzymes,UbcH10）又称周期蛋白选择性泛素载体蛋白E2-C,属于泛素结合酶E2家族的成员,是肿瘤相关的泛素结合酶。在泛素介导的蛋白质降解途径中,E2蛋白的作用将来自E1活化酶的泛素转至具有E3连接酶活性的特异的底物蛋白的赖氨酸残基,泛素化的靶蛋白被26s蛋白酶体识别而降解”0。该泛素蛋白酶体系统（ubiquifin—proteasome system,UP—S）对调控蛋白质的动态平衡起关键作用而且对调控细胞进展（不论正常细胞还是肿瘤细胞）起决定性作用。特异性干涉UP—S的某一环节已被认为是一种很有前途的创新性抗肿瘤治疗方法。     

SCF E3泛素化连接酶的研究进展

Skp1-Cullins-F-box蛋白复合物(SCF复合物)E3泛素化连接酶是最大的泛素化连接酶家族成员,该蛋白复合体可以促进多种蛋白通过泛素化降解,对细胞周期、DNA复制等多种生物过程具有重要的调节作用。SCF E3泛素化连接酶在人类肿瘤中的异常激活可以诱导细胞无限制的增殖和基因组的不稳定,因此,E3泛素化连接酶复合物成员可以作为抗肿瘤治疗的靶点。本文主要介绍SCF E3泛素化连接酶作为抗癌药物的靶点和新型肿瘤抑制剂MLN4924的抗肿瘤作用。     

泛素连接酶MDM2促进外源NOLC1的泛素化和降解

目的研究泛素连接酶MDM2对其调节因子NOLC1的泛素化和降解。方法克隆原核表达了NOLC1全长蛋白和其核定位信号区域,在体外泛素化体系中利用有泛素连接酶活性的重组MDM2研究其对NOLC1的泛素化。在哺乳动物细胞中,研究MDM2对外源转染的NOLC1的降解。结果在体外泛素化体系中MDM2泛素化NOLC1全长和其核定位信号区域;在哺乳动物细胞中,MDM2促进外源NOLC1降解超过70%,且NOLC1的降解通过蛋白酶体途经实现。结论 MDM2促进外源NOLC1的泛素化和降解,为研究MDM2-TP53-NOLC1之间的相互调节提供了新的线索。     

去泛素化酶USP14调控H_2O_2诱导的H9c2细胞氧化应激损伤

目的:观察抑制泛素特异性蛋白酶14(ubiquitin-specific protease 14,USP14)的活性对H_2O_2诱导的H9c2细胞氧化应激损伤的影响。方法:体外培养H9c2心肌细胞,用H_2O_2(25μmol/L)处理2 h,建立心肌细胞氧化应激损伤模型。将细胞分为对照(control,CON)组、模型组(H_2O_2组)、USP14抑制剂IU1处理组(IU1组)和IU1处理后建模组(IU1+H_2O_2组)。MTS法检测H9c2心肌细胞活力;流式细胞术检测细胞内活性氧簇(ROS)的产生和细胞存活率;Western blot法检测丝裂原活化蛋白激酶家族相关蛋白的表达变化。结果:与CON组相比,H_2O_2组细胞活力、细胞存活率显著降低,细胞内ROS含量、Bax/Bcl-2、P53、p-ERK1/2、p-JNK和p-P38的蛋白水平显著增加(P0.05);与H_2O_2组比较,IU1+H_2O_2组细胞活力、细胞存活率显著增加,细胞内ROS含量、Bax/Bcl-2、P53、p-ERK1/2、p-JNK和p-P38蛋白水平显著降低(P0.05)。结论:抑制USP14活性可以减轻氧化应激条件下H9c2心肌细胞的损伤,其机制可能与抑制丝裂原活化蛋白激酶信号活化和下调凋亡相关蛋白有关。     

泛素连接酶LNX1促进外源PBK的泛素化和降解

 目的 研究LNX1对其相互作用蛋白PBK的泛素化和降解。方法 克隆、原核表达、纯化了一系列重组人LNX1截断体蛋白和LNX1全长蛋白;在体外泛素化体系中研究其对PBK的泛素化,哺乳动物细胞内研究其对外源PBK的泛素化和降解。结果 在体外泛素化体系中LNX1泛素化PBK,并研究了不同LNX1截断体对PBK泛素化的影响;发现在哺乳动物细胞内外源LNX1促进外源PBK的泛素化,进而导致其通过蛋白酶体降解。结论 研究发现了LNX1对外源PBK的泛素化和降解,为研究LNX1的生理功能提供了重要线索。