反刍动物生长激素受体基因的研究进展

生长激素受体(growth hormone receptor,GHR)基因是家畜生产力的重要候选基因,并成为提高反刍动物奶肉产量等研究的焦点。近年来,有关牛羊GHR基因的研究不断增加,该领域的深入探讨可能产生家畜育种和生产中候选基因研究的突破性进展,而且有助于标记辅助选择的实施.本文主要就牛羊GHR的结构和功能区域的分析,及其基因的结构和表达调控,多态性与生产性能的相关研究等方面进行了综述和讨论。     

生长激素—受体复合物的结构和受体信号转导

生长激素受体是一种单通道受体，具有一个细胞外蛋白区，一个跨膜区和一个细胞内蛋白区。     

生长激素－受体复合物的结构和受体信号转导

生长激素受体是一种单通道受体，具有一个细胞外蛋白区，一个跨膜区和一个细胞内蛋白区。晶体学结构资料表明，生长激素－受体复合物由三个分子组成，实际上是两个生长激素受体包裹着一个被结合的激素。虽然激素的局部结构是不对称的，但是通过改变构象，受体能够利用它们的相同残基序列与不同的结构模式相结合。这种聚集作用控制着信号转导。这些信息可用来设计分子核医学研究生长激素受体的浓度或占有率所用的放射性标记配体     

VEGF及其受体的表达与肝癌的生物学特性关系

目的：通过检测裸鼠肝癌模型中肝癌不同生长时期的病理改变与血管内皮生长因子（VEGF）及其受体（VEGFR）KDR及Flt-1的异常表达，探讨肝癌复发转移与VEGF及其受体间的关系。方法：将裸鼠25只随机分成5组，Ⅰ组为对照组，其余20只原位种植人肝癌细胞，分别于1周、2周、3周、4周作血管造影，取标本切片行HE染色及用免疫组化的方法检测anti-VEGF,anti-KDR及anti-Flt-1的表达。结果：血管造影显示种植后2周组肝脏血管开始有增生及扭曲，3周及4周组血管改变更加明显，各组成瘤率均为100％，光镜下1周组可见瘤细胞散在肝血窦周围，2周组瘤组织聚集成团，3周组，4周组瘤细胞团形态不规则，边界不清，向瘤周浸润，瘤细胞团内可见坏死，1周组瘤细胞VEGF表达成弱阳性，2周组VEGF表达成阳性，3周组及4周组VEGF表达强阳性；正常对照组于种植后1周组肿瘤细胞与周围肝细胞VEGFR表达未见明显差异，种植后2周、3周、4周肿瘤新生儿血管VEGFR表达逐渐增强，肿瘤新生血管内皮细胞的VEGFR着色明显强于瘤周血管内皮细胞，肿瘤细胞亦可见VEGFR染以。结论：多血供的肝癌结节VEGF及其受体表达较强，肿瘤的生长，局部浸润，远处转移与VEGF及其受体密切相关，VEGF首先来源于旁分泌，在后期肿瘤自分泌是VEGF高表达的重要来源，这可能是肝癌阻断血供后，癌灶能存活，复发和转移的重要原因之一。     

原发性肝癌组织中β—G基因的表达及意义

为探讨原发性肝癌组织中β-G基因的表达及其意义,采用免疫组化,免疫荧光和原位杂交等方法对54例原发性肝癌组织、其中的51例癌旁肝硬化组织及10例正常肝组织进行检测,结果发现,β-G在原发性肝癌及癌旁组织中的表达明显高于正常组织,伴转移患癌旁组织表达高于癌组织,临资料证实β-G表达与肝癌的转移和分化密切相关,而与肿瘤的大小、有无包膜、AFP水平,组织类型,是否并发乙型肝等无关,提示β-G基因的检测可作为判断肝癌恶性程度及转移的参考指标。     

原发性肝癌雄激素受体表达的临床病理研究

 目的探讨原发性肝癌患者雄激素受体的改变对肝癌发生发展的影响.方法应用放射配体结合分析法(RBA)对36例行手术切除的肝癌组织、癌周组织及外周血白细胞雄激素受体(Androgen receptor,AR)的含量进行测定,同时用放射免疫法(RIA)测定肝癌患者及正常人血浆雄激素(睾酮T)的水平,结合临床病理资料进行统计分析.结果(1)癌组织与癌周组织相比,AR含量明显升高(P＜0.01),且与肿瘤直径大小有关;(2)高分化的肝癌组织AR含量明显高于低分化者(P＜0.01);(3)肝癌患者血浆睾酮水平增加不明显(P＞0.05),但白细胞AR表达明显升高(P＜0.01).结论肝癌的发生可能与癌组织中AR含量升高有关,AR的含量与肿瘤的大小及分化程度存在相关性.     

基因重组人生长激素治疗生长激素缺乏伴贫血患儿的研究

目的观察基因重组人生长激素（rhGH）对生长激素缺乏症伴贫血患儿的治疗作用。方法44例生长激素缺乏伴贫血患儿分为治疗组和对照组,治疗组26例给予rhGH0．1U／（kg·d）晚睡前皮下注射1年,对照组18例未给予任何治疗。结果两组患儿治疗前在骨龄、年龄、身高、身高增长率、血红蛋白值、红细胞压积等方面无显著性差异。rhGH治疗1年后两组患儿在骨龄、年龄方面无显著性差异,但是在身高增长率、红细胞压积、血红蛋白值方面治疗组明显高于对照组（P〈0．05）。结论rhGH不仅能明显提高生长激素缺乏症伴贫血患儿的身高,还能改善贫血状态。     

肝癌肝动脉化疗栓塞术后外周血AFP mRNA变化及意义

通过对肝癌肝动脉化疗栓塞术（TAE）治疗前后外周血AFP mRNA定量检测,探讨治疗前后外周血AFP mRNA定量变化规律,并分析其临床意义。采用分子生物学反转录竞争PCR技术,定量检测了15例原发性肝细胞癌患者TAE治疗前及术后第1、2、3、4、5、6、7、14、28日外周血AFP mRNA水平。结果显示TAE前后外周血AFP mRNA有不同程度的变化,其中术后第3日呈最高水平,1周后基本恢复至术前水平,与术前比较,术后4周1例升高,8例基本相同,6例下降。提示TAE治疗后第3日外周血AFP mRNA水平最高,临床可给予积极治疗,预防肝外转移的发生。     

重组人生长激素对烧伤后高代谢的影响

为探讨重组人生长激素（ｒｈＧＨ）对烧伤后高代谢反应的影响,采用实验用小型香猪ＴＢＳＡ３５％Ⅲ度烧伤模型,动态观察了ｒｈＧＨ对静息能量消耗（ＲＥＥ）、血清生长激素、胰岛素样生长因子１（ＩＧＦ－１）、胰岛素、胰高血糖素、皮质醇、白蛋白及体重等代谢相关指标的影响。结果发现,ｒｈＧＨ能明显降低烧伤后ＲＥＥ水平,并使表生长激素、ＩＧＦ－１、白蛋白及体重罗对照组显著升高,但对胰岛素、胰高血糖素和皮质醇等无明显     

大肠癌组织血管内皮生长因子及其受体的表达与肿瘤血管生成的关系

为探讨血管内皮生长因子（VEGF）及其受体（KDR）的表达与人大肠癌组织血管生成的关系，采用免疫组织化学SABC法观察了68例人大肠癌组织中的VEGF及KDR的定位与分布，并对血管进行染色及计数。结果显示，68例大肠癌组织中VEGF表达阳性率为55．9％（38／68），阳性物质阳性物质主要位于肿瘤细胞胞膜及胞浆；KDR表达阳性率为45．6％（31／68），既可位于癌组织及癌组织旁的血管内皮细胞，又可位于肿瘤细胞胞膜及胞浆。VEGF表达与大肠癌Dukes分期密切相关。VEGF表达阳性大肠癌组织的微血管密度（MVD）显著高于VEGF表达阴性者（P＜0．01），而且随着VEGF表达强度的增强，癌组织内微血管密度明显增加（P＜0．01）。结果提示，大肠癌细胞分泌的VEGF既可以旁分泌的形式促进肿瘤血管的生成，也可能存在着自分泌形式；VEGF与大肠癌的生长、浸润和转移密切相关，是大肠癌主要的血管新生诱导因子之一，可促进大肠癌的血管生成。     

缺氧复氧损伤后小肠上皮细胞刷状缘二肽转运载体生物学功能的改变及生长激素的调控作用

目的　探讨缺氧复氧损伤后小肠上皮细胞模型Caco 2细胞刷状缘二肽转运载体 (PepT1)生物学功能的变化及重组人生长激素(rhGH)对PepT1的调控作用。方法　建立Caco 2细胞单层培养模型和缺氧复氧损伤模型 ,比较常规培养的Caco 2细胞单层及缺氧复氧损伤后Caco 2细胞模型对底物头孢氨苄转运和摄取功能的变化 ;用rhGH对两种细胞模型进行干预 ,比较两者对底物的转运和摄取能力改变 ;同时分别比较各种情况下PepT1mRNA的变化。结果　缺氧复氧损伤后Caco 2细胞PepT1mRNA水平明显下降 ,对底物的摄取能力明显低于对照组 (P <0 0 5 ) ;正常培养的Caco 2细胞经rhGH孵育后对底物的转运和摄取能力明显强于对照组 (P <0 0 5 ) ;缺氧复氧损伤后的Caco 2细胞用rhGH孵育后对底物的转运和摄取能力明显提高 ,与单纯损伤组比较差异有统计学意义 (P <0 0 5 )。结论　缺氧复氧损伤后PepT1mRNA下降 ,在基因水平下调了肠上皮细胞刷状缘PepT1对二肽的转运和摄取能力 ;rhGH对正常培养的Caco 2细胞和缺氧复氧损伤的Caco 2细胞的二肽载体转运和摄取功能均有上调作用 ;rhGH是在基因水平调节PepT1的生物学功能     

乙型肝炎病毒在原发性肝细胞癌中病原意义的研究

本文收集我院近年经病理确诊的肝细胞癌70例、毛细胆管型肝癌7例,复核临床材料和HE染色切片,同时再作Victoria blue染色观察肝细胞内HBsAg,证明未查血清HBsAg、血清HBsAg阴性和阳性者肝细胞内HBsAg检出率分别为85.7％、75.0％和90.2％,三者无明显差别,仅血清HBsAg阴性者肝细胞内HBsAg数量明显少些,提示肝细胞癌病例呈血清内HBsAg阴性,并不能除外HBV感染和致癌可能。再者,34.3％标本内可在肝癌细胞内查见HBsAg,9.8％标本于癌、肝组织间不正常肝细胞内查见HBsAg,而7例毛细胆管型肝癌,HE染色肝组织内未见毛玻璃样肝细胞,Victoria blue染色未见HBsAg,进一步说明HBV感染与肝细胞癌问确具密切因果关系。     

肝细胞生长因子及其c-Met受体表达与原发性小肝癌术后复发关系的初步研究

目的　探讨原发性小肝癌 (SHCC)切除术后血清肝细胞生长因子 (HGF)水平和癌组织中c Met受体表达与术后复发的关系。方法　采用ELISA对手术前后血清HGF浓度变化进行检测 ,并利用Western、Northern印迹杂交方法 ,测定肿瘤与非肿瘤组织内c Met蛋白表达量。结果　术前血清HGF浓度为 0 64± 0 15ng/ml,术后 3天为 1 41±0 2 8ng/ml,二者差异有显著性意义 (P <0 0 0 1)。术后 3天血清HGF浓度是术前的 2 3 2± 0 5 5倍。术后HGF的增长倍数与肿瘤组织内c Met蛋白的过度表达在术后复发与未复发者中差别有显著性意义(P <0 0 5 ) ,两年内复发者明显高于两年后复发及未复发者。结论　SHCC切除术后血清HGF水平明显增高 ,肿瘤组织本身c Met蛋白过度表达 ,可能与SHCC术后早期复发有关     

纤维连接蛋白降解片段（MAD2）单抗的制备及肝细胞癌患者血浆含量检测

应用杂交瘤技术制备了纤维连接蛋白（FN）降解片段MAD2的单克隆抗体（McAb)；建立了ＭＡＤ２检测的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法；对２２７例肝细胞癌（ＨＣＣ）、７６例肝转移癌（ＨＭＣ）、９８例消化道癌（ＡＣＣ）、１５６例慢性肝病（ＣＬＤ）患者和４８例健康人体血浆ＭＡＤ２含量进行测定。结果显示，制备的ＭＡＤ２ ＭcAb属ＩgG1，与ＦＮ无交叉反应；ＨＣＣ组血浆ＭＡＤ２含量均值与ＣＬＤ组、ＨＭＣ组、ＡＣＣ组和正常对照组比较差异有显著性意义（分别Ｐ＜0.01）,以HCC患者的最低MAD2值作临界值时，仅13.5%CLD、6.6%HMC和4.1?C超过此值，而健康人体血浆MAD2含量均低于临界值；65例血清AFP正常的HCC患者其血浆平均MAD2值仍明显高于非HCC肿瘤、CLD患者和正常对照。结合以前的结果，进一步表明，血浆MAD2检测可作为HCC诊断的新标志物，并可与AFP相互补充；ＭＡＤ２ ＭcAb的制备使MAD2的检测变得易行。     

基质金属蛋白酶及其抑制物在大肠癌表达的定量分析

为探讨基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)及其组织型基质金属蛋白酶抑制因子(tissueinhibitorofmetalloproteinase,TIMP)的表达与人大肠癌转移及其预后的关系,利用S-P免疫组化方法,检测了41例大肠癌组织中MMP-2、MMP-9及TIMP-1的表达情况,并应用计算机图像分析系统作定量分析.结果显示,在肿瘤组织中MMP-2、MMP-9及TIMP-1的表达量明显高于正常大肠组织;淋巴结转移的组织中,MMP-2、MMP-9及TIMP-1的表达量明显高于非淋巴结转移的组织,三者高表达水平与大肠癌的进展有关,并且预后不良.提示基质金属蛋白酶及其抑制物与大肠癌转移及预后密切相关.     

抗人肝癌单抗制备的HAg18-1血清酶联免疫检测试剂在肝癌病人诊断中的初步应用

报道了用抗人肝癌单克隆抗体(McAb)制备的HAg18-1血清快速EIA检测试剂对良恶性消化系疾病血清检测结果。阳性率如下:原发性肝癌(PLC)79.63％(43/54);肝硬变9.09％(2/22);乙型肝炎4.88％(2/41);胃癌23.08％(6/26);大肠癌20％(5/25)。19例胃肠炎、16名正常人均为阴性。该试剂对PLC诊断的特异性为89.52％,HAg18-1阳性与甲胎蛋白(AFP)含量无关。两者合用对PLC诊断阳性率达94.44％。     

单侧肾癌和囊肿共存的分型及诊断

为了提高单侧肾癌和囊肿共存的诊断水平,回顾性分析10例单侧肾癌和囊肿共存的患者影像学结果。结果显示,分泌性尿路造影显示囊性占位,B型超声波提示增厚及不规则的囊性肿物。CT扫描示病灶不规则增厚,部分有壁结节、增厚分隔及钙化,实质部分有明显的早期强化。有的类似单纯囊肿,但至少一层能显示肿瘤密度影。提示,囊壁分隔及不规则增厚、壁结节和实质早期强化是CT诊断单侧肾癌和囊肿共存的重要依据。对囊肿基底要进行非常仔细的扫描,尽可能捕获到有上述特征的影像学改变,有时囊肿周围也可获得类似的特征性影像。