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相似文献
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1.
目的了解急性白血病(AL)PTENmRNA表达和Akt磷酸化(p-Akt)水平的关系,以期探讨急性白血病发生发展的机制。方法采用逆转录(1it)-PCR法检测白血病细胞系K562、Jurkat、HL-60及21名健康对照者和68例AL患者PTENmRNA表达情况。同时用流式细胞术检测K562、Jurkat、HL-60细胞和AL患者p-Akt水平。结果(1)21名健康对照者PTENmRNA阳性18名,占85.70%。K562细胞PTENmRNA阳性,Jurkat、HL-60细胞阴性。68例AL中PTENmRNA阳性18例,占26.47%,与健康对照者比较差异有统计学意义(Х^2=23.38,P〈0.01);31例AL缓解患者PTENmRNA阳性21例,与AL初诊组比较差异有统计学意义(Х^2=15.19,P均〈0.01)。AL各亚型PTEN阳性率比较差异无统计学意义。(2)21名健康对照者p-Akt中位数1.57%。K562、Jurkat细胞p-Akt高表达,HL-60细胞低表达。68例AL患者p-Akt中位数25.47%,与健康对照者比较差异有统计学意义(P〈0.01)。(3)AL患者FYENmRNA表达缺失率与p-Akt阳性率呈显著正相关(Х^2=0.73,P〈0.01)。结论AL患者PTENmRNA表达缺失是导致p-Akt高表达的关键因素之一,可能和急性白血病的发生发展有关。  相似文献   

2.
目的 了解骨髓增生异常综合征(MDS)PTEN基因表达和Akt磷酸化(p-Akt)水平之间的关系,探讨MDS演进、高风险转归为急性髓系白血病的机制。方法 采用RT-PCR检测白血病细胞株K562、Jurkat,65例MDS患者骨髓细胞PTENmRNA表达情况。同时用流式细胞术检测Jurkat、HL-60细胞和30例MDS患者骨髓细胞p-Akt水平。并以21份正常人骨髓标本为健康对照。结果 ①PTEN基因阳性对照K562细胞呈阳性表达,阴性对照Jurkat细胞无表达。65例MDS患者中有27例表达阳性,阳性率41.5%,与健康对照组(85.7%)比较差异有统计学意义(P〈0.01)。RAEB(39.1%)、RAEB—t(27.8%)和MDS—AML(12.5%)PTEN阳性率均低于RA/RARS(75.O%)组,各亚型组之间比较差异有统计学意义(P〈0.01)。②阳性对照Jurkat细胞高表达p-Akt(86.9%),阴性对照HL-60细胞p-Akt阴性。30例MDS患者p-Akt水平升高(1.35%~58.23%),与健康组(0.54%~2.34%)比较差异有统计学意义(P〈0.01),且随着原始细胞比例增高p-Akt水平升高。MDS患者PTEN基因表达缺失率与p-Akt阳性率呈显著正相关(r=0.93,P〈0.01)。结论 MDS患者PTEN基因表达缺失是导致p-Akt高表达的关键因素之一,并且可能加速MDS病程进展及转化为急性髓系白血病。  相似文献   

3.
抑癌基因的失活和癌基因的激活与肿瘤的发生、发展密切相关。PTEN基因是迄今为止发现的第一个具有脂质磷酸酶活性的抑癌基因,S期激酶相关蛋白2(SKP2)是新近发现的一种癌基因,血管内皮生长因子(VEGF)是目前研究较为普遍的癌基因,它们的异常表达与人类大多数肿瘤的发生、发展关系密切。目前,已有PTEN基因、SKP2基因及VEGF基因在急性白血病(AL)细胞中表达异常的报道。我们应用细胞免疫化学染色方法检测RTEN蛋白在AL患者骨髓细胞中的表达,分析PTEN与SKP2、VEGF的相关性,探讨PTEN、SKP2及VEGF蛋白水平的异常在AL中的可能作用。  相似文献   

4.
白血病细胞内SHIP基因表达及其对AKT磷酸化的影响   总被引:3,自引:1,他引:2  
SHIP(SH2 domain containing inositol 5’-phosphatase)基因位于人类染色体2q36-37.1,广泛表达于造血细胞。SHIP基因敲除小鼠可表现出骨髓细胞的高度增生。SHIP可特异地清除磷脂酰肌醇3激酶(P13K)代谢产物P1P3,从而抑制其下游信号分子AKT的磷酸化。这些研究表明,SHIP可能作为潜在的肿瘤抑制基因对造血细胞的发生、发展及功能起着关键的负调控作用。我们应用实时定量PCR的方法检测T、B及髓系白血病细胞中SHIP基因的表达,初步证实SHIP基因表达和AKT磷酸化水平呈现负相关关系,同时证实bcr—abl融合基因产物对SHIP基因表达有抑制作用。  相似文献   

5.
本研究通过建立磷酸特异化流式细胞术(phospho-specific flow cytometry,phospho-flow)检测白血病细胞信号通路磷酸化蛋白的实验方法,探讨Phospho-flow在白血病研究中的应用价值。取白血病患儿的骨髓,分别采用Phospho-flow单个核细胞法和Phospho-flow直接固定法进行处理。Phospho-flow单个核细胞法为:骨髓经提取单个核细胞并固定破膜处理后,加入磷酸化抗体(P-AKT,P-ERK1/2)孵育,然后用流式细胞仪分析;Phospho-flow骨髓直接固定法为:骨髓经固定/裂解液和90%甲醇破膜细胞处理,然后加入细胞表面CD抗体及P-AKT,P-ERK1/2孵育,然后上流式细胞仪分析处理。结果表明,26例白血病患儿骨髓经phospho-flow单个核细胞法处理,P-AKT和P-ERK1/2阳性率分别为46.2%和30.8%,经phospho-flow骨髓直接固定法处理,P-AKT和P-ERK1/2阳性率分别为50.0%和38.5%。经统计学分析,两种phospho-flow的骨髓处理方法在检测P-AKT和P-ERK1/2的阳性率方面无统计学差异(p>0.05)。结论:本实验室建立的phospho-flow骨髓直接固定法,能有效检测白血病患儿骨髓细胞的磷酸化蛋白,可用于白血病信号通路的实验研究。  相似文献   

6.
目的:探讨Livin、PTEN基因在急性早幼粒细胞性白血病患者中的表达及其临床意义。方法:采用PCR方法检测急性早幼粒细胞性白血病患者的Livin、PTEN基因表达情况,并与缺铁性贫血患者相比较。结果:30例AML-M3患者当中Livin基因的阳性率为63.3%(19/30),对照组为15.0%(3/20)。AML-M3患者当中PTEN基因的阳性率为43.3%(13/30),对照组为85.0%(17/20),与对照组相比较,AML-M3的Livin和PTEN基因表达异常有显著意义(P<0.01)。结论:Livin、PTEN基因在AML-M3呈异常表达,对疾病的发生发展有重要作用,Livin和PTEN有可能成为AML-M3重要诊断指标和基因治疗靶点。  相似文献   

7.
抑癌基因PTEN mRNA在白血病细胞中的表达及意义   总被引:7,自引:2,他引:7  
目的了解白血病细胞中PTEN基因的表达情况及其与临床的关系。方法采用RT-PCR法检测5个白血病细胞系,31例慢性粒细胞白血病(CML),87例初诊急性白血病(AL)[包括59例急性髓系白血病(AML),26例急性淋巴细胞白血病(ALL),2例急性混合细胞白血病],21例完全缓解期急性白血病(AL-CR)患者骨髓标本中PTEN mRNA表达情况,并分析了与临床指标的相关性。结果PTEN基因在K562细胞中有表达,而在Kasum i-1、HL-60、U937、Nalm-1细胞中均无表达。CML组阳性率(61.29%)与正常对照组(78.57%)相比,差异无统计学意义(P>0.05),AL组和AL-CR组阳性率(分别为18.29%和42.86%)均低于正常水平(P<0.01和P<0.05),AL组阳性率又低于AL-CR组(P<0.05)。PTEN基因的阴性表达与外周血高白细胞计数(≥20×109/L)、染色体异常呈显著的正相关。结论AL患者存在PTEN基因的表达缺失,PTEN基因在AL的发病中可能起一定作用。  相似文献   

8.
目的 探讨AKT信号转导通路中有关蛋白肿瘤抑制基因(PTEN)、磷酸化AKT(p-AKT)及细胞周期素D1(Cyclin D1)在原发性肺鳞癌和腺癌中不同的表达意义及与临床病理因素的相关性.方法 应用免疫组化的方法,检测原发性肺鳞癌44例、腺癌36例及35例非肿瘤性肺组织标本中PTEN、p-AKT、Cyclin D1的表达,并与临床病理因素进行相关性分析.结果 p-AKT、Cyclin D1在肺鳞癌和腺癌中总的阳性率分别为78.8%、76.3%,均显著高于非肿瘤性肺组织中阳性表达0%(均P<0.05).PTEN在肺鳞癌和腺癌中总阳性率为47.5%,显著低于非肿瘤性肺组织中阳性表达94.3%(P<0.05).PTEN、p-AKT、Cyclin D1在肺鳞癌和腺癌中的表达差异均无统计学意义(均P>0.05).PTEN表达与有无淋巴结转移和组织的高分化有关.p-AKT在高中分化腺癌中阳性表达显著高于低分化腺癌的表达.Cyclin D1表达与淋巴结转移、鳞癌的低分化有关.在肺鳞癌和腺癌中,p-AKT蛋白的表达均与Cyclin D1呈正相关.肺鳞癌中,PTEN表达与p-AKT、Cyclin D1呈负相关;肺腺癌中,PTEN表达与p-AKT、Cyclin D1均无相关关系.结论 在肺鳞癌和腺癌中均存在AKT及其通路的激活.PTEN的失活参与了肺鳞癌和腺癌的发生和发展.在肺鳞癌中,AKT的激活与PTEN的失活有关;在肺腺癌中,PTEN的失活可能不是AKT活化的主要原因.在肺鳞癌和腺癌中可能存在不同的AKT活化机制.  相似文献   

9.
目的利用实时PCR技术检测急性粒细胞白血病(AML)、急性淋巴细胞白血病(ALL)和慢性淋巴细胞白血病(CLL)中的PTEN mRNA的表达状况。方法收集病例AML21例,ALL3例和CLL23例,按照相应的情况进行分组,比较各组PTEN mRNA在不同情况下的表达状态。结果 AML和ALL组的目的基因Ct值没有明显差异(P0.05),且这两组的Ct值要明显高于CLL组的Ct值(P0.05),这三个组的Ct值要明显高于对照组的Ct值(P0.05)。AML组和ALL组的初治组Ct值要高于缓解组的Ct值,CLL组的初治组的Ct值和缓解组的Ct值没有明显差异(P0.05)。AML、ALL和CLL组的高肿瘤负荷组的Ct值要明显高于低肿瘤负荷组的Ct值(P0.05)。结论通过实验确定了三种病例的PTEN基因表达状况,为疾病的预判和转归可能提供了辅助的可靠地途径。  相似文献   

10.
目的:探讨 PTEN、AKT2、NF-кB 在肺癌组织表达及临床意义。方法随机取62例肺癌组织作为肺癌组与20例肺癌远端(>5 cm)肺组织为癌旁组,采用免疫组化法与 RT-PCR 方法检测组织中 PTEN、AKT2、NF-кB 蛋白的表达,并分析其相关性和临床意义。结果肺癌组织中 AKT2、NF-кB 的阳性表达率分别为57.89%和79.00%,显著高于癌旁组(15.00%和50.00%);肺癌组 PTEN 阳性表达率为50.00%,显著低于正常组(90.00%),差异有统计学意义(均 P <0.05)。RT-PCR 显示肺癌组织中 AKT2、NF-кB 的 mRNA 表达量显著高于癌旁组,而 PTEN 的 mRNA表达量显著低于正常组,组间比较差异有统计学意义(P <0.05)。PTEN 与 NF-кB 的表达在肺癌组织不同分化程度方面差异显著;PTEN、AKT2、NF-кB 的表达在不同的临床分期与有无淋巴结转移方面,差异有统计学意义(均 P <0.05);PTEN、AKT2、NF-кB 的表达与患者的年龄、性别、组织学类型等无关(均 P >0.05)。肺癌组织中 PTEN 的表达与 AKT2、NF-кB 呈负相关(均 P <0.05),而 AKT2与 NF-кB 呈正相关(均 P <0.05)。结论在肺癌组织中,PTEN呈低表达,AKT2、NF-кB 呈高表达,PTEN、AKT2、NF-кB 的表达与肺癌发生发展关系密切,可以作为临床诊治肺癌的重要参考指标。  相似文献   

11.
本研究旨在检测不同亚型急性淋巴细胞性白血病患者血清PTK7 mRNA和蛋白的表达水平,探讨其诊断的临床价值.选择2012年5月-2014年4月在本院诊断为急性淋巴细胞白血病(ALL)患者,按照纳入和排除标准共纳入136例患者,按照细胞形态学将他们分成L1组(n=42)、L2组(n=45)和L3组(n=49),另外选择48例正常儿童为对照组.使用荧光定量PCR检测外周血单个核细胞中PTK7 mRNA转录水平,采用Westem blot检测血清中PTK7蛋白表达量.结果表明,L1组PTK7转录水平显著高于正常组(P=0.000).L2组PTK7转录水平显著高于L1组(P =0.000).L3组与L2组之间无显著性差异(P =0.123).L1组患者PTK7蛋白水平显著高于正常组(仁1.564,P=0.000),L2组PTK7蛋白水平显著高于L1组(t=1.437,P=0.003),L3组PTK7蛋白水平与L2组比较无显著差异(t=0.821,P=0.312).结论:血清PTK7蛋白表达检测具有诊断ALL的潜在临床价值,但对ALL分型不具有型特异性.  相似文献   

12.
为了研究pten基因在骨髓增生异常综合征(MDS)、急性髓系白血病(AML)患者中的表达及其意义,采用逆转录.聚合酶链反应(RT—PCR)和免疫印迹杂交(Western blot)方法检测Jurkat细胞株、35例MDS、45例AML及20例正常人骨髓有核细胞中pten mRNA及其蛋白的表达。结果表明:pten mRNA在阴性对照Jurkat细胞株不表达。MDS组的阳性表达率(77.1%)低于正常对照组(90.0%),但差异无统计学意义(P〉0.05);AML组阳性表达率(60.0%)低于正常对照组,差异有统计学意义(P〈0.05);MDS—RAEB组阳性表达率(70.0%)低于MDS—RCMD组(86.7%),初发/复发AML组阳性表达率(53.3%)低于完全缓解AML组(73.3%),但差异均无统计学意义(p〉0.05)。对各组pten mRNA相对表达量分析发现,MDS及AML组均明显低于正常对照组(P〈0.005);MDS-RAEB组低于MDS-RCMD组(P〈0.05);初诊/复发的AML组明显低于完全缓解的AML组(P〈0.001);MDS组与AML组相比,差异无统计学意义(p〉0.05)。PTEN蛋白表达阳性率在MDS组(65.7%)及AML组(54.8%)均低于正常对照组(90%)(P〈0.05);MDS—RCMD组(80.O%)与MDS—RAEB组(55.0%)相比,阳性表达率均无统计学意义(P〉O.05),但初诊/复发的AML组(44.4%)与完全缓解的AML组(73.3%)相比,差异有统计学意义(p〈0.05)。结论:pten mRNA在MDS、AML中表达完全缺失并不多见,但表达强度较正常人明显减弱。PTEN蛋白在MDS、AML中阳性表达率低于正常人,且与mRNA表达水平不一致。pten基因的表达异常参与了MDS及AML的发病。  相似文献   

13.
目的:研究抑癌基因PTEN及凋亡抑制因子Survivin在卵巢上皮性癌中的表达及相关性。方法:应用免疫组织化学SP法,检测PTEN和Survivin蛋白在20例正常卵巢组织、21例良性上皮性卵巢肿瘤和38例卵巢上皮性癌中的表达。结果:PTEN在卵巢上皮性癌中的表达水平显著低于卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织,差异有显著性(P〈0.05);Survivin与PTEN相反,在卵巢上皮性癌中的表达显著高于良性卵巢肿瘤及正常卵巢组织(P〈0.05)。Survivin与PTEN的表达呈负相关(r=-0.527,P=0.001)。两者的表达均与年龄及病理类型无关(P〉0.05),而与临床分期、分化程度及是否转移相关(P〈0.05)。结论:PTEN及Survivin蛋白的表达与卵巢上皮性癌的发生、发展有关;两者的联合检测有助于判断卵巢上皮性癌的恶性程度及预后。  相似文献   

14.
本研究旨在探讨急性髓系白血病患者骨髓细胞相关分子标志物(PTEN、mTOR、NF-kB、CD44、PI3K)表达.选取20例住院患者,抽取骨髓液,先涂片检查骨髓白血病细胞百分比,并分临床缓解(9例)与未缓解(11例)两组.再将剩余的骨髓液以石蜡包埋,常规切片,免疫组化技术检测PTEN、mTOR、NF-kB、CD44、PI3K表达.结果表明:光学显微镜观察缓解组与未缓解组PTEN、mTOR、NF-kB、CD44、PI3K阳性细胞表达率分别为33.3、33.3、77.8、22.2、0与63.6,18.2,90.9,63.6,0.经统计学处理,PTEN和CD44两组比较,有统计学意义(P<0.05),荧光表达强度与图像分析也得出同样的研究结果.结论表明:急性白血病骨髓细胞PTEN、CD44高表达可作为急性髓系白血病难治诊断和预后判定的重要参考指标.  相似文献   

15.
本研究探讨stathmin1基因和蛋白在急性白血病初治、复发和缓解患者中的表达及其意义.应用FQ-PCR和Western blot检测25例正常人和76例急性白血病患者外周血细胞中stathmin1 mRNA和stathmin1蛋白的表达水平.结果显示,在正常人体内检测不出stathmin1蛋白表达,其mRNA在正常人体内则低水平表达.急性白血病初治患者stathmin1 mRNA表达高于正常人(P<0.05),急性白血病复发者stathmin1 mRNA表达显著高于初治者(P<0.05),急性髓系白血病与急性淋巴细胞白血病之间stathmin1 mRNA表达无显著差别(P>0.05).急性白血病初治患者stathmin1蛋白表达的阳性率为89%,stathmin1蛋白在急性白血病患者缓解后表达明显下降或不表达,急性白血病复发者stathmin1蛋白表达与初治者无显著差别(P>0.05),急性髓系白血病与急性淋巴细胞白血病之间stathmin1蛋白表达无显著差别(P>0.05).结论:stathmin1蛋白和mRNA在急性白血病初治及复发患者体内高表达,而在缓解后体内仍有弱表达的患者,具有一定的复发风险,因此stathmin1可能成为判断微残留白血病的一个新的生物学指标.  相似文献   

16.
为了解p16基因在急性髓系白血病(AML)发病中的意义,用PCR-SSCP和Northern blot方法分析了16例AML细胞p16基因结构及mRNA的表达。研究结果表明,16例未发现p16基因的缺失、突变。初治和复发的12例AML的p16 mRNA表达水平明显低于4例长期缓解者及正常对照者。1例p53突变AML的p16 mRNA有明显升高,提示p16基因在AML发病中可能不占重要地位,而在AML细胞抑制正常造血的逐步恶化中起一定作用,在p53突变时,其表达反馈性升高显示一种反馈环路失衡。  相似文献   

17.
本研究探讨红细胞生成素受体(EPOR)在白血病细胞上的表达及其意义,以及急性白血病患者血清红细胞生成素(sEPO)水平与贫血的关系,为急性白血病(AL)贫血的细胞因子治疗提供新的理论依据。用RT—PCR法检测30例急性白血病患者的白血病细胞EPOR表达,以化学发光法测定sEPO含量,采用全自动血细胞分析仪测定Hb水平。结果表明:30例AL患者中18例表达EPOR,表达率为60%,其中急性髓系白血病(AML)的EPOR表达率为61.9%(13/21),急性淋巴细胞白血病(ALL)的EPOR表达率为55.6%(5/9),AML与ALL的EPOR表达率之间无显著差异(P〉0.05),AL的EPOR表达率明显低于对照组(86.7%)(P〈0.05)。AML的EPOR表达量高于ALL,AL的EPOR表达量明显低于对照组(P〈0.01)。30例AL患者的sEPO水平均明显高于对照组(P〈0.01),与Hb水平呈负相关关系(r=-0.658,p〈0.01)。结论:急性白血病细胞有EPOR的表达,但表达水平较低,AML与ALL的EPOR表达率无显著差异。AL时EPO对贫血的负反馈机制未受损害,AL贫血不完全是由于机体EPO产生不足所致,推测主要是由于骨髓红系生成受抑制引起。重组人红细胞生成素(rh—EPO)在治疗急性白血病贫血仍被广泛应用,对白血病贫血的病人使用rh—EPO治疗是否可能促进白血病细胞异常增殖尚需进一步分析与研究。  相似文献   

18.
人抵抗素基因表达与白血病发病的相关性研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
抵抗素(resistin)自2001年被发现以来,人们对其生物学功能尚不清楚。本研究目的是通过抵抗素的组织表达分布以探讨人抵抗素的生物学功能、表达及与白血病发病的相关性。选择152例无炎症并发症的白血病病人作为实验组,100例健康志愿者作为对照组,采集静脉血血样,采用半定量PCR方法检测抵抗素在组织中的表达分布并比较抵抗素与内参基因表达的相对值,进行统计学分析。结果表明:抵抗素在正常人骨髓、胎儿肝脏,脐带血以及外周血细胞中有高水平表达,而在脂肪、脐带、胎盘以及成人肝脏组织中尚没有扩增出目的基因。实验发现,实验组抵抗素表达率为21%,对照组抵抗素表达率为27%,经卡方检验,χ^2=0.84,差异不显著。时实验组与对照组抵抗素表达水平比较结果进行了统计学分析,差别无统计学意义(P〉0.05)。结论:抵抗素在正常人骨髓、胎肝、脐血及外周血细胞中有高表达,此结果表明人抵抗素的表达与正常造血相关,但其表达率和表达水平与白血病无明显相关性。  相似文献   

19.
本研究探讨儿童急性淋巴细胞性白血病中SLC25A38表达水平及其临床意义.以23例初治儿童急性淋巴细胞白血病患儿作为实验组,10例非恶性血液病患儿作为对照组.通过Western blot及实时荧光定量RT-PCR方法检测SLC25A38在蛋白和mRNA水平的表达变化.结果表明:23例实验组中SLC25A38蛋白阳性的有8例,阳性率34.78%,10例对照均未检测出SLC25A38蛋白;ALL患儿中SLC25A38蛋白阳性组mRNA的相对表达量为0.4673±0.05344,阴性组为1.296±0.2517;蛋白阳性组较阴性组SLC25A38 mRNA的表达量明显降低(P=0.001);蛋白阴性组与对照组比较表达量无统计学差异(P =0.1097);临床资料分析发现,蛋白阳性组与阴性组在性别比例、免疫分型、初诊时外周血白细胞数、乳酸脱氢酶之间差异具有统计学意义(P<0.05).结论:SLC25A38蛋白作为一种新发现的蛋白,在初诊儿童急性白血病细胞中过表达,有可能作为急性白血病的一种新的分子标志和潜在的治疗靶点.  相似文献   

20.
有研究证实,白细胞介素12(IL-12)可以增强自然杀伤细胞的细胞毒性,还可以促进细胞毒T细胞对原代白血病细胞及白血病细胞株的细胞毒反应.此外,Wilms癌基因WT1 mRNA作为微小残留病变的标志已被广泛用于监测急性白血病(AL)和骨髓增生异常综合征(MDS)的疗效.为了研究IL-12能否降低AL和MDS患者外周血单个核细胞WT1基因的表达,分别收集了30例恶性血液病患者和5例健康志愿者的外周血单个核细胞(PBMNC)进行体外培养,在培养体系中加入IL-12.培养前和培养后第3天,用竞争性RT-PCR方法分别测定各标本中WT1 mRNA的表达量.结果显示,在6例慢性粒细胞性白血病患者,WT1 mRNA由104.8降至104.2拷贝/微克总RNA;在12例MDS患者,WT1 mRNA由105.4降至104.8拷贝/微克总RNA;在5例完全缓解期AL患者,WT1 mRNA由105.0降至104.2拷贝/微克总RNA;但在7例未缓解的AL患者,WT1 mRNA的表达无变化.结论:IL-12可以显著降低大部分恶性血液病患者WT1 mRNA的表达水平,IL-12有望用于去除恶性血液病患者体内的微小残留病变.  相似文献   

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