太子参均一多糖的分离与表征

目的:对太子参抗二型糖尿病多糖活性部位(PF40),进行分离纯化得到均一多糖并对其进行结构表征。方法:太子参粉碎后,通过水提醇沉法(40%乙醇)得到太子参粗多糖,采用DEAE-纤维素、葡聚糖凝胶柱对其分离纯化,得到一种均一多糖,采用高效凝胶渗透色谱法测定分子量,1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)-柱前衍生高效液相色谱法分析单糖组成。结果:分离得到一种均一多糖,由葡萄糖组成,分子量为18400Da,命名为HPh-1-1。结论:太子参均一多糖HPh-1-1是一种葡聚糖。     

猴头菇子实体中的主要多糖成分

目的对猴头菇子实体中的多糖进行分离、纯化和组成分析。方法猴头菇依次经过水提取和碱提取,所得粗多糖以DEAE-celluose色谱、Sephadex凝胶滤过色谱和Fehling试剂沉淀等方法进一步分离纯化,高效凝胶滤过法(HPGPC)鉴定纯度及相对分子质量,气相色谱和IR光谱分析多糖的比旋光度和化学组成。结果从猴头菇子实体中提取得3部分粗多糖CPW、CPB1和CPB2,经分离纯化得到5种多糖HEP-1～HEP-5,其中HEP-1和HEP-4为杂多糖,HEP-3和HEP-5为葡聚糖,HEP-2为酸性多糖。结论猴头菇子实体分到的5种多糖主要含以D-葡萄糖为主的中性糖,以葡聚糖含量最多,其中HEP-1、HEP-2为新类型的真菌多糖。     

灰树花子实体多糖中β-葡萄糖含量的酶法测定

目的探讨灰树花子实体多糖中β-葡聚糖含量的测定方法。方法多糖粗提物依次用高温α-淀粉酶、木瓜蛋白酶和α-1,4葡萄糖水解酶水解,通过测定其中葡萄糖的含量计算β-葡聚糖的含量。结果确定了测定方法中几种酶的用量。在0~300 mg.L-1范围内线性关系良好,测得灰树花子实体多糖中β-葡聚糖含量为3.26%~3.51%,3组样品的平均回收率为90.5%。结论该方法操作简便,准确度高。     

兰州百合多糖BHP-1的化学结构与形貌分析

目的:以兰州百合鳞茎中分离和纯化得到的多糖BHP-1为主要研究对象,综合运用仪器分析和化学反应等手段研究其初步的形貌特征和化学结构。方法:采用热重分析(TG)及扫描电镜(SEC)技术分别分析多糖BHP-1的热稳定性和形貌结构特征;通过气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术,结合部分酸水解、高碘酸钠氧化-Smith降解以及核磁共振波谱(NMR)分析等方法对多糖BHP-1的化学结构进一步的进行解析。结果:BHP-1是以1,4连接的α-D-吡喃葡萄糖和1,4连接的β-D-吡喃甘露糖为基本骨架的甘露葡聚糖,在葡萄糖和甘露糖的2位和/或3位形成主要的分支,主链或支链的末端残基主要为T-α-D-吡喃葡萄糖,同时在其结构片段中含有少量的O-乙酰基。热重分析显示BHP-1在220℃开始发生降解,520℃基本结束,说明BHP-1热稳定性良好。形貌分析显示BHP-1表面光滑有大量凹陷,凹陷处多为片层结构错落紧密堆积而成,并交织下陷呈不规则的孔洞。结论:多糖BHP-1是一种热稳定性良好,表面光滑有大量的凹陷和孔洞,并含少量O-乙酰基的甘露葡聚糖,其化学结构为首次报道。     

蜜环菌不同发育阶段多糖成分的研究

目的 :对蜜环菌不同发育阶段体内多糖的性质和含量进行研究。方法 :提取、分离、纯化蜜环菌菌丝体、发酵液、菌索和子实体多糖 ,应用红外光谱分析法、高效液相色谱法、凝胶渗透色谱法和凝胶色谱法等方法测定蜜环菌 4种多糖的性质、多糖组成、多糖含量和多糖分子量。结果 :蜜环菌菌丝体和发酵液多糖为单一葡萄糖组成的葡聚糖 ;菌索和子实体多糖由葡萄糖、木糖组成 ,这两种单糖在菌索多糖中的摩尔比为 1∶14,在子实体多糖中的摩尔比为 1∶10。蜜环菌多糖的分子量为 1万～7万。蜜环菌不同发育阶段多糖含量分别为菌丝体含 9.00% ;发酵液含 0.87g·(100ml)^-1;菌索含 1.12% ;子实体含 2.27%。结论 :蜜环菌不同发育阶段多糖成分的研究 ,为综合开发利用蜜环菌提供了科学依据。     

板蓝根多糖的系统分离纯化与组成分析

目的建立板蓝根多糖的系统分离纯化方法,并对分离得到的均一多糖进行组成测定。方法以抗病毒活性较好的80%醇沉板蓝根粗多糖为研究对象,对其进行DEAE-Sepharose Fast Flow柱色谱、Sephacryl-200葡聚糖凝胶柱色谱以及高效凝胶色谱系统分离纯化。分别采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)和邻苯二甲醛(OPA)衍生化HPLC法对分离得到的板蓝根均一多糖进行单糖组成和氨基酸组成测定。结果利用系统分离纯化策略,从80%醇沉板蓝根粗多糖中分离得到2种均一板蓝根多糖(IRPS1A和IRPS1B)和2种均一板蓝根糖蛋白(IRPS2A和IRPS3A)。其中,IRPS1A与IRPS1B的单糖组成均为甘露糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖;IRPS2A的单糖组成为半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖;IRPS3A的单糖组成为甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖。糖蛋白IRPS2A与IRPS3A均含有天门冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、组氨酸、甘氨酸、苏氨酸、精氨酸、丙氨酸、胱氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸,共14种氨基酸残基。同时,IRPS2A还含有酪氨酸残基。结论该系统分离纯化的策略可应用于板蓝根均一多糖(糖蛋白)的获取,为板蓝根多糖的结构分析及药理活性研究奠定基础。     

香菇有效成分提取分离及分析方法研究进展

香菇堪称食用菌的上品 ,营养丰富 ,香郁诱人 ,食药兼用 ,健脾益气 ,调和阴阳。其主要成分有香菇多糖 (lentinan,L NT)、香菇嘌呤 (eriadenine)、核苷酸、维生素、三萜类化合物、大量的蛋白质和氨基酸、多种矿物质及膳食纤维素等 [1 ]。现将其主要成分的提取分离及分析方法综述如下。1　香菇多糖香菇多糖是香菇中的重要药用成分 ,具有较强抗肿瘤活性。是以 β- D(1→ 3)葡萄糖残基为主链 ,(1→ 6 )葡萄糖基为侧链的葡聚糖 ,相对分子质量约为 5 0万。 196 9年最先由日本学者证实有抑制小鼠 S1 80 肉瘤生长的作用 ,作为优良的免疫调节剂进入…     

广东海风藤多糖化学研究

目的:建立一种广东海风藤多糖分子量及其分布和单糖种类的质控方法.方法:分子量及其分布采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC),色谱柱为Ultrahydrogel 120 Column(300mm×7.8 mmID),以已知分子量的葡聚糖为标样,0.2 mol·L-1氯化钠为流动相,示差折光检测器.单糖种类测定采用HPLC法,色谱柱为Sugar-pakTM(16.5 mm×300 mm),50 mg·L-1,EDTA-Ca为流动相,示差折光检测器.结果:利用GPC软件处理,得到广东海风藤多糖的数均、重均分子量.构成广东海风藤多糖的单糖种类有D-葡萄糖,D-半乳糖,D-阿拉伯糖.结论:本文建立的方法简便,重现性好,可作为广东海风藤多糖的质量控制.     

高效阴离子交换-脉冲安培检测色谱法测定人工培养蛹虫草多糖的单糖组成

目的 采用高效阴离子交换-脉冲安培检测色谱法测定人工培养蛹虫草多糖的单糖组成.方法 以人工培养蛹虫草子实体为原料,利用热水和稀碱液分别对其水溶性多糖成分进行提取.分离得到6种人工蛹虫草水溶性多糖化合物.其中水提部分主要分离得到3种精多糖P50、P70-1和P70-2,碱提部分则分离得到3种精多糖CBP-1、CBP-2和CBP-3.高效阴离子交换-脉冲安培检测色谱法分别对上述6种精多糖的单糖组成成分进行了测定.结果 除CBP-3为葡聚糖外,其他5个多糖均为由D-甘露糖、D-半乳糖和D-葡萄糖组成的杂多糖.结论 采用高效阴离子交换-脉冲安培检测色谱法进行多糖化合物的单糖组成成分测定,无需进行衍生化,可达到简便、高效、准确地进行单糖组成分析之目的 .     

猴头菌丝体多糖的化学研究

目的:对猴头菌丝体的多糖类成分进行化学组成及结构研究。方法:DEAE 纤维素、DEAE-Sephadex 柱分离,葡聚糖凝胶柱层析测定纯度,凝胶过滤法测定分子量,酶解、气相色谱及光谱分析等测定化学组成及结构。结果和结论:从猴头菌丝体中分离得到5 个多糖均一体,其主要成分HEPA₁ 分子量6 .2 ×10⁴ ,为以葡萄糖为主的杂多糖,单糖组成摩尔比为葡萄糖∶阿拉伯糖∶木糖= 33 .1∶1 .7∶1 .0 ;HEPA₄ 分子量2 .6 ×10⁴ ,为杂多糖肽,肽部分由17 种氨基酸组成,占糖肽的3 .8 % ;HEPB2 分子量1 .2×10⁴ ,为以葡萄糖为主的杂多糖,单糖组成摩尔比为葡萄糖∶阿拉伯糖∶木糖∶甘露糖= 50 .7∶2 .1∶1 .0∶2 .4 。各均一体单糖间的甙键构型均以α-甙键为主。     

老龙皮多糖的研究

老龙皮经热水提取,乙醇沉淀及进一步精制得LOK(Lobaria kurokauae)多糖,经SephadexG-75柱层析为一组均一多糖,糖含量为82.4％。气相色谱分析含有鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖。其克分子比为1.00:1.34:1.12:10.13:6.99:6.47。经Sephadex G-200柱层析测定,平均分子量为1.5×10~4。经高碘酸氧化,Smith降解,有甲酸、丙三醇、丁四醇生成,红外光谱在842cm~(-1)有吸收,说明LOK多糖结构主要以α(1→4)、a(1→6)苷键连接而成的杂多糖。     

10-Hydroxy-2-decenoic acid from Royal jelly: A potential medicine for RA

Aim of the study

Rheumatoid arthritis synovial fibroblasts (RASFs) are known to produce matrix metalloproteinases (MMPs) and cause joint destruction. The purpose of this study is to develop a potential medicine for rheumatoid arthritis (RA).

Materials and methods

To this end, first, the MMPs inhibition factor was purified from an alkali-solubilized fraction of RJ (Apis mellifera) by C18 reverse-phase column chromatography and identified as 10-hydroxy-2-decenoic acid (10H2DA) by LTQ XL analysis. Next, Experimental test 10H2DA how to inhibited the activities of MMPs: with RASFs isolated from rheumatoid tissues by enzymatic digestion, cultures in monolayers were treated with 10H2DA (0.5 mM, 1 mM, and 2 mM) or PBS for 2 h followed by stimulation with TNF-α (10 ng/ml) for 2 h, mRNA. Protein levels of MMP-1 and MMP-3 were measured by real-time PCR and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), the DNA-binding activity of activator protein-1 (AP-1) and nuclear factor κB (NF-κB) by electrophoretic mobility shift assay (EMSA), and the protein kinase activity of p38, ERK and JNK by kinase assay.

Results

The molecular investigation revealed that the 10H2DA-mediated suppression was likely to occur through blocking p38 kinase and c-Jun N-terminal kinase–AP-1 signaling pathways. In contrast, 10H2DA had no effect on extracellular signal-regulated kinase activity, NF-κB DNA-binding activity and IκBα degradation.

Conclusion

These results suggest that 10H2DA may be of potential therapeutic value in inhibiting joint destruction in RA.     

党参果聚糖的化学结构

目的:对中药党参中多糖进行研究。方法:DE-52纤维素和Sephadex G-200凝胶柱色谱分离纯化一多糖CPP-1。凝胶色谱法测定其纯度和分子质量。酸全水解,甲基化反应,高碘酸盐氧化及降解,IR,¹H-NMR和¹³C-NMR分析其结构。结果:CPP-1分子质量约为7.5×10⁴,化学结构为呋喃果糖以-β(2→1)连接而成的果聚糖。结论:该多糖为一中性的均一多糖。     

当归多糖组分的高效液相色谱分析

 目的：分析当归多糖AP-Ⅰ,AP-Ⅱ,AP-Ⅲ,AP-Ⅳ各组分的重均相对分子质量分布及其电荷特性;探讨多糖类生物大分子的组效关系研究方法。方法：采用高效凝胶过滤色谱法、阴离子交换色谱法、二极管阵列检测器进行检测;改良苯酚-硫酸法测定糖分部;Serva Blue-G 染料结合法测定蛋白质分部。结果：当归多糖AP-Ⅰ,AP-Ⅱ,AP-Ⅲ,AP-Ⅳ分别由4～5个具有不同重均相对分子质量分布及电荷特性的多糖组分组成;4种多糖中还分别含有一定量的游离或结合蛋白质。结论：当归多糖AP-Ⅰ,AP-Ⅱ,AP-Ⅲ,AP-Ⅳ为组成成分不同的多糖;该方法可为多糖组效关系研究提供简便、实用的分析方法。     

HPD系列大孔吸附树脂预处理方法研究

目的:建立HPD系列大孔吸附树脂的预处理方法。方法:采用气相色谱法(GC)和紫外分光光度法比较了2%NaOH对HPD系列大孔吸附树脂预处理的影响。结果:树脂先用2%NaOH浸泡后再用乙醇洗脱,对有机残留物的洗脱效果较好。结论:HPD系列树脂预处理方法为:树脂经2%NaOH浸泡洗脱后,在60℃,用乙醇浸泡、洗脱,洗脱流速为2BV.h^-1,乙醇用量为3~4倍柱体积,洗脱液的紫外吸收值为0.2~0.5。预处理的树脂经GC检测,苯未检出,其他有机残留物均低于10mg.L^-1,达到药用要求。     

Activation of activator protein-1 in cells exposed to electrical stimulation of various parameters used in electroacupuncture therapy

The aim of this study was to investigate the effect of electrical stimulation on activator protein-1 (AP-1) in recombinant liver cells. In order to elucidate the molecular effects of electrical stimulation on cells, AP-1 expression was detected by a luciferase assay. The parameters used were taken from clinical electroacupuncture (EA) therapy as follows: biphasic rectangular symmetrical pulses (frequency: 2, 10 and 100 Hz; pulse width: 50, 80, 130 and 250 microsec; intensity: 1, 2, 5 and 10 mA; time: 5, 10, 20 and 30 minutes). S (10% fetal bovine serum in medium), SF (serum free medium) and 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA) treatment represented the experimental, negative and positive groups, respectively. We found that electrical stimulation with 10 Hz, a pulse width of 130 microsec, and a duration of 30 minutes gave a significant increase in AP-1 activity. In contrast, the intensity of the stimulation had no significant effect on AP-1 activity. In conclusion, our data suggest that electrical stimulation with an appropriate frequency, duration and pulse width could cause an increase in AP-1 activity in cells.     

升麻糖蛋白的分离纯化及鉴定

从中药升麻中提取升麻多糖,经DEAE纤维素(DEAE-52)柱层析得CF-Ⅰ、CF-Ⅱ、CF-Ⅲ三个组分。CF-Ⅰ经Sepharose CL-4B凝胶层析柱纯化后,琼脂糖凝胶电泳和Superdex-200柱层析证明其为均一组分。红外和紫外光谱鉴定其成分是一种糖蛋白,不含核酸和色素。气相色谱测定其单糖组分有葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖,它们的摩尔比为11.94∶2.18∶1.38∶1;Superdex-200FPLC法测定其分子量为5.8×105,比色法测其总糖含量、蛋白含量、糖醛酸含量分别为78%、14.4%、23%。高碘酸氧化和Sm ith降解推测CF-Ⅰ多糖的结构主要以1→4、1→6糖苷键连接而成的。     

液相色谱-电喷雾质谱定量测定银杏内酯的研究

目的:研究了用液相色谱-电喷雾质谱联用技术定量测定4种银杏内酯的方法。方法:采用ZOR-BAXRX-C₁₈(2.1 mm×150 mm)色谱分析柱,梯度洗脱,0 min时,流动相甲醇-水(25∶75),25 min,甲醇-水(35∶65);柱温25℃;流速0.25 mL.min^-1,采用电喷雾负模式[ESI(Neg)]、选择离子采集方式[SIM]定量测定了银杏内酯A,B,C和白果内酯BB。结果:该方法测定银杏内酯的线性范围为4.04~1.01×10²ng,r为0.993 7~0.999 8,RSD为2.50%~4.73%。选择离子采集方式的检测限可达1.47×10^-3~0.320μg.mL^-1。结论:该方法稳定、可靠,能快速定量测定微量银杏内酯。     

蓝桉果实挥发油成分GC-MS分析

目的 :用气相色谱 质谱法对蓝桉果实挥发性成分进行研究。方法 :采用水蒸气蒸馏法从蓝桉果实中提取挥发油 ,然后经GC MS进行分离鉴定 ,用归一化法计算含量。色谱条件 :DB WAX石英毛细管柱 (0.32mm×30m ,0.25μm) ,柱温条件 :起始温度 40℃保持 3min ,以 5℃·min^-1升温至 250℃保持 10min ,MS检测器。结果 :蓝桉果实挥发油中鉴定出 31个成分 ,占 93.7%。结论 :本法可靠 ,可用于蓝桉果实挥发性成分的鉴别和测定。     

三列凹顶藻化学成分研究 Ⅱ

目的：从三列凹顶藻Laurencia tristicha中寻找具有多样性结构的化学成分,供药理活性筛选。方法：采用凝胶柱色谱、硅胶柱色谱、重结晶和高效液相色谱等方法进行分离；借助核磁共振等波谱方法鉴定化合物的结构；用MTT法对得到的化合物进行细胞毒活性评价。结果：分离得到7个化合物,分别鉴定为鉴定为胆甾醇(1),胆甾-5-烯-3β,7α二醇(2),β-谷甾醇(3),叶绿醇(4),玉米黄素(5),对羟基苯甲醛(6),3-吲哚甲醛(7)；在人肿瘤细胞株HCT-8,Bel-7402,BGc-823,A549和HELA模型上,化合物2对所有细胞株均显示毒性,化合物4对HCT-8和HELA细胞显示中等强度的细胞毒活性,其它化合物对所有细胞株均无明显毒性,IC₅₀均大于100 μg·mL^-1。结论：化合物1～7均为首次从三列凹顶藻中得到,化合物2对所有细胞株均显示毒性,化合物4对HCT-8和HELA细胞具有中等强度的选择性细胞毒活性。