神经干细胞增殖分化基因调控的进展

文章从Notch基因，bHLH基因和同源盒基因等方面介绍了神经干细胞增殖分化基因调控的最新研究进展。     

Notch细胞信号通路在神经干细胞增殖分化中的作用

<正>Notch是相邻细胞之间互相通讯的典型信号通路,其作用具有多样性,在调控细胞增殖、分化、凋亡和细胞周期等方面都发挥了重要作用。神经干细胞(NSCs)的增殖分化受诸多因素影响,越来越多的证据表明Notch细胞信号通路在此过程中具有重要作用。本文主要就Notch信号通路及其对NSCs增殖分化的作用进行综述。1 Notch细胞信号通路的组成Notch细胞信号通路主要由Notch受体、配体(DSL)、CSL     

神经钙黏蛋白调控Akt/PKB信号通路对神经干细胞增殖的影响

目的探讨神经钙黏蛋白(N-cadherin)调控蛋白激酶(Akt/PKB)信号通路对神经干细胞(NSCs)生长的影响。方法利用RNAi技术将N-cadherin基因的RNA干扰载体p MSCVneo/N-cadherin质粒及p EGFP-MSCVneo对照质粒分别转染至原代培养NSCs,分别作为干扰组和对照组,以原代培养NSCs作为正常组。Western印迹方法检测各组细胞N-cadherin、蛋白激酶(PKB)、蛋白激酶磷酸化(P-PKB)、3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶-1(PDK1)的蛋白表达水平。以MTT法检测NSCs的增殖情况。结果与正常组和对照组相比,干扰组N-cadherin、PKB、P-PKB及PDK1的表达水平显著降低(P0.05),其NSCs克隆形成率显著减少(P0.05),NSCs增殖速度也显著减慢(P0.05)。结论沉默N-cadherin表达可能阻断Akt/PKB信号通路,从而抑制NSCs的增殖。N-cadherin有望成为促进NSCs增殖的潜在靶点。     

神经源分化因子基因多态性与老年2型糖尿病的关系

神经源分化因子又称为BETA2，属于B类碱性螺旋—环—螺旋(bHLH)转录因子家族，其基因定位邻近于IDDM7(D2S152)位点，在胰腺发育、内分泌细胞及神经分化、维持β细胞的正常功能等方面具有重要的作用，故被认为是糖尿病的候选基因之一。近年来，尽管国外有一些关于BETA2基因与糖尿病关系的报道，但各研究结果不尽相同。为此，我们以     

肝干细胞分化的基因调控研究

目前原位肝移植是治疗各种晚期肝脏疾病的有效措施，但由于合适供体肝脏的缺乏和长期使用免疫抑制药物所导致的不良反应，大大限制了该技术的广泛应用。研究表明，肝细胞移植（hepatocyte transplantation，HCT）技术可以解决目前肝脏移植所面临的部分问题。HCT的供体来源主要包括异体肝细胞、自体肝干细胞、胚胎肝细胞、胚胎干细胞。成熟的供体肝细胞在应用于治疗时也受到组织来源的限制，并在体内难以长期增殖和维持生物学功能。晚近，具有增殖和分化潜能的肝干细胞（HSC）成为细胞移植治疗另一重要的供体来源，利用基因调控手段上调HSC分化基因表达，将可改善HSC移植治疗水平，是该领域的研究热点。     

神经干细胞的增殖与分化调控机制

神经干细胞(NSC)是具有高度自我更新能力并能分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的神经前体细胞。从胚胎和成年哺乳动物脑内均可分离出NSC。干细胞的增殖和分化受微环境和基因的双重调控,现已发现多种细胞因子和基因可调节NSC的增殖并决定其分化方向。对NSC增殖和分化机制认识的加深将会促进NSC的临床应用。     

成年和老年大鼠脑出血后海马齿状回神经干细胞增殖分化的比较

目的 比较成年和老年大鼠脑出血后海马齿状回神经干细胞(NSCs)的增殖与分化,探讨脑出血后NSCs的变化规律.方法 制作大鼠脑出血模型,5-溴脱氧尿核苷(BrdU)腹腔注射标记增殖细胞,用免疫组化法检测大鼠海马齿状回BrdU、神经元核抗原(NeuN)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞数的变化.结果 正常组和假手术组大鼠海马齿状回均可见BrdU阳性细胞,成年大鼠明显多于老年大鼠.脑出血后成年和老年大鼠各时间点的BrdU阳性细胞均较正常组和假手术组明显增加,7d组达到峰值,成年大鼠各时间点均明显高于老年大鼠.正常大鼠海马齿状回可见少量BrdU/NeuN和BrdU/GFAP双标阳性细胞,脑出血后成年和老年大鼠海马齿状回双标阳性细胞数均较正常组明显增加,且老年大鼠BrdU/NeuN双标细胞明显少于成年大鼠.结论 脑出血后大鼠海马齿状回NSCs增殖明显,成年大鼠明显强于老年大鼠,且新生细胞分化为神经元的比例也明显高于老年大鼠.     

针灸对SAMP8小鼠皮层神经干细胞增殖分化的影响

目的 探讨针刺、艾灸对快速老化小鼠(SAMP8)皮层NSC增殖分化的影响.方法 选用8月龄SAMP8雄性小鼠随机分为模型组、针刺组、艾灸组,以同龄雄性正常老化小鼠(SAMR1)为对照组.针刺组、艾灸组选用"百会"进行治疗,每天治疗1次,7 d为1个疗程,共治疗3个疗程.对照组和模型组每天在相同时间给予相同方式的抓取.处死前1 w开始给予BrdU腹腔注射,50 mg/kg ;治疗结束后,取皮层,用免疫荧光双标方法检测神经干细胞(NSC)增殖、分化.结果 (1)各组小鼠均存在皮层NSC增殖.与对照组比较,模型组、针刺组、艾灸组阳性细胞数减少(P＜0.01,P＜0.05);但模型组与针刺组、艾灸组之间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).(2)各组小鼠均存在皮层NSC分化.与对照组相比,模型组NSC分化为神经元较少(P＜0.01,P＜0.05)、分化为胶质细胞较多(P＜0.01,P＜0.05);与模型组相比,针刺组NSC分化为神经元较多(P＜0.05)、分化为胶质细胞较少(P＜0.01,P＜0.05);艾灸组NSC分化为未成熟神经元较多(P＜0.05)、分化为成熟星形胶质细胞(P＜0.01)和少突胶质细胞较少(P＜0.05).结论 针刺、艾灸治疗3个疗程后,主要反映在促进NSC向不同方向分化的差异.其中,针刺主要促进SAMP8皮层NSC向神经元分化,抑制向胶质细胞分化;艾灸主要是促进其向未成熟神经元分化、抑制向成熟星形胶质细胞和少突胶质细胞分化.     

神经干细胞基因转导治疗帕金森病的研究进展

随着神经干细胞研究的逐渐成熟，神经干细胞移植是未来治疗帕金森病的主要发展方向。本文就近年来神经干细胞的来源、基因转导和移植治疗帕金森病等方面的研究进展予以综述。     

NT-3基因转染对骨髓间充质干细胞增殖及向神经元分化的影响

目的研究神经营养素-3(neurotrophin-3,NT-3)对骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)增殖和向神经元分化的影响,探讨转染NT-3基因的MSCs体内移植治疗脊髓损伤的可行性。方法体外培养稳定表达NT-3蛋白的MSCs,通过MTT法检测NT-3对MSCs增殖的影响;应用免疫细胞化学和免疫印迹方法检测转染NT-3的MSCs表达神经元标志物NeuN蛋白的情况。结果转染NT-3基因的MSCs生长曲线上移,细胞增殖率显著升高,与对照组相比,两者有显著差异(P<0.05),表明转染NT-3后细胞生长加快。免疫荧光染色结果显示转染NT-3的MSCs的NeuN阳性细胞数明显增多,与对照组比较有显著差异(P<0.05);Western印迹检测结果显示转染NT-3的MSCs内NeuN蛋白表达明显增多,与对照组比较有显著差异(P<0.05),表明NT-3促进MSCs向神经元方向分化。结论 NT-3基因转染可促进MSCs的增殖,并诱导其向神经元方向分化。     

同源异型盒基因在胶质瘤细胞增殖及迁移侵袭中的作用

目的研究同源异型盒基因(HOXA5)在胶质瘤增殖及迁移侵袭中的作用。方法采用shRNA干扰技术构建HOXA5低表达胶质瘤细胞系,通过MTT,Transwell和Matrigel方法研究干扰HOXA5表达后对胶质瘤细胞增殖和侵袭迁移的影响。结果与对照组细胞相比,干扰HOXA5表达后能够显著抑制胶质瘤细胞的增殖和运动侵袭能力(P0.01)。结论 HOXA5可能在胶质瘤的发生发展中具有重要的作用,其机制与促进细胞的增殖和侵袭迁移有关。     

ATRA诱导鼠胚神经干细胞向神经元分化过程中Notch1的表达变化及意义

目的观察全反式维甲酸（ATRA）体外诱导鼠胚神经于细胞（NSCs）分化为神经元过程中Notch1的表达变化,并探讨其机制。方法将NSCs分为两组,观察组加入终浓度为1．0μmol／L的ATRA,对照组不加ATRA。采用免疫细胞化学法检测NSCs地Notch1蛋白,采用实时荧光定量PCR法检测NSCs Notch1 mRNA。结果观察组NSCs经ATRA诱导3、5、7、9d,Notch1蛋白积分光密度值分别为539．43±13．46、488．67±13．12、437．54±13．10、434．32±13．04,Notch1 mRNA相对表达量分别为0．4122±0．0802、0．2164±0．1252、0．0221±0．1355、0．0177±0．0061;对照组分别为591．35±15．61、0．6243±0．2745,与对照组相比,P均〈0．05。结论在ATRA体外促鼠胚NSCs分化为神经元过程中,Notch1表达减少;ATRA诱导NSCs向神经元的分化与抑制Notch信号途径有关。     

清热化瘀方对脑缺血再灌注损伤大鼠神经干细胞增殖的影响

目的 观察清热化瘀方对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经干细胞增殖的影响.方法 90只大鼠随机分为假手术组、模型组、清热化瘀组3组,采用线栓法制作局灶性脑缺血大鼠(MCAO)模型,观察大鼠缺血损伤后缺血半暗带区的细胞增殖.采用免疫组化法观察脑缺血再灌注后2 d、4 d、7 d、14 d、21 d五个时间点巢蛋白(Nestin)及5-溴脱氧尿苷(BrdU)免疫活性的变化.结果 清热化瘀组大鼠在第2天、第4天、第7天的神经功能缺损评分明显优于模型组(P<0.05);模型组缺血半暗带Nestin和BrdU阳性表达分别于再灌注7 d和14 d达高峰(P<0.05),以后表达逐渐减弱;清热化瘀组可以明显增加缺血再灌注后第4天、第7天、第14天大鼠的Nestin阳性细胞表达(P<0.05);并可以明显增加缺血再灌注后第7天、第14天、第21天大鼠缺血半暗带的BrdU阳性细胞表达(P<0.05).结论 脑缺血损伤可激活神经干细胞,促使其增殖和表达.清热化瘀方可以促进MCAO大鼠缺血半暗带神经干细胞的增殖.     

骨髓间充质干细胞体外诱导神经干细胞分化的观察

来源于人胚脑组织的神经干细胞及来源于16岁非造血系统疾病患者的胸骨骨髓间充质干细胞(BMSCs),采用Transwell培养板在体外共同培养(共培养组),观察神经干细胞的形态变化,在共培养第7天用免疫荧光染色检测神经干细胞中神经元细胞特异性标志物特异性烯醇化酶(NSE),并与单纯低糖DMEM培养基培养的神经干细胞(对照组)进行比较.结果显示,共培养组中的NSE阳性细胞达32.7%±11. 5%,而对照组未见NSE阳性细胞,两组相比,P＜0.05.认为BMSCs在体外可诱导神经干细胞分化为神经元.     

神经分化因子-1基因与糖尿病

神经分化因子-1(NeuroD1／Beta2)基因在胰腺组织发育过程的网络调节中起着重要的作用，近年发现NeuroD1／Baa2基因突变与青幼年发病型成人糖尿病(MODY)有关。NeuroD1／Bern2是MODY6的致病基因，另据研究发现NeuroD1／Baa2基因Ala45Thr多态可能和1型糖尿病的发生相关联。本文对NeuroD1／Beta2基因突变在各种族MODY人群中筛查的研究现状及各研究组对NeuroD1／Beta2基因Ala45Thr多态和1型糖尿病发生关系的研究结果作一综述。     

神经递质与神经干细胞的增殖和分化

神经干细胞的增殖和分化调控是目前神经干细胞研究的核心问题。神经递质不仅介导神经元之间和神经元与效应器之间的信息传递,而且作为细胞外微环境的一员,也参与了神经干细胞的增殖和分化。神经递质受体及其信号转导在神经干细胞增殖和分化中的作用还不完全清楚,有关神经递质及其受体在神经系统的药理作用可能随着神经干细胞研究的不断深入而重新得到审视和运用。     

碱性成纤维细胞生长因子对脑出血模型大鼠脑内神经干细胞增殖的影响

目的研究碱性成纤维细胞生长因子( bFGF)对大鼠脑出血后运动功能恢复及脑部神经干细胞增殖的影响.方法 SD大鼠24只制作大鼠脑出血模型,随机分为对照组和实验组,每组12只.分别给予生理盐水和bFGF,分别于模型制作后和给药后28 d进行运动功能评分和Nestin抗原检测.结果给予bFGF组患鼠运动功能恢复明显优于对照组,实验组脑组织切片显示Nestin阳性细胞增殖明显.结论损伤局部注射bFGF可通过促进神经干细胞增殖和神经保护两条途径促进脑出血机体神经功能恢复,是一种值得进一步深入研究的方法.     

血管再生基因调控的研究现状和展望

随着生活水平的提高,冠状动脉性心脏病的发病率近年来呈增长趋势。再生的血管很大程度上改善心肌的供血,从而缓解疾病的进展。到目前为止,无论是在体内还是体外的研究中,促血管生成的细胞因子诱导血管再生大多是利用单一的血管生成因子。它的疗效还是有限的。近年来,对血管再生基因治疗的研究为缺血性心脏疾病的治疗提供了新的方向。随着基因工程的开展,基因重组技术与基因芯片技术的发展为血管再生在基因水平的研究创造了良好的基础,现就血管再生的基因治疗进行综述。     

中医药对神经干细胞增殖分化影响的研究进展

目前中医药对神经干细胞增殖分化的研究较多,研究方法分为体内试验和体外试验,神经干细胞主要分化为神经元和神经胶质细胞(多为星形胶质细胞,对少突胶质细胞的研究较少)。其促进增殖分化的中药类型主要有:滋阴、益气、补肾、活血、清热解毒等。虽然已发现许多中药对神经干细胞的增殖分化有调节作用,包括中药单体、单味药、中药复方、中药制剂等,但是目前对神经干细胞的研究仍然比较局限,还需要进一步研究。对2010年以来中医药对神经干细胞的增殖分化作用以及相关机制进行综述。