前列腺癌患者外周血单个核细胞中miR-21表达及临床意义

目的探讨前列腺癌患者外周血单个核细胞中miR-21表达及临床意义。方法将安徽省中医药大学第一附属医院自2012年1月至2016年1月收治的87例前列腺癌患者纳入前列腺癌组,将同期随机选取的103例前列腺增生患者纳入前列腺增生组、40例健康体检者纳入健康组。采用聚合酶链反应法检测3组研究对象外周血单个核细胞中miR-21的表达量,分析其与临床病理特征的关系;采用Log-rank检验miR-21对前列腺癌预后的预测价值,受试者工作特征曲线下面积评估miR-21对前列腺癌的诊断价值。结果前列腺增生组、前列腺癌组miR-21表达量均高于健康组,且前列腺癌组表达量高于前列腺增生组,差异均有统计学意义(P<0.05)。miR-21表达量与Gleason评分、TNM分期、组织分化程度、淋巴结转移密切相关(P<0.05),与年龄、前列腺特异性抗原、肿瘤大小无明显相关性(P>0.05)。Gleason评分≥7分、TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、低分化、有淋巴结转移的前列腺癌患者的外周血单个核细胞中miR-21表达量高于Gleason评分<7分、TNM分期Ⅰ～Ⅱ期、中高分化、无淋巴结转移的患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。受试者工作特征曲线下面积为0.853,95%可信区间0.777～0.930,最佳截断值为5.340,敏感度、特异性分别为0.850、0.810,准确性为0.870。前列腺癌患者miR-21中位相对表达量为7.79,以7.79为分界点,将患者分为miR-21≤7.79组(n=39)和miR-21>7.79组(n=48)。miR-21≤7.79组患者的2年无生化复发存活率高于miR-21>7.79组,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者的1年无生化复发存活率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 miR-21表达下调可参与前列腺癌的发生和发展,早期检测可作为临床辅助诊断前列腺癌、评估病情严重程度及判断预后的重要分子标志物。     

乳腺肿瘤整形保乳手术治疗早期乳腺癌患者的临床效果及对患者预后的影响

目的探究乳腺肿瘤整形保乳手术治疗早期乳腺癌患者的临床效果及患者预后的影响。方法从2016年7月-2019年7月收治的早期乳腺癌患者中选择108例作为研究样本,分作两组。其中常态组54例患者行非整形保乳手术治疗,科研组54例患者行乳腺肿瘤整形保乳手术治疗,对于其临床效果及患者预后的影响进行深入分析。结果科研组术中引流量、出血量及手术操作时间等手术指标较常态组明显更优,同时科研组无复发与远处转移情况,较参照组明显更优(P<0.05),组间具有显著差异。结论乳腺肿瘤整形保乳手术对早期乳腺癌患者的临床效果确切,同时对其预后产生积极影响,其乳房美容效果优良。     

膀胱癌患者血清miR-21、miR-119a表达量与肿瘤恶性增殖及侵袭的相关性分析

目的 探讨血清miR-21和miR-119a是否可以预测膀胱肿瘤并分析其与肿瘤恶性增殖及侵袭的关系。方法 膀胱癌患者及健康体检者各48例,分为膀胱癌组和正常对照组。荧光定量PCR法检测血清和组织中miR-21和miR-119a的表达水平。蛋白质印迹法检测PTEN,PI3K,AKT,CyclinD1,TGF-β,β-Catenin,N-cadherin和E-cadherin的表达。流式细胞术检测细胞凋亡率和周期分布。Perason相关分析血清miR-21和miR-119a表达与侵袭性基因的相关性。结果 与正常对照组比较,膀胱癌组血清miR-21和miR-119a相对表达量均升高（均P<0.05）;血清miR-21和miR-119a对膀胱癌的分型具有良好的鉴别能力,其AUC分别为0.995和0.996。与癌旁正常组织比较,膀胱癌组织miR-21和miR-119a相对表达量均升高（均P<0.05）,PTEN和E-cadheri相对表达量降低（均P<0.05）,PI3K、AKT、CyclinD1、TGF-β、β-catenin和N-cadherin相对表达量均升高（均P<0.05）。与膀胱癌正常组织比较,膀胱癌组织凋亡率较低,膀胱癌组织G1期的比例低于膀胱癌正常组织,S、G2期的比例则高于膀胱癌正常组织（均P<0.05）;Pearson相关分析显示,血清miR-21和miR-119a表达水平与PI3K、AKT、CyclinD1、TGF-β、β-catenin及N-cadherin表达呈正相关（均P<0.05）,与PTEN和E-cadherin表达呈负相关（均P<0.05）。结论 血清中miR-21和miR-119a的表达水平对膀胱癌的预测具有较高的价值,膀胱癌患者血清和癌组织中miR-21、miR-119a表达水平均升高,且血清miR-21、miR-119a与增殖和侵袭相关基因相关,提示血清miR-21、miR-119a可能是膀胱癌的潜在生物标志物。     

前列腺癌患者癌组织中miR-21表达水平及与预后的关系分析

目的 分析前列腺癌患者癌组织中miRNA-21（miR-21）表达水平及与预后的关系。方法 回顾性分析2011年1月—2012年6月四川大学华西医院76例前列腺癌行手术切除患者资料,采用特异性TaqMan探针实时定量PCR法检测患者切除前列腺癌组织及癌旁前列腺组织miR-21表达水平,分析其与患者预后的关系。结果 miR-21在前列腺癌组织中相对表达量为（2.68±0.54）,明显高于癌旁组织的（1.14±0.42）（t=19.62,P<0.05）;前列腺癌患者miR-21高表达者57例（75%）,低表达者19例（25%）,2组TNM分期、Gleason评分、复发转移比较,差异均有统计学意义（P<0.05）,而年龄、前列腺体积、血清前列腺特异抗原水平比较,差异无统计学意义（P>0.05）;miR-21表达量低组平均生存期32.5个月,miR-21表达量高组平均生存期24.8个月,经Kaplan-Meier生存分析显示,2组差异有统计学意义（P=0.019）。结论 miR-21在前列腺癌患者癌组织中具有高表达现象,对前列腺癌的诊断及预后评价具有指导意义。     

miR-155在淋巴瘤Raji细胞辐射抵抗中作用的研究

目的 研究miR-155在淋巴瘤Raji细胞辐射抵抗中的作用及其机制。方法 实时定量聚合酶链反应检测Raji细胞miR-155的表达,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测PTEN和p-AKT的表达。结果 miR-155 RNA和p-AKT蛋白在Raji细胞中表达较高,而pten基因mRNA和蛋白质表达水平极低,单纯4.0 Gy照射48 h后Raji细胞凋亡率较低;miR-155 siRNA不仅使miR-155 RNA和p-AKT表达水平明显下降,而且pten基因mRNA和蛋白质水平显著增高,同时细胞显示出增殖抑制作用,显著增加Raji细胞对该辐射剂量敏感性,siRNA+射线照射组细胞凋亡率为(36.78±1.35)%,高于单纯照射组(t=12.572,P<0.05)。结论 miR-155 表达对Raji细胞辐射敏感性具有重要影响,其机制与PTEN/PI3K/AKT信号途径激活有关。     

miR-34a在复发-缓解型多发性硬化患者血清中表达情况研究

目的检测复发-缓解型多发性硬化患者在急性复发期及缓解期外周血血清miR-34a的表达情况,探讨其作为新的血清标记物的可能性,以及其血清表达情况与疾病活动的关系。方法选取2014年1月至2015年12月在哈尔滨医科大学附属第四医院神经内科就诊的复发-缓解型多发性硬化患者20例为观察组,患者均处于急性复发期且近期未接受任何治疗;患者均接受随访,在缓解期未用药物治疗(免疫调节药物等)。同时,选取年龄、性别与观察组相匹配的20例健康人作为健康组。分别采集两组患者外周静脉血,提取血清总RNA,并对miR-34a进行RT-qPCR检测验证,对观察组急性复发期和缓解期、健康组分别进行多种microRNA的相对定量分析。结果 RT-qPCR检测结果显示,观察组急性复发期与健康组比较,血清中miR-34a的含量明显降低,对照组平均表达量约为观察组急性复发期的1.91倍,差异有统计学意义(P<0.05);miR-34a在观察组缓解期的血清表达与健康组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 miR-34a在复发-缓解型多发性硬化患者的急性复发期中表达降低,并可能具有作为复发-缓解型多发性硬化急性复发期诊断的血清生物标志物潜质。     

微小核糖核酸-21对乳腺癌MCF-7细胞反转录富含半胱氨酸蛋白表达的调节研究

目的探讨乳腺癌MCF-7细胞中微小核糖核酸-21(microRNA-21,miR-21)对反转录富含半胱氨酸蛋白(reversion inducing cysteine rich protein with Kazal motifs,RECK)表达的调控作用。方法将miR-21模拟物、miR-21抑制物及模拟物阴性对照、抑制物阴性对照各组瞬时转染到MCF-7细胞中,48 h后通过荧光定量聚合酶链反应检测miR-21在细胞的表达情况,蛋白质印迹法检测转染后RECK表达水平变化。结果细胞转染48 h后,miR-21抑制物组和miR-21模拟物组miR-21的表达分别与转染空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.001),转染miR-21抑制物组miR-21的表达明显下降,转染miR-21模拟物组miR-21的表达明显上调;细胞转染miR-21各组后RECK表达差异有统计学意义(P<0.01),miR-21抑制物组相对其阴性对照组,RECK表达明显上升(P<0.001);miR-21模拟物组相对其阴性对照组,RECK表达明显下降(P<0.001)。结论miR-21可以抑制乳腺癌MCF-7细胞RECK表达,可能成为判断乳腺癌患者预后的评价指标及肿瘤治疗的新靶点。     

血清miR-21在食管鳞癌中的表达及临床意义

目的 检测血清miR-21在食管鳞癌患者中的表达及临床意义。方法 收集2016年10月—2017年6月汕头大学医学院附属肿瘤医院食管鳞癌患者50例和健康体检者50例血清标本,提取miRNAs,通过实时荧光定量PCR检测miR-21表达水平,结合食管鳞癌患者临床资料进行统计分析。结果 在食管鳞癌患者血清样本中,miR-21的表达水平明显高于健康对照组,差异比较具有统计学意义（P<0.001）;miR-21的高表达与肿瘤远处器官转移及淋巴结转移呈正相关（P<0.001）;临床分期为Ⅲ、Ⅳ期的患者血清miR-21表达水平明显高于Ⅰ、Ⅱ期患者（P<0.05）;miR-21在胸中、下段食管鳞癌患者中的表达水平与胸上段食管鳞癌患者相比显著上调（P<0.05）。结论 血清miR-21表达水平与食管鳞癌的发生、转移及临床分期密切相关,有望成为新的肿瘤标志物。     

自然杀伤细胞、CD19+对乳腺癌患者保乳手术治疗后复发预测价值研究

目的探讨自然杀伤细胞、CD19+对乳腺癌患者保乳手术治疗后复发的预测价值。方法将辽宁省肿瘤医院自2015年5月至2017年5月收治的67例行保乳手术治疗的乳腺癌患者纳入B组,将60例同期入院健康体检者纳入A组。比较A组与B组术前、术后患者CD19+、自然杀伤细胞的表达水平;对B组患者进行为期1年的随访,比较A组与B组未复发、复发患者CD19+、自然杀伤细胞的表达水平;绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线),判断自然杀伤细胞、CD19+对乳腺癌患者保乳手术治疗后复发的预测价值。结果 B组患者术前、术后CD19+、自然杀伤细胞表达水平均高于A组,差异有统计学意义(P<0.05);B组患者术后CD19+、自然杀伤细胞表达水平均低于术前,差异有统计学意义(P<0.05)。B组未复发、复发患者CD19+、自然杀伤细胞表达水平均高于A组,差异有统计学意义(P<0.05);B组未复发患者CD19+、自然杀伤细胞表达水平均低于复发患者,差异有统计学意义(P<0.05)。CD19+预测乳腺癌复发的灵敏度、特异度分别为80.31%、74.21%;自然杀伤细胞预测乳腺癌复发的灵敏度、特异度分别为60.02%、87.69%。结论自然杀伤细胞、CD19+表达水平升高对乳腺癌及其术后复发具有一定的预测价值。     

放疗对血清miR-150-5p和miR-23a-3p表达水平的影响

目的 通过采集肿瘤患者放疗前后外周血,探讨照射对人外周血血清miR-150-5p、miR-23a-3p表达的影响,以期为寻找辐射生物标志物提供科学依据。方法 以2021年10月至2022年3月63例行放疗的肿瘤患者为研究对象,采用实时荧光定量PCR(qPCR)方法,检测患者放疗前后外周血血清miR-150-5p与miR-23a-3p的相对表达水平。比较两种miRNAs放疗前后在患者外周血血清中的差异表达变化,分析其与肿瘤类型等因素的关系。结果 放疗后,患者外周血血清miR-150-5p与miR-23a-3p的相对表达量明显低于放疗前(t=4.97,Z=-2.77,P<0.05)。不同的肿瘤类型中,乳腺癌、食管癌和其他消化道肿瘤患者放疗后miR-150-5p的相对表达量降低(t=3.47、2.47、2.87,P<0.05),消化道肿瘤患者放疗后miR-23a-3p相对表达量下降(Z=-1.99,P<0.05)。在放疗前、后miR-150-5p的表达改变均不受性别、年龄、化疗和肿瘤类型等因素影响(P>0.05),而miR-23a-3p的表达改变在放疗后受性别、年龄和化疗等因素影响(t=2.04、 -3.34、-2.29,P<0.05)。结论 放疗可影响肿瘤患者血清中miR-150-5p的表达,其有作为辐射生物学标志物的潜力。     

MiR-514与胃癌细胞凋亡的关系及机制

目的 探讨微小RNA-514（microRNA-514,miR-514）与胃癌细胞凋亡的关系及机制。方法 实时定量PCR检测80例胃癌组织及癌旁正常胃黏膜组织中miR-514的表达情况,分析miR-514与患者各病理参数之间的关系。应用miR-514模拟物转染人胃癌细胞株MGC803,检测转染前后细胞凋亡率及凋亡相关基因的情况。结果 胃癌组织中miR-514水平（0.3619±0.2103）明显低于癌旁正常胃黏膜（0.6943±0.3032）（t=-8.0573;P<0.001）;miR-514表达与肿瘤的淋巴结转移有关（t=-2.5620,P=0.012 3）;miR-514模拟物转染人胃癌细胞株MGC803后细胞的活性明显降低而凋亡率明显增高（P<0.05）;转染后凋亡相关基因Bcl-2、xIAP的mRNA和蛋白表达明显降低,而Bax的mRNA和蛋白表达明显增高（P<0.05）。结论 胃癌组织中miR-514的表达减弱,miR-514可能通过调节一些凋亡基因表达而参与肿瘤的凋亡过程。     

支气管哮喘患者血清miR-155、HP及MPO水平与肺功能的关系

 目的 探讨支气管哮喘患者血清miR-155、HP及MPO水平与肺功能的关系。方法 选择2017-11至2019-09医院呼吸内科收治的支气管哮喘患者62例,其中39例处于发作期作为发作组,23例处于缓解期作为缓解组,另选择同期健康体检者12例作为健康组,对各组受试人员血清微小RNA-155 ( miR-155)、羟脯氨酸(HP)及髓过氧化物酶(MPO)水平与肺功能进行检测并对比分析。结果 发作组和缓解组HP、MPO、miR-155表达水平均明显高于健康组(均P<0.01),发作组HP(mg/L)、MPO(U/L)、miR-155表达水平明显高于缓解组(1.97±0.98 vs 1.49±0.73、757.28±111.63 vs 579.06±101.74、2.89±0.93 vs 2.02±0.83,均P<0.01);发作组和缓解组FVC、FEV₁、FEV₁/FVC、MMEF_75/25、PEF指标均明显低于健康组(均P<0.01),发作组FVC(L)、FEV₁(L)、FEV₁/FVC(%)、MMEF_75/25(L/s)、PEF(L/min)指标明显低于缓解组(2.63±0.92 vs 3.12±0.76、1.45±0.31 vs 1.87±0.30、59.26±14.25 vs 73.73±10.04、0.41±0.09 vs 0.73±0.08、138.95±15.06 vs 402.69±10.85,均P<0.01);FVC、FEV₁、FEV₁/FVC、MMEF_75/25、PEF与HP、MPO、miR-155均呈负相关性(P<0.05)。结论 支气管哮喘患者血清miR-155、HP及MPO水平均与肺功能有明显的负相关性。     

早期乳腺癌保留乳房手术临床探讨

目的：分析早期乳腺癌保留乳房手术的临床结果。方法抽选2012年2月～2015年3月接收早期乳腺癌患者100例,按先后顺序分成两组（实验组、对照组）,对照组患者行临床保留胸大肌疗法,实验组患者行临床保留乳房手术疗法,比对手术结果。结果实验组患者临床术后生活质量和对照组相比,差异性鲜明（P＜0．05）。结论临床针对早期乳腺癌患者行保留乳房手术疗法效果明显,可提高患者乳房美观度,改善生活现状,值得使用。     

紫外线B辐射敏感的miR-365在皮肤鳞癌发生中的作用研究

目的 探讨紫外线(UVB)辐射敏感miR-365在皮肤鳞状细胞癌发生中的作用.方法 取对数生长期正常人皮肤角质细胞HaCaT分为对照组和照射组,照射组给予50 J/m²的UVB照射.照射后培养不同时间,分析miRNA的表达谱.实时荧光定量PCR分析HaCaT细胞和皮肤鳞癌细胞系A431、Tca8113和HSC-1的miR-365的表达.平板克隆形成实验和Transwell小室细胞运动实验分别检测细胞的克隆形成能力和体外运动能力.构建miR-365高表达的HaCaT细胞系HaCaT^{pre-miR-365-2}.裸鼠皮下注射HaCaT^{pre-miR-365-2}观察其成瘤能力.结果 UVB照射后,HaCaT差异表达的miRNAs共30个,其中miR-365最敏感,且照后6 h升高最明显,为对照的6.7倍;皮肤鳞癌细胞系A431、Tca8113和HSC-1的miR-365的表达均高于HaCaT细胞(P<0.05),其中,A431增加最多,为(15.67±1.12)倍,Tca8113最少,为(4.72±0.85)倍;抑制皮肤鳞癌细胞系miR-365的表达可以显著抑制其克隆形成能力(t=13.68,P<0.05)和体外细胞迁移能力(t=19.98,P<0.05),而提高HaCaT的miR-365的表达则可以显著提高其克隆形成能力(t=7.11,P<0.05)和体外细胞迁移能力(t=22.03,P<0.05),且能够在裸鼠皮下成功地成瘤.结论 miR-365是一种皮肤鳞状细胞癌的促癌基因.     

miR-141过表达增强人食管癌细胞的放射敏感性

目的 研究miR-141对食管癌细胞放射敏感性的影响及可能的作用机制。方法 将miR-141 mimic或miR-对照转染到食管癌KYSE-150细胞中,分别使用qRT-PCR和Western blot技术检测miR-141和增殖相关蛋白Ki67、凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达。CCK-8,流式细胞术及克隆形成实验检测放射处理后细胞的放射敏感性变化。结果 随放射剂量的增加,食管癌细胞中miR-141表达逐渐降低（t=2.57~8.96,P<0.05）。miR-141过表达抑制了细胞的增殖和克隆形成能力,促进了KYSE-150细胞凋亡,使得放射敏感性增高（t=3.24,P<0.05）。此外,与对照组相比,miR-141过表达显著抑制KYSE-150细胞中的Ki67和Bcl-2蛋白表达（t=6.56、8.24,P<0.01）,并促进Bax蛋白表达（t=3.24,P<0.01）,进一步证实了miR-141增强食管癌细胞的放射敏感性。结论 miR-141通过调控细胞增殖和凋亡相关蛋白表达增强食管癌细胞的放射敏感性。     

miR-27b-3p通过靶向PLK2促进乳腺癌细胞的辐射抵抗

目的 研究miR-27b-3p对乳腺癌细胞辐射抵抗的影响。方法 通过检索基因表达（GEO）数据库，筛选分析miR-27b-3p在正常乳腺组织和乳腺癌组织中的表达水平。利用实时荧光定量PCR技术分析其在不同乳腺癌细胞系中的表达水平。通过细胞克隆形成、免疫荧光和5-乙炔基-2''-脱氧尿苷（EDU）检测技术评价miR-27b-3p对乳腺癌细胞辐射抵抗作用。采用荧光素酶报告基因技术确定miR-27b-3p的靶基因PLK2，并在乳腺癌细胞中进一步验证miR-27b-3p的辐射抵抗作用。结果 与正常乳腺组织和细胞相比，miR-27b-3p在乳腺癌组织（t=2.99，P<0.01）和乳腺癌细胞中表达水平显著上调（t=21.21、32.88，P<0.05）。尤其在抗辐射细胞MCF-7R中升高更加明显（t=25.63，P<0.05）。过表达miR-27b-3p增强了MCF-7细胞的克隆形成能力（t=10.32，P<0.05），且随着辐照剂量的增加，miR-27b-3p对MCF-7增殖能力的保护效应逐渐凸显（t=8.77、8.26、8.03，P<0.05）；干扰miR-27b-3p则抑制MCF-7R细胞克隆形成数（t=40.00，P<0.05），且随着辐照剂量的增加，进一步削弱了MCF-7R细胞的增殖能力（t=8.54、8.32、8.23，P<0.05）。报告基因实验结果表明，PLK2是miR-27b-3p的直接靶标。过表达PLK2抑制了miR-27b-3p介导的乳腺癌细胞辐射抵抗（MCF-7：t=9.66，P<0.05；MCF-7R：t=6.42，P<0.05）。结论 miR-27b-3p可通过靶向PLK2提高乳腺癌细胞的辐射抗性。     

过表达miR-26b-5p抑制HMGA1参与卵巢癌细胞上皮间质转化的机制

 目的 探究microRNA-26b-5p(miR-26b-5p)介导高迁移率族蛋白组A1(high-mobility group A1,HMGA1)基因参与卵巢癌上皮间质转化的机制。方法 对miR-26b-5p靶基因进行预测。qRT-PCR检测组织中miR-26b-5p和HMGA1的表达量。卵巢癌细胞分组转染后,qRT-PCR和Western Blot检测细胞中相关因子的mRNA和蛋白的表达量;Transwell侵袭实验检测细胞侵袭,细胞划痕实验检测迁移能力。结果 卵巢癌组织中miR-26b-5p表达降低,HMGA1的表达升高(均P＜0.05)。miR-26b-5p mimic及sh-HMGA1组HMGA1和Vimentin表达降低而E-cadherin表达上调,且细胞侵袭和迁移降低(均P＜0.05);共转染miR-26b-5p inhibitor和sh-HMGA1,sh-HMGA1处理对上皮间质转化及细胞侵袭和迁移的抑制作用被逆转(均P＜0.05)。结论 过表达miR-26b-5p可抑制卵巢癌细胞中HMGA1和Vimentin表达并促进E-cadherin表达,降低细胞侵袭和迁移能力,从而抑制卵巢癌细胞上皮间质转化。