松果菊苷通过调控SIRT1/PGC-1α信号通路改善肥胖糖尿病小鼠肝损伤

目的 探讨松果菊苷(ECH)通过调控SIRT1和PGC-1α及其下游因子表达水平在改善肥胖糖尿病小鼠(db/db小鼠)肝损伤中的作用。方法 20只8周龄db/db小鼠采用数字表法随机分为糖尿病模型组(db/db组,0.9%氯化钠注射液灌胃,n=10)和松果菊苷治疗组(db/db+ECH组,松果菊苷灌胃,n=10)。8周龄db/m小鼠(db/m组,生理盐水灌胃,n=9),为正常对照组。每天给药1次,共处理10周。观察一般情况,监测各组小鼠体质量和血糖、计算肝质量指数,检测血清中ALT、AST、TG、TC、HDL-C、LDL-C水平; HE染色和油红O染色观察肝脏病理学改变和脂质沉积;Western blot法检测肝脏SIRT1、PGC-1α、PPARα、CPT1蛋白质表达量;RT-PCR法检测肝脏SIRT1、PGC-1α mRNA表达。结果 糖尿病肝损伤主要表现为非酒精性脂肪肝(NAFLD),与正常对照组比较,糖尿病模型组肝质量指数和血糖增加,肝脏组织细胞气球样变性,脂滴沉积,炎性细胞浸润,血清中ALT、AST、TG、TC、LDL-C水平升高,HDL-C降低,SIRT1、PGC-1α蛋白质和mRNA表达水平降低,PPARα、CPT1蛋白质表达降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);与糖尿病对照组比较,松果菊苷治疗组小鼠一般情况改善,糖尿病模型组肝质量指数和血糖降低,肝脏组织脂质沉积和细胞坏死减轻,血清中ALT、AST、TG、TC、LDL-C水平降低,HDL-C增加,SIRT1、PGC-1α蛋白质和mRNA表达水平上调, PPARα、CPT1蛋白质表达上调,差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 松果菊苷可延缓肥胖糖尿病所致的肝损伤的发生, 其机制与上调肝SIRT1/PGC-1α通路及其下游因子表达水平有关。     

虾青素调控SIRT1/PGC-1α/NRF1信号通路减轻对比剂诱导的急性肾小管损伤

目的 观察虾青素 （astaxanthin, AST） 对碘海醇 （iohexol, I） 诱导的大鼠肾小管上皮细胞损伤的保护作用,并探讨其可能机制。方法 常规培养的大鼠肾小管上皮细胞株 （NRK-52E） 分为空白对照组 （Control组）、溶剂对照组 （DMSO组）、碘海醇组 （I组）、虾青素预处理组 （AST组）、虾青素和尼克酰胺共处理组 （AST+NA组）、尼克酰胺 （nicotinamide,NA组）。CCK-8检测细胞增殖情况;硫代巴比妥酸法测定丙二醛 （MDA） 含量;流式细胞仪检测细胞内活性氧 （ROS） 的水平;Western blot法检测各组细胞SIRT1、PGC-1α和NRF1蛋白表达。结果 与Control组比较,碘海醇培养的NRK-52E细胞增殖活性明显下降,MDA和ROS水平升高,SIRT1、PGC-1α和NRF1蛋白表达明显下降 （P<0.05）。与I组比较,AST预处理组细胞增殖活性增加,MDA和ROS水平下降,SIRT1、PGC-1α和NRF1蛋白表达上调 （P<0.05）。在AST组基础上给予SIRT1抑制剂后,逆转了以上AST的保护作用。与AST+NA组比较,NA组细胞活性下降,MDA和ROS水平升高,SIRT1、PGC-1α和NRF1蛋白表达增加 （P<0.05）。结论 虾青素通过减少MDA和ROS水平,调控SIRT1/PGC-1α/NRF1信号通路缓解碘海醇诱导的NRK-52E细胞损伤。     

电针对糖尿病大鼠背根神经节辅助激活因子PGC-1α表达的影响

目的 观察电针对糖尿病大鼠背根神经节辅助激活因子PGC-1α的表达的影响.方法 制作糖尿病大鼠模型,造模后第8周,将大鼠随机分为模型组、电针组、正常组,每组10只,电针治疗14d后,取3组大鼠L4～6背根神经节,用逆转录聚合酶链反应与Western-Blot法检测PGC-1α mRNA表达及PGC-1α蛋白表达水平.结...     

基于PPAR-α/PGC-1α途径探讨低氧减重对肥胖大鼠能量代谢的影响

目的:探讨低氧运动对肥胖大鼠能量代谢的影响及其作用机制。方法:80只雄性SD大鼠随机分为普通膳食对照组(10只)、高脂膳食模型组(70),模型组大鼠给予7周高脂膳食诱导,构建肥胖大鼠模型,取建模成功的肥胖大鼠60只,随机分为常氧安静组(A组)、常氧运动组(AE组)、16.3%低氧安静组(B组)、16.3%低氧运动组(BE组)、13.3%低氧安静组(C组)、13.3%低氧运动组(CE组),每组10只,继续进行高脂膳食饲养,运动组大鼠进行跑台耐力训练,测量大鼠体长、体重,计算Lee’s指数;检测血糖(BG)和血脂四项(BG、TC、LDL-C、TG);采用大鼠代谢系统检测运动后耗氧量、能量消耗;检测骨骼肌组织中PPAR-α、PGC-1α蛋白表达。结果:7周高脂膳食饲养后,大鼠体重明显增加,且超过对照组大鼠体重的20%,血糖、TC、TG、LDL-C含量均明显增加(P<0.01,P<0.05),提示营养性肥胖大鼠模型建立成功。采用低氧、耐力运动干预后8周后,与A组比较,AE、BE、C、CE组大鼠的体重增长、TC、TG、LDL-C、血糖均明显下降(P<0.05,P<0.01...     

尼克酰胺通过SIRT1/PGC-1α/HIF2α信号途径介导白血病细胞HL-60糖酵解代谢的作用及机制

目的:探讨尼克酰胺对人慢性髓系白血病细胞HL-60糖酵解代谢途径的影响,以及SIRT1/PGC-1α/HIF2α信号通路在上述过程中的作用。方法:HL-60细胞培养,葡萄糖消耗实验检测白血病细胞糖酵解活性;流式细胞术检测细胞凋亡,RT-PCR和Western Blot方法检测SIRT1、PGC-1α、HIF2α基因的表达。结果:尼克酰胺能明显抑制白血病细胞HL-60的糖酵解活性和诱导细胞凋亡,此作用呈时间依赖性和浓度依赖性。SIRT1、PGC-1α和HIF2α基因在白血病细胞HL-60均有基础表达,10μmol/L尼克酰胺对HL-60细胞干预24 h后,3个基因的mRNA和蛋白表达水平均明显下调(P<0.05)。结论:尼克酰胺能抑制白血病细胞HL-60的糖酵解活性,诱导细胞凋亡,其机制可能与尼克酰胺调节的SIRT1/PGC-1α/HIF2α信号通路有关。     

电针对VD大鼠学习记忆能力及海马CA1区SIRT1/PGC1-α表达的影响

目的:通过建立血管性痴呆(VD)大鼠模型,观察电针对VD大鼠学习记忆能力改善和对海马CA1区神经元中沉默信息调节因子1(SIRT1)、过氧化物酶体增殖物激活受体 γ 辅激活因子1α(PGC1-α)的表达水平的调节作用,探讨中医电针法对VD的神经保护机制.方法:雄性SD大鼠24只,随机分为对照组、模型组和电针组.采用结扎...     

电针联合丰富康复训练对局灶性脑缺血大鼠PI3K/AKT信号通路的影响

目的 探讨电针联合丰富康复训练对磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B（phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase,PI3K/AKT）信号通路的影响及血管新生机制。方法 将60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、针康组、抑制剂组,每组15只,参照Longa线栓法建立局灶性大脑中动脉缺血动物模型。针康组于模型复制后给予电针及康复治疗,电针取穴“百会”“风府”“内关”“心俞”,每日1次,连续治疗7 d。抑制剂组侧脑室注射AKT阻断剂后,进行电针联合康复训练干预,每日1次,连续治疗7 d。干预结束后,比较各组大鼠神经功能评分、脑梗死面积,分别采用免疫组织化学法和Western blot法检测缺血侧脑组织中PI3K、AKT蛋白的表达水平。结果 与假手术组比较,模型组神经功能缺损评分显著增加（P＜0.05）,梗死面积显著增大（P＜0.05）,缺血侧脑组织中PI3K、AKT蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）;与模型组比较,针康组神经功能缺损评分显著降低（P＜0.05）,脑梗死面积显著缩小（P＜0.05）,缺血侧脑组织PI3K、AKT蛋白表达水平显著增加（P＜0.05）;与针康组比较,抑制剂组大鼠神经功能缺损评分显著增加（P＜0.05）,脑梗死面积显著增大（P＜0.05）,缺血侧脑组织PI3K、AKT蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）。结论 电针联合丰富康复训练可有效促进脑缺血大鼠神经功能恢复,减小脑梗死面积,这可能与其激活PI3K/AKT信号通路,诱导血管新生有关。     

香芹酚通过SIRT1/FOXO1通路减轻糖尿病肾病大鼠氧化应激损伤

目的：研究香芹酚通过SIRT1/FOXO1通路减轻糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）大鼠氧化损伤的机制。方法：采用高脂饮食和腹腔注射链脲佐菌素建立DN大鼠模型,将DN大鼠分为对照组、模型组、L-XQF组（5 mg/kg）、M-XQF组（10 mg/kg）和L-XQF组（20 mg/kg）。检测大鼠空腹血糖（fasting blood glucose,FBG）、尿素氮（urea nitrogen,BUN）、血肌酐（serum creatinine,SCr）、尿微量蛋白（urine microprotein,U-mAlb）的含量;之后处死大鼠,采集肾脏组织,HE染色和Masson染色分别观察大鼠肾脏组织病理变化和纤维化情况;ELISA法检测肾脏组织丙二醛（malondialdehyde,MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）水平;Western blot检测肾脏组织中SIRT1/FOXO1通路相关蛋白水平。结果：香芹酚能够降低DN大鼠FBG、BU...     

白藜芦醇调控SIRT1/PGC-1α通路减轻IgA肾损伤

目的：探讨白藜芦醇（RSV）对免疫球蛋白A(IgA)肾损伤的影响及其作用机制。方法：将60只SD大鼠随机分为对照组（Control组）、模型组（Model组）、白藜芦醇组[RSV组,100 mg/（kg·d）]、沉默信息调节因子1(SIRT1)抑制剂组（EX-527组,10 mg/kg）、RSV+EX-527组[100 mg/(kg·d) RSV和10 mg/kg EX-527],每组12只。除Control组外,其他组均按照BSA+LPS+CCl4方法构建IgA肾病模型,造模成功后,进行药物处理,Control组和Model组灌胃等量的生理盐水,每天1次,持续8周。收集24 h尿,通过邻苯三酚红钼法检测尿蛋白（Upr）含量;自动生化分析仪测量血清中血肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）的含量;HE染色检测大鼠肾组织病理变化;超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）检测试剂盒检测大鼠肾组织中SOD、MDA水平;ELISA法检测大鼠肾组织匀浆中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;TUNEL染色检测大鼠肾组织细胞凋亡;Western Blot检测SIRT1、过氧化...     

PGC-1 对血管内皮细胞内线粒体生物合成的影响

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体辅激活因子1α(PGC-1α)对血管内皮细胞线粒体生物合成的影响.方法 将原代培养的人脐带静脉内皮细胞(HUVECs)及小牛主动脉内皮细胞(BAECs)分成4大组,分别为对照组、空质粒组(pcDNA3.1/V5-His-TOPO)或空病毒Ad组、pcDNA3.1/V5-His-TOPO-PGC-1转染组或d-PGC-1α感染组,以及PGC-1αsiRNA转染组.并分别将四组细胞置于正常糖(5 mmol/L)及高精(30 mmol/L)环境中进行培养.裂解细胞,提取细胞总DNA,应用Southern blot以细胞色素b cDNA为探针检测线粒体DNA拷贝数.结果 与对照组、空质粒组或空病毒组对比,通过质粒转染或腺病毒感染过渡表达PGC-1α,Southem blot显示高糖及正常糖环境下的血管内皮细胞内总DNA中细胞色素b的拷贝数增多,表明细胞内线粒体的生物合成增加,应用小分子干扰RNA转染技术抑制细胞内PGC-1α蛋白的表达,Southern blot显示高糖及正常糖环境下的血管内皮细胞内总DNA中细胞色素b的拷贝数增多,表明细胞内线粒体的生物合成减少.结论 血管内皮细胞内过度表达PGC-1α可以显著促进线粒体生物合成,抑制血管内皮细胞内PGC-1α的表达,线粒体生物合成显著降低.     

电针额区对血管性痴呆大鼠认知功能及SIRT1/NF-κB信号通路的影响

目的 观察电针额区对血管性痴呆大鼠认知功能及SIRT1/NF-κB信号通路的影响,初步探讨其作用机制.方法 选取60只健康雄性Wistar大鼠,随机分为假手术组、模型组、西药组和电针组,动物模型的制作方法采取改良的2-VO法造模.电针组参照于致顺教授头针疗法,选取VD大鼠头部额区丛刺并连接脉冲电疗仪,西药组给予脑复康治...     

少突胶质样细胞条件培养液通过调节Sirt1/PGC-1α通路改善SH-SY5Y细胞氧化应激损伤

目的:研究人神经干细胞来源的少突胶质样细胞条件培养液(oligodendrocytes-like conditioned medium, OCM)对人神经元氧化应激损伤的修复作用及可能机制。方法:人神经干细胞分化为少突胶质样细胞(oligodendrocytes-like, OLs),免疫荧光等方法鉴定OLs,体外观察其髓鞘形成能力。构建H₂O₂诱导的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)氧化损伤模型,流式细胞术测定活性氧水平及细胞凋亡,荧光探针检测线粒体膜电位,化学发光法检测还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平。蛋白质印迹法检测Sirt1/PGC-1α通路蛋白水平。结果:人神经干细胞源少突胶质样细胞(human neural stem cell-derived oligodendrocytes-like, hNSC-OLs)呈现典型的少突胶质细胞形态,表达少突胶质细胞标志物Olig2和SOX10,在体外包裹轴突形成髓鞘。OCM处理显著提高了受损SH-SY5Y细胞活力(P<0.01),活性氧水平明显降低...     

稳定性心绞痛患者SIRT1表达与氧化应激的相关性研究

目的：检测冠心病稳定性心绞痛患者外周血单个核细胞(PBMC)中沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)蛋白表达和血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶（SOD）水平,探讨SIRT-1和氧化应激的相关性。方法：选择稳定性心绞痛患者25例,并与20名健康者（对照组）做比较。采用Western blot法检测PBMC中SIRT1蛋白表达和血清MDA、SOD水平,分析SIRT1蛋白表达和氧化应激相关性。结果：与对照组相比,稳定性心绞痛患者PBMC中SIRT1蛋白表达显著降低（P＜0.05）;血清MDA升高,SOD降低（P均＜0.05）;Pearson直线相关法分析稳定性心绞痛患者的SIRT1蛋白表达水平与血清MDA呈显著负相关（r=-0.539,P＜0.05）,与SOD呈正相关（r=0.630,P＜0.05）。结论：冠心病稳定性心绞痛患者SIRT1蛋白表达水平降低,与血清MDA呈负相关,与SOD呈正相关,提示SIRT1与稳定性心绞痛患者机体内氧化应激关系密切。     

早期康复训练结合电针治疗对脑缺血损伤大鼠IL-6、IL-1影响及可能机制的探讨

目的探讨早期康复训练结合电针疗法对脑缺血损伤的疗效及其可能机制.方法采用线栓法制备大鼠脑缺血模型,观察早期康复训练结合电针治疗对脑缺血大鼠缺血脑组织形态结构、血清IL-6含量以及海马区IL-1表达的影响,并与单纯电针治疗比较.结果早期康复训练结合电针治疗与单纯电针疗法均显著改善缺血后脑组织病理结构变化,显著降低脑缺血损伤后血清IL-6含量,促进海马区IL-1的释放,而早期康复训练结合电针治疗效应更强.结论早期康复训练结合电针治疗能降低大鼠脑缺血损伤,促进机体康复,提高生存质量.     

TNF-α与PGC-1α影响成熟脂肪细胞分泌RBP4的研究

目的观察过氧化物酶增殖体激活受体辅激动子1α（PGC-1α）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及两者联合对体外培养的成熟3T3-L1脂肪细胞分泌视黄醇结合蛋白4（RBP4）的影响。方法体外培养3T3-L1细胞,待细胞完全融合后两天,诱导分化为成熟脂肪细胞,使用重组PGC-1α腺病毒,对照病毒,以及重组TNF-α（10ng/ml）,TNF-α联合PGC-1α腺病毒干预,采用放射免疫分析法检测24小时后成熟脂肪细胞RBP4的分泌量。结果①各干预组均能导致成熟脂肪细胞RBP4分泌的降低。②对照病毒组和PGC-1α腺病毒组引起RBP4的降低,两组间差别无统计学意义。③TNF-α组和TNF-α联合PGC-1α腺病毒组两组减少脂肪细胞分泌RBP4,差别无统计学意义。④两含有TNF-α组和两病毒组对RBP4的影响有统计学差异。结论PGC-1α对成熟脂肪细胞分泌RBP4无影响,TNF-α能抑制成熟脂肪细胞RBP4的分泌,两者对RBP4分泌的影响无相互作用。     

基于PGC-1α/Irisin/Ucp1通路的静力性训练改善骨骼肌减少症研究进展

基于线粒体功能紊乱与骨骼肌减少症、PGC-lα表达与线粒体功能紊乱之间的密切关系,从PGC-1α/Irisin/Ucp1通路角度阐述静力性训练改善骨骼肌减少症的作用机制研究进展。静力性训练可以诱导肌肉PGC-1α蛋白表达、促进FNDC5分解,将鸢尾素(Irisin)释放到血液中,改善线粒体功能、提高线粒体中ATP含量,辅助Ucp1在棕色脂肪和肌肉中的表达,从而降低白色脂肪含量、增加肌肉组织含量,达到抑制骨骼肌萎缩的效果。     

间歇性低氧干预对脑缺血大鼠神经功能恢复的影响

目的:探究脑缺血后间歇性低氧干预的神经保护作用及机制。方法:8周龄雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠随机分为假手术组（SHAM,n=6）、脑缺血-静息组（MCAO-SED,n=7）和脑缺血-间歇性低氧组（MCAO-IH,n=7）。术后1周开始对MCAO-IH组进行低氧干预,持续4周。每周进行改良神经损伤程度评分（mNSS）;干预4周后采用MRI检测大鼠脑梗死体积;Western 印迹法检测脑皮质梗死边缘区脑组织腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）和过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子-1α（PGC-1α）的表达量。 结果:与MCAO-SED组相比,MCAO-IH组死亡率无差异（14.29%,P>0.05）;mNSS评分显著降低（P<0.05）;脑梗死体积明显减小（P<0.01）;梗死边缘区AMPK和PGC-1α表达量显著升高（PAMPK<0.001,PPGC-1α<0.05）。相关性分析结果显示,梗死边缘区AMPK和PGC-1α表达量与mNSS评分之间均呈显著负相关（P<0.05）。结论:间歇性低氧干预可通过上调脑组织中AMPK和PGC-1α蛋白表达,进而减小脑梗死体积,促进运动功能恢复,可能通过激活AMPK/PGC-1α信号通路发挥神经保护作用。