纯种发酵淡豆豉的抗抑郁作用研究

目的 初步研究纯种发酵淡豆豉的抗抑郁作用及其活性成分。方法 制备自然发酵淡豆豉和枯草芽孢杆菌纯种发酵淡豆豉,采用显色鉴别、薄层鉴别、异黄酮和 γ-氨基丁酸（GABA）的含量测定对纯种发酵淡豆豉进行质量评价;昆明小鼠按体质量随机分为 8 组,每组 10 只,雌雄各半,分别为对照组、模型组、盐酸氟西汀（阳性对照,0.01 g·kg^-1）组、γ-氨基丁酸（GABA,0.014 45 g·kg^-1）组、异黄酮（0.003 05 g·kg^-1）组、自然发酵淡豆豉 醇 提 水 洗 脱 物（水 洗 脱 物 ,1.82 g·kg^-1）组 、自 然 发 酵 淡 豆豉 总 提 物（自 然 发 酵 ,1.82 g·kg^-1）组、纯种发酵淡豆豉总提物（纯种发酵,1.82 g·kg^-1）组,除对照组外,建立慢性温和不可预知应激（CUMS）小鼠抑郁模型,边造模边给药,每日应激前 1 h ig 给药,连续给药 28 d。实验第 0、7、14、21、28 天分别测定各组小鼠体质量,第 28 天给药 1 h 后,进行悬尾、强迫游泳、糖水偏好、敞箱实验各行为学指标检测;HE 染色后观察海马 CA1 区病理学变化;超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）鉴定水洗脱物组、纯种发酵组的主要化学成分。结果 纯种发酵淡豆豉与自然发酵淡豆豉有相同的显色反应、显色斑点和 GABA 含量。与模型组相比,各给药组在应激第 14、21、28 天时体质量增加明显（P＜0.01）,悬尾及强迫游泳不动时间显著降低（P＜0.01）;GABA 组、异黄酮组、纯种发酵组、自然发酵水洗脱物组小鼠糖水偏好指数均显著增加（P＜0.05、0.01）;盐酸氟西汀组、水洗脱物组、GABA 组、纯种发酵组小鼠敞箱实验跨格数和直立数均显著增加（P＜0.05、0.01）;各给药组海马 CA1 区细胞排列紧密有序,边缘圆润,细胞间隙正常。纯种发酵组与自然发酵总提物组、水洗脱物组小鼠的各项行为学指标均无显著差异。自然发酵醇提水洗脱物组、纯种发酵总提物组都含有大豆苷元、染料木素、GABA 和各种氨基酸。结论 纯种发酵淡豆豉具有与自然发酵淡豆豉相似的抗抑郁作用,抗抑郁作用的主要成分可能是 GABA 和异黄酮。     

基于GABA能神经系统探究淫羊藿次苷Ⅱ的抗抑郁作用及机制

目的 基于γ氨基丁酸（GABA）能神经系统研究淫羊藿次苷Ⅱ（ICSⅡ）的抗抑郁作用及潜在机制。方法 将雄性昆明小鼠分为对照组（C组,10只）和造模组（50只）,造模组小鼠以慢性不可预知温和应激法复制抑郁模型。刺激21 d后,将造模组小鼠随机分为抑郁模型组（NS组）、阳性对照药组[ECS组,草酸艾司西酞普兰15 mg/（kg·d）]和ICSⅡ低、中、高剂量组[ICSⅡ-L、ICSⅡ-M、ICSⅡ-H组,ICSⅡ10、20、30 mg/（kg·d）],每组10只。各药物组小鼠灌胃相应药物,每天1次,连续14 d。检测各组小鼠的糖水偏爱率、运动总距离、悬尾实验和强迫游泳实验的静止不动时间,观察其海马CA3区神经元及尼氏体形态,检测海马组织中GABA、谷氨酸（Glu）含量、GABA/Glu比值及GABA能神经系统相关蛋白（GABA A受体α1、GABA B受体1、GABA囊泡转运体、谷氨酸脱羧酶67、GABA膜转运体3）的表达情况。结果 与C组比较,NS组小鼠糖水偏爱率显著降低,运动总距离显著缩短,悬尾实验和强迫游泳实验的静止不动时间均显著延长（P<0.05）;海马CA3区的神经元形态不...     

刺五加注射液UPLC-MS成分分析及其抗抑郁作用研究

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS）分析方法,对刺五加注射液（CWJI）主要化学成分进行鉴定或表征;进一步研究CWJI对抑郁症模型大鼠行为学及神经肽水平的影响。方法 采用优化后的UPLC-MS分析方法,在正负离子模式下提取质谱峰的一级质谱和二级质谱信息,鉴定CWJI中主要化学成分的化学结构。将雄性SD大鼠随机分为6组,分别为对照组、模型组、盐酸多塞平注射液（DH,阳性药,4.5 mg·kg^-1）组和CWJI低、中、高剂量（44.1、88.2、132.3 mg·kg^-1）组,除对照组外,其余各组均利用孤养结合慢性温和不可预知应激（28 d）的方法制备抑郁大鼠模型,在造模的同时开始ip给药,每天2次,每次间隔3 h。观察各组大鼠体质量、糖水偏好率、敞箱实验（水平穿越格数、直立次数、粪便粒数）的变化;采用放射免疫试剂盒法测定血浆中神经肽Y （NPY）、P物质（SP）、生长抑素（SS）水平。结果 在CWJI中共鉴定出29个主要化学成分,包括刺五加苷D、刺五加苷E、异嗪皮啶、咖啡酸、绿原酸等。抗抑郁实验结果表明,与模型组比较,CWJI高剂量组与DH组在实验第21、28天大鼠体质量均显著升高（P<0.05、0.01）; CWJI低、中、高剂量组及DH组大鼠的糖水偏好率显著增加（P<0.05、0.01）; CWJI低、中、高剂量组及DH组大鼠的水平穿越格数均显著增加（P<0.01）,中、高剂量组及DH组大鼠的直立次数均显著增多（P<0.01）,粪便粒数均显著减少（P<0.05、0.01）; CWJI低、中、高剂量组和DH组大鼠血浆中的NPY水平均显著升高,SP水平均显著降低（P<0.05、0.01）,中、高剂量组和DH组的SS水平均显著升高（P<0.05、0.01）。结论 CWJI具有显著的抗抑郁作用,其化学成分以苷类和黄酮类化合物为主,可能是其抗抑郁的主要活性成分。     

天花粉中瓜氨酸与γ-氨基丁酸的含量测定

目的 建立测定天花粉中瓜氨酸与γ-氨基丁酸含量的方法.方法 采用柱前衍生反相高效液相色谱法.在碱性条件下,氨基酸与异硫氰酸苯酯反应,生成异硫氰酸苯-氨基酸的衍生物,采用Venusil-AA氨基酸分析柱(250mm×4.6mm,5μm),用二元梯度洗脱方式,流动相A为0.05 mol/L醋酸钠溶液(pH=6.5),流动相B为乙腈-水(80:20),检测波长为248 nm.结果 瓜氨酸与γ-氨基丁酸的进样量分别在9.30~372.00 ng(r=0.999 7)与25.76~1 030.40 ng(r=0.999 6)范围内与各自峰面积呈良好的线性关系,样品平均加样回收率分别为98.45%(RSD=0.73%)与98.15%(RSD=0.64%).结论该方法测定天花粉中瓜氨酸与γ-氨基丁酸,结果准确、重现性好.     

左旋薄荷酮抗抑郁作用及机制研究

目的：研究左旋薄荷酮（MTN）的抗抑郁作用及可能机制。方法：以开野实验、强迫游泳实验、悬尾实验、糖水偏好实验对ICR小鼠进行行为学观察,探讨左旋薄荷酮对抑郁模型小鼠行为学的改善作用,同时检测小鼠血清皮质酮及皮质中糖皮质激素受体（GR）、脑源性神经营养因子（BDNF）含量的变化。结果：左旋薄荷酮15、30 mg·kg-1能显著缩短小鼠强迫游泳、悬尾不动时间,显著提高慢性不可预知温和刺激（CUMS）小鼠糖水偏好值,并能显著降低CUMS小鼠血清皮质酮含量、升高GR mRNA和BDNF的表达。结论：左旋薄荷酮具有抗抑郁作用,其抗抑郁机制可能与抑制下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA轴）过度活化、促进皮质BDNF的表达有关。     

淡豆豉炮制过程中黄曲霉毒素含量的动态变化规律分析

目的: 检测淡豆豉炮制过程中不同时间点样本的黄曲霉毒素(AFTs)含量,明确AFTs的动态变化规律及其产生的关键时间点。方法: 按实验室前期已建立的规范炮制工艺制备淡豆豉,获取淡豆豉炮制过程中不同时间点的样本;采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)检测各样本中4种AFTs [黄曲霉毒素B₁(AFB₁),AFB₂,AFG₁,AFG₂]含量。结果: 4种黄曲霉毒素在选定的质量浓度范围内与峰面积线性关系良好(R²均大于0.99),重复性相对标准偏差(RSD)0.4%~0.9%,精密度RSD 0.7%~2.6%,稳定性RSD 0.8%~1.74%,加样回收率介于95.09%~107.20%(RSD 3.14%~12.71%);AFB₁含量在淡豆豉整个炮制过程中呈先上升后下降的趋势,在"再闷"第6天时达最高值6.95 μg·kg^-1,再闷第12天后各样本均未检测出AFTs。结论: 本研究建立了简单、快速、灵敏度高且适用于淡豆豉中4种AFTs检测的UPLC-MS/MS法;淡豆豉炮制过程中AFTs含量呈动态变化,表明淡豆豉炮制中生物拮抗作用自然存在,从安全性角度证实淡豆豉炮制中"再闷"环节的重要性和"再闷"时间的合理性。     

香砂六君丸中γ-氨基丁酸的含量测定

目的测定香砂六君丸中γ-氨基丁酸的含量。方法在碱性条件下。氨基酸与异硫氰酸苯酷反应,生成异硫氰酸苯-氨基酸的衍生物。采用Venusil-从氨基酸分析柱（250mm×4．6mm,5μm）。用二元梯度洗脱方式,流动相A为0．05mol·L^-1（pH6．5）-乙腈（95：5）。流动相B为乙腈-水（80：20）,检测波长：248nm。结果T-氨基丁酸在2．253μg·mL^-1～13．518μg·mL^-1的浓度范围内有较好的线性关系,加样回收率为99．1％。结论本方法结果准确。重现性好。     

HPLC测定大鼠海马中谷氨酸、γ-氨基丁酸的含量

目的 建立了邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生高效液相荧光色谱法检测大鼠海马中谷氨酸(GLU)、γ-氨基丁酸(GABA)含量的方法。方法 采用Alltima C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为50 mmol·L^-1乙酸钠(pH 6.8)、甲醇、四氢呋喃梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1。激发波长(λ_Ex)338 nm,发射波长(λ_Em)425 nm。结果 GLU、GABA线性范围分别为1.03~20.6 μg·mL^-1(r=0.999 2)和1.13~22.6 μg·mL^-1(r=0.999 7);当信噪比为3时,GLU和GABA的检出限分别为5.27×10^-4μg·mL^-1和7.35×10^-4 μg·mL^-1;测得精密度RSD分别为3.4%和3.5%;加样回收率分别为90%~96%,85%~91%。结论 本方法简便、准确、灵敏,特异性强,重复性好,适用于海马中GLU和GABA的含量测定。     

HPLC测定大鼠海马中谷氨酸、γ-氨基丁酸的含量

目的建立了邻苯二甲醛（OPA）柱前衍生高效液相荧光色谱法检测大鼠海马中谷氨酸（GLU）、γ-氨基丁酸（GABA）含量的方法。方法采用AlltimaC18色谱柱（4.6mm×250mm,5μm）,流动相为50mmol·L^-1乙酸钠（pH6.8）、甲醇、四氢呋喃梯度洗脱,流速1.0mL·min^-1。激发波长（λEx）338nm,发射波长（λEm）425nm。结果GLU、GABA线性范围分别为1.03～20.6μg·mL^-1（r=0.9992）和1.13～22.6μg·mL^-1（r=0.9997）;当信噪比为3时,GLU和GABA的检出限分别为5.27×10-4μg·mL^-1和7.35×10-4μg·mL^-1;测得精密度RSD分别为3.4%和3.5%;加样回收率分别为90%～96%,85%～91%。结论本方法简便、准确、灵敏,特异性强,重复性好,适用于海马中GLU和GABA的含量测定。     

柱前衍生反相高效液相色谱法测定天花粉中γ-氨基丁酸含量

目的测定天花粉中γ-氨基丁酸的含量。方法在碱性条件下，将氨基酸与异硫氰酸苯酯反应生成异硫氰酸苯一氨基酸的衍生物，采用Venusil-AA氨基酸分析柱（250mm×4．6mm，5μm），二元梯度洗脱，流动相A为0．05mol／L醋酸钠溶液（pH=6．5），流动相B为乙腈-水（80：20），检测波长为248am。结果γ-氨基丁酸质量浓度在8．224～41．120μg／mL范围内与峰面积线性关系良好，平均加样回收率为99．1％（n=5）。结论该方法结果准确，重现性好。     

黄芩苷对γ-氨基丁酸受体和抗焦虑症作用研究

目的观察黄芩苷与γ-氨基丁酸（GABA）受体的关系及其所具有的抗焦虑作用。方法采用同位素标记GABA受体结合实验观察黄芩苷与GABA受体的关系;采用高台十字迷宫实验和四孔箱实验观察动物服用黄芩苷后行为的改变。结果 GABA受体竞争结合试验显示,黄芩苷可竞争性抑制50%GABA受体苯二氮类结合浓度（IC50）为（117.62±8.50）μmol·L-1,抑制结合常数（Ki）为（77.10±4.79）μmol·L-1。黄芩苷可增加实验动物进入十字迷宫开放侧次数,百分率和滞留时间,减少在四孔箱中探头和竖身的次数。这些变化与黄芩苷剂量有明显的关系,可被GABA受体阻断剂Ro 15-1788阻断。结论黄芩苷是GABA结合位点的配体,具有一定的抗焦虑作用。     

五味子不同炮制品对小鼠慢性不可预知性应激抑郁的改善作用

目的评价五味子不同炮制品对小鼠慢性不可预知性应激抑郁的改善作用。方法 ICR小鼠随机分为对照组、模型组、氟西汀组以及生五味子组、酒五味子组、醋五味子组,每组10只。对照组和模型组ig蒸馏水,氟西汀组ig盐酸氟西汀分散片3.3 mg/kg,生五味子、酒五味子和醋五味子组均ig相应药物1.0 g/kg,体积为10 m L/kg,给药1 h后采用10种刺激方法建立慢性不可预知性应激模型,持续28 d。以敞箱实验、悬尾实验、强迫游泳实验进行行为学观察,采用酶联免疫法测定血清中五羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、肾上腺皮质酮(CORT)水平,对实验结果进行综合分析。结果与模型组比较,生五味子可以增加抑郁小鼠敞箱站立次数(P0.01)、敞箱中央格穿越次数(P0.05),降低悬尾、强迫游泳不动时间(P0.05);酒五味子和醋五味子均对抑郁小鼠敞箱站立次数、敞箱中央格穿越次数无影响,但可降低悬尾不动时间、强迫游泳不动时间(P0.05)。与模型组比较,生五味子可显著升高抑郁小鼠血清中5-HT、DA水平,降低CORT水平(P0.01);酒五味子和醋五味子可显著升高抑郁小鼠血清中DA水平,降低CORT水平(P0.05、0.01),对血清中5-HT水平无影响。结论五味子不同炮制品均有一定的抗抑郁作用,其中生五味子作用较强。     

心得安降压作用与脑内γ-氨基丁酸受体功能的关系

前文报告因中枢经α-肾上腺素受体激动而产生的降压作用有可能是通过γ-氨基丁酸(GABA)能抑制性神经元而实现。鉴于β肾上腺素受体拮抗剂心得安的抗高血压效应已被临床肯定,而且近年又报告心得安引起的降压作用伴有内脏神经放电减少;在几个脑区     

反相高效液相色谱法测定香砂养胃丸中γ-氨基丁酸含量

目的建立测定香砂养胃丸中γ-氨基丁酸含量的反相高效液相色谱法。方法在碱性条件下,氨基酸与异硫氰酸苯酯反应生成异硫氰酸苯-氨基酸的衍生物,采用Venusil-AA氨基酸分析柱（250mm×4.6mm,5μm）,二元梯度洗脱方式,流动相A为0.05mol/L醋酸钠溶液（pH=6.5）-乙腈（95：5）,流动相B为乙腈-水（80：20）,检测波长248nm。结果γ-氨基丁酸质量浓度在2.252～13.512μg/mL范围内与峰面积有较好的线性关系,平均加样回收率为98.04%,RSD=0.97%（n=6）。结论所用方法结果准确,被测溶液稳定性良好,可用于香砂养胃丸中γ-氨基丁酸的含量测定。     

γ-氨基丁酸脂溶性前体药物合成及脂水分配系数测定

目的 合成γ-氨基丁酸脂溶性前体药物.方法 以香豆素和γ-氨基丁酸为原料经过碱催化水解、乙酰化、醇解及DCC－HOBt活化酯法四步制备出目标化合物,并采用摇瓶法测定其在正辛醇/水中的分配系数.结果 所得产物经熔点、红外谱图、核磁共振氢谱确证其结构,正辛醇/水分配系数为3.03.结论 该合成方法简便易行,最终产物具有一定的脂溶性.     

基于肝脏代谢组学的柴胡-白芍药对抗抑郁作用机制研究

利用LC-MS代谢组学技术,分析柴胡-白芍药对对慢性不可预知温和应激抑郁(CUMS)大鼠肝脏内源性代谢物代谢紊乱的调控作用,明确柴胡-白芍药对"疏肝解郁"的代谢调控途径。将大鼠随机分为正常对照组、CUMS模型组、文拉法辛阳性药组和柴胡-白芍药对高、低剂量组,造模及给药持续28天。通过抑郁症传统药效学指标(大鼠体重、旷场实验、糖水偏爱实验及强迫游泳实验)评价柴胡-白芍药对的药效。动物实验获得山西大学伦理委员会的批准(批准号:SXULL2016036)。采用UHPLC-Q Exactive Orbitrap-MS代谢组学技术分析柴胡-白芍药对对CUMS模型大鼠肝脏代谢轮廓调节作用,探讨柴胡-白芍药对"疏肝解郁"的代谢调控机制。结果显示柴胡-白芍药对能显著改善CUMS模型组大鼠的抑郁样行为;通过LC-MS代谢组学技术共鉴定指认出25种与抑郁相关的生物标志物,柴胡-白芍药对能显著回调其中的16种;代谢通路分析显示D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢,精氨酸和脯氨酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,谷胱甘肽代谢为其改善CUMS模型大鼠肝脏代谢紊乱的主要途径。     

柱前衍生RP-HPLC法测定法半夏中γ-氨基丁酸的含量

目的:建立以反相高效液相色谱法测定法半夏中γ-氨基丁酸含量的方法。方法:在碱性条件下,氨基酸与异硫氰酸苯酯反应,生成异硫氰酸苯-氨基酸的衍生物;采用Venusil-AA氨基酸分析柱(250mm×4.6mm,5μm)、二元梯度洗脱方式测定样品含量,流动相A为0.05mol.L-1醋酸钠溶液(pH6.5),流动相B为乙腈-水(80∶20),检测波长为248nm。结果:γ-氨基丁酸检测浓度在2.056～12.336μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈较好的线性关系;加样回收率为99.0%,RSD=0.92(n=6)。结论:本方法简便、准确、重现性好,可用于法半夏的质量控制。     

氯硝西泮治疗失眠伴焦虑的临床观察及对血清5-羟色胺、γ-氨基丁酸含量的影响

目的 研究氯硝西泮治疗失眠伴焦虑的临床观察及对血清5-羟色胺、γ-氨基丁酸含量的影响。方法 选取2021年1月～2021年12月南京市高淳区精神病防治院95例失眠伴焦虑患者,随机分为对照组47例,研究组48例。对照组艾司唑仑治疗,研究组氯硝西泮治疗。比较治疗后两组睡眠质量,焦虑情绪,血清5-羟色胺、γ-氨基丁酸含量及生活质量。结果 治疗后两组匹兹堡睡眠质量指数量表（PSQI）评分较治疗前下降,且研究组PSQI评分低于对照组（P <0.05）。治疗后两组广泛性焦虑量表（GAD-7）评分较治疗前下降,且研究组GAD-7评分低于对照组（P<0.05）。治疗后两组5-羟色胺、γ-氨基丁酸含量相对于治疗前显著上升,且研究组5-羟色胺、γ-氨基丁酸含量高于对照组（P <0.05）。治疗后两组SF-36评分较治疗前上升,且研究组SF-36评分高于对照组（P <0.05）。结论 氯硝西泮相比于艾司唑仑可有效改善失眠伴焦虑患者睡眠质量,缓解其焦虑情绪,提高血清5-羟色胺、γ-氨基丁酸含量,显著提升患者生活质量,可作为临床治疗首选方式之一。     

吴茱萸次碱对慢性不可预见性温和刺激诱导大鼠的抗抑郁作用及其机制研究

目的研究吴茱萸次碱对慢性不可预见性温和刺激(CUMS)诱导的大鼠抑郁模型的作用及其机制。方法将大鼠随机分为对照组、模型组、氟西汀组(1 mg/kg)和吴茱萸次碱低、高剂量(10、20 mg/kg)组,每组10只,除对照组外,其他各组动物连续复制CUMS模型28d,在造模的第15天开始每天ig给药1次,连续14d。记录大鼠体质量,通过糖水偏好实验、旷场实验、强迫游泳实验检测各组大鼠的行为学,并检测大脑海马5-羟色胺(5-HT)和去甲肾上腺素(NA)水平及脑源性神经营养因子(BDNF)m RNA表达水平。结果与模型组比较,吴茱萸次碱高低剂量组均能显著抑制大鼠体质量下降(P0.05);与模型组比较,吴茱萸次碱高剂量组大鼠的糖水偏好度、大鼠穿越格数和中央格停留时间明显增加(P0.05);与模型组比较,吴茱萸次碱高低剂量组大鼠强迫游泳不动时间明显减少(P0.05、0.01);与模型组比较,吴茱萸次碱高剂量组大鼠海马中5-HT、NA水平和BDNF mRNA表达明显增加(P0.05、0.01)。结论吴茱萸次碱具有一定的抗抑郁效果,其机制可能与其提高大鼠海马单胺神经递质水平、增加BDNF mRNA的表达有关。     

γ-氨基丁酸对药物成瘾的调节及机制

1 引言 滥用药物被认为是通过激活中脑边缘多巴胺系统（mesolimbic dopamine system，MLDS）产生的强化作用：急性给药，通过MLDS的多巴胺（DA）能神经元产生药物强化作用；慢性给药，通过激活伏隔核（nucleus accumbens，NAc）和前额叶皮层（prefrontal codex，PFC）的DA能神经突触，实现药物的强化作用。