啤酒花中蛇麻酮体外诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡作用研究

目的探讨啤酒花(Humulus LupulusL.)中成分蛇麻酮(Lupulone,LP)体外对人胃癌细胞SGC-7901生长抑制及诱导凋亡作用的研究。方法体外培养人胃癌细胞株SGC-7901,MTT法检测不同浓度蛇麻酮对SGC-7901细胞体外生长的影响;流式细胞仪分析蛇麻酮对SGC-7901细胞的凋亡率的影响。结果蛇麻酮对SGC-7901的生长具有较强的抑制作用,IC50为0.73μg/mL;0、0.2、0.8、3.2μg/mL剂量的蛇麻酮作用SGC-7901细胞48h细胞凋亡率分别为0.1%、7.1%、18.0%、49.3%。结论蛇麻酮对SGC-7901具有较强的抗肿瘤活性,其机制可能与其可诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

SHP-2对人胃癌细胞克隆增殖的影响

目的研究SHP-2对人胃癌细胞SGC-7901细胞克隆增殖的影响。方法采用重组腺病毒Ad-GFP(GFP)、Ad-GFP-SHP-2(WT)转染SGC-7901细胞;采用蛋白印迹技术(Western blot)检测SHP-2蛋白的表达;同时进行集落形成实验检测SGC-7901细胞克隆形成能力。另外,观察SHP-2抑制剂NSC-87877作用后,对SGC-7901集落形成的影响。结果当胃癌细胞感染复数为150时,转染成功的细胞数占总细胞数的0.9。WT组SHP-2蛋白过表达。WT组的平板克隆数明显高于SGC-7901亲本细胞组(Control 1)和GFP组,P<0.05。SHP-2抑制剂组(NSC-87877)的平板克隆数及软琼脂克隆数分别明显低于SGC-7901亲本细胞组(Control2),P<0.05。结论 SHP-2对SGC-7901细胞克隆增殖有明显促进作用。     

藤茶蛇葡萄素抗人胃癌细胞作用的实验研究

目的:探讨藤茶蛇葡萄素的体外抗肿瘤作用。方法:采用MTT法、生长曲线法、细胞集落形成法观察蛇葡萄素对人胃癌SGC-7901细胞的抑制作用。结果:蛇葡萄素能明显抑制体外培养的SGC-7901细胞的生长,MTT法IC50为11.19μg/mL;细胞生长曲线法提示其对SGC-7901细胞的生长也有明显的抑制作用;集落形成法,当药物浓度在9.90μg/mL以上时抑制率为100%,当药物浓度为6.60μg/mL时抑制率为72.3%,当药物浓度为4.40μg/mL时抑制率为36.0%。结论:蛇葡萄素对体外SGC-7901细胞的生长有明显的抑制作用。     

金刚藤正丁醇提取物对胃腺癌SGC-7901细胞增殖和迁移的影响

目的探讨金刚藤正丁醇提取物对人胃腺癌SGC-7901细胞的增殖及迁移的影响。方法体外培养人胃腺癌SGC-7901细胞,给予不同浓度(25、50、100μg·mL-1)金刚藤正丁醇提取物处理,并以环孢素A处理的SGC-7901细胞作为阳性对照,采用细胞增殖抑制试验(MTT法)检测胃腺癌细胞的增殖情况;采用划痕实验检测胃腺癌细胞的迁移情况。结果不同浓度(25、50、100μg·mL-1)的金刚藤正丁醇提取物对人胃腺癌SGC-7901细胞的增殖均有明显的抑制作用(P<0.05),且呈时间、剂量依赖性;金刚藤正丁醇提取物可降低人胃腺癌SGC-7901细胞的迁移能力,且呈时间、剂量依赖性(P<0.05)。随着金刚藤正丁醇提取物浓度的增加及培养时间的延长,人胃腺癌SGC-7901细胞迁移率由78.1%下降至58.4%(P<0.05)。结论金刚藤正丁醇提取物可以浓度和时间依赖性的方式抑制体外培养的人胃腺癌SGC-7901细胞的增殖和迁移。     

藤茶双氢杨梅树皮素对SGC-7901细胞端粒酶活性的影响

目的研究双氢杨梅树皮素（DHM）对人胃癌SGC-7901细胞端粒酶活性的影响。方法应用酶联免疫分析法检测端粒酶活性。结果双氢杨梅树皮素（6．7～10μg·mL^-1,48h）能抑制人胃癌SGC-7901细胞端粒酶活性。结论双氢杨梅树皮素抑制SGC-7901细胞增殖的作用机制可能与对端粒酶活性的抑制作用有关。     

黄荆子乙酸乙酯提取物体内外对胃癌SGC-7901细胞作用的研究

目的研究黄荆子乙酸乙酯提取物(EVn-50)在体内外对人胃癌SGC-7901细胞的作用。方法细胞计数法检测EVn-50对人胃癌SGC-7901细胞生长增殖的抑制作用,并绘制细胞生长曲线;平板克隆试验测定细胞集落形成率;建立SGC-7901裸鼠异种移植瘤模型,绘制移植瘤生长曲线,计算经EVn-50治疗后的肿瘤抑制率;光镜和电镜观察肿瘤组织病理变化。结果在体外,1、10、100mg·L-1的EVn-50均能抑制人胃癌SGC-7901细胞生长和增殖,呈浓度和时间依赖性;与对照组比较,细胞集落形成率明显下降(P<0.05);在体内,EVn-50能够抑制SGC-7901细胞裸鼠异种移植瘤生长,5、10、20mg·kg-1的EVn-50对移植瘤的瘤重抑制率分别为32%、43%和56%,且呈浓度依赖性;病理学观察结果,EVn-50可引起SGC-7901细胞坏死,诱导SGC-7901细胞凋亡。结论EVn-50在体内外均可抑制SGC-7901细胞生长和增殖,并在体内诱导其凋亡。     

猫儿眼植物酸对人SGC-7901细胞的抑制作用

目的分离提取猫儿眼植物酸并探讨其对人胃癌(SGC-7901)细胞抑制作用机制。方法采用色-质联用仪、流式细胞仪、MTT法和克隆形成法对猫儿眼植物酸组分及其对SGC-7901细胞的抑制作用进行分析检测。结果分别给予猫儿眼植物酸(浓度分别为10.0,1.0和0.1μg/mL)48h,用MTT法测定其对SGC-7901细胞的抑制率分别为86.9%,77.9%和70.6%;克隆形成抑制率分别为67.8%,55.7%和30.9%;凋亡率分别为39.4%,31.2%和20.2%。结论猫儿眼植物酸对SGC-7901细胞具有显著抑制作用,其效果随给药浓度的增加而递增。     

纳米蜂胶对肿瘤细胞K562,L929,MNK28的杀伤效应及机理研究

目的:了解纳米蜂胶对常见肿瘤细胞的体外杀伤效应,并探讨其机理.方法:乳酸脱氢酶法测定纳米蜂胶体外对小鼠成纤维瘤细胞、人胃癌细胞、人红白血病细胞和非肿瘤源性的脐静脉内皮细胞的杀伤作用.流式细胞仪测定细胞周期和凋亡率.结果:纳米蜂胶在浓度16～400μg·ml-1范围内对3种肿瘤细胞都有一定的杀伤作用,且随着浓度的升高杀伤率增加,其对肿瘤细胞的杀伤作用明显强于普通蜂胶,但低于氟尿嘧啶.纳米蜂胶对K562,L929,MNK28半数致死浓度(IC50)分别为(357.8±8.3)μg·ml-1,(472.3±27.5)μg·ml-1,(461.7±18.7)μg·ml-1.而普通蜂胶对K562,L929和MNK28的IC50分别为(737.6+74.3)μg·ml-1,(753.6±82.1)μg·ml-1,(939.3±75.5)μg·ml-1.而两种蜂胶对人脐静脉内皮细胞的毒性均较低.细胞凋亡率与杀伤率有一定的线形关系,纳米蜂胶作用后处于G0/G1期的肿瘤细胞的比例明显增高.结论:纳米蜂胶体外对小鼠成纤维瘤细胞、人胃癌细胞、人红白血病细胞具有明显的杀伤作用,诱导肿瘤细胞凋亡是其抗肿瘤的机制之一.     

硼替佐米对人胃癌SGC-7901细胞uPA、NF-κB表达的影响及与其侵袭力关系

目的硼替佐米对人胃癌SGC-7901细胞uPA、NF-κB表达的影响及与其侵袭力关系。方法 Brdu ELISA法测细胞增殖活性;Boyden小室培养测细胞的迁移率;Western blot测细胞uPA、NF-κB的蛋白水平;细胞免疫化学测NF-κB细胞表达及细胞定位。结果 (1)与对照组(无血清培养基组)相比,10%FCS组细胞增殖活性与迁移率明显增高(P<0.05);与10%FCS组相比,硼替佐米呈浓度依赖性抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖及迁移,硼替佐米浓度为(4μg.L-1),人胃癌SGC-7901细胞增殖活性与迁移率均明显降低(P<0.05);与PDTC组(10μmol.L-1)相比,两者无明显差别;(2)与10%FCS组相比,硼替佐米呈浓度依赖性抑制胃癌SGC-7901细胞uPA、NF-κB蛋白表达,硼替佐米浓度为(4μg.L-1)时uPA、NF-κB蛋白表达均明显降低(P<0.05);与NF-κB特异性抑制剂PDTC组相比,两组uPA、NF-κB表达均无明显差别;硼替佐米浓度为(4μg.L-1)能明显降低NF-κB核蛋白含量,与PDTC组相比,两者无显著差异(P>0.05);(4)细胞免疫化学结果示:硼替佐米(4μg.L-1)抑制10%FCS诱导人胃癌SGC-7901细胞NF-κB核移位。结论①硼替佐米抑制血清诱导胃癌SGC-7901细胞增殖迁移及uPA、NF-κB蛋白表达,②硼替佐米降低胃癌SGC-7901细胞侵袭力可能与其抑制NF-κB活性,降低UPA水平有关。     

刺梨提取物CL对胃癌细胞的抑制作用

目的观察刺梨提取物CL的体外抗肿瘤作用。方法采用溴化3-(4,5-二甲基噻唑2)-2,5-二苯基四氮唑蓝(3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2.5-diphenyltetrazolium bromide,MTT)检测法测定CL对胃癌-7901和MKN-45细胞的细胞毒性作用,台盼蓝排染法计数不同浓度药物作用下,不同时间点的活细胞数,绘制细胞生长曲线。结果MTT法检测显示,0.01μl·ml1～100μg·ml-1的CL 处理12～96h胃癌SGC-7901细胞和MKN-45细胞生长的抑制率均呈现剂量依赖性和时间依赖性, 细胞生长曲线显示:随CL浓度的升高曲线逐渐右移,且100μg·ml1的CL对SGC-7901细胞的生长曲线呈逐渐下降趋势。结论CL对胃癌7901和MKN-45细胞的体外生长具有一定的抑制作用,这种抑制作用均呈刺量依赖性和时间依赖性,提示CL有一定的体外抗肿瘤作用。     

猫儿眼植物酸对人SGC-7901细胞的抑制作用

目的 分离提取猫儿眼植物酸并探讨其对人胃癌（SGC-7901）细胞抑制作用机制。方法 采用色-质联用仪、流式细胞仪、MTT法和克隆形成法对猫儿眼植物酸组分及其对SGC-7901细胞的抑制作用进行分析检测。结果 分别给予猫儿眼植物酸（浓度分别为10．0，1．0和0．1μg／mL）48h，用MTT法测定其对SGC-7901细胞的抑制率分别为86．9％，77．9％和70．6％；克隆形成抑制率分别为67．8％，55．7％和30．9％；凋亡率分别为39．4％，31．2％和20．2％。结论 猫儿眼植物酸对SGC-7901细胞具有显著抑制作用，其效果随给药浓度的增加而递增。     

草豆蔻中总黄酮体外抗肿瘤活性研究

目的 评价草豆蔻中总黄酮的体外抗肿瘤活性.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法体外检测草豆蔻中总黄酮对多种肿瘤细胞株的生长抑制作用.结果 草豆蔻中总黄酮对人胃癌细胞株SGC-7901有较强抑制作用,IC50为3.48μg·mL-1;对人肝癌细胞株HepG2、人慢性粒细胞白血病细胞株K562和人肝癌细胞株SMMC-7721也有一定的抑制作用,IC50分别为32.30μg·mL-1、29.21μg·mL-1和16.38μg·mL-1.结论 草豆蔻中总黄酮具有抗肿瘤活性.     

三七总皂苷对人胃癌SGC-7901细胞增殖、侵袭及凋亡的影响

目的探讨三七总皂苷(Panax notoginseng,PNS)治疗胃癌(gastric cancer,GC)的潜在分子机制,为临床PNS治疗GC奠定理论基础。方法将培养的人胃癌SGC-7901细胞随机分为4组:对照组(C组,只加入生理盐水),低质量浓度组(L组,PNS:200μg·mL~(-1)),中质量浓度组(M组,PNS:50μg·mL~(-1))和高质量浓度组(H组,PNS:100μg·mL~(-1))。PNS给药24,48,72和96 h后,采用CCK-8法检测人胃癌SGC-7901细胞活力。使用流式细胞仪检测PNS对胃癌SGC-7901细胞周期的影响。在给PNS 48 h后,通过Hoechst-33342荧光染色探索胃癌SGC-7901细胞凋亡情况。通过Transwell试验,检测不同质量浓度PNS对SGC-7901细胞侵袭的影响。同时,利用蛋白免疫印迹实验检测PNS对胃癌SGC-7901细胞Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。结果 PNS能够抑制体外人胃癌SGC-7901细胞的增殖活力。给药24 h后,H组细胞活力明显低于C组(P<0.05);给药48和72 h后,3个实验组细胞活力均明显低于C组(P<0.05);给药48和72 h后,H组细胞活力均明显低于L组和M组;给药72 h后,M组细胞活力明显低于L组(P<0.05)。流式细胞仪结果显示,与C组比较,3个组G0/G1期细胞数量均明显增加,而S期细胞数量均明显减少(P<0.05);与L组比较,H组G0/G1期细胞数量均明显增加,而S期细胞数量均明显减少(P<0.05)。细胞凋亡实验结果表明,与C组比较,3个组细胞凋亡率均明显提高(P<0.05);与L组比较,M组、H组细胞凋亡率明显提高(P<0.05);与M组比较,H组细胞凋亡率明显提高(P<0.05)。Transwell侵袭实验结果显示,PNS能以质量浓度依赖方式抑制胃癌SGC-7901细胞的侵袭。与C组比较,3个组细胞穿膜数量明显减少(P<0.05);与L组和M组比较,H组细胞穿膜数量明显减少(P<0.05)。蛋白免疫印迹实验结果显示,与C组比较,3个组Bax蛋白表达明显增加(P<0.05);与L组比较,M组和H组Bax蛋白表达明显增加(P<0.05);与M组比较,H组Bax蛋白表达明显增加(P<0.05)。与C组比较,3个组Bcl-2蛋白表达明显减少(P<0.05);与L组比较,M组和H组Bcl-2蛋白表达明显减少(P<0.05)。结论 PNS能抑制SGC-7901细胞的增殖和侵袭,促进其凋亡。     

MED19基因在胃癌SGC-7901细胞中的功能研究

目的研究慢病毒MED19-shRNA包装颗粒感染胃癌SGC-7901细胞后对其细胞增殖和细胞周期的影响。方法应用MED19-shRNA-pLVTHM慢病毒载体感染胃癌SGC-7901细胞,采用RT-PCR和Western blot的方法检测MED19基因的沉默效率,通过MTT和克隆形成实验研究MED19基因在SGC-7901细胞增殖中的作用,并用流式细胞技术试验检测MED19基因沉默后对细胞周期的影响。结果成功构建的MED19-shRNA慢病毒载体并使MED19基因沉默成功,感染SGC-7901细胞后细胞增殖能力显著降低、细胞克隆形成能力明显减弱、细胞周期阻滞于S期。结论MED19基因沉默后对胃癌SGC-7901细胞增殖和细胞周期均有显著影响。     

黄芪多糖对人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制作用的体外研究

目的研究黄芪多糖对人胃癌SGC-7901细胞株的增殖的影响。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察黄芪多糖对胃癌SGC-7901细胞株的抑制作用。结果黄芪多糖能抑制人胃癌SGC-7901细胞株的增殖,并呈浓度及时间依赖性。结论黄芪多糖在体外对胃癌细胞株SGC-7901细胞的增殖有明显的抑制作用。     

白附子木脂素化合物调节人胃癌SGC-7901细胞TRAIL及其受体的表达

目的:探讨白附子木脂素化合物对人胃癌细胞株(SGC-7901)的TRAIL及其受体TRAIL-R1和TRAIL-R2表达的影响。方法:SGC-7901细胞在不同浓度组0.026~26μg.L-1的白附子木质素化合物中培养24 h后,用MTT法检测白附子木脂素化合物对细胞增殖的抑制作用;利用Hoechst33342/PI染色法观察细胞凋亡;采用RT-PCR方法检测不同浓度白附子木脂素化合物对SGC-7901细胞TRAIL及其受体mRNA基因表达。结果:不同浓度组0.026~26μg.L-1的白附子提取物对SGC-7901细胞增殖的抑制率分别为7.35%,16.11%,27.18%和50.58%;且均导致细胞凋亡的改变;同时其TRAIL及其受体TRIAL-R1和TRAIL-R2 mRNA表达水平明显高于空白对照组。结论:白附子木脂素化合抑制了SGC-7901的增殖并诱导其凋亡。作用机制可能与上调TRAIL及其受体TRAIL-R1和TRAIL-R2有关。     

维生素K2与苯那普利诱导胃癌细胞凋亡及抑制血管生成的体外实验研究

目的:通过体外细胞培养观察维生素K2联合苯那普利对人胃癌SGC-7901细胞的影响,以探讨两者对胃癌细胞的影响及有无协同作用。方法:通过人胃癌SGC-7901细胞培养,将处于对数生长期的SGC-7901细胞分成5组:药物组(维生素K2组、苯那普利组、联合组)、阴性对照组和空白对照组,阴性对照组不加药,空白对照组不加细胞。加入不同终浓度的药物(维生素K2:5、10、20、40、80μmol/L)或(苯那普利:0.625、1.25、2.5、5、10μg/mL)或(维生素K2+苯那普利)。分别培养24、48和72 h。利用MTT实验检测细胞生长抑制率,流式细胞仪Annexin V/PI双染法及梯状DNA电泳检测细胞凋亡情况,RT-PCR测定血管内皮生长因子(VEGF)表达。结果:药物组能抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖,且具有明显的剂量-效应关系,在抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡及抑制VEGF表达方面,联合组较单独药物组作用更强。结论:维生素K2与苯那普利联合有协同作用,能通过诱导细胞凋亡、抑制VEGF的表达抑制胃癌细胞增殖。     

MiR-497对人胃癌细胞株顺铂耐药性的影响和机制

目的:通过建立人胃癌细胞SGC-7901的顺铂耐药细胞株SGC-7901/DDP,探讨miR-497对SGC-7901/DDP耐药性的影响及其机制。方法:体外研究采用顺铂体外逐步加量诱导法建立人胃癌细胞SGC-7901耐药株,并通过检测药物半抑制浓度和耐药基因MDR1、BCRP、MRP1的表达以鉴定耐药细胞株;检测在亲本及耐药细胞中miR-497、MDR1、MRP1、BCRP和凋亡相关基因Bax、Bcl-2的表达水平;miR-497模拟物分别转染SGC-7901/DDP细胞株,利用SRB法和流式细胞术检测转染miR-497模拟物后细胞对顺铂醇的敏感程度和细胞的周期、凋亡的变化,并检测耐药基因和凋亡相关基因的表达。结果:成功建立人胃癌SGC-7901/DDP耐药细胞株,耐药细胞株中耐药基因MDR1、BCRP、MRP1表达均升高,抗凋亡基因Bcl-2升高,凋亡基因Bax下降,miR-497表达下降(P<0.05);miR-497模拟物提高耐药细胞株对顺铂的药物敏感性,凋亡水平增加,细胞周期G₀/G₁期细胞增多(P<0.05),并可抑制耐药细胞中耐药基因的表达,降低Bcl-2/Bax比值(P<0.05)。结论:人胃癌耐药细胞株SGC-7901/DDP的miR-497表达下调;上调miR-497的表达可逆转人胃癌SGC-7901/DDP细胞株对化疗药物顺铂的耐药性。     

(±)2-(7,8,3,′4,′5′-五甲氧基)黄烷通过诱导周期阻滞和细胞凋亡抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖

目的研究(±)2-(7,8,3′,4′,5′-五甲氧基)黄烷(PMF)体外对人胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制作用及机制。方法MTT法检测不同浓度PMF体外对SGC-7901细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪检测PMF对细胞周期分布的影响;Western blot法检测PMF对凋亡相关蛋白PARP、caspase-3表达的影响。结果不同浓度的PMF作用72 h可剂量依赖性地抑制SGC-7901细胞增殖;PMF作用12 h可使SGC-7901细胞周期阻滞于G2/M期;PMF作用24 h细胞周期检测可见亚二倍体峰(SubG1),并可诱导细胞凋亡相关蛋白PARP、caspase-3的活化。结论PMF体外可抑制人胃癌SGC-7901细胞的增殖,其增殖抑制作用与诱导G2/M周期阻滞和细胞凋亡有关。     

基于p53介导自噬通路探讨臭椿酮对顺铂耐药胃癌细胞株耐药性的影响

目的探讨臭椿酮对顺铂(DDP)耐药胃癌细胞株SGC-7901/DDP耐药性的影响及其机制。方法采用噻唑蓝(MTT)法检测不同质量浓度臭椿酮对SGC-7901/DDP细胞活力的影响以筛选无毒作用浓度。将体外培养的SGC-7901/DDP细胞分为臭椿酮低浓度(0.2 mg/mL)+DDP(2μg/m L)组、臭椿酮中浓度(0.4 mg/mL)+DDP(2μg/m L)组、臭椿酮高浓度(0.8mg/mL)+DDP(2μg/m L)组考察臭椿酮对SGC-7901/DDP细胞DDP敏感性的影响;将体外培养的SGC-7901/DDP细胞分为对照组、DDP(2μg/m L)组、DDP(2μg/mL)+Pifithrin-α(20μmol/L)组、臭椿酮(0.8 mg/mL)+DDP组、臭椿酮+DDP(2μg/m L)+Pifithrin-α(20μmol/L)组考察p53信号通路与药物作用的关系;采用MTT法检测SGC-7901/DDP细胞活力,流式细胞仪检测SGC-7901/DDP细胞凋亡率,免疫印迹法检测SGC-7901/DDP细胞中LC3Ⅱ、LC3Ⅰ、Beclin1和p53蛋白表达水平。结果 0.2、0.4、0.8 mg/mL臭椿酮对SGC-7901/DDP细胞未产生明显细胞毒性。与DDP组相比,臭椿酮低浓度+DDP组、臭椿酮中浓度+DDP组、臭椿酮高浓度+DDP组细胞活力明显降低,凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ值和Beclin1、p53蛋白表达水平明显升高(P0.05),且呈浓度依赖性;而DDP组和对照组之间差异无统计学意义(P0.05);给予Pifithrin-α作用后的DDP+Pifithrin-α组和臭椿酮+DDP+Pifithrin-α组细胞活力较相应对照DDP组、臭椿酮+DDP组明显升高,而细胞凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ值和Beclin1、p53蛋白表达水平较DDP组、臭椿酮+DDP组明显降低(P0.05)。结论臭椿酮可通过p53通路诱导自噬逆转SGC-7901/DDP细胞对DDP的耐药性。