基于HPLC指纹图谱结合化学模式识别及定量测定的夏枯草质量控制研究

目的建立夏枯草药材HPLC指纹图谱,结合化学模式识别技术筛选出不同批次夏枯草质量差异性标志物,并以其为指标建立夏枯草含量测定方法,为科学全面地评价夏枯草药材质量提供参考。方法采用HPLC法建立30批不同产地夏枯草的指纹图谱,利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A进行相似度评价,确定共有峰;运用主成分分析和正交偏最小二乘判别分析,筛选出不同批次夏枯草质量差异性标志物,基于筛选出的质量差异性标志物建立含量测定方法,并对61批夏枯草药材进行含量测定。结果建立了夏枯草HPLC指纹图谱,共标定28个共有峰,其相似度均在0.970以上,表明30批夏枯草药材的整体质量相对稳定;采用主成分分析和正交偏最小二乘判别分析筛选出了不同批次夏枯草质量差异的5个标志物,分别为咖啡酸(5号峰)、金丝桃苷(9号峰)、异槲皮苷(10号峰)、异迷迭香酸苷(11号峰)和迷迭香酸(12号峰),以5个标志物为指标,对其进行含量测定,色谱峰分离度良好,且线性关系良好,平均加样回收率为95.0%～105.0%,RSD值均低于3%。结论该方法科学、准确、可靠,指纹图谱结合化学模式识别技术和含量测定构建了一个更加完善、合理、有效的夏枯草质量评价方法。     

南药“凉粉草”药材水溶性成分HPLC指纹图谱鉴别研究

目的建立南药"凉粉草"水溶性成分的HPLC指纹图谱,为药材质量控制提供依据。方法采用Kromasil C_(18)(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.1%甲酸溶液梯度洗脱,流速1.0 mL·min~(-1),检测波长254nm,柱温25℃。结果建立凉粉草药材水溶性成分HPLC指纹图谱,确定11个共有色谱峰,并指认图谱中的5个色谱峰,分别为咖啡酸、异槲皮苷、迷迭香酸苷、紫云英苷、迷迭香酸。对16批凉粉草药材指纹图谱进行聚类分析和主成分分析,筛选并判断合格样品,以合格样品构建指纹图谱共有模式,并用国家药典委员会中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2004B版)对其质量进行分析与评价。结论该色谱方法简单、准确、重复性好,可用于凉粉草药材的质量评价。     

不同产地叶下珠中4种酚酸类成分的测定

目的 建立落花生茎叶HPLC指纹图谱并对其进行化学模式识别.方法 采用HPLC法,构建不同产地13批落花生茎叶的指纹图谱;采用聚类分析和主成分分析对指纹图谱进行化学模式识别.结果 建立了以7个共有峰为特征指纹信息的HPLC指纹图谱,13批样品被聚分为两大类.结论 HPLC指纹图谱的构建为落花生茎叶内在质量的评价研究提供了参考.     

HPLC指纹图谱和多成分定量结合化学模式识别法评价不同产地胡桃楸叶质量

目的 基于HPLC指纹图谱与多成分含量测定,结合化学模式识别法评价胡桃楸Juglans mandshurica叶质量,为其深入研究和开发提供依据。方法 采用HPLC法建立30批不同产地胡桃楸叶指纹图谱;通过中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）进行相似度评价;通过对照品比对指认了3种化学成分,并测定了样品中3种成分的含量;使用SPSS 25.0软件进行聚类分析、主成分分析和相关性分析。结果 30批胡桃楸叶指纹图谱共标定了12个共有峰,指认的3个共有峰为绿原酸、金丝桃苷和异槲皮苷,指纹图谱相似度范围是0.827～0.995,具有较好的一致性;样品中绿原酸、金丝桃苷和异槲皮苷3种化学成分的质量分数分别为0.258～5.607mg/g、0.113～3.974mg/g和0.439～6.537mg/g;聚类分析将样品分为3类,30批样品中28批样品聚为一类,铁岭鸡冠山乡（S3）、本溪东营坊乡（S6）的样品各自聚为一类;主成分分析用2个主成分进行综合评价,综合得分大于1的前6位分别为S3、S6、S12、S8、S24和S18;30批样品中3种成分的总含量与主成分综合得分存在明显相关性。结论 建...     

化学计量学结合指纹图谱评价不同产地青钱柳叶的质量

目的:同时测定不同产地青钱柳叶中5种化学成分含量,化学计量学结合指纹图谱评价不同产地青钱柳叶的质量。方法:采用HPLC法同时测定青钱柳叶中绿原酸、异槲皮苷、槲皮苷、山柰酚、山柰素的含量。建立青钱柳叶HPLC指纹图谱,并进行相似度评价,结合指纹图谱对14批青钱柳叶样品进行主成分分析(PCA)和聚类分析(HCA),并进行整体质量评价。结果:不同产地青钱柳叶中5种化学成分含量存在较大差异,相似度均在0.80以上,以共有峰相对峰面积进行PCA分析可以将不同产地的青钱柳叶进行较好的区分,结果与HCA分析基本一致。结论:指纹图谱结合化学计量学方法可以用于不同产地来源的青钱柳叶的质量评价,为其全面质量控制提供参考。     

黄连体外改善胰岛素抵抗活性与HPLC指纹图谱的相关性研究

目的：探索黄连体外改善胰岛素抵抗活性与HPLC指纹图谱的相关性。方法：采用RP—HPLC法建立不同产地的黄连样品的指纹图谱,采用主成分分析法进行化学模式识别研究,并采用体外测定药物改善脂肪细胞胰岛素抵抗生物活性,对化学信息和生物效应进行灰色关联分析和多元相关分析,以探索两者的相关性。结果：不同产地黄连药材化学成分含量及生物效应的有一定的差异。HPLC指纹图谱各共有峰中色谱峰10、6、3、7和巴马汀与改善胰岛素抵抗活性相关性较强。结论：基本明确了化学指纹图谱与改善胰岛素抵抗生物效应的相关性,有利于黄连改善胰岛素抵抗活性成分的筛选。     

基于HPLC指纹图谱和多成分定量分析的炒甘草饮片质量评价研究

建立HPLC双波长条件下炒甘草饮片的指纹图谱及多成分含量测定方法。采用Thermo Acclaim^TM 120 C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱;流速1.0 mL·min^-1;检测波长237,360 nm;柱温30℃。15批炒甘草饮片指纹图谱相似度均大于0.849,共标定了17个共有峰,指认了甘草苷、芹糖异甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素、甘草酸6个成分,其中甘草苷、芹糖异甘草苷、异甘草苷、甘草素、甘草酸5种成分的质量分数分别为0.519%~3.058%,0.227%~0.389%,0.070%~0.439%,0.038%~0.173%,1.381%~4.252%。聚类分析将15批饮片分为3类,主成分分析筛选出4个主成分,累计方差贡献率为86.630%,说明主成分可包含原有数据的绝大部分信息,PLS-DA法标记出饮片中的6个差异性成分。建立的指纹图谱及多成分含量测定方法稳定、可靠,可为炒甘草饮片的质量控制及临床应用提供参考。     

枣仁安神胶囊HPLC指纹图谱与化学模式识别分析

目的建立枣仁安神胶囊HPLC指纹图谱,通过化学模式识别的方法全面评价其内在质量。方法采用高效液相色谱法(HPLC),确定12批次安神胶囊指纹图谱的15个共有峰,鉴定其中3个共有峰的化学成分。采用指纹图谱相似度评价,结合主成分分析和聚类分析对不同生产厂家12批枣仁安神胶囊的质量进行评价。结果 12批枣仁安神胶囊样品图谱与对照图谱比较,不同厂家相似度差距较大,质量不稳定。主成分分析与聚类分析均可将不同生产厂家的枣仁安神胶囊分为3类,且分类结果基本一致。结论所建立的HPLC指纹图谱分析方法高效、稳定,结合化学模式识别研究可有助于枣仁安神胶囊的整体质量控制及质量评价。     

黄连体外改善胰岛素抵抗活性与HPLC指纹图谱的相关性研究

目的:探索黄连体外改善胰岛素抵抗活性与HPLC指纹图谱的相关性.方法:采用RP-HPLC法建立不同产地的黄连样品的指纹图谱,采用主成分分析法进行化学模式识别研究,并采用体外测定药物改善脂肪细胞胰岛素抵抗生物活性,对化学信息和生物效应进行灰色关联分析和多元相关分析,以探索两者的相关性.结果:不同产地黄连药材化学成分含量及生物效应的有一定的差异.HPLC指纹图谱各共有峰中色谱峰10、6、3、7和巴马汀与改善胰岛素抵抗活性相关性较强.结论:基本明确了化学指纹图谱与改善胰岛素抵抗生物效应的相关性,有利于黄连改善胰岛素抵抗活性成分的筛选.     

夏枯草中异迷迭香酸苷和迷迭香酸的含量测定

目的建立高效液相色谱法同时测定中药夏枯草中特征成分异迷迭香酸苷(salviaflaside)和迷迭香酸含量的测定方法。方法采用HPLC测定夏枯草中异迷迭香酸苷和迷迭香酸的含量。以Agilent Eclipse XDB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,以乙腈(A)-1.0%醋酸水(B)为流动相系统梯度洗脱,流速为1.1 mL·min-1,检测波长319 nm,柱温30℃,进样体积10μL。结果异迷迭香酸苷和迷迭香酸分别在0.006 7～4.2μg和0.047～9.4μg内呈良好的线性关系,回收率分别为99.99%和100.2%,RSD分别为1.13%和1.64%;所测夏枯草样品中异迷迭香酸苷的含量大于0.01%,迷迭香酸的含量大于1%。结论本法简单、快捷、准确,可用于夏枯草药材中特征成分异迷迭香酸苷和迷迭香酸含量的测定,为夏枯草的质量控制提供参考。     

中药三七不同药用部位的指纹图谱及模式识别研究

目的建立中药三七的HPLC化学模式识别方法,用于三七不同药用部位(主根、剪口、支根)的区分,为其质量评价提供可靠依据。方法利用HPLC获取35批不同部位三七样品的化学信息,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)计算相似度,运用主成分分析(PCA)和偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)分别进行模式识别研究。结果建立了35批三七样品的HPLC指纹图谱共有模式(相似度>0.994);所建立的PCA模型可区分剪口,PLS-DA可将三者完全区分,并发现人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1等7个特征峰是导致三七不同部位间差异的标志物。结论本实验所建立的化学模式识别模型,能准确有效的区分三七不同部位,为三七的质量控制及评价提供参考依据。     

基于指纹图谱及多指标成分定量分析的肿节风配方颗粒质量标准研究

目的建立肿节风配方颗粒(SHDG)HPLC指纹图谱及多指标成分定量分析方法,比较不同厂家及批次SHDG的质量差异,为SHDG的质量控制提供依据。方法采用HPLC-UV法,以乙腈-0.2%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,建立SHDG指纹图谱,并利用对照品和HPLC-Q/TOF法对其特征峰进行指认;同时建立绿原酸、异嗪皮啶、迷迭香酸的含量测定方法。采用Chempattern化学计量学软件对结果进行处理分析。通过聚类分析和主成分分析,将不同厂家及相同厂家不同批次的制剂进行分类,并阐明造成差异的主要成分。结果建立SHDG指纹图谱,确证了7个特征峰并进行了指认,分别是新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异嗪皮啶、迷迭香酸-4-O-β-D-葡萄糖苷、迷迭香酸。55 min内SHDG的主要色谱峰能够达到完全分离;绿原酸、异嗪皮啶、迷迭香酸分别在各自范围内峰面积与质量浓度呈良好的线性关系;平均回收率分别为98.92%(RSD 1.54%)、98.20%(RSD 1.12%)、99.58%(RSD 1.12%);18批样品绿原酸质量分数为0.33～1.39 mg/g,异嗪皮啶质量分数为1.31～2.74 mg/g,迷迭香酸质量分数为1.11～4.54 mg/g;18批样品与共有模式的相似度为0.688～0.992;不同厂家及批次的SHDG中绿原酸、异嗪皮啶、迷迭香酸含量存在较大的差异。结论根据所建立的指纹图谱,结合3个主要成分含量测定能够为SHDG的质量控制提供更全面的参考。     

HPLC指纹图谱结合化学模式识别的蒿竭通痹气雾剂质量研究北大核心

目的:通过HPLC指纹图谱结合化学模式识别法研究蒿竭通痹气雾剂的质量。方法:采用HPLC法建立蒿竭通痹气雾剂的指纹图谱,将数据导入SIMCA-P 14.1软件进行主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA),提取变量重要性投影图(VIP),寻找出批间差异较大的成分。结合文献报道,对部分成分进行指认,并进行含量测定。结果:建立了蒿竭通痹气雾剂的指纹图谱,标定了22个共有峰,10批样品指纹图谱与对照图谱的相似度均≥0.952。PCA和OPLS-DA可将样品分为2类,VIP值图显示色谱峰3~10、18号是引起2类样品差异的主要化学成分,并指认出了雪上一枝蒿甲素、马钱子碱、士的宁、龙血素A、龙血素B,10批样品中上述5个成分的平均含量分别为48.69、112.26、118.64、19.54、20.92μg/mL。结论:该研究建立的方法可用于蒿竭通痹气雾剂的质量控制。     

HPLC指纹图谱结合化学模式识别分析不同产地款冬花生品与蜜炙品

目的建立不同产地款冬花生品与蜜炙品的HPLC指纹图谱,为不同来源款冬花药材鉴别和质量评价提供依据。方法基于高效液相色谱法对36批不同产地款冬花生品与蜜炙品进行测定,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012A版)计算相似度,运用聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和最小偏二乘法-判别分析(PLS-DA)对款冬花生品与蜜炙品进行模式识别研究。结果建立了不同产地款冬花生品与蜜炙品的HPLC指纹图谱,标定了20个共有峰,并指认了其中10个共有峰;36批样品与对照指纹图谱的相似度在0.723～0.984,16批款冬花生品相似度在0.862～0.998,20批蜜炙品相似度在0.687～0.993;通过HCA、PCA和PLS-DA可将款冬花生品与蜜炙品完全区分开来,没食子酸、绿原酸、异绿原酸A、款冬酮等10个成分是导致二者差异性的主要标志物。结论 HPLC指纹图谱结合化学模式识别为款冬花生品与蜜炙品的质量控制和品质评价提供了更全面的参考。     

基于指纹图谱结合化学模式识别对狗脊药材的质量评价

目的 采用指纹图谱结合聚类分析（hierarchical clustering analysis,HCA）、主成分分析（principal component analysis,PCA）和偏最小二乘法-判别分析（partial least squares discriminant analysis,PLS-DA）等进行化学模式识别，对狗脊药材指纹图谱数据进行分析，筛选特征性指标成分并以此建立狗脊有效成分的定量分析，为狗脊质量控制提供科学依据。方法 采用Agilent Eclipse XDB-C18柱（250 mm×4.6mm,5.0μm），以甲醇-1%醋酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，体积流量为1.0 mL/min，柱温为30℃，检测波长为280 nm,HPLC法建立9个产地16批样品狗脊的指纹图谱，运用相似度分析、HCA、PCA和PLS-DA等化学模式识别技术筛选出不同产地狗脊化学成分的特征成分作为狗脊有效成分，并定量分析。结果 16批狗脊HPLC指纹图谱标定10个共有峰，相似度在0.695～0.954；通过HCA、PCA和PLS-DA较好的区分各产地狗脊，综合分析筛选5-羟甲基糠醛、...     

川产麦冬野生资源HPLC指纹图谱及化学模式识别研究

目的建立川产麦冬野生资源的化学模式识别方法。方法采用高效液相色谱法,建立川产麦冬野生资源的HPLC指纹图谱,使用SPSS17.0软件对26批不同来源川产麦冬样品的HPLC指纹图谱进行主成分分析,在主成分得分系数矩阵的基础上,对其进行系统聚类分析;并使用相似度评价软件进行相似度评价验证。结果 26批麦冬样品共提取出4个主成分,被分为4大类;与共有峰直接聚类相比,主成分-聚类分析更符合相似度评价结果。结论利用SPSS软件对麦冬HPLC指纹图谱进行主成分-聚类分析,所建立的模式识别方法,操作简便,统计结果具有可靠性,可对麦冬化学计量学分类及其质量评价提供有效参考。     

江西不同产区车前子药材的HPLC指纹图谱及其多成分化学模式识别分析

目的:建立车前子HPLC指纹图谱检测方法,结合化学模式识别方法对江西不同产区车前子样品进行分析,并测定其中5种有效成分的含量,为科学评价和有效控制该药材的质量提供参考。方法:利用HPLC检测34批车前子药材,采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2012版)进行相似度评价,以其色谱峰信息为数据来源,利用化学模式识别方法综合分析江西道地药材车前子的质量,对筛选并指认出的5个有效成分京尼平苷酸、大车前苷、毛蕊花糖苷、木犀草苷、异毛蕊花糖苷进行定量分析。结果:江西不同产区车前子样品的相似度均 0. 86,说明江西不同产区车前子相似度良好。利用正交偏最小二乘法-判别分析能较好地区分不同产区车前子药材,且可判断与车前子质量相关性较强的化学成分。5种有效成分的含量在不同产区车前子中仍存在一定差异,其中尤以大车前苷的含量差别较大。结论:建立的车前子HPLC指纹图谱特征性强,结合化学模式识别方法可有效的评价车前子质量并区分其不同产区,可为该药材的质量控制提供参考依据。     

基于HPLC指纹图谱和化学模式识别的经典名方桃红四物汤制备过程质量评价研究

目的基于中药复方化学成分群整体指纹信息,考察桃红四物汤(TSD)汤剂制备过程中化学成分的变化,并分析其影响质量的波动成分和主要贡献成分,为其质量评控提供参考。方法按照经典名方物质基准制备工艺,制备TSD一次煎煮(A组)、二次煎煮(B组)、冷冻干燥(C组)3个制备过程样品,建立18批药材3组样品的HPLC指纹图谱,采用中药指纹图谱相似度评价系统进行数据处理,SPSS 20.0进行系统聚类分析(HCA)和主成分分析(PCA),SIMCA 14.1软件进行偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA),分析3组样品中化学指纹信息的动态变化。结果选取17个色谱峰作为指纹图谱共有峰,3个组别各18批样品相似度分别均大于0.900;共指认出没食子酸、5-羟甲基糠醛、原儿茶酸、苦杏仁苷、咖啡酸、羟基红花黄色素A、芍药苷、阿魏酸、洋川芎内酯A、藁本内酯共10个成分;HCA、PLS-DA将54批样品分为2类,A组样品一类,B、C组样品一类;PLS-DA分析筛选出6个差异性色谱峰;根据PCA综合模型计算,综合评分结果为B组>C组>A组,TSD煎煮2次较为合理,冷冻干燥能较好保留煎液中的成分,色谱峰16(藁本内酯)、1(没食子酸)、13、12(阿魏酸)、7(苦杏仁苷)、15(洋川芎内酯A)是影响样品质量的标志性差异物质。结论通过HPLC指纹图谱和化学模式识别够较好地辨识制备过程中影响TSD质量的标志性成分,为经典名方制备工艺评价和质量标志物辨识思路提供了参考。     

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS的疏肝和胃汤化学成分、HPLC指纹图谱、化学模式识别及含量测定研究

目的 指认疏肝和胃汤（Shugan Hewei Decoction,SHD）主要化学成分,建立其HPLC指纹图谱,并结合化学模式识别评价其质量,同时确定9种成分含量测定方法。方法 通过UPLC-Q-TOF-MS/MS对SHD中化学成分进行分析;HPLC建立SHD指纹图谱及含量测定方法;采用中药色谱指纹图谱相似度评价软件（2012年版）,结合层次聚类分析（hierarchical cluster analysis,CA）、主成分分析（principal component analysis,PCA）与正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA）,寻找影响SHD质量的主要化学成分。结果 从SHD中共鉴定出88个成分,包括26个黄酮类成分、27个萜类成分、18个生物碱类成分、6个香豆素类成分、6个有机酸类成分、2个苯丙素类化合物、3个其他类成分;建立了SHD的HPLC指纹图谱,确定了20个共有峰,10批样品相似度0.972～1.000。3种化学模式识别均将样品分为2类,造成主要差异的质量差异物来源于槲皮苷。建立的多成分含量测定方法耐用性良好。结论UPLC-Q-TOF- MS/MS定性鉴别结合HPLC指纹图谱,可以体现SHD组分的整体特征,为其质量控制研究奠定基础。     

基于指纹图谱和OPLS-DA的越南和国产土茯苓差异性化合物探索

目的:分析越南和国产土茯苓化学成分的差异,对差异性化合物进行辨识,并对样品进行产地鉴别。方法:收集越南土茯苓7份,国产土茯苓28份。建立越南和国产土茯苓化学成分色谱指纹图谱,根据相似度评价结果比较两者的差异程度,采用HPLC-MS对指纹图谱的主要色谱峰进行归属,共鉴定21个峰。采用聚类分析对样品进行产地鉴别;结合正交信号校正偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)进行差异性化合物的筛选,选取位于S-plot图两端并且VIP1的点作为区分越南与国产土茯苓的差异性化合物。结果:越南和国产土茯苓主要化学成分的含量存在差异性,聚类分析可将35批土茯苓药材分为越南和国产2组,两者的差异性化合物分别为落新妇苷、异落新妇苷、新落新妇苷、黄杞苷,越南土茯苓中差异性化合物的含量显著大于国产土茯苓。结论:采用OPLS-DA分析样品的指纹图谱,既可从整体角度分析越南和国内土茯苓化学成分的异同,又可对两者差异性化合物进行辨识,为越南土茯苓入药的可能性及其质量评价提供实验数据。