克霉唑对皮肤移植大鼠T淋巴细胞增殖与分化的影响

目的探讨克霉唑在体使用对皮肤移植大鼠T淋巴细胞增殖与分化的抑制作用。方法建立SD对Wistar大鼠移植皮肤模型，术后随即分组，使用克霉唑、环胞霉素在体干预，分离T淋巴细胞体外培养，MTT法测定T淋巴细胞增殖反应及IL-2活性，流式细胞仪测定T淋巴细胞增殖各周期变化。结采克霉唑可以抑制T淋巴细胞增殖反应及IL-2活性，克霉唑处于C0／G1期的细胞数目明显增多，同时S期和G2＋M期的的细胞数目明显减少，其作用差于环胞霉素，但克霉唑和环胞霉素合用作用优于单用环胞霉素．结论克霉唑对移植排斥反应有抑制作用，此作用与阻断T淋巴细胞IKCa1通道有关，克霉唑对环胞霉素有协同作用。     

银杏叶制剂对哮喘大鼠T淋巴细胞体外增殖和凋亡的影响

目的探讨银杏叶制剂治疗哮喘的部分机理。方法将14只大鼠分成2组(健康对照组7只,哮喘组7只),分别采集外周血,并分离出T淋巴细胞体外分组培养(分空白组、银杏叶制剂BN-52021组、银杏叶制剂EGb761组),各组分别以不同浓度的BN-52021和EGb761干预不同时间。用MTT法分别测定各组细胞的增殖情况,用Annexin V/PI双染法流式细胞仪测定BN-52021不同浓度组的细胞凋亡情况。结果与空白组比较,EGb761在低浓度时促进T淋巴细胞增殖,而高浓度时则起抑制作用(均P＜0．05)；BN- 52021对体外培养的哮喘和健康大鼠T淋巴细胞的增殖均有抑制作用,其作用强度(在一定的范围内)随剂量的增加和时间的延长而加强(均P＜0．05)；但对哮喘大鼠的抑制作用明显强于健康大鼠(P＜0．05)；T淋巴细胞凋亡率随BN-52021浓度增加而增加(P＜0．01)。结论银杏叶制剂因其成分和干预浓度的不同而对体外培养的大鼠T淋巴细胞增殖活性的影响不同,对哮喘与健康大鼠T淋巴细胞的作用也有差异。银杏内酯B是抑制T淋巴细胞增殖的主要活性成分,其不仅可抑制T淋巴细胞的体外增殖,而且还可增加T淋巴细胞凋亡率。     

黄芩苷对T淋巴细胞增殖与活化的影响

目的:研究黄芩苷对小鼠T细胞体外活化和增殖的影响,并探讨其免疫调节机制。方法:以刀豆蛋白A(ConA)或佛波醇酯(PMA) 离子霉素(ionomycin,Ion)诱导小鼠淋巴细胞中T细胞增殖,用MTT法测定细胞增殖;利用ConA或PMA诱导T细胞激活,流式细胞术检测T细胞早期活化标志CD69分子与CD25分子表达情况。结果:在ConA或PMA Ion刺激48h后,小鼠淋巴细胞MTT吸光度显著高于对照组(P<0.01)。黄芩苷(10~40uM)显著降低了ConA或PMA Ion引起的MTT吸光度增加(P<0.01)。在ConA或PMA刺激18h后,小鼠T细胞CD69表达率显著提高(P<0.01),ConA或PMA刺激36小时后,T细胞CD25表达率显著提高(P<0.01),黄芩苷(10~40uM)能显著降低活化(P<0.01)。结论:黄芩苷可以显著抑制多克隆刺激剂ConA或佛波醇酯(PMA)介导的小鼠T细胞的活化和增殖。     

双氢青蒿素对AA大鼠外周血T淋巴细胞的调节作用

目的:探讨双氢青蒿素对佐剂性关节炎(AA)大鼠外周血T细胞的调节作用.方法:采用佐剂性关节炎动物模型,将体重160～ 180 g的SD大鼠随机设为6组:正常对照组、模型对照组、甲氨蝶呤对照组(1mg·kg-1)、双氢青蒿素高、中、低剂量(11.2,5.6,2.8 mg·kg-1)组,造模2周后灌胃给药,连续给药28 d,并采用流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群、酶联免疫法检测血清白介素-4 (IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)的水平.结果:相较于正常组,模型组外周血CD4+T,CD4+ T/ CD8+T和血清IFN-γ水平显著升高(P＜0.01),血清IL-4水平显著降低(P＜0.01),CD3+T,CD8+T则无明显变化;高、中剂量双氢青蒿素组CD4+T所占百分比分别是(34.81±3.80)％,(34.92±5.14)％,CD4+ T/ CD8+T分别是2.21±0.43,2.27±0.48,与模型组相比显著降低(P＜0.05,P＜0.01);双氢青蒿素高、中、低剂量组血清INF-γ水平分别是(15.90±2.05),(16.27 ±2.11),( 18.15±2.15) ng·L-1,与模型组相比显著降低(P＜0.01);IL-4水平分别是(40.21±4.89),(40.04±4.56),(34.81±4.02)ng·L-1,与模型组相比显著升高(P＜0.01),其调节作用在2.8 ～5.6 mg·kg-1范围呈剂量依赖性(P＜0.05).结论:双氢青蒿素能有效改善AA大鼠T细胞功能紊乱状况,为其应用于类风湿关节炎治疗奠定实验基础.     

枸杞多糖联合趋化因子对肝癌小鼠T辅助淋巴细胞分化的影响

目的: 探讨枸杞多糖(LBP)及枸杞多糖联合趋化因子(CXCL10)对实验性肝癌荷瘤小鼠辅助性T细胞分化的影响。 方法: 建立H22肝癌小鼠皮下移植瘤模型,分为模型组、LBP高剂量组(ig 100 mg·kg^-1)、LBP低剂量组(ig 50 mg·kg^-1)、LBP+CXCL10组(ig 100 mg·kg^-1+15 μg·kg^-1)、CTX组(ip 20 mg·kg^-1),另设正常对照组。连续给药2周后小鼠眼球取血,颈椎脱臼处死。分离小鼠肿瘤、脾脏、胸腺,计算肿瘤抑制率、胸腺指数、脾指数,流式细胞术检测小鼠外周血T辅助细胞1/T辅助细胞2(Th1/Th2)分化情况。 结果: 与模型组相比,LBP低、高剂量组、LBP+CXCL10组对肿瘤抑制率分别为37.83%,12.50%,14.14%; Th1/Th2分别4.44±3.05,2.48±2.93,4.36±1.96,其中LBP低剂量组及LBP+CXCL10组P<0.05。 结论: 低剂量LBP及LBP+XCL10能显著提高H22肝癌荷瘤小鼠Th1/Th2比率。     

T淋巴细胞与银屑病发病关系研究进展

银屑病是一种慢性炎症性皮肤病，特征表现为表皮异常增殖。目前研究表明，该病是多基因遗传背景下T细胞异常的免疫性疾病，皮肤相关T细胞是维持银屑病疾病活动的中心环节，与皮损的发生、发展和持续存在密切相关。T淋巴细胞的浸润是银屑病的重要病理特征之一，主要分布在表皮、真皮乳头及真皮浅层。现探讨T淋巴细胞与银屑病机制二者间的关系。     

紫草素对银屑病T淋巴细胞增殖、活化的影响

目的:研究具有凉血、解毒作用的中药单体紫草素对银屑病病理状态下异常活化的T淋巴细胞功能及相关信号转导通路的影响。方法:选取Jurkat E6-1 T淋巴细胞,以佛波醇酯和离子霉素活化Jurkat E6-1 T淋巴细胞,同时将0. 5～2μg/m L浓度的紫草素作用于细胞,采用CCK-8法检测T淋巴细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞膜CD69的表达及细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的变化;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测T淋巴细胞释放白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平;用Realtime-PCR和Western blotting法分别观察核转录因子mRNA及蛋白的表达影响。结果:不同浓度的紫草素均可明显抑制细胞增殖、CD69表达及Th1类细胞因子分泌;均可有效降低[Ca2+]i和蛋白激酶C(PKC)磷酸化蛋白的水平;显著降低核转录因子NF-AT mRNA的表达,下调c-Jun的mRNA及蛋白表达并可抑制核因子-κB蛋白的表达。以上各项指标均有一定量效关系。结论:紫草素可以通过抑制过度活化的T淋巴细胞功能从而发挥免疫调控作用,为紫草素治疗银屑病的作用机制及应用前景提供实验依据。     

补肾健脾复方对肾虚黄体抑制流产大鼠T淋巴细胞亚群的影响

目的:探讨补肾健脾中药复方对肾虚黄体抑制流产大鼠T淋巴细胞亚群的影响。方法:以羟基脲和米非司酮建立肾虚黄体抑制流产大鼠模型;将大鼠分为正常妊娠组、模型对照组、黄体酮组、补肾健脾方组4组;于孕11 d处死大鼠,观察妊娠结局,用流式细胞仪分析方法检测4组大鼠外周血中CD3+、CD4+、CD8+细胞百分数,并计算CD4+/CD8+的比值。结果:补肾健脾方组体质量减轻程度较模型组轻微(P0.05)。而黄体酮组体重减轻程度与模型对照组对比,差别无统计学意义(P0.05)。与其他3组对比,模型对照组CD4+、CD4+/CD8+最高,差别有统计学意义(P0.01);补肾健脾方组与模型对照组对比,CD4+、CD4+/CD8+明显降低,差别有统计学意义(P0.01)。结论:补肾健脾中药复方可以降低肾虚黄体抑制流产大鼠外周血中CD4+百分比和CD4+/CD8+比值,纠正T淋巴细胞亚群比率失调,使CD8+T淋巴细胞和CD4+T淋巴细胞在机体免疫应答过程中发挥免疫协调作用,而起到维持妊娠的作用。     

银屑病愈后复发与外周血T淋巴细胞关系研究

目的：观察银屑病患者,临床痊愈时外周血T淋巴细胞亚群的情况,及其与近期病情复发的关系。方法：应用流式细胞分析法在患者痊愈时进行检测,并观察其30周内病情是否复发。结果：患者痊愈时,外周血CD8＋T细胞相比正常组明显减低;复发组CD4＋T细胞较未复发组明显减低。结论：银屑病患者痊愈时仍存在细胞免疫功能的异常。痊愈时CD4＋T细胞较低者近期复发的可能性更大。     

灵芝三萜对T淋巴细胞的活化作用

目的探讨灵芝三萜对人淋巴细胞活化时CD69和HLA-DR表达的影响。方法淋巴细胞与不同浓度的灵芝三萜分别培养6h和72h后,用流式细胞术测定四色荧光标记抗体,分析T淋巴细胞的活化。结果灵芝三萜对T淋巴细胞的CD69表达有促进作用,以10μg/mL的浓度对CD3CD4亚群上CD69的表达最明显(P<0.05);10μg/mL和20μg/mL两个浓度促进T细胞表达HLA-DR(P<0.05),对CD3CD4亚群上HLA-DR表达促进更显著(P<0.01);同时灵芝三萜对T淋巴细胞亚群的比例无显著影响。结论适当浓度的灵芝三萜能促进人T淋巴细胞的活化,主要是促进CD3CD4亚群的活化,对HLA-DR表达的作用超过对CD69的作用,而对细胞亚群的比例无影响。     

T淋巴细胞在临床疾病发病与诊治中的作用探讨

T淋巴细胞来源于骨髓的多能干细胞,它是由骨髓中的一部分多能干细胞或前T细胞迁移到胸腺内,在胸腺激素的诱导下分化成熟,成为具有免疫活性的T细胞。T细胞分为CD4T细胞和CD8T细胞两个主要的亚群,T淋巴细胞及亚群的检测结果可以解释一些疾病发病机理、对患者的免疫功能和预后做出判断以及指导治疗,如感染性疾病、肿瘤性疾病、自身免疫性疾病、器官移植患者、其他免疫缺陷或异常的患者。     

免疫性卵巢早衰与T淋巴细胞亚群相关性研究

卵巢早衰病因错综复杂,自身免疫因素是卵巢早衰的一个重要原因.T淋巴细胞按其功能可分为辅助性T细胞(helper T cells,Th)、细胞毒T细胞(cytotoxic T cells,Tc)、调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)3个亚群.相关研究表明,卵巢早衰与T淋巴细胞亚群关系密切,但卵巢早衰与T淋巴细胞各个亚群之间的关系尚无统一看法,特别是卵巢早衰与辅助性T细胞及细胞毒T细胞的关系尚存在很多争议,而且目前也没有关于卵巢早衰与调节性T细胞的研究报道.因此,探索免疫性卵巢早衰与T淋巴细胞亚群的关系尤为重要.     

淫羊藿提取物对小鼠T淋巴细胞体外活化和增殖的影响

目的研究淫羊藿水溶性提取物对刀豆蛋白A(ConA)刺激的小鼠T淋巴细胞体外早期活化和增殖的影响。方法无菌分离小鼠各部位淋巴结,制备单细胞悬液,加入不同终质量浓度(5、25、50mg/L)的淫羊藿提取物,以MTT法检测药物对T细胞活性的影响;利用流式细胞术(FCM)结合双色荧光抗体染色技术检测早期活化标志CD69分子的表达;运用流式细胞术结合活体染料CFDA-SE染色技术和荧光抗体染色技术检测T细胞增殖。结果MTT法检测淫羊藿提取物在50mg/L时细胞存活率达52.36%。ConA作用6h后,对照组CD69 表达率为(4.61±0.85)%,ConA组CD69 T细胞的比率上升至(38.30±2.54)%,淫羊藿提取物在终质量浓度5、25、50mg/L时均抑制ConA诱导的CD3 T淋巴细胞CD69的表达(P<0.01),其表达率分别下调为(36.16±2.14)%,(30.5±1.72)%,(15.99±0.87)%。培养48、72后,对照组增殖指数(PI)分别为1.01±0.01和1.05±0.01,ConA组PI分别达到1.42±0.01、2.32±0.01,淫羊藿提取物在终质量浓度5、25、50mg/L均抑制T淋巴细胞增殖(P<0.01),48h时PI分别为1.28±0.01、1.26±0.01、1.21±0.01;72h时PI分别为2.30±0.03、2.13±0.02、2.10±0.01。结论淫羊藿提取物能明显抑制ConA刺激的小鼠T淋巴细胞的早期活化和增殖,并呈剂量依赖性。     

槐胺碱对皮肤移植大鼠T淋巴细胞的影响

目的：研究槐胺碱（SA）对移植排斥反应的影响并探讨其发生机制。方法：以同种皮肤移植大鼠作为动物模型,免疫荧光浊测定T淋巴细胞及克亚群数量;MTT比色法测定T淋巴细胞增殖反应。结果：SA减少CD3、CD4细胞数、降低CD4／CD8,抑制T淋巴细胞的增殖,延长移植物存活时间。结论SA对移植排斥反应有抑制作用,此作用与其减少T淋巴细胞数量并抑制T淋巴细胞功能有关。     

乌头汤及其配伍对佐剂性关节炎大鼠外周血T淋巴细胞的影响

目的：探讨乌头汤及其配伍各组对佐剂性关节炎大鼠外周血中CD4^＋、CD8^＋细胞百分比含量以及CD4^＋/CD8^＋比值的变化的影响。方法：用完全弗氏佐剂诱导复制大鼠关节炎模型,并用乌头汤及其配伍的各组药物进行干预,末次给药后采血,采用流式细胞仪测定大鼠外周血中CD4^＋、CD8^＋的含量。结果：与正常组相比,模型组大鼠外周血中CD4^＋细胞的百分比含量明显升高,CD8^＋细胞的百分比含量明显下降;与模型组相比,经过乌头汤及其配伍各组、MTX组治疗干预后,大鼠外周血中升高的CD4^＋百分比呈现不同程度的下降,下降的CD8^＋百分比水平呈现不同程度的升高,升高的CD4^＋/CD8^＋比值也呈现不同程度的下调;乌头汤与各个配伍组之间的上述作用比较没有明显的差异。结论：乌头汤及其配伍各组对佐剂性关节炎大鼠抑制作用的作用机制可能是通过调节外周血中异常的CD4^＋、CD8^＋的百分比含量而发挥的。     

桂枝汤对痹证小鼠T淋巴细胞的调节作用

目的:探讨桂枝汤对痹证T淋巴细胞的调节作用.方法:外周全血中T淋巴细胞亚群用免疫荧光标记流式细胞仪计数,脾脏中T、B淋巴细胞增殖功能用MTT法测定.结果:外周全血中CD3 T、CD4 T、CD8 T细胞在应用桂枝汤后数量均降低,脾脏来源的T淋巴细胞对丝裂原刀豆蛋白A(ConA)激活的增殖反应系数应用桂枝汤后降低,B淋巴细胞对丝裂原细菌脂多糖(LPS)激活的增殖反应系数应用桂枝汤后无变化.结论:桂枝汤能减少外周血中T淋巴细胞的数量且对脾脏中T淋巴细胞的功能具有抑制作用.     

白藜芦醇对于异抗原刺激下大鼠T淋巴细胞活化增殖的影响

目的 研究白藜芦醇(RSV)对于异抗原刺激下大鼠T淋巴细胞活化增殖的影响.方法 建立SD-Wistar大鼠腹腔异位心脏移植模型急性排斥反应模型,分离受体脾脏淋巴细胞与成年供体系SD大鼠心肌细胞体外混合培养,分别给予不同剂量RSV与CSA干预,观察RSV与CSA对体外混合培养下T淋巴细胞增殖的影响;通过ELISA法检测两者对细胞因子IL-2的影响.结果 RSV可以抑制共培养细胞中T淋巴细胞增殖,减低培养上清中IL-2活性,作用强弱表现出明显的剂量依赖性,与CSA有协同性.结论 RSV在体外淋巴细胞培养中表现免疫抑制作用.     

T淋巴细胞亚群与肾气盛衰规律的探讨

本文按中医肾气盛衰规律将１２２名男性，据年龄分为３组进行Ｔ淋巴细胞亚群的测定。结果：８～２４岁年龄组Ｔ＿３、Ｔ＿４较２５～４０岁组为低，与年龄呈中度正相关；２５～４０岁年龄组的Ｔ＿３、Ｔ＿４较其他两组均高，与年龄无相关性；４１～６４岁年龄组Ｔ＿３、Ｔ＿４较２５～４０岁组为低，与年龄呈中度贞相关，Ｔ＿８有所增高与年龄呈轻度正相关。提示：Ｔ淋巴细胞亚群变化与中医肾气盛衰规律有密切联系，Ｔ＿３、Ｔ＿４、Ｔ＿８水平的变化可作为肾气盛衰辨证的客观指标之一。     

环孢素对心脏移植大鼠外周血淋巴细胞多基因mRNA表达的影响

 目的 对大鼠心脏移植前后不同时间点外周血淋巴细胞mRNA差异表达的研究,探讨环孢素对免疫排斥反应过程中基因表达的影响.方法 心脏移植前后以15 mg·kg^-1·d^-1环孢素灌胃的大鼠,分别在移植前、移植后24,72 h,7,10,12d取血,提取总RNA,用mRNA差异显示法找出差异表达条带,克隆测序,用灰度扫描法计算差异表达基因的比密度。结果 对照组移植心脏存活率于移植后的10d内降至为0%,而此阶段环孢素组的移植心脏存活率始终保持在50％.移植后第10天,对照组与凋亡信号传导和线粒体蛋白构象重构与蛋白转运相关基因Ribosomal—12S和S25,MHC—Ⅲ(Hst-70)的表达水平显著高于移植前,与移植心脏存活率最低点同步.其2,3-bisphosphoglycerate和gig18基因表达水平的变化无统计学意义。环孢素组与细胞凋亡有关的gig18和Thbsl,以及T细胞受体(TCR)等基因的表达水平于移植后10 d内持续低于移植前,2,3-bisphosphoglycerate基因的表达水平于移植后24 h降低,只有钠通道β-1基因的表达水平于移植后10 d内高于移植前。结论 环孢素可负调心脏移植后大鼠外周血淋巴细胞凋亡相关基因gig18和Thbsl,正调钠通道基因的转录。     

益气活血中药对大鼠右肺辐照后外周血T淋巴细胞亚群的影响

目的:观察益气活血中药对大鼠右肺辐照后外周血T淋巴细胞亚群的影响。方法:54只Wistar种雌性大鼠随机分为正常对照组(A组)6只、单纯照射组(B组)24只、照射加中药组(C组)24只。6MV-X直线加速器对B、C组大鼠右肺进行分次照射(5Gy/次,1次/周,总剂量30Gy),于照射后第6、8、12、26周处死,每组各6只大鼠,A组6只于第6周末处死,取抗凝全血进行流式细胞检测CD4+、CD+8、CD4+/CD+8的动态变化。结果:B组大鼠各时相点外周血CD4+/CD+8比值下降,显著性低于A组(P<0.05)。C组大鼠各时相点外周血中CD4+/CD+8比值均高于B组(P<0.05)。结论:益气活血中药具有减轻大鼠右肺辐照后外周血T淋巴细胞亚群的损伤作用且有助于恢复。