HPLC-荧光法同时测定人血浆中3种抗抑郁药的浓度

目的:建立以高效液相色谱-荧光法同时测定人血浆中文拉法辛、氟西汀、舍曲林浓度的方法。方法:以异丙嗪为内标,样品碱化后经液-液萃取,用Phenomenex-C18反相色谱柱进行分离,流动相为乙腈∶磷酸盐缓冲液(50mmol·L-1磷酸二氢钠用磷酸调节pH值至2.5)=35∶65,流速为1.2mL.min-1,柱温为40℃。荧光检测文拉法辛,激发波长为276nm,发射波长为598nm;紫外检测氟西汀和舍曲林,检测波长为200nm。结果:文拉法辛、氟西汀、舍曲林血药浓度分别在5～1000μg·L-1(r=0.9980)、40～1000μg·L-1(r=0.9990)、20～800μg·L-1(r=0.9980)范围内线性关系良好;日内、日间RSD均<10%,提取回收率均>70%,方法回收率均>90%。结论:本法简便、快速、灵敏、准确,可用于文拉法辛、氟西汀、舍曲林的治疗药物监测、中毒分析及药动学研究。     

固相萃取结合HPLC-荧光法测定人血浆中维生素B2含量

目的:建立固相萃取结合HPLC-荧光法测定人血浆中维生素B2含量的方法。方法:采用SiroccoTM96孔蛋白沉淀板和正压固相萃取装置处理样品,采用SymmetryshieldTMRP-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-5 mmol.L-1乙酸铵(35∶65),流速为0.6 mL.min-1,荧光检测器检测(激发波长:450 nm,发射波长:520 nm)。结果:维生素B2线性范围为0.2～10 ng.mL-1(r=0.9937)。定量下限为0.17 ng.mL1,日内精密度(RSD)为2.0%～4.8%,日间精密度(RSD)为3.8%,方法回收率为101.5%～116.0%(n=3),提取回收率为91.8%～115.1%。结论:所建方法采用96孔蛋白沉淀装置自动处理样品,高效液相色谱-荧光法测定,可用于临床血浆样品中维生素B2含量的测定。     

高效液相-质谱联用法测定人血浆中盐酸度洛西汀浓度

目的:建立高效液相色谱-质谱联用法测定盐酸度洛西汀在人血浆中的浓度,以研究该药物在人体内的药动学,并为临床用药提供参考.方法:以氟西汀为内标,血浆样品采用固相萃取的预处理方法,用phenomenex C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)进行分离,以5 mmol·L-1醋酸铵(含1‰甲酸)-乙腈(55:45)为流动相,柱温40℃,流速1.0mL·min-1.采用质谱电喷雾电离源(ESI)将样品离子化,选择性正离子监测(SIM)准分子离子峰.结果:血浆中度洛西汀在0.78～93.60 μg·L-1范围内线性关系良好,r为0.999 1;最低定量质量浓度为0.78 μg·L-1;萃取回收率和方法回收率均大于92.05%;日内日间变异系数均小于15.0%.结论:本方法简便迅速,灵敏准确,选择性高,可用于度洛西汀药动学研究,并为临床用药提供部分参考依据.     

固相萃取-反相HPLC荧光法快速测定血浆中左氧氟沙星的含量

目的建立固相萃取—反相HPLC荧光法快速测定人血浆中左氧氟沙星的方法。方法采用C18固相萃取小柱萃取血浆中的左氧氟沙星。色谱柱为ODS-BP柱(5μm,250mm×4.6mm),流动相为含1.31g.L-1L-异亮氨酸和0.80g.L-1Cu-SO4的水溶液-甲醇(80:20),激发波长为280nm,发射波长为504nm,流速为0.8mL.min-1。结果该方法在1.0～20μg.mL-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9976),最小检测限1ng.mL-1,萃取回收率和方法回收率分别为89.12%和109.47%,高、中、低3个浓度的日内RSD为3.2%,日间RSD为1.4%。结论该法血样处理简单,干扰小,灵敏度高,精密度好,可用于该药物的快速测定。     

RP-HPLC法测定人血浆中氟吡汀的浓度

目的建立以HPLC法测定人血浆中马来酸氟吡汀的浓度的方法。方法采用DiamonsilC18色谱柱,流动相:5 mmol.L-1磷酸氢二钠缓冲溶液-乙腈(体积比为55∶45),流速:1.0 mL.min-1,荧光检测激发波长:323 nm,发射波长:370 nm。结果氟吡汀血药质量浓度在10.0~1 500.0μg.L-1内线性关系良好(r=0.999),定量下限为10μg.L-1,方法回收率平均为105.36%,提取回收率平均为90.74%,日内、日间RSD均小于10%。结论本方法适用于人血浆中氟吡汀的药代动力学研究。     

互为内标法测定患者血浆中氟西汀和西酞普兰的浓度

目的：建立测定人血浆中氟西汀、西酞普兰的高效液相色谱-荧光（HPLC-FLU）法,为临床用药提供参考。方法：氟西汀和西酞普兰互为内标,血浆样品碱化后经液-液萃取,以Ultimate XB-C18反相色谱柱进行分离,流动相为乙腈：0.02 mol·L-1磷酸氢二钠溶液（35∶65,pH 5.0）,流速为1.0 ml·min-1,柱温为30℃。荧光检测氟西汀和西酞普兰的激发波长为230nm,发射波长为305 nm。结果：氟西汀、西酞普兰血药浓度均在15.625～1 000μg.L-1范围内线性关系良好;平均回收率分别为100.72%和100.94%;分析方法的最低定量限均为5μg.L-1;日内、日间RSD均〈3%;冻融稳定性RSD均〈10%。结论：本法快速、简便、灵敏、准确,适用于氟西汀、西酞普兰的血药浓度监测及药动学研究。     

固相萃取反相高效液相色谱法测定人血浆中多奈哌齐浓度

目的:建立固相萃取反相高效液相色谱法测定人血浆中多奈哌齐浓度的方法。方法:血浆经碱化后,用OASIS固相萃取小柱提取血浆中多奈哌齐,紫外检测器检测,检测波长316nm。色谱柱:Sh im-Pack C18柱(150mm×4.6mm,5μm),保护柱:Sh im-Pack C18柱,流动相:0.5%三乙胺溶液(磷酸调pH3.0)-乙腈(65∶35),流速为1.0mL.m in-1。结果:标准曲线线性范围为5~100mg.L-1(r=0.999 3),萃取回收率在81.9%~90.7%之间。日内、日间RSD在5.4%~10.2%之间,最低检测浓度为2mg.L-1。结论:本测定方法快速、灵敏、准确,适用于临床治疗药物浓度检测的要求。     

高效液相色谱荧光检测法测定人血浆中阿昔洛韦浓度

目的:测定人血浆中阿昔洛韦的浓度。方法:采用高效液相色谱荧光法检测,色谱柱为ODS-3(DIKMA150mm×4.6mm,5μm),流动相为0.02mol·L-1高氯酸-甲醇(450∶8),流速为1.0mL·min-1,检测波长为λex=260nm,λem=375nm。结果:阿昔洛韦的提取回收率大于96%,方法回收率为(98.4±3.7)%,日内RSD≤5.7%,日间RSD≤6.6%。结论:本方法准确可靠,可用于阿昔洛韦体内血药浓度测定。     

反相高效液相色谱荧光检测法测定血浆中西酞普兰浓度

目的:建立反相高效液相色谱法测定人血浆中西酞普兰浓度.方法:采用岛津公司LC-10Avp系列高效液相色谱仪,RF-10Axl荧光检测器,SIL-10Advp全自动进样器,Diamonsil C18(250mm×4.6mm,5μm ) 色谱柱,柱温:35℃.以CH3CN-0.05 mol·L-1 H3PO4 (36∶64)为流动相,普奈洛尔做内标,检测波长Ex=236nm,Em=306 nm.结果:标准曲线线性范围1.25～50.00 ng·mL-1;萃取回收率 84.96%～88.33%;方法回收率96.95%～105.2%;日内测定RSD为1.8%～6.1%,日间测定RSD为1.9%～5.3%.结论:本法快速、灵敏、准确、简便,可用于西酞普兰血药浓度测定和药动学及生物利用度研究.     

SPE-HPLC法测定止嗽立效丸中吗啡的含量

目的:建立HPLC法测定止嗽立效丸中吗啡的含量。方法:预处理应用固相萃取技术;液相色谱采用Shim-pack C18柱(6.0 mm×150 mm,5μm),流动相为乙腈-0.05 mol.L-1磷酸二氢钾-0.005 mol.L-1庚烷磺酸钠(10∶45∶45),流速1 mL.min-1,柱温25℃,检测波长210 nm。结果:吗啡进样量在0.026×10～2.58μg范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为101.3%,RSD为1.2%(n=9)。结论:方法简便、准确,重复性好。     

高效液相色谱荧光检测法测定人血浆中溴酸加兰他敏浓度

目的建立高效液相色谱荧光法测定人血浆中氢溴酸加兰他敏浓度的方法.方法采用hypersil-C8色谱柱,以乙腈水三乙胺(25741)作为流动相(pH=7.0).碱化血浆后经无水乙醚提取,挥干乙醚后,残渣经溶有参照标准品舒必利的流动相溶解后进行测定.荧光检测的激发波长为290nm,发射波长为320nm.结果本法测定氢溴酸加兰他敏的线性范围为5～250μg.L-1(r=0.999),最低检测限1ng,最低检测浓度为5μg.L-.日内变异系数为8.92%,日间变异系数为8.79%,萃取回收率和方法回收率均>90%.结论本方法精密、准确、稳定,适用于加兰他敏的临床检测和药代动力学研究.     

固相萃取-高效液相色谱法测定人血浆中的替硝唑浓度

目的建立固相萃取结合高效液相色谱法测定人血浆中替硝唑浓度的方法。方法血浆样品经C18固相萃取小柱净化后进样。色谱柱:HyperS il C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:磷酸二氢钾(含0.1%三乙胺,磷酸调pH=3.2)-乙腈(89∶11),柱温:25℃,流速:1 m L/min,检测波长:236 nm,进样量:30μL。结果替硝唑血药浓度在0.5~50 mg/L之间呈良好线性关系(r=0.999 5),线形方程Y=1.012 C-0.053 1,相对标准偏差<5%,回收率>90%。结论该方法操作简便、准确可靠,灵敏度高,适用于替硝唑的血药浓度检测。     

反相高效液相色谱法测定人血浆中氯硝西泮浓度

目的采用反相高效液相色谱法测定人血浆中氯硝西泮的浓度。方法血浆经碱化后,用OASIS固相萃取小柱提取血浆中氯硝西泮,采用HPLC法紫外检测器检测。色谱柱为Shim-Pack C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),保护柱为Shim-Pack C18柱,流动相为水-乙腈(65∶35,V/V),流速为1.0 mL.min-1,检测波长252 nm。结果测定方法在氯硝西泮浓度为5~100μg.L-1(r=0.999 3)范围内具良好线性关系,萃取回收率在91.9%~98.2%之间。日内、日间RSD在3.7%~11.3%之间,最低检测浓度为2μg.L-1。结论本测定方法适用于临床氯硝西泮浓度检测的要求。     

固相萃取结合高效液相色谱测定人血浆中万古霉素的浓度

目的建立固相萃取结合高效液相色谱法测定人血浆中万古霉素的浓度。方法以去甲万古霉素为内标,用Cleanert PEP固相萃取柱预处理样品,水洗涤杂质,60%甲醇溶液洗脱药物;采用SHIMADZUVP-ODS C18（150mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,流动相为乙腈-0.05 mol.L-1磷酸二氢钾缓冲液（8.5∶91.5,pH=3.2）,流速1mL.min-1,柱温为35℃,二极管阵列检测器检测波长230 nm。结果人血浆中万古霉素在1.080.0 mg.L-1线性关系良好,平均萃取回收率〉78%,方法回收率为88%109%,日内RSD〈6.9%（n=5）,日间RSD〈7.5%（n=15）。结论本法简便、灵敏、准确,适用于人体内万古霉素的血药浓度监测。     

高效液相色谱荧光检测法测定人血浆中替米沙坦浓度及其应用

目的:建立高效液相色谱荧光检测人血浆中替米沙坦浓度的方法,并用于研究替米沙坦片的人体药代动力学。方法:采用固相萃取方法提取血浆中的替米沙坦,色谱柱为 Diamonsil C_(18)柱(5μm,4.6mm×150mm),以乙腈-磷酸二氢钾缓冲液(61∶39,磷酸调 pH=3.74)为流动相,流速1.0mL·min~(-1),坎地沙坦为内标,荧光检测波长λ_(Ex)=305nm,λ_(Em)=365nm。结果:本法测定替米沙坦的线性范围为0.5-144ng·mL~(-1),r=0.9998,绝对回收率在79.62%-85.69%(n=5),相对回收率在101.9%-109.0%(n=5),日内和日间 RSD 分别为4.23%-9.80%和4.03%-9.95%(n:5)。结论:本法灵敏、准确,操作简捷,适用于替米沙坦的血药浓度测定及药代动力学研究。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中盐酸度洛西汀的浓度及其药代动力学研究

目的建立高效液相色谱-串联质谱联法测定人血浆中度洛西汀(抗抑郁药)并研究其在健康人体的药代动力学。方法5名男性与5名女性健康志愿者口服盐酸度洛西汀肠溶片60mg,色谱柱为phenomenex C18,流动相为水相(5mmol.L-1醋酸胺,含0.02%的甲酸)-乙腈=55∶45;电喷雾电离源正离子模式(ESI+),以氟西汀为内标。用高效液相色谱-串联质谱法测定盐酸度洛西汀血药浓度,并计算药代动力学参数。结果度洛西汀血浆浓度在0.89～106.80ng·mL-1内与峰面积积分值线性关系良好(γ=0.9977)。方法回收率在93.19%～107.27%,萃取回收率在72.81%～89.96%。日内、日间标准偏差均小于11%。主要药代动力学参数:Cmax为(44.40±17.78)ng·mL-1,tmax为(6.10±1.29)h,t1/2为(12.81±2.31)h;AUC0-60和AUC0-∞分别为(696.04±337.82),(733.82±343.40)ng.h.mL-1。结论本方法操作简单,结果准确可靠,适于度洛西汀的血药浓度监测和药代动力学研究。     

HPLC法测定长春西汀脂质体的药物含量及包封率

目的:建立长春西汀脂质体的药物含量方法。方法:采用Kromasil C18柱(4.6mm×200mm,5μm),流动相为甲醇-0.1mol.L-1碳酸铵水溶液(90∶10,v/v),检测波长314nm,柱温为室温,流速:1.0mL.min-1。结果:长春西汀在4.00～60.00μg.ml-1浓度范围内线性关系良好,峰面积对浓度有良好的线性关系,回归方程为:A=9437.5C+1534.3(r=0.9999,n=7),方法的日内与日间精密度RSD均<2%,回收率分别为101.4%、100.3%、100.5%。结论:该方法具有简便、快速、准确的特点,可用于长春西汀脂质体的药物含量及包封率测定。     

固相萃取-高效液相色谱法测定枇杷止咳胶囊中吗啡的含量

目的:建立以固相萃取-高效液相色谱法测定枇杷止咳胶囊中吗啡含量的方法。方法:色谱柱为LichrospherC18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.01mol.L-1磷酸二氢钾溶液-0.005mol.L-1庚烷磺酸钠水溶液(5∶47.5∶47.5),流速为1.0mL.min-1,检测波长为220nm。结果:吗啡进样量在0.2335～1.8680μg范围内呈良好线性关系(r=0.9999),平均回收率为97.6%(RSD=1.2%,n=5)。结论:本方法简便、准确、重现性好,可有效控制该制剂中吗啡的含量。     

高效液相色谱荧光检测法测定人血浆中盐酸曲马多浓度

目的:建立测定人血浆中盐酸曲马多的高效液相色谱-荧光检测法。方法:血浆样品经液-液萃取,以氟康唑为内标,在Diamonsil C18柱(迪马公司,200mm×4.6mm,5μm),以磷酸二氢纳缓冲液(0.04mol.L-1,pH3.5)-乙腈(77∶23)为流动相,荧光检测,激发波长为275nm,发射波长为302nm。结果:曲马多的线性范围为5~1 000μg.L-1,最低检测限为1μg.L-1。低、中、高3种浓度的日内日间RSD均小于7.7%,提取回收率分别为(85.2±4.3)%,(80.6±3.5)%和(83.6±3.6)%。结论:该法重复性好、准确、简便、快速,适用于人血浆中盐酸曲马多浓度的测定及临床药动学研究。     

高效液相色谱荧光法测定健康人血浆中赖诺普利浓度

目的:建立测定血浆中赖诺普利浓度的方法,为临床血药浓度的测定提供快速、有效的分析手段.方法:高效液相色谱法荧光法,采用HypersilODS柱,流动相为20mmol/LKH2P04缓冲液(pH=3.0)-甲醇(35:65,V/V),流速为1.0mL/min;血浆样品经固相萃取后与荧光试剂(荧光胺)发生衍生化反应,进样量为20μL;荧光检测器的激发波长为383 nm,发射波长为477 nm.结果:赖诺普利浓度在2～200 ng/mL范围内线性关系良好(r=0.997 8),平均绝对回收率为68.55%(n=15),日内与日间精密度均小于3%,最低检测限为1 ng/mL;内源性物质不干扰测定.结论:高效液相色谱荧光法工作曲线稳定,灵敏度高,操作步骤简单,可以用于赖诺普利的药动学和药效学研究及临床血药浓度的监测.