温阳解毒化瘀方对肝衰竭大鼠内毒素血症的影响

目的:动态观察温阳解毒化瘀方对肝衰竭大鼠内毒素血症(ITEM)的影响。方法:将85只SD大鼠随机分为正常组、模型组、对照组(予乳果糖+三联活菌溶液)及温阳解毒化瘀颗粒组(实验组),采用D-半乳糖胺(D-gal)腹腔注射致肝衰竭ITEM大鼠模型。正常组在腹腔注射生理盐水12小时后处死,其余各组分别于造模后12小时、24小时各取10只大鼠处死,检测各组大鼠血清转氨酶(ALT、AST)、肝组织病理学、门静脉及结肠内毒素水平。结果:模型组12小时时ALT和AST较正常组升高(P<0.05),24小时时门静脉及结肠内毒素水平明显升高(P<0.01),肝组织大面积坏死;实验组及对照组在造模后12小时各观察指标与模型组比较,差异无显著性意义,造模后24小时两组ALT和AST、门静脉及结肠内毒素水平较模型组降低(P<0.05),肝组织病变减轻。结论:D-gal腹腔注射可建立大鼠肝衰竭ITEM模型,温阳解毒化瘀方可通过降低门静脉及结肠内毒素水平减轻ITEM而达到抗肝衰竭的效应。     

解毒化瘀通腑方对乙型肝炎肝硬化肝胆湿热证患者肠道菌群的影响

目的 研究解毒化瘀通腑方对乙型肝炎肝硬化肝胆湿热证患者肠道稳态的调节作用及对内毒素、炎性因子和细胞免疫功能的影响。方法 纳入2019年6月至2021年1月在河南中医药大学第一附属医院就诊,符合诊断及纳入标准的72例患者为研究对象,随机分为观察组和对照组,每组各36例。其治疗组脱落2例,剔除2例,完成32例;对照组脱落2例,剔除1例,完成33例。两组均给予抗病毒、保肝等基础治疗,观察组加服解毒化瘀通腑颗粒,对照组给予双歧杆菌四联活菌片口服,疗程为4周。运用16S rDNA测序技术对两组粪便菌群进行基因测序,同时检测治疗前后肝功能（ALT、AST、TBil、Alb）、内毒素（ET）、TNFα、IL-6水平以及T淋巴细胞亚群（CD3⁺T、CD4⁺T、CD8⁺T、CD4⁺/CD8⁺）的变化。计量资料服从正态分布及方差齐性时,组内比较采用配对t检验,2组间比较用独立样本t检验,不服从正态分布时用Wilcoxon秩和检验;计数资料组间比较采用χ²检验。结果 观察组临床...     

解毒化瘀温阳法重建HBV相关肝衰竭免疫平衡的探索与实践

肝衰竭为肝病领域的急危重症之一,我国肝衰竭主要由HBV感染所引起。毛德文教授在运用“解毒化瘀温阳法”防治HBV相关肝衰竭基础、临床研究等方面成效突出,尤以“解毒化瘀温阳法”为技术核心的HBV相关肝衰竭免疫平衡重建临床防治新方案的创建奠定了中西医协同治疗HBV相关肝衰竭的基石,彰显了中医药的疗效优势,突破了当前HBV相关肝衰竭临床治疗的瓶颈,为肝衰竭发病率和病死率的降低做出了有益的尝试。     

急性肝衰竭大鼠肠道菌群和内毒素的动态研究

目的 研究急性肝衰竭大鼠肠道菌群及内毒素的动态变化。 方法 腹腔注射半乳糖胺建立急性肝衰竭大鼠模型。40只SD大鼠随机分为A组(对照组)10只;B组12只,C组18只(均为肝衰竭大鼠)。实验开始时(A组)、造模后24 h(B组)和48 h(C组)分别处死各组大鼠并检测肝功能,定性、定量分析空肠、回肠及结肠菌群,定量测定门静脉、右心室血,回肠及结肠内毒素。 结果 肝功能检测显示:B组大鼠的肝脏损伤最为严重;与B组相比,C组大鼠的肝功能开始好转。肠道菌群分析显示:B组大鼠肠道内肠杆菌科细菌显著增加(空肠、回肠间,P<0.01;结肠间,P<0.05)、乳酸杆菌下降(P<0.01);与B组相比,C组空肠和结肠内的肠杆菌科细菌出现下降(P<0.05)、乳酸杆菌增加,以空肠为显著(P<0.05)。内毒素测定表明B组回肠内毒素增加(P<0.05);C组空肠和回肠内毒素继续增高与对照组差异有显著性(P<0.01);门静脉内内毒素在B组最高,与A、C两组比较差异有显著性(P<0.01)。 结论 急性肝衰竭大鼠肠道存在菌群失调、肠杆菌科细菌过度生长,菌群失调程度与肝损伤程度有关;肠道菌群失调伴有回肠和结肠内内毒素升高;门静脉内毒素的增加与肠道菌群失调有关     

解毒化瘀Ⅱ方对急性肝衰竭大鼠肝线粒体膜电位的影响

目的:观察解毒化瘀Ⅱ方对急性肝衰竭大鼠肝线粒体膜电位(△Ψm)的影响。方法:用硫代乙酰胺(TAA)皮下注射构建急性肝衰竭大鼠模型,将84只大鼠随机分为7组:空白组、阳性对照组、解毒化瘀Ⅱ方低、中、高剂量组(9·1g/kg、28·76g/kg、57·55g/kg)、乳果糖组、安宫牛黄丸组。通过机械法分离肝细胞,阳离子染料JC-1染色后分别使用倒置荧光显微镜(Fluorescence Microscopy,FM)、流式细胞仪(Flow Cytometry,FCM)观察各组大鼠△Ψm的稳定性。结果:FM检测发现空白组主要呈现点状的红色荧光,阳性组镜下呈现大量弥散性的云雾状绿色荧光,解毒化瘀Ⅱ方组、乳果糖组、安宫牛黄丸组红色荧光量明显多于阳性组;FCM定量分析显示阳性对照组绿色荧光强度为28·4±2·92,解毒化瘀Ⅱ方高剂量组为16·21±2·89,两组比较差异有显著性意义(P<0·01)。结论:解毒化瘀Ⅱ方可能是通过稳定肝线粒体膜电位,抑制肝细胞发生异常凋亡来实现其保护肝细胞的作用。     

解毒化瘀方对内毒素血症大鼠肝细胞线粒体能量代谢的影响

目的：观察解毒化瘀方对内毒素血症（endotoxemia，ETM）大鼠肝细胞线粒体能量代谢的影响。方法：将56只大鼠随机分为正常对照组及脂多糖（LPS）注射后6、12、24小时组和解毒化瘀方6、12、24小时组。取肝组织分离线粒体，测定其Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋～Mg^2＋-ATP酶活性。同时行高压液相色谱检测线粒体内腺苷酸含量及能荷（EC）水平。结果：在注射LPS 6小时后，线粒体Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性降低，ATP、ADP含量及EC值减少；24小时后，线粒体Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性明显降低，ATP、ADP、AMP含量及EC值明显减少。与对应的LPS组比较，经解毒化瘀方处理后，肝细胞线粒体Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性增加，ATP、ADP、AMP含量及EC值均升高。结论：解毒化瘀方能增加ETM大鼠肝线粒体Ma^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性，提高线粒体氧化磷酸化水平，增加线粒体腺苷酸EC值，改善能量代谢，具有保护肝细胞的作用。     

解毒化瘀颗粒对慢性重型肝炎患者血清细胞因子的影响

目的:观察解毒化瘀颗粒对慢性重型肝炎患者血清TNF-α、IL-6、IL-10、IL-12的影响。方法:将110例慢性重型肝炎患者随机分为对照组55例、治疗组55例,对照组采用西药基础治疗和对症支持治疗,治疗组在对照组的基础上加用解毒化瘀颗粒,检测两组患者治疗前后TNF-α、IL-6、IL-10、IL-12的变化情况并进行比较。结果:治疗组患者在治疗后第2周、4周、8周血清中TNF-α、IL-6、IL-12较对照组明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05);而IL-10在治疗后第4周、8周与对照组比较有显著增高,差异亦具有统计学意义(P<0.05)。结论:解毒化瘀颗粒能降低慢性重型肝炎患者血清促炎因子水平,提高抗炎因子水平,对内毒素(LPS)介导的机体炎症反应具有一定防治作用。     

温阳解毒化瘀颗粒对肠源性内毒素血症大鼠肠黏膜上皮紧密连接的影响

目的：研究温阳解毒化瘀颗粒对肠源性内毒素血症（ IETM ）模型大鼠结肠黏膜上皮紧密连接的影响,探索其抗肝衰竭的作用机制。方法：将大鼠随机分为正常组、模型组、温阳解毒化瘀颗粒（实验组）和对照组4组,采用D-半乳糖胺（D-gal）腹腔注射致肝衰竭ITEM大鼠模型。正常组在腹腔注射生理盐水24h后处死,模型组、实验组、对照组分别于造模后24h、48h、72h各取6只、7只、7只大鼠处死,检测各组肝功能、内毒素、结肠黏膜上皮咬合蛋白（occludin）及肌球蛋白轻链激酶（MLCK）。结果：模型组血清ALT/AST、内毒素、 MLCK表达水平均高于正常组, occludin表达低于模型组（ P＜0.01）;实验组血清ALT/AST、内毒素、 MLCK表达水平均低于模型组, occlu-din表达高于模型组（ P＜0.05）。结论：增强结肠粘膜上皮紧密连接功能,降低内毒素的吸收是温阳解毒化瘀颗粒抗肝衰竭的作用机制之一。     

解毒化瘀方对内毒素血症大鼠肝细胞线粒体氧化损伤的影响

目的:观察解毒化瘀方对内毒素血症( endotoxemia,ETM)大鼠肝细胞线粒体氧化损伤的影响.方法:将56只大鼠随机分为正常对照组及内毒素注射后6小时、12小时、24小时组和解毒化瘀方6小时、12小时、24小时组.眼眶取血,检测大鼠血清肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,同时取肝组织分离线粒体,测定其丙二醛(MDA)的含量及超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性.结果:在注射内毒素6小时后,大鼠血清TNF-α水平及线粒体MDA的含量升高,线粒体SOD、GSH-Px活性下降,随着时间的延长,TNF-α水平及MDA的含量进一步升高,SOD、GSH-Px活性明显下降.与对应的内毒素组比较,经解毒化瘀方处理后,TNF-α水平及MDA的含量均降低,SOD、GSH-Px活性均升高.结论:解毒化瘀方对内毒素刺激Kupffer细胞释放TNF-α有抑制作用,同时减少内源性自由基的生成,提高机体的抗氧化损伤能力,具有保护肝细胞的作用.     

解毒化瘀方对内毒素血症大鼠肝线粒体COX的影响

目的：观察解毒化瘀方对内毒素血症（endotoxemia,ETM）大鼠肝细胞线粒体COX的影响。方法：将56只大鼠随机分为正常对照组及内毒素（脂多糖LPS注射后）6小时、12小时、24小时组和解毒化瘀方6小时、12小时、24小时组。取肝组织分离线粒体,采用紫外分光光度计检测COX活性,采用RT—PCR法检测COXI、COXⅡ、COXⅢ的表达变化。结果：内毒素造模后6小时、12小时、24小时,肝线粒体内COX活性明显下降,与正常组相比有统计学意义（P〈0．01）,24小时降为最低。解毒化瘀方组与内毒素组相同时相点比较,解毒化瘀方12小时组、24小时组COX活性增加,两组比较差异有显著性意义（P〈0．05）。内毒素组6小时、12小时、24小时,COXⅠmRNA、COXⅡmRNA表达逐步下降,与正常组相比有统计学意义（P〈0．01）,COXⅢmRNA表达与正常组比较无统计学意义（P〉0．05）。解毒化瘀方24小时组COXⅠmRNA表达高于内毒素同时相组（P〈0．05）。结论：解毒化瘀方能提高COX活性,上调线粒体编码基因COX表达水平,这可能是改善能量代谢、保护肝细胞的一个作用机制。     

解毒化瘀方对内毒素血症大鼠肝细胞线粒体ATPase 6、ATPase 8基因表达的影响

目的：观察解毒化瘀方对内毒素血症大鼠肝细胞线粒体ATPase 6、ATPase 8基因表达的影响。方法：将大鼠分成正常对照、内毒素6、12、24小时和解毒化瘀方6、12、24小时组,检测肝线粒体Na^＋K^＋-ATP、Ca^＋Mg^＋-ATP酶活性和ATPase 6、ATPase 8 mRNA的表达。结果：内毒素各组Na^＋K^＋-ATP、Ca^＋Mg^＋-ATP酶活性和ATPase 6、ATPase 8 mRNA表达与正常组比明显下降;与对应的内毒素组比,解毒化瘀方12、24小时组Na^＋K^＋-ATP、Ca^＋Mg^＋-ATP酶活性显著增加,24小时组ATPase 6、ATPase 8表达显著提高。结论：内毒素能造成大鼠肝线粒体ATPase 6、ATPase 8基因表达下降,解毒化瘀方能干预内毒素血症大鼠ATPase 6、ATPase 8基因表达下调,具有保护肝细胞的作用。     

补肾解毒健脾冲剂对慢性乙肝病毒携带者HBeAg、HBVDNA和肝组织学的影响

目的：研讨验证补肾解毒健脾冲剂对慢性乙肝病毒携带者HBV DNA、HBeAg和肝组织学的作用。方法：筛选慢性乙肝病毒携带者200例,以1∶1的比例随机分为治疗组和对照组。治疗组用补肾解毒健脾冲剂治疗,对照组用安慰剂干预,周期为72周。结果：治疗72周后,治疗组患者血清HBV DNA下降﹥1 log10、﹥2 log10及﹥3 log10的患者比例明显高于对照组（P﹤0.005）。治疗组患者血清HBeAg阴转率及转换率明显高于对照组,两组比较差异有统计学意义（P﹤0.05）。治疗组患者治疗前后肝组织的炎症活动度分级及纤维化程度分期相比差异有统计学意义（P﹤0.05）,72周时,与对照组比较,差异有统计学意义（P﹤0.05）。结论：补肾解毒健脾冲剂对慢性乙肝病毒携带者的HBeAg血清学转换及HBV DNA阴转作用明显,对肝脏组织炎症活动度及纤维化程度也有改善作用,安全性好,未见明显副作用。     

肝衰竭肠源性内毒素血症的研究进展

肝衰竭的发生和发展与肠源性内毒素血症密切相关,本文从其生物特性、发病机制、诊断及防治等方面对肝衰竭肠源性内毒素血症作一综述。     

HBV相关慢加急性肝衰竭预后危险因素分析及解毒逐瘀汤灌肠的临床疗效

目的:评价解毒逐瘀方灌肠治疗HBV相关慢性急性肝衰竭(HBV-ACLF)的临床疗效。方法:236例HBV-ACLF患者,根据入组时是否采用解毒逐瘀方灌肠分为灌肠组55例和对照组181例。比较两组患者临床特征、灌肠治疗短期疗效及分析影响预后的因素。结果:Kaplan-Meier生存分析显示,灌肠组患者总生存期显著优于对照组(P=0.003),灌肠治疗可显著改善早期HBV-ACLF患者总生存期(P=0.021),但对中晚期HBV-ACLF患者总生存期影响差异无统计意义(P>0.05)。Cox回归分析显示年龄、肝性脑病、白细胞计数、凝血酶原活动度及总胆红素水平是影响HBV-ACLF患者总生存期的危险因素(P<0.01);肝肾综合征、白细胞计数、凝血酶原活动度及天门冬氨酸氨基转移酶水平为早期HBV-ACLF患者总生存期的危险因素(P<0.01)。结论:解毒逐瘀方灌肠可有效改善早期HBV-ACLF患者的总生存率。     

化瘀解毒健脾方联合穴位贴敷治疗乙型肝炎肝硬化结节的临床观察

目的:观察化瘀解毒健脾方联合穴位贴敷治疗乙型肝炎肝硬化结节(脾虚血瘀兼湿热证)的有效性及安全性。方法:将82例符合脾虚血瘀兼湿热证的乙型肝炎肝硬化结节患者随机分为治疗组和对照组,每组41例。对照组患者采用基础治疗(保肝、抗病毒等);治疗组患者在对照组治疗的基础上加用中药(化瘀解毒健脾方)内服及外敷(穴位贴敷)治疗,疗程6个月。观察治疗前后患者肝脏结节的MR影像学表现、中医症状评分、肝功能、T细胞亚群等指标的变化。结果:治疗后,治疗组及对照组患者的有效加稳定率分别为88.6%、68.03%,差异有统计学意义(χ^2=4.471,P=0.034),两组患者肝硬化结节最大直径治疗后均无明显变化。治疗后两组患者的CD4^+及CD8^+T淋巴细胞水平均较前提高,且治疗组患者改善更明显(P<0.05)。治疗后两组患者的TBil、ALT及AST水平下降,Alb水平较前上升(P<0.05),除ALT、AST两项指标外,治疗组患者肝功能改善情况更佳(P<0.05)。两组患者治疗后4项中医症状均较前下降;除胁肋疼痛治疗组患者无明显优势外(P>0.05),余3项均优于对照组(P<0.05)。治疗组及对照组患者总有效率分别为85.70%、65.90%,治疗组患者疗效更显著(χ^2=3.972,P=0.045)。结论:化瘀解毒健脾方联合穴位贴敷治疗能延缓或部分逆转乙型肝炎肝硬化结节的进展,改善中医症状和肝功能,调节患者免疫功能,无明显不良反应。