细胞周期蛋白激酶抑制剂研究现状

目前普遍观点认为,肿瘤产生的本质是细胞增殖的调节失控,而细胞的增殖要通过细胞周期来调控。细胞周期调控激酶复合物[cyclin dependent kinase（CDK）/Cyclin]活性的异常是导致细胞周期失控的根本原因。抑制CDK/Cyclin激酶的活性成为有效治疗肿瘤的策略之一。因此,针对CDK/Cyclin激酶抑制剂的研究是当前抗肿瘤药物开发的热点之一。本文对近年来CDK/cyclin抑制剂的种类及目前其在临床应用中出现的问题进行概述。     

Tob与细胞周期蛋白D1在喉癌细胞增殖过程中调控关系的研究

目的探讨Tob与细胞周期蛋白(cyclin)D1的调控关系及其对喉癌细胞增殖的影响。方法荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测74例喉癌及相应癌旁正常组织中Tob与cyclinD1的表达;应用U0126处理Hep2细胞,检测处理后细胞中磷酸化的Tob蛋白和Tob蛋白总量的改变,以及cyclinD1的表达量,并用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞毒性指数;RNA干扰(RNAi)抑制Hep2细胞中Tob蛋白的表达后,检测cyclinD1的表达改变,MTT法测定细胞毒性指数。结果Tob和cyclinD1分别在喉癌组织中表达下降和增加,且二者呈负相关;U0126处理后,磷酸化的Tob减少,Tob蛋白总量无明显改变,cyclinD1表达降低,且细胞增殖下降;siR-NA-Tob转染后可使磷酸化的Tob和Tob总量减少,而cyclinD1表达增加,细胞增殖亦增强。结论Tob和cy-clinD1都与喉癌的发生相关。Tob接受细胞外信号调节激酶(ERK1)的调控,并调节下游cyclinD1基因的表达,影响喉癌细胞的增殖能力,发挥其肿瘤抑制基因的作用。     

细胞周期蛋白D1在大肠癌组织中的表达及其意义

目的检测细胞周期蛋白D1蛋白在大肠癌组织中的表达情况,并探讨其与大肠癌临床病理参数的关系。方法应用Western blot和免疫组织化学EnVision法检测50例大肠癌患者与10例外伤患者肠黏膜组织中细胞周期蛋白D1的表达水平,采用t检验和χ2检验进行统计学分析。结果细胞周期蛋白D1在大肠癌组织中表达主要在细胞核,也有少量表达在细胞质,阳性表达率为80.0%,明显高与在正常口腔黏膜组织中的表达率10.0%,差异有统计学意义(P=0.000);且随着大肠癌组织分化程度的降低,细胞周期蛋白D1的表达显著增加(r=0.972,F=119.304,Pr=0.000);淋巴结转移的大肠癌组织细胞周期蛋白D1表达高于无转移组织,差异有统计学意义(χ2=7.762,P=0.005);细胞周期蛋白D1在不同分期的大肠癌组织中表达不同(χ2=16.328,P=0.003),且细胞周期蛋白D1的表达与大肠癌的分期有关(r=-0.400,F=11.077,Pr=0.002)。结论细胞周期蛋白D1的异常表达与大肠癌的发生、发展有密切的关系,可作为大肠癌治疗和预后的辅助性指标。     

细胞周期蛋白D1的表达与乳腺癌新辅助化疗关系的研究

目的 研究乳腺癌患者新辅助化疗前后CyclinD1蛋白表达与化疗的关系.方法 选择手术治疗的Ⅱb-Ⅲb期女性乳腺癌患者80例,分为CyclinD1阳性46例,阴性34例.术前先行蒽环类药物联合化疗方案或紫杉类药物化疗2-4个周期.新辅助化疗前后临床体检和B超测量肿瘤原发灶体积,评估近期疗效.结果 CyclinD1蛋白的阳性表达与患者的绝经情况、肿瘤的大小、腋窝淋巴结的受累情况、临床分期以及组织学分级无相关性(P＞0.05).CyclinD1表达阳性者,化疗疗效优于CyclinD1表达阴性者(P＜0.05).结论 CyclinD1蛋白表达阳性的患者,可能对化疗的敏感性增加,CyclinD1蛋白表达有助于预测新辅助化疗的效果并指导临床治疗.     

细胞周期蛋白D1与乳腺癌发生、发展及预后

肿瘤是一种细胞周期性疾病，细胞周期的失调在肿瘤发生、发展过程中起着关键性的作用。细胞周期蛋白（cyclins）是在从酵母到人类等真核生物中有广泛作用的分子，它与细胞周期蛋白依赖性激酶（cyclin—dependent kinases，CDKs）、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子（cyclin—dependent kinasae inlaibitors，CKIs）一起参与细胞周期调控。本文就cyclin D1在乳腺癌的发生、发展及预后中的研究作一综述。     

胃癌组织中窖蛋白-1与细胞周期素D1的表达及临床意义

目的 探讨窖蛋白-1(Caveolin-1)和细胞周期素D1(cyclin D1)在胃腺癌组织中的表达及其临床病理意义,为胃癌判断预后及多途径治疗提供有效的试验依据.方法 采用免疫组织化学方法,检测120例胃腺癌和30例正常胃组织中Caveolin-1和cyclin D1的表达,分析两者与临床病理特征的关系及相关性.结果 胃癌组织中Caveolin-1表达降低、cyclin D1表达增多,与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移和TNM分期相关,且两者的表达呈负相关(r=-0.297,P=0.001).结论 Caveolin-1和cyclin D1表达的负向协同可能与胃癌的发生、发展密切相关,两者可作为评价胃癌预后的指标,对胃癌的治疗有重要意义.     

细胞周期蛋白依赖性激酶及抑制因子与肿瘤

细胞周期指从细胞分裂结束开始,到下一次细胞分裂结束为止的过程。DNA合成和细胞分裂是细胞周期的两个主要事件。在进化过程中,细胞发展并建立了一系列的调控机制,以确保细胞周期各时相严格有序地进行。已发现的与细胞周期调控有关的分子可分为三大类:细胞周期蛋白(cyclin)、细     

钙粘附蛋白E与膀胱肿瘤侵袭和转移的关系

侵袭和转移是恶性肿瘤的特征性改变，也是构成肿瘤患者死亡的重要原因之一。近年研究表明，肿瘤细胞的粘附功能在肿瘤的侵袭和转移起着关键性的作用。近年来，随着多种细胞表面粘附分子的发现，以及对其研究的不断深入，有越     

胃癌组织中细胞周期素D1的表达与细胞周期的关系

目的 研究胃癌组织中细胞周期素D1( cyclin Dl)的表达,并分析其与细胞周期的关系.方法 采用Western blot和流式细胞术检测33例胃癌组织及其相应正常胃黏膜周期素D1表达和细胞周期分布.结果 胃癌组织周期素D1阳性率63.6％,高于正常胃黏膜的21.1％(P＜0.01).周期素D1阳性组胃癌G1/G0期细胞比例为(42.2±1.5)％,显著低于周期素D1阴性组的(64.3±4.8)％(P＜0.01);周期素D1阳性组胃癌S期细胞比例为(55.1±1.8)％,显著高于周期素D1阴性组的(34.5±4.9)％(P＜0.01).结论 胃癌细胞高表达细胞周期素D1预示癌细胞具有高增殖活性.周期素D1在胃癌发生、发展过程中可能起着重要的作用.     

前列腺癌中细胞周期蛋白的表达及其与肿瘤细胞增殖与凋亡的相关性研究

目的检测前列腺癌中细胞周期蛋白（Cyclins）、增殖细胞核抗原（PCNA）的表达和凋亡细胞密度，探讨Cyclins的表达与肿瘤细胞增殖与凋亡之间的关系。方法应用组织芯片技术，采用SP免疫组织化学方法检测62例前列腺癌组织中Cyclin A、B1、D1、E和PCNA的表达，应用原位脱氧核糖核酸末端转移酶（IST-DT）标记技术检测细胞凋亡的情况。结果62例前列腺癌组织分化愈差，PCNA评分愈高，细胞凋亡密度愈低；前列腺癌组织中Cyclins蛋白表达与凋亡细胞密度呈负相关（P〈0．01），与PCNA评分呈正相关（P〈0．01）；前列腺癌组织中凋亡细胞密度与PCNA评分呈负相关（P〈0．01）。结论Cyclins在前列腺癌组织中呈不同程度的高表达，缩短了细胞周期，使癌细胞增生活跃，凋亡减少，恶性表型增加。     

口腔鳞状细胞癌细胞周期蛋白D1的表达与意义

目的：分析口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达与临床美丽资料及预后的关系。方法：回顾性研究50例OSCC及10例正常口腔黏膜cyclin D1的表达情况，采用SABC法根据染色指标计数，并利用Cox比例风险模型进行生存多因素分析。结果：cyclinD1在正常口腔黏膜上皮呈现低水平表达，在OSCC组织中过表达。单因素生存分析表明cyclinD1的表达与生存期显相关，多因素Cox回归分析表明cyclinD1的表达可作为OSCC辅助性的预后指标。结论：cyclinD1的表达与OSCC的发生发展有密切关系，并与肿瘤的预后密切相关，可作为辅助性的预后观察指标。     

膀胱移行细胞癌EGF,EGFr含量的测定及意义

用125I标记分析法对25例膀胱移行细胞癌组织和14例正常膀胱组织进行了EGF、EGFr含量测定。表明EGF、EGFr在肿瘤组织中的含量明显高于癌旁正常对照组织（P＜0.05）。肿瘤组织各病理分级组之间EGF、EGFr含量随病理分级增高，有明显增高趋势，但经统计学处理，尚未观察到有显著性差异（P＞0．05）。25例病人术后随访，1年内肿瘤复发的5例患者中，4例肿瘤组织中有EGFr较高水平的表达，表明EGFr与肿瘤复发有一定联系     

肝细胞肝癌组织中Cyclin D1与HSP70的表达及意义

目的:探讨细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)与热休克蛋白70(hot shock protein70,HSP70)在肝细胞肝癌(HCC)中的表达及意义。方法:以石蜡包埋组织芯片为材料,分别检测145例HCC、78例肝硬化和16例来自尸检的正常肝组织标本的Cyclin D1和HSP70的表达。结果:Cyclin D1和HSP70在HCC中的平均表达指数分别为3.43±2.11和3.18±2.13,显著高于肝硬化组及正常对照组1.51±2.19和1.04±1.85及0和0.75±1.39,差异有统计学意义(q分别为6.29、4.13、6.62及7.39,均P<0.01)。Cyclin D1表达与HSP70表达呈正相关(r=0.219,P<0.01)。结论:Cyclin D1与HSP70过度表达,在HCC癌变中起重要作用。     

The TREK2 Channel Is Involved in the Proliferation of 253J Cell,a Human Bladder Carcinoma Cell

Bladder cancer is the seventh most common cancer in men that smoke, and the incidence of disease increases with age. The mechanism of occurrence has not yet been established. Potassium channels have been linked with cell proliferation. Some two-pore domain K⁺ channels (K2P), such as TASK3 and TREK1, have recently been shown to be overexpressed in cancer cells. Here we focused on the relationship between cell growth and the mechanosensitive K2P channel, TREK2, in the human bladder cancer cell line, 253J. We confirmed that TREK2 was expressed in bladder cancer cell lines by Western blot and quantitative real-time PCR. Using the patch-clamp technique, the mechanosensitive TREK2 channel was recorded in the presence of symmetrical 150 mM KCl solutions. In 253J cells, the TREK2 channel was activated by polyunsaturated fatty acids, intracellular acidosis at -60 mV and mechanical stretch at -40 mV or 40 mV. Furthermore, small interfering RNA (siRNA)-mediated TREK2 knockdown resulted in a slight depolarization from -19.9 mV±0.8 (n=116) to -8.5 mV±1.4 (n=74) and decreased proliferation of 253J cells, compared to negative control siRNA. 253J cells treated with TREK2 siRNA showed a significant increase in the expression of cell cycle boundary proteins p21 and p53 and also a remarkable decrease in protein expression of cyclins D1 and D3. Taken together, the TREK2 channel is present in bladder cancer cell lines and may, at least in part, contribute to cell cycle-dependent growth.     

聚维酮对人膀胱癌T24细胞的抑制作用研究

目的 探讨聚维酮(PVP)对人膀胱癌T24细胞的抑制作用。 方法 采用MTT法检测PVP对T24细胞生长的抑制作用，流式细胞仪检测PVP对T24细胞周期的影响和黏附作用。结果 2.5%PVP作用24和72 h，对人膀胱癌T24细胞生长抑制率分别为（15.11±2.36）%和（49.57±7.07）%；浓度为7.5%时24和72 h抑制率分别（35.42±5.55）%和（79.66±19.92）%。5.0%PVP作用24和72 h时，细胞G0/G1期所占比例分别为（74.17±0.91）%和（46.69±3.76）%；G2/M期细胞所占比例分别为（14.63±0.47）%和（41.88±1.50）%。PVP能提高抗鼠IgG1对T24细胞的黏附作用。结论 PVP能通过诱导人膀胱癌T24细胞周期阻滞于G2/M期和作为化疗药的黏附性载体而抑制癌细胞的生长增殖。     

环氧化酶-2和血管内皮生长因子在膀胱尿路上皮癌中的表达及临床意义

目的 探讨环氧化酶-2 (cyclooxygenase-2,COX-2)和血管内皮生长因子(vascular endothelil growth factor,VEGF)在膀胱尿路上皮癌(uroepithelium carcinoma of bladder,BUC)中的表达及临床意义.方法 应用免疫组化法检测65例BUC和20例正常膀胱黏膜组织中COX-2和VEGF的表达水平,并结合临床病理特征进行分析.结果 在BUC中,COX-2和VEGF蛋白阳性表达率分别为70.8%和64.6%,均显著高于正常膀胱黏膜组织(P<0.05);COX-2 和VEGF蛋白表达均与肿瘤病理分级、TNM临床分期、复发和转移相关(P<0.05);BUC中COX-2与VEGF表达呈正相关(r=0.64,P<0.05).结论 COX-2和VEGF可能参与了调控BUC的发生、发展过程,其高表达预示BUC预后不良.     

多层螺旋CT三维成像在膀胱癌诊断中的价值

目的：探讨多层螺旋CT（MSCT）三维成像技术及其在膀胱癌诊断中的价值。方法：对临床怀疑膀胱癌或已经膀胱镜确诊的膀胱癌27例，行多层螺旋CT容积扫描，经AW 4．2工作站后处理获得三维立体图像，结合轴位原始图像，对膀胱癌进行评价。结果：本组27例。其中病灶大于2cm 17例，小于2cm 10例（含小于1cm 3例）。多层螺旋CT扫描诊断结果与膀胱镜及手术病理结果一致。结论：多层螺旋CT膀胱三维后处理图像可提供更多的诊断信息，大大提高诊断质量和病变检出率，将成为诊断泌尿系疾病的一种新型无创伤影像学手段。     

组织蛋白酶D、表皮生长因子受体在膀胱移行细胞癌中的表达及其相关性

目的 探讨组织蛋白酶Ｄ（ＣＤ）、表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）的表达与膀胱移行细胞癌（ＢＴＣＣ）生物学行为间的关系及其发生浸润转移的机制。方法 应用免疫组化ＡＢＣ法检测３３例ＢＴＣＣ及１２例正常膀胱组织中ＣＤ、ＥＧＦＲ的表达。结果 正常膀胱移行细胞ＣＤ均呈弱阳性表达,ＢＴＣＣ组肿瘤细胞ＣＤ中／强阳性表达率显著高于正常对照组（Ｐ〈０．０５）,且在不同病理分级,临床分期,单发与多发,初发与复发组间均有显     

细胞周期素D1和磷酸酶基因蛋白在喉鳞状细胞癌中的表达及与临床病理特征的关系

目的探讨喉鳞状细胞癌（LSCC）组织中细胞周期素D1（CyclinD1）和磷酸酶基因（PTEN）蛋白的表达及其与临床病理特征的关系。方法应用免疫组化方法检测50例LSCC组织、20例不典型增生（AH）、15例声带息肉（VCP）和10例正常喉黏膜（NLM）组织中CyclinD,和PTEN蛋白表达水平,并结合临床病理特征进行分析。结果在LSCC中CyclinD、和PTEN表达阳性率分别为62．O％和48．0％。LSCC中CyclinD,表达阳性率高于AH、VCP和NLM,而PTEN表达阳性率低于AH、VCP和NLM（P〈0．05）。CyclinD,和PTEN表达与LSCC分级程度、临床分期和颈部淋巴结转移相关（P〈0．05）。LSCC中CyclinD,表达与PTEN表达呈显著负相关（r=-0．32,P〈0．05）。结论联合检测CyclinD。和PTEN蛋白的表达对提示LSCC恶性程度、临床进展和预测颈部淋巴结转移具有重要意义。     

RNA干扰靶向cyclin D1基因对K562细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响

目的 利用RNA干扰（RNAi）技术体外观测其对K562细胞cyclin D1基因的沉默效应及对细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法 通过壳聚糖介导转染K562细胞、Westernblot分析检测转染前后CyclinD1蛋白表达变化；集落形成实验检测细胞增殖能力；流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡率的影响。结果 构建靶向cyclin D1基因的shRNA表达质粒（pshRNA-419和pshtNA-575）经壳聚糖转染后．能显著抑制cyclin D1基因表达；抑制K562细胞增殖，影响其集落形成能力；影响K562细胞周期分布，诱导细胞凋亡。而设计一碱基突变的序列所构建的质粒并无上述生物学效应。结论 cyclin D1基因表达下调可抑制K562细胞生长，并诱导细胞凋亡。提示cyclin D1基因可能是白血病治疗的一个有效靶点的。