干扰素,高三尖形酯碱,阿糖胞苷对慢性粒细胞性白血病Ph^＋细胞生长影响的实

为观察干扰素;（ＩＦＮ）、高三尖杉酯碱（ＨＨＴ）及阿糖胞苷（Ａｒａ－ｃ）体外对慢性粒细胞性白血病（ＣＭＬ）Ｐｈ＾＋细胞的生长影响,探讨其临床治疗ＣＭＬ的有效组合方案。以药物作用２４小时液体培养及常规染色体分析法研究ＩＦＮ、ＨＨＴ及Ａｒａ－ｃ对１０例ＣＭＬ慢性期患者的骨髓中Ｐｈ＾＋细胞的生长影响。结果显示：ＩＦＮ、ＨＨＴ及Ａｒａ－ｃ对ＣＭＬ Ｐｈ＾＋细胞均有选择性杀伤作用,以ＩＦＮ作用最强。ＩＦＮ与ＨＨＴ及Ａｒａ－ｃ联合对Ｐｈ＾＋细胞的杀伤作用明显强于ＨＨＴ及Ａｒａ－ｃ单药运用（Ｐ〈０．０５）,而ＨＨＴ及Ａｒａ－ｃ有促ＩＦＮ清除Ｐｈ＾＋细胞趋势（Ｐ〉０．０５）。以上结果提示,ＩＦＮ、ＨＨＴ及Ａｒａ－ｃ皆可作为治疗ＣＭＬ慢性期患者的有效药物;两药或三药的联合应用有望获得比单药更好的效应。     

GM—CSF与阿糖胞苷,高三尖杉酯碱联合诱导HL—60细胞凋亡的？…

为了研究粒－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭＬ－ＣＳＦ）对化疗药物诱导ＨＬ－６０细胞凋亡的影响，运用吖啶橙（ＡＯ）／溴乙锭（ＥＢ）染色法和ＤＮＡ电泳法检测了ＧＭ－ＣＳＦ对阿糖胞苷（Ａｒａ－Ｃ）、高三尖杉酯碱（ＨＨＴ）诱导ＨＬ－６０细胞凋亡的影响。结果提示同步作用时对Ａｒａ－Ｃ／ＨＨＴ诱导的细胞凋亡无影响，但在非同步时（前或后）对Ａｒａ－Ｃ／ＨＨＴ诱导的ＨＬ－６０细胞凋亡有抑制作用。说明在化疗时运用ＧＭ－     

GM-CSF与阿糖胞苷、高三尖杉酯碱联合诱导HL-60细胞凋亡的实验研究

为了研究粒－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）对化疗药物诱导ＨＬ－６０细胞凋亡的影响，运用吖啶橙（ＡＯ）／溴乙锭（ＥＢ）染色法和ＤＮＡ电泳法检测了ＧＭ－ＣＳＦ对阿糖胞苷（Ａｒａ－Ｃ）、高三尖杉酯碱（ＨＨＴ）诱导ＨＬ－６０细胞凋亡的影响。结果提示同步作用时对Ａｒａ－Ｃ／ＨＨＴ诱导的细胞凋亡无影响，但在非同步时（前或后）对Ａｒａ－Ｃ／ＨＨＴ诱导的ＨＬ－６０细胞凋亡有抑制作用。说明在化疗时运用ＧＭ－ＣＳＦ须选择适合的时间     

联用重组的IL—3,GM—CSF对阿糖胞苷诱导的HL—60细胞凋亡的影响

为研究在阿糖胸苷（Ａｒａ－Ｃ）的作用下，基因重组的人白细胞介素３、粒单祖细胞集落因子对白血病细胞凋亡的影响，选用了ＨＬ－６０白血病细胞系，采用ＤＮＡ电泳、流式细胞仪检测、单克隆抗体Ｃ－ｍｙｃ、ｂｃｌ－２抗原表达的分析以及白血病细胞集落扔培养观察方法，观察了０－３６ｈ８ 时相亡率有其他指标的变化，表明Ａｒａ－Ｃ凋亡的作用随药物孵育时间的延长而逐渐增强，凋良率从０ｈ的１．５％升至３６ｈ后的３６．４％，     

急性白血病Bcl-2反义寡核苷酸基因治疗的实验研究

目的选用２０ｎｔＢｃｌ－２反义硫代磷酸寡核苷酸（Ａｓ－Ｐｓ－ＯＤＮ，ＡＳＰＯ），并以其正义寡核苷酸（ＳＰＯ）为对照做如下问题探讨：（１）普通剂量（５～２０μｍｏｌ）ＡＳＰＯ对ＨＬ６０细胞、正常及缺铁性贫血患者骨髓细胞及急性白血病病人骨髓细胞或外周白血病细胞（幼稚细胞≥８５％）的作用；（２）大剂量（１６０μｍｏｌ）正义或反义寡核苷酸对ＨＬ６０细胞作用的特点，并通过ＡＳＰＯ引起ＨＬ６０细胞Ｂｃｌ－２蛋白表达变化和ＳＰＯ对ＨＬ６０细胞毒性的变化，寻找可能的最佳效应剂量和最小毒性剂量；（３）ＡＳＰＯ联合化疗药物对ＨＬ６０细胞和原代急性白血病细胞的作用。方法台盼蓝拒染试验和克隆培养测定细胞的生长能力；免疫细胞化学染色和流式细胞仪检测Ｐ２６Ｂｃｌ－２蛋白表达，ＲＴ－ＰＣＲ法检测Ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ（Ｂｃｌ－２／β－ａｃｔｉｎ）相对水平；光、电镜下观察凋亡细胞形态，吖啶橙染色及流式细胞仪检测细胞凋亡率，ＤＮＡ提取及电泳观察凋亡细胞ＤＮＡ降解片段的形成；ＭＴＴ法检测ＰＳ－ＯＤＮ及化疗药物的细胞毒作用。结果（１）普通剂量的ＡＳＰＯ即能降低ＨＬ６０细胞及白血病细胞Ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的表达，并抑制ＨＬ６０细胞及１８／２０例白血病细     

急性髓系白血病H—ras,凋亡及多药耐药的研究

目的 研究急性髓系白血病（ＡＭＬ）Ｈ－ｒａｓ／Ｐ２１,抗凋亡基因、细胞凋亡与多药耐药基因的疗效的影响,并证实流式细胞术检测Ｐ－ｇｐ和逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ｍｄｒ－１ ｍＲＮＡ间的相关。方法 用ＦＣＭ检测８５例初始ＡＭＬ患者的Ｈ－ｒａｓ／Ｐ２１、ｂｃｌ－２,细胞凋亡和ｍｄｒ－ｌ产物Ｐ－ｇｐ的表达;用ＲＴ－ＰＣＲ检测其中４７例的ｍｄｒ－ｌ／ｍＲＮＡ。结果 Ｐ２１＾＋／Ｐ－ｇｐ＾＋者完全     

肝细胞癌和癌旁肝组织中c—myc,N—ras癌基因的表达

应用生物素标记的ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓｃＤＮＡ探讨对２１例肝细胞癌石蜡切片进行原位杂交研究，结果显示，在２３１例肝癌组织中９例呈ｃ－ｍｙｃ阳性（４２．９％），４例为Ｎ－ｒａｓ阳性（１９％），而癌旁肝组织中仅有４例呈ｃ－ｍｙｃ弱阳性，１例呈Ｎ－ｒａｓ弱阳性，Ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ，ｍＲＮＡ多分布于肝癌细胞浆中，显微分光光度计检测结果显示，肝癌细胞中ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ，ｍＲＮＡ阳性信号明显高于癌六     

不同剂量的HA方案治疗慢粒慢性期36例

为进一步探讨治疗慢粒白血病（ＣＧＬ）慢性期的新疗法，自１９９３年开始笔者试用不同剂量的高三尖杉酯碱（ＨＨＴ）和阿糖胞苷（Ａｒａ－ｃ）方案治疗ＣＧＬ各１８例，现报道如下。１资料与方法１．１临床资料治疗组１８例ＣＧＬ经临床、血象及骨髓象确诊，其中男１２例...     

反义核酸对白血病细胞化疗药物敏感性的影响

①目的 了解白血病化疗过程中药物的副作用和白血病细胞的抗药性。②方法 将人工合成的与Ｃ－ｍｙｂ基因起密码子２～７互补的反义寡聚脱氧核苷酸（ＡＳＯ）和化疗药物阿糖胞苷（Ａｒａ－ｃ）联合作用于急性粒细胞白血病（ＡＭＬ）细胞,观察其对细胞活力奏落形成和凋亡的影响。③结果 ＡＳＯ可明显提高白血病细胞对化疗药物的敏感性。④结论 ＡＳＯ和化疗药物联合应用可望成为根治白血病的一项新手段。     

肝细胞癌和癌旁肝组织中c－myc，N－ras癌基因的表达

应用生物素标记的ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓｃＤＮＡ探针对２１例肝细胞癌石蜡切片进行原位杂交研究，结果显示，在２１例肝癌组织中９例呈ｃ－ｍｙｃ阳性（４２．９％），４例为Ｎ－ｒａｓ阳性（１９％），而癌旁肝组织中仅有４例呈ｃ－ｍｙｃ弱阳性，１例呈Ｎ－ｒａｓ弱阳性．Ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ，ｍＲＮＡ多分布于肝癌细胞胞浆中，显微分光光度计检测结果显示，肝癌细胞中ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ，ｍＲＮＡ阳性信号明显高于癌旁肝细胞．作者认为，ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ癌基因在肝细胞癌中均可呈较高水平表达．二者参与了肝癌的恶性转化过程并在肝癌的发生过程中相互协同以维持肝癌的恶性表型．     

Experimental study on induction of apoptosis of leukemic cells by Boswellia carterii Birdw extractive]

The purpose of the study was to investigate the apoptosis of leukemic cells induced by Boswellia Carterii Birdw(BCB). The target leukemia cell line HL60 and bone marrow leukemic cells from 30 acute non-lymphocytic leukemic(ANLL) patients (3 M1 11 M2a 10 M3 1 M4a 5 M5b) were studied. Apoptosis was detected by morphological observation, DNA electrophoresis, percentage of DNA fragmentation test and flow cytometric cell cycle analysis. It is concluded that BCB can induce apoptosis in ANLL cells and HL60 cells.     

乳香提取物诱导急性非淋巴细胞性白血病细胞凋亡的实验研究

目的：研究乳香提取物诱导急性非淋巴细胞性白血病细胞凋亡作用。方法：应用形态学观察、ＤＮＡ电泳、ＤＮＡ片段百分率、流式细胞仪分析检测白血病细胞凋亡。结果：乳香提取物能诱导急性非淋巴性白血病细胞凋亡。结论：乳香提取物具有诱导急非淋白血病细胞凋亡作用     

雷公藤多甙对人急性髓性白血病细胞株HL-60的生长抑制及凋亡诱导作用

目的：探讨雷公藤多甙对人急性髓性白血病细胞株HL-60细胞的增殖及凋亡的影响。方法：应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法、荧光染色法、流式细胞仪（FCM）检测、DNA片段化分析等方法研究雷公藤多甙对HL-60细胞的影响。结果：雷公藤多甙能显著抑制白血病细胞的增殖,降低肿瘤细胞的存活率,其半数细胞抑制剂量( IC50 )为5.0 μg/ml,阻滞细胞周期于G2/M期（P<0.05）。雷公藤多甙实验组在形态学上可见明显凋亡细胞,且凋亡细胞百分率显著上升(P<0.05),凝胶电泳分析有DNA梯状条带出现。结论：雷公藤多甙能显著抑制人急性髓性白血病细胞株HL-60细胞的生长增殖并促进细胞凋亡。     

榄香烯体外诱导急性白血病细胞凋亡的研究

目的 探讨榄香烯诱导白血病细胞凋亡的作用及其机制。方法 采用MTT法、荧光显微镜、透射电镜、流式细胞术（FCM）、DNA电泳方法观察榄香烯对HL．60白血病细胞株的促凋亡作用，并进行细胞周期分析和采用RT-PCR、FCM检测bcl-2基因表达的变化。结果 榄香烯在体外诱导HL-60细胞凋亡，呈细胞凋亡典型的形态和生化特征，可见凋亡小体和梯形条带，并具有时间剂量依赖性，凋亡率最高达51．8％，在凋亡过程中细胞阻滞于S期，并检测到bcl-2基因表达下调。结论 榄香烯具有诱导细胞凋亡的作用，其机制可能与bcl-2基因表达下调有关。     

中药“拮新康”对白血病细胞凋亡的影响

为探讨中药“拮新康”对白血病细胞凋亡的影响。采用形态学及ＤＮＡ凝胶电泳方法观察其对白血病细胞株ＨＬ－６０及Ｋ５６２细胞凋亡的影响,结果示：①电镜观察可见凋亡细胞和凋亡小体,ＤＮＡ凝胶电泳可见典型的梯形带改变;②一定浓度范围内的拮新康经适当作用时间后可诱导白血病ＨＬ－６０,Ｋ５６２细胞凋亡,但诱导Ｋ５６２细胞凋亡所需时间较ＨＬ－６０长且剂量较大。提示拮新康可诱导白血病细胞凋亡,与剂量和时间有一定的关     

Antisense RNA of Survivin Gene Inhibits the Proliferation of Leukemia Cells and Sensitizes Leukemia Cell Line to Taxol-induced Apoptosis

The effects of survivin antisense RNA on proliferation of leukemia cell line HL-60 and taxol-induced chemotherapy was explored. A cDNA fragment of survivin obtained by RT-PCR was inserted into a plamid vector named pcDNA3 in the reverse direction. The vector encoding antisense RNA of survivin was confirmed by restriction enzyme digestion and DNA sequencing. The recombinant plasmid was delivered into HL-60 cells by electroporation. Growth curves were plotted based on cell counting. Trypan blue dye exclusion assay and MTT assay were carried out after the cells were incubated with taxol. DNA gel electrophoresis and nuclear staining were performed for cell apoptosis assay. The correct construction of the recombinant plasmid has been identified by restriction enzyme digestion and DNA sequencing. A stable down-regulation has been achieved in HL-60 SVVas cells after G418 selection. Compared to HL-60 cells, the proliferation of HL-60 SVVas cells was significantly inhibited （P〈0.05）. Cytotoxicity assays indicated that IC50 of HL-60 SVVas for taxol was relatively lower than controls （P〈0.01）. Apoptosis assays revealed that taxol-induced apoptosis was detected in HL-60 SVVas cells incubated with 50 ng/ml taxol for 12 h, while in HL-60 cells incubated with 100 ng/ml taxol for 72 h. It was suggested that Survivin antisense RNA could inhibit the proliferation of HL-60 cells and enhance taxol-induced apoptosis in HL-60 cells, which may lay an experimental foundation for further research on gene therapy in leukemia.     

二烯丙基二硫诱导HL-60细胞系凋亡及其与Caspase-3的关系

目的研究二烯丙基二硫（DADS）诱导白血病细胞凋亡及其机制。方法实验分对照组、DADS处理组、Ae—DEVD—CHO预处理组，进行体外细胞培养，采用形态学观察、MTT法、流式细胞术、DNA凝胶电泳等方法，进行细胞形态学观察、细胞增殖抑制作用研究，检测细胞凋亡率、Caspase-3活性以及DNALadder检测。结果DADS诱导前后，HL-60细胞形态学发生明显改变，DADS以剂量依赖的方式抑制细胞的生长，在DADS诱导HL-60细胞凋亡过程中有Caspase-3的活化，且与剂量和作用时间呈依赖关系，Caspase-3抑制剂Ac—DEVD—CHO能抑制DADS诱导HL-60细胞凋亡。结论DADS能有效地诱导HL-60细胞凋亡，其过程与Caspase-3活化相关。     

5-杂氮-2′-脱氧胞苷抗白

目的:研究甲基转移酶抑制荆5-杂氮-2′-脱氧胞苷(5-aza-2dC)对人急性髓系白血病细胞株HL-60生长、分化、凋亡的影响,初步探讨其抗白血病作用的可能机制.方法:不同浓度和时间的5-aza-2dC处理HL-60细胞后,采用MTT比色试验检测5-aza-2dC对HL-60细胞生长的影响;采用流式细胞术检测5-aza-2dC对HL-60细胞周期及分化的影响;采用Hochest33342染色和流式细胞术检测5-aza-2dC时HL-60细胞凋亡的影响;采用RT-PCR法检测药物处理对S100A8和S100A9基因mRNA表达水平的影响.结果:(1)5-aza-2dC呈剂量和时间依赖性地抑制HL-60细胞的生长,并使HL-60细胞周期阻滞于G2/M期;(2)5-aza-2dC处理使HL-60细胞的髓系分化抗原CD11b的表达增强,在低浓度(0.5 μmol/L)时其促分化作用最明显;(3)5-aza-2dC呈剂量和时间依赖性地诱导HL-60细胞凋亡,在高浓度(5.0μmol/L)时诱导凋亡的作用最明显;(4)5-aza-2dC能明显上调S100A8和S100A9基因mRNA的表达.结论:5-aza-2dC能抑制HL-60细胞生长,阻滞HL-60细胞于G2/M期,促进HL-60细胞分化和诱导其凋亡,并能上调S100A8和S100A9基因的表达,这些作用可能是5-aza-2dC抗急性髓系白血病的重要机制.     

氟伐他汀对HL-60细胞凋亡的诱导作用及其机制

目的：研究氟伐他汀（Flu）对人早幼粒细胞白血病HL-60细胞（HL-60细胞）凋亡的诱导作用及可能的机制,为其临床应用提供理论依据。方法：体外培养的HL-60细胞分为空白对照组、阳性对照组［全反式维甲酸（ATRA）,10  μmol·L^-1］、Flu组（20  μmol·L^-1）和Flu（20  μmol·L^-1）加［甲羟戊酸（Mev）,100  μmol·L^-1］组。HL-60细胞被处理后,应用ACETM分析系统检测caspase-3活性以确定细胞凋亡,Annexin V-FITC/PI双染后流式细胞仪分析细胞凋亡,DNA凝胶电泳评价DNA碎片阶梯状条带及透射电镜观察细胞的超微改变。结果：处理24 h后,Flu组HL-60细胞caspase-3活性（A405,30.68±1.57）显著高于对照组（12.05±2.15,P<0.01）,Flu加Mev组HL-60细胞caspase-3活性明显降低（14.62±1.36）,接近对照组细胞的水平（P>0.05）。Annexin V-FITC/PI双染后流式细胞仪检测
,与对照组比较,Flu组HL-60细胞凋亡率明显增加（4.24%  vs  10.76%,P<0.01）,Flu加Mev组HL-60细胞凋亡率降低到5.11%,与对照组细胞凋亡率(4.24%)比较差异无显著性（P>0.05）。处理72 h后Flu组HL-60细胞在琼脂糖凝胶电泳图上可观察到DNA碎片梯状条带。透射电镜观察显示：Flu组HL-60细胞胞体缩小,胞质浓缩,核染色质凝聚,呈块状聚集于核膜内侧,胞膜及细胞器完好。结论：Flu能诱导HL-60细胞凋亡,这种作用是Mev途径依赖的,提示抑制Mev途径可能是Flu诱导HL-60细胞凋亡的分子机制之一。     

Potentiation of arsenic trioxide-induced apoptosis by retinoic acid in retinoic acid sensitive and resistant HL-60 myeloid leukemia cells

Objective To study the effect of arsenic trioxide (As(2)O(3)) on non-APL acute myeloid leukemia (AML) cells and the interreactive effect between retinoic acid (RA) and As(2)O(3).Methods RA-sensitive (S) and RA-resistant (R) HL-60 non-APL AML cells were used as an in vitro model. Cell number and trypan blue were used to observe cell growth and survival. Apoptosis was determined by morphological changes, using a DNA laddering assay, terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT) fragment end labeling assay and a flow cytometry assay. Results As(2)O(3) induced apoptosis in both HL-60S and HL-60R cells, As(2)O(3)-induced apoptosis was both time- and concentration-dependent in a therapeutically-achievable As(2)O(3) range (0.25-4.0 μmol/L). Both all-trans retinoic acid (ATRA) and 9-cis retinoic acid (9cRA) potentiated As(2)O(3)-induced apoptosis, as measured by quantitative TdT fragment end labeling and flow cytometry assays in both HL-60S and HL-60R cells (P&lt;0 .05, for all RA+As(2)O(3) combinations vs As(2)O(3) alone in both sublines). Conclusions As(2)O(3) may inhibit the growth of non-APL AML cells by promoting programmed cell death. RA can potentiate As(2)O(3)-induced apoptosis even in RA-resistant HL-60 cells in which the classical ATRA response pathway is repressed owing to a homozygous inactivating mutation in the retinoic acid receptor α. As[2]O[3] can have clinical activity in non-APL cases of AML and the enhanced activity might result from the combined As(2)O(3)-RA therapy.