丹参酮ⅡA对LPS等诱导的肝细胞损伤及枯否细胞释放细胞因子的作用

目的研究丹参酮ⅡA(TSHⅡA)对枯否细胞(kupffercell,KC)释放细胞因子致肝细胞损伤的影响,以探讨丹参治疗慢性肝病的机制。方法分离肝细胞和KC并建立DGlaN、LPS损伤肝细胞模型,测定培养上清中ALT、MAO、LDHL、GSHST、MDA,LPS作用KC释放细胞因子同时放免法测定TNFα、IL6、IL8,HE染色观察细胞形态,免疫组化法观察TNFα、CD14、iNOS、eNOS在细胞内表达,双层小室培养观察LPS刺激KC释放细胞因子对肝细胞的损伤。结果TShⅡA能修复DGlaN和LPS诱导损伤的肝细胞,反映肝细胞损伤的酶水平和MDA明显低于DGlaN和LPS组,能明显抑制LPS诱导KC分泌TNFα、IL8,100ng·L-1升高IL6作用。TShⅡA尚能抑制KC表达TNFα、CD14、iNOS、eNOS,并有效地抑制KC释放过量的细胞因子损伤肝细胞,但对细胞因子所致肝细胞损伤无直接保护作用。结论TShⅡA抑制DGlaN、LPS损伤肝细胞作用机制与有效抑制KC释放过量的细胞因子参与肝损伤有关。     

丹参酮ⅡA与丹参酮ⅡA磺酸钠对HepG2细胞的抑制作用

目的 比较丹参酮ⅡA与丹参酮ⅡA磺酸钠对人肝癌HepG2细胞的体外增殖抑制作用.方法 采用改良MTT法测定丹参酮ⅡA与丹参酮ⅡA磺酸钠对HepG2的增殖抑制作用,倒置显微镜下观察两者对HepG2细胞的形态学影响.结果 3.4～27.2 μmol·L~(-1)丹参酮ⅡA对HepG2细胞有明显的增殖抑制作用,并呈时间和剂量依赖性,而对应各浓度丹参酮ⅡA磺酸钠对HepG2细胞均无增殖抑制作用.结论 丹参酮ⅡA对HepG2细胞具有显著增殖抑制作用,其与丹参酮ⅡA磺酸钠在抗肝癌的药效方面可能存在差异.     

丹参酮ⅡA对鼠肝星状细胞活化Ca2+效应的抑制作用

目的研究丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA)药物血清是否具有抑制肝星状细胞(HSCs)胞浆游离钙([Ca2+]i)增高的作用。方法健康SD大鼠32只,按随机数字表随机分为4组:肝纤维化模型丹参酮ⅡA组(8只)给予用精制橄榄油配制的40%CCl4溶液,9周后腹腔注射丹参酮ⅡA(15mg/kg)15d;肝纤维化模型对照组(8只)给予用精制橄榄油配制的40%CCl4溶液,9周后灌服生理盐水15d;正常大鼠丹参酮ⅡA组(8只)仅给予等量精制橄榄油9周,然后腹腔注射丹参酮ⅡA(15mg/kg)15d;正常对照组(8只)仅给予等量精制橄榄油,9周后灌服生理盐水15d。结束后,经下腔静脉取血并分离血清。采用盲法,用上述10%血清培养HSCs24h并负载好Fluo23PAM后使用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测HSCs[Ca2+]i。结果①经正常大鼠丹参酮ⅡA组及肝纤维化模型丹参酮ⅡA组的血清预处理的HSCs,其[Ca2+]i荧光强度相对值均明显低于肝纤维化模型对照组(P<0.05);且二者与正常对照组相比也均差异有统计学意义(P<0.05)。②经正常大鼠丹参酮ⅡA组及肝纤维化模型丹参酮ⅡA组血清预处理HSCs后加入AngⅡ,HSCs[Ca2+]i荧光强度变化百分数显著低于肝纤维化模型对照组(P<0.01)。结论丹参酮ⅡA能抑制肝星状细胞活化[Ca2+]i的升高,可能是其发挥抗肝纤维化作用的重要途径之一。     

丹参酮ⅡA对人胃癌细胞SGC7901抑制作用

目的研究丹参酮ⅡA(TanⅡA)对人胃癌细胞SGC7901抑制作用及其与环氧合酶-2(COX-2)表达及核因子-κB(NF-κB)信号通路的关系。方法 SGC7901细胞分为实验组极低、低、中、高剂量和对照组,极低、低、中、高剂量实验组用0.5,1.0,2.0,4.0μg·mL^-1 TanⅡA干预,对照组无任何药物处理。培养24,48,72 h后,用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况;以流式细胞仪检测细胞凋亡情况;以蛋白质印迹法检测细胞COX-2及NF-κB信号通路相关蛋白表达情况;以酶联免疫吸附(ELISA)法测定前列腺素E₂(PGE₂)水平。结果干预后72 h,极低、低、中、高剂量实验组增殖抑制率分别为(9.64±2.28)%,(25.09±1.88)%,(45.86±2.88)%,(55.68±3.22)%。培养72 h后,极低、低、中、高剂量实验组细胞凋亡率高于对照组,且随药物浓度的升高而增大(均P<0.05)。对照组与极低、低、中、高剂量实验组上清中PGE₂分别为(115.46±6....     

羟基红花黄色素A对血管内皮细胞损伤的保护作用

目的 观察羟基红花黄色素A（HSYA）对过氧化氢（H2O2）、羟自由基及肿瘤坏死因子α（TNF-α）致血管内皮细胞损伤的防护作用. 方法 体外培养人脐静脉血管内皮细胞株Eahy-926;建立H2O2、羟自由基及TNF-α致内皮细胞损伤的模型;噻唑蓝（MTT）比色法测定内皮细胞活力;烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）动力学法检测内皮细胞乳酸脱氢酶（LDH）漏出;双波长荧光光度法测定胞内游离钙浓度;酶联免疫吸附（ELISA）法检测血管内皮细胞黏附因子1（VCAM-1）的释放水平,观察HSYA对内皮细胞的影响. 结果 与模型组比较,HSYA处理组在25.0 μmol/L浓度时即可明显抑制H2O2诱导的内皮细胞活力下降（P＜0.05）,细胞存活率为82.0%;HSYA处理组对H2O2（200.0 μmol/L）致内皮细胞损伤LDH,漏出有抑制作用,在HSYA 500.0 μmol/L浓度时差异有统计学意义（P＜0.01）;HSYA处理组可明显抑制羟自由基H2O2/Fe^2＋体系致EAhy926细胞LDH的漏出,并呈现出明显的体外浓度依赖性;HSYA在浓度5.0 μmol/L时即可明显降低FE340/FE380值（P＜0.01）,提示HSYA可明显抑制H2O2（200.0 μmol/L）介导EAhy926胞内游离Ca^2＋浓度升高,并呈体外浓度依赖性;HSYA在浓度1、5、25 μmol/L时均可明显抑制TNF-α诱导的内皮细胞VCAM-1的高表达（与模型组比较P＜0.05或P＜0.01）,VCAM-1水平分别为（406±4）、（352±14）、（348±4）ng/L. 结论 HSYA有缓解血管内皮细胞氧化损伤的作用,并能抑制TNF-α诱导的炎性递质VCAM-1的高表达.     

丹参酮ⅡA对压力负荷增加的大鼠TNF-α表达的影响

目的观察TNF-α在压力负荷增加大鼠血清中的表达,并探讨其对心肌纤维化的作用机制。方法 32只成年雄性SD大鼠,随机分成四组(n=8),假手术组(Sham组)、模型组(Model组)、Tan II A组(Tan II A组,20 mg.kg-1.d-1)及阳性对照药物卡托普利组(Captopril组,100 mg.kg-1.d-1)。除Sham组外,其余3组大鼠均行肾上方腹主动脉缩窄术制备压力负荷增加心肌纤维化模型,Sham组仅分离腹主动脉而不结扎。术后4周成功造模并开始给药,疗程为4周。8周后检测左室重量指数、心肌组织病理学、心肌羟脯氨酸(HYP)含量、血清TNF-α蛋白的含量。结果与Model组比较,Tan II A组能明显抑制心肌纤维化大鼠心肌组织的病理改变,降低心肌肥厚指数、心肌羟脯氨酸含量以及血清TNF-α蛋白浓度(P0.01)。结论压力负荷增加大鼠血清TNF-α蛋白表达明显升高,表明促炎细胞因子TNF-α在压力负荷增加大鼠心肌纤维化中起着重要的作用;TanII A对心肌纤维化的保护作用可能部分与下调促炎细胞因子表达有关。     

丹酚酸B/丹参酮ⅡA不同配比对肿瘤坏死因子-α损伤大鼠心肌细胞的影响

目的　观察丹参的水溶性代表成分丹酚酸B(SalB)和脂溶性代表成分丹参酮ⅡA(TanⅡA)对肿瘤坏死因子 α(TNF α)损伤大鼠心肌细胞 (cardiomyocyte ,CMC)的影响 ,探讨两者不同配比的作用及特点。方法　采用CMC体外培养技术 ,建立TNF α的损伤模型 ,以细胞活力、细胞培养液中乳酸脱氢酶 (LDH)释放、超氧化物歧化酶 (SOD)活性及丙二醛 (MDA)含量的变化为评价指标 ,观察不同配比 (10∶0、8∶2、5∶5、2∶8、0∶10 )的SalB、TanⅡA对TNF α损伤的保护作用。结果　SalB明显提高细胞活力 ,8∶2组显著降低LDH释放水平 ,TanⅡA抗氧化的作用最好。结论　SalB、TanⅡA的各配比组均能改善细胞损伤 ,因其作用靶点不同 ,在不同情况下产生的效应亦不同     

丹参酮ⅡA对不同器官缺血再灌注损伤保护作用的研究进展

丹参酮ⅡA是从中药材丹参根茎中提取的脂溶性有效活性成分,具有清除氧自由基、稳定血管内皮功能、保护细胞和肌体免受脂质过氧化损伤等作用,可通过多种机制减轻缺血再灌注器官的损伤,从而对心、脑、肝、肺、肾等器官起到保护作用.本文综合近几年国内外的实验研究成果,对丹参酮ⅡA在缺血再灌注损伤的器官保护作用进行综述,为临床治疗局部缺血再灌注损伤提供依据.     

生姜油提取物对过氧化氢致大鼠肝细胞损伤的保护作用

目的 比较=三个不同生姜油提取物对过氧化氢(H2O2)损伤培养的大鼠肝细胞的保护作用.方法 用硅胶柱层析分离生姜油后获取A(主要为萜烯类)、B(姜油酮类)、C(姜酚类和姜烯酚类)三个不同提取部位溶液.6只SD大鼠分为6组,4组分别以生姜油A、B、C三个不同部位和联苯双酯制备含药血清干预,另2组给溶媒制备对照血清.利用H2O2体外诱导大鼠肝细胞损伤模型,检测肝细胞经含药血清处理后上清液中ALT、AST、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的变化.结果 生姜油A部位含药血清能显著降低ALT和AST水平,抑制MDA的产生,升高GSH-Px活性;B部位亦能明显降低ALT和AST水平,抑制MDA的产生,升高GSH-Px活性,但降低ALT作用不如A部位;C部位能降低ALT和AST水平,升高GSH-Px活性,但对MDA含量无明显影响且降低AST作用不如A部位.结论 不同成份的生姜油提取物含药血清对H2O2引起的大鼠肝细胞损伤均有不同程度的保护作用,但以A部位效果较好,其机制可能与其抗氧化作用有关.     

丹参酮ⅡA预防性给药对脑缺血/再灌注损伤炎症反应的影响

目的研究丹参酮ⅡA对大鼠脑缺血/再灌注损伤缺血区白细胞浸润及细胞粘附分子的影响。方法缺血前给予丹参酮ⅡA8,16,32mg·kg-1,灌胃7d,末次给药1h后制备大鼠大脑中动脉阻断短暂局灶性缺血模型。脑缺血2h再灌注24h后,用TTC染色法、伊文思兰法(EB)测定脑梗死范围及血脑屏障的损伤程度。分别用放免、酶免、Westernblot法测定大脑缺血区肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、髓过氧化物酶(MPO)的活性、血清白介素-8(IL-8)的含量及血管内皮粘附分子ICAM-1(细胞间粘附分子)、E-selectin(E-选择素)的表达水平。结果丹参酮ⅡA能缩小脑缺血/再灌注后脑梗死体积,减轻神经损伤症状,降低脑内TNF-α、MPO的活性及血清IL-8含量,同时,减少ICAM-1、E-selectin的表达(P<0·05或P<0·01vs模型组)。结论丹参酮ⅡA可通过抑制脑缺血/再灌注过程中炎症介质释放、表达,降低脑缺血/再灌注所致脑损伤。     

丹参酮ⅡA与丹参酮ⅡA磺酸钠对 K562细胞的增殖抑制与诱导分化作用

目的 比较丹参酮ⅡA与丹参酮ⅡA磺酸钠对人白血病K562细胞的体外增殖抑制与诱导分化作用.方法 采用改良MTT法测定两种药物对K562细胞的增殖抑制作用,倒置显微镜下观察其对K562细胞形态的影响,以硝基四氮唑蓝还原试验法,用流式细胞仪测定细胞膜表面的分化抗原CD33和CD11 b,观察丹参酮ⅡA与丹参酮ⅡA磺酸钠对K...     

丹参酮ⅡA对心血管系统保护作用及机制的研究进展

心血管疾病是全球发病率和致死率最高的疾病,而丹参酮ⅡA对心血管系统具有突出的保护作用.本文综述了丹参酮ⅡA对血管内皮、平滑肌、心肌以及心肌成纤维细胞的保护作用及可能机制,从抑制细胞增殖、改善氧化应激损伤、改善迁移黏附功能等具体机制方面进行阐释,以期为丹参酮ⅡA的合理应用提供依据.     

丹参酮ⅡA对大鼠创面愈合瘢痕增生的抑制作用

目的 探讨丹参酮ⅡA(TanⅡA)对大鼠创面愈合瘢痕增生的抑制作用。方法 取96只大鼠建立创面模型,随机分为模型组及TanⅡA低、中和高剂量组,其余24只为对照组。TanⅡA低、中和高剂量组分别按100、200和300 mg·kg^-1的剂量制成10 mL TanⅡA溶液腹腔注射,对照组、模型组腹腔注射DMSO 10 mL,连续注射14 d。比较各组大鼠创面组织瘢痕增生指数(HI)、单位面积的成纤维细胞数量(NA)、创面组织学、转化生长因子β₁(TGF-β₁)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-10(IL-10)、粒-单系祖细胞集落刺激因子(GM-CSF)mRNA及蛋白表达的差异。结果 HE染色显示,注射14 d后对照组创面组织上皮完整、无炎性细胞浸润,模型组可见成纤维细胞(FB)肿胀、排列紊乱,有大量炎性细胞浸润;TanⅡA不同剂量组注射3 d即可见FB增生,高剂量组最明显;注射14 d后,TanⅡA高剂量组FB轻微肿胀,有少量炎性细胞浸润。TanⅡA不同剂量组在各注射时间创面愈合面积、TGF-β₁     

白藜芦醇苷体外对过氧化氢导致小鼠肝细胞损伤的保护作用

目的　观察中药虎杖的活性成分白藜芦醇苷对过氧化氢 (H2 O2 )所致肝细胞损伤的影响。方法　用邻苯三酚自氧化法测过氧化物歧化酶 ,用硫代巴比妥酸 (TBA)法测丙二醛 (MDA)含量 ,用改良Hafeman方法测还原谷胱甘肽含量 ,用 5 ,5’ 二巯基 2 ,2’ 二硝基苯甲酸 (DTNB)法测谷胱甘肽过氧化物酶活性。谷丙转氨酶 (ALT)、一氧化氮 (NO)和一氧化氮合酶 (NOS)采用测试药盒测定。结果　白藜芦醇苷系列浓度 (0 0 5 ,0 1,0 5 ,1,2 ,4mmol·L-1)作用肝细胞后 ,能显著降低H2 O2 引起的NO和MDA水平升高 ,抑制NOS活性 ,升高SOD和GSH px活性 ,减少GSH消耗 ,明显减少了H2 O2 导致的肝细胞悬液中ALT浓度增高。结论　白藜芦醇苷在一定浓度范围内对H2 O2 所致的小鼠肝细胞氧化损伤具有保护作用。     

白背叶根对过氧化氢所致大鼠肝细胞损伤的保护作用

目的　探讨中药白背叶根对过氧化氢 (H2 O2 )所致大鼠肝细胞损伤的影响。方法　用终浓度为 2mmol·L-1的H2 O2 对大鼠肝细胞进行损伤 ,收集肝细胞悬液 ,测定丙氨酸转氨酶 (ALT)、丙二醛 (MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD)和一氧化氮 (NO)的含量。结果　白背叶根作用肝细胞后 ,能显著降低H2 O2 引起的NO和MDA水平的升高 ,并提高SOD活性 ,显著降低肝细胞悬液中ALT的浓度。结论　白背叶根对H2 O2 所致的大鼠肝细胞氧化损伤有保护作用。     

丹参酮ⅡA对低分化鼻咽癌细胞氯通道的激活作用

目的研究丹参酮ⅡA对低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)氯通道的激活作用并分析该通道的生理学和药理学特性。方法采用膜片钳全细胞记录技术记录丹参酮ⅡA激活的CNE-2Z细胞氯电流,细胞外高张刺激或灌流氯离子通道阻断剂,观察并分析电流的特性。结果细胞外灌流1nmol.L-1的丹参酮ⅡA激活CNE-2Z细胞产生一个具有明显外向优势的电流,该电流没有明显的电压依赖性和时间依赖性的失活,电流的翻转电位为(-5.9±0.2)mV,接近氯离子平衡电位。渗透性容积缩小可以完全抑制该电流,氯通道阻断剂NPPB可以部分抑制该电流。结论丹参酮ⅡA激活鼻咽癌细胞膜上的氯通道,诱导氯电流,该电流具有容积敏感性。     

肝细胞生长因子及α—干扰素对肝炎患者血清中TNF水平的影响

通过对２５例应用ＨＧＦ，１０例应用α－ＩＦＮ治疗的肝炎患者进行行用药前后ＴＮＦ水平的检测，了解其作用机理。结果显示：ＨＧＦ治疗后肝炎患者血浆中ＴＮＦ含量明显低于治疗前，α－ＩＦＮ治疗后患者血清中ＴＮＦ水平较用药前明显升高。     

丹参酮ⅡA对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察丹参酮ⅡA对局灶性脑缺血再灌注大鼠的保护作用。方法采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,缺血前大鼠灌胃给药7天,观察丹参酮ⅡA对手术大鼠的行为学得分、脑含水量、脑梗塞率、脑指数、血小板聚集率、血液流变性、血浆血栓素、前列环素和内皮素的影响。结果丹参酮ⅡA30mg/kg、15mg/kg可明显降低手术大鼠的行为学得分,降低脑含水量和脑梗塞率,可以改善试验动物的血液流变性,降低血小板聚集率。结论丹参酮ⅡA对局灶性脑缺血再灌注大鼠具有保护作用。     

丹参酮ⅡA静脉乳剂对异丙肾上腺素致大鼠急性心肌缺血损伤的保护作用

目的研究丹参酮ⅡA静脉乳剂对异丙肾上腺素致大鼠急性心肌缺血的保护作用。方法采用异丙肾上腺素造成大鼠急性心肌缺血模型,以心电图∑ST变化,血清CK、LDH,心肌匀浆SOD、MDA、GSH-PX为指标,研究丹参酮ⅡA静脉注射乳剂对大鼠急性心肌缺血的保护作用。结果丹参酮ⅡA静脉乳剂5.6、2.8、1.4 mg/kg组均能明显抑制心肌缺血大鼠ST段的偏移,并且能够显著降低心肌缺血大鼠血清中CK和LDH的释放,降低心肌匀浆中MDA的水平(P<0.05),保护心肌SOD和GSH-PX的活性。结论丹参酮ⅡA静脉乳剂对大鼠急性心肌缺血具有显著的保护作用,其机制与抑制脂质过氧化和改善心肌能量代谢有关。     

雷公藤多苷联合丹参酮ⅡA对佐剂性关节炎大鼠外周血TNF—α、vWF表达的影响

目的研究雷公藤多苷联合丹参酮ⅡA（TG＋TanⅡA）对佐剂性关节炎（AA）大鼠外周血肿瘤坏死因子仪（TNF-α）、血管假性血友病因子（vWF）表达的影响。方法建立AA大鼠模型并随机分组,各组连续给药3周后处死大鼠。酶联免疫吸附法（ELISA）检测外周血TNF-α、vWF含量。结果模型组、TanⅡA组TNF-α水平明显高于空白对照组,TG＋TanⅡA组水平最低,MTX组、TG组与空白对照组无差异;模型组vWF水平最高,与空白对照组、MTX组、TG组、TanⅡA组差异具有统计学意义,TG＋TanⅡA组水平最低。结论TG＋TanⅡA可能通过抑制炎性因子的表达,改善RA心血管损伤。