复方斑蝥注射液联合奥沙利铂对肝癌HepG2细胞增殖与凋亡的影响

目的：探讨复方斑蝥注射液（CCI）、奥沙利铂（L-OHP）单药及联合作用对人肝癌HepG2细胞株的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法：MTT法观察不同浓度复方斑蝥注射液、奥沙利铂单药及联合应用对HepG2细胞生长的抑制作用;采用流式细胞仪检测上述药物单独或联合应用对HepG2细胞的凋亡率的影响。结果：复方斑蝥注射液、奥沙利铂单药及联合作用对HepG2细胞的抑制作用均呈明显的剂量依赖关系。均可诱导细胞凋亡,联用时有协同作用。结论：复方斑蝥注射液、奥沙利铂能够抑制人肝癌HepG2细胞增殖并诱导凋亡。两药联合有协同作用。     

复方斑蝥注射液联合奥沙利铂对肝癌HepG2细胞增殖与凋亡的影响

目的:探讨复方斑蝥注射液(CCI)、奥沙利铂(L-OHP)单药及联合作用对人肝癌HepG2细胞株的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法:MTT法观察不同浓度复方斑蝥注射液、奥沙利铂单药及联合应用对HepG2细胞生长的抑制作用;采用流式细胞仪检测上述药物单独或联合应用对HepG2细胞的凋亡率的影响。结果:复方斑蝥注射液、奥沙利铂单药及联合作用对HepG2细胞的抑制作用均呈明显的剂量依赖关系。均可诱导细胞凋亡,联用时有协同作用。结论:复方斑蝥注射液、奥沙利铂能够抑制人肝癌HepG2细胞增殖并诱导凋亡。两药联合有协同作用。     

5-脂氧合酶抑制剂对人肝癌细胞株HepG2增殖和凋亡的影响

目的：研究5-脂氧合酶（5-lipoxygenase,5-Lox）在人肝癌细胞株HepG2中的表达,以及5-Lox抑制剂对人肝癌细胞株HepG2增殖、凋亡的影响。方法：应用免疫细胞化学染色及RT-PCR分别检测5-Lox的蛋白和mRNA在人肝癌细胞株HepG2中的表达,采用MTT法及流式细胞术检测5-Lox抑制剂齐留通（Zileuton）对人肝癌细胞株HepG2增殖、凋亡的影响。结果：5-Lox蛋白表达于肝癌细胞浆,局灶细胞核膜亦见阳性染色,RT-PCR可检测到肝癌细胞5-Lox的mRNA的表达。人肝癌细胞株HepG2给予不同浓度的齐留通处理24小时后,细胞存活率呈剂量依赖性下降;流式细胞术检测可见细胞凋亡率呈剂量依赖性升高。结论：人肝癌细胞株HepG2存在5-Lox的表达,5-Lox抑制剂齐留通可抑制人肝癌细胞株HepG2的增殖,诱导细胞凋亡。     

5-脂氧合酶抑制剂对人肝癌细胞株HepG2增殖和凋亡的影响

目的:研究5-脂氧合酶(5-lipoxygenase,5-Lox)在人肝癌细胞株HepG2中的表达,以及5-Lox抑制剂对人肝癌细胞株HepG2增殖、凋亡的影响。方法:应用免疫细胞化学染色及RT-PCR分别检测5-Lox的蛋白和mRNA在人肝癌细胞株HepG2中的表达,采用MTT法及流式细胞术检测5-Lox抑制剂齐留通(Zileuton)对人肝癌细胞株HepG2增殖、凋亡的影响。结果:5-Lox蛋白表达于肝癌细胞浆,局灶细胞核膜亦见阳性染色,RT-PCR可检测到肝癌细胞5-Lox的mRNA的表达。人肝癌细胞株HepG2给予不同浓度的齐留通处理24小时后,细胞存活率呈剂量依赖性下降;流式细胞术检测可见细胞凋亡率呈剂量依赖性升高。结论:人肝癌细胞株HepG2存在5-Lox的表达,5-Lox抑制剂齐留通可抑制人肝癌细胞株HepG2的增殖,诱导细胞凋亡。     

拓扑替康诱导人肝癌细胞株HepG2凋亡的初步研究

背景与目的:拓扑替康(topotecan,TPT)是新一代水溶性、半合成喜树碱类衍生物,系拓扑异构酶I抑制剂、细胞周期特异性抗肿瘤药物;肝癌为我国发病率居第三位的恶性肿瘤,现有治疗方法的临床疗效均不理想。本文研究TPT诱导肝癌细胞株HepG2凋亡的作用,及其细胞毒作用。方法:运用MTT、HE染色、透射电镜、流式细胞仪、免疫组化技术等实验方法,对TPT杀伤HepG2细胞的程度进行了测定并观察了其诱导凋亡的过程。结果:TPT能通过诱导HepG2细胞凋亡的方式,杀伤HepG2细胞,TPT对HepG2细胞具有较强的体外杀伤作用,并存在明显的剂量、时间依赖关系,IC50约为95μg/L。TPT将HepG2细胞阻断在S期,并进一步诱导其凋亡。凋亡形态特征表现为典型的间期凋亡:细胞核染色质固缩,呈新月形聚集于核膜周缘,胞质浓缩,出现空泡。在TPT诱导HepG2细胞凋亡的过程中,不影响bcl-2基因蛋白正常表达(P>0.05)。结论:TPT能诱导HepG2细胞凋亡,细胞毒性较强。     

健择联合电子线照射对人胰腺癌裸鼠移植瘤凋亡的影响

目的探讨健择联合电子线外照射对人胰腺癌细胞株(panc-1)裸鼠移植瘤细胞凋亡的作用。方法建立人胰腺癌panc-1裸鼠移植瘤模型,36只裸鼠随机分为6组：对照组（A组）、单纯放疗组(B组)、健择25mg/kg组(C组)、健择50 mg/kg组(D组)、联合治疗1组（E组）、联合治疗2组（F组）。A组裸鼠尾静脉注射0.9%氯化钠溶液,B组荷瘤鼠背部肿瘤局部以6MeV电子线照射。C、D组分别以25 mg/kg、50 mg/kg健择裸鼠尾静脉注射,E、F组分别以25、50 mg/kg健择裸鼠尾静脉注射加背部肿瘤6MeV电子线照射。采用TUNEL法检测凋亡指数（AI）,免疫组织化学检测凋亡抑制蛋白Bcl-2、凋亡相关蛋白Bax的表达情况。结果干预组较对照组肿瘤细胞凋亡明显增加,干预组各组之间凋亡指数比较差异有统计学意义（P＜0.05）。免疫组织化学结果示：与对照组比较,干预各组均可不同程度下调Bcl-2蛋白表达,Bax蛋白表达上调（P＜0.05）,联合治疗组与其他各组比较,Bcl-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达升高,差异均有统计学意义（P ＜0.05）。结论健择联合电子线对人胰腺癌移植瘤的凋亡有促进作用。     

得力生注射液联合肝动脉化疗栓塞治疗原发性肝癌的临床研究

目的评价得力生注射液联合经肝动脉化疗栓塞术(transcatheterarterialchemoembolization,TACE)治疗原发性肝癌(hepatocelluarcarcinoma,HCC)患者的临床效果及不良反应。方法选择无手术指征的HCC患者62例,随机分为试验组(得力生联合TACE)32例和对照组(单纯TACE)30例,选用FAP肝动脉化疗方案,试验组加用得力生注射液50ml/d静滴,15d~20d。治疗2个周期后观测患者的近期疗效、细胞免疫功能、生活质量及不良反应。结果试验组有效率为56.3%(18/32),对照组为43.3%(13/30),两组之间差异无统计学意义,(P>0.05)。试验组较对照组生活质量(KPS评分)明显提高,(P<0.05)。试验组细胞免疫功能提高,其中NK细胞升高明显,差异有统计学意义,(P<0.05)。试验组化疗毒副反应减轻,与对照组比较无统计学意义,(P>0.05)。结论得力生注射液联合TACE治疗能提高HCC患生存质量,增强患者的细胞免疫功能。     

得力生注射液联合化疗治疗广泛期小细胞肺癌临床研究

目的通过前瞻性研究,与单纯化疗组比较、观察化疗与得力生联合治疗广泛期小细胞肺癌(SCLC)的临床疗效。方法将76例广泛期SCLC住院患者随机分为单纯化疗组和得力生加化疗组(联合治疗组),分别给予相应治疗,观察各组近期疗效、生活质量、远期生存等指标。结果联合治疗组肿瘤缓解率为66.7%,单纯化疗组为43.2%;生活质量改善的患者联合治疗组高于单纯化疗组;联合治疗组中的化疗毒副反应明显轻于单纯化疗组;单纯化疗组中位生存期为13个月,联合治疗组为18个月,两组两年生存率分别为5.41%和7.69%,联合治疗组略高于单纯化疗组。结论得力生注射液联合化疗能够减轻广泛期小细胞肺癌患者的化疗副作用,改善生活质量,有利于患者化疗疗程的顺利完成。     

Bestrophin 3高表达促进人肝癌细胞株HepG2的凋亡

目的：研究Bestrophin 3高表达对人肝癌细胞株HepG2凋亡能力的影响,并初步探讨其作用机制。 方法： 将Bestrophin 3腺病毒以感染复数(multiplicity of infection, MOI)10、20、40、80转染HepG2细胞株,Western blotting检测转染细胞内Bestrophin 3的表达,确定最佳MOI值。设对照组（未转染病毒）、LacZ组（转染携带LacZ的对照腺病毒载体）、Ad-Best3组（以最佳MOI值转染Bestrophin 3腺病毒）,CCK-8法和流式细胞术分别检测Bestrophin 3过表达对HepG2细胞增殖、凋亡的影响,Western blotting检测Bestrophin 3过表达对HepG2细胞内Bcl-2、Bax以及细胞色素C表达的影响,JC-1染色观察Bestrophin 3过表达对HepG2细胞线粒体膜电位的影响。 结果： Bestrophin 3腺病毒转染HepG2细胞的最佳MOI为40,转染后细胞过表达Bestrophin 3。Ad-Best3组的细胞存活率显著低于对照组和LacZ组\[(79.37±1.76)% vs (98.67±3.02)%、(99.67±325)%,均P<0.05\],而其细胞凋亡率显著升高\[（29.47±2.37）% vs （5.47±0.37）%,（4.95±0.44）%,均P<0.05\]。 Ad-Best3组HepG2细胞内Bcl-2的蛋白表达显著减少,Bax的蛋白表达显著增加,导致Bcl-2/Bax比值显著降低（0.32±0047 vs 1.00±000, P<0.05）;Ad-Best3组HepG2细胞的线粒体膜电位显著降低 \[(0.64±0.09)% vs （1.00±0.00)%, P<0.05\],同时线粒体中细胞色素C明显减少（P<0.05）,而细胞质中细胞色素C水平显著升高（P<0.05）。结论：过表达Bestrophin 3可能通过促使线粒体释放细胞色素C从而促进肝癌细胞株HepG2的凋亡。     

得力生注射液配合肝动脉介入治疗原发性肝癌的临床疗效

目的:观察得力生注射液配合肝动脉灌注栓塞治疗原发性肝癌的疗效。方法:33例住院原发性肝癌患者,随机分为治疗组和对照组,治疗组17例,采用得力生注射液配合介入化疗。对照组单用介入化疗,化疗方案相同。得力生注射液给药方案:介入前3天开始得力生注射液50ml/d静脉注射连用3天,然后用EADM60mg、5-Fu1.0,并行MMC20mg、碘化油及明胶碎屑栓塞,同时术后每天静点得力生注射液1次,50ml/次,4周1疗程,28天后重复前方案,共用2疗程。结果:治疗组肿瘤缩小明显优于对照组。治疗组治疗后与治疗前相比CD3、CD4、CD4/CD8均明显升高,且两组治疗后上述指标相比差异显著。治疗组血常规始终维持在正常范围。对照组2例WBC低于3.0×109/L时使用升白药物。结论:得力生注射液与化疗药物同时经肝动脉灌注栓塞治疗原发性肝癌,可明显提高疗效,增强免疫力,减轻化疗副作用,改善患者生活质量。     

番茄红素对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究番茄红素(Lycopene,LP)对人肝癌HepG2细胞生长的影响并初探其机制。方法取对数生长期HepG2细胞设空白对照组、LP(5 μg/mL)组、LP(10 μg/mL)组、LP(20 μg/mL)组和顺铂(40 μg/mL)组,每组设10个复孔;各组分别给药干预48 h后,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖抑制率,流式细胞术(FCM)检测细胞周期和细胞凋亡状况,RT-PCR法检测Bax mRNA和Bcl-2 mRNA表达,Western blot法检测Caspase-3蛋白表达。结果 与空白对照组比较,经LP(10 μg/mL、20 μg/mL)或顺铂40 μg/mL干预48 h能够显著提高HepG2细胞增殖抑制率,延长细胞周期中G₀/G₁期而缩短G₂/M期,提高细胞凋亡率,上调促凋亡Bax mRNA表达并下调抑凋亡Bcl-2 mRNA表达,提高Bax/Bcl-2比值,上调Caspase-3蛋白表达,LP上述作用具有一定的剂量依赖性。结论 LP具有抑制人肝癌HepG2细胞增殖并促进其凋亡的作用,其机制可能与LP干预细胞周期分布和调节凋亡相关基因蛋白表达有关。     

丹皮酚联合阿霉素对HepG2细胞株的增殖抑制作用

目的 探讨丹皮酚联合阿霉素对HepG2细胞株的增殖抑制作用。方法 采用MTT法测定丹皮酚、阿霉素及丹皮酚联合阿霉素体外对HepG2细胞的增殖抑制率;采用两药相互作用指数评价两药相互作用性质;流式细胞仪检测细胞凋亡;原位细胞凋亡检测法观察细胞凋亡形态学变化;Western blot分析Bcl 2、Bax变化。结果 不同浓度的丹皮酚、阿霉素及联合用药对HepG2细胞株均有增殖抑制作用,呈剂量依赖性。丹皮酚在31.25mg/L分别与阿霉素在0.16、0.31mg/L联合应用时协同作用最为显著（CDI<0.7）。流式细胞仪检测联合用药组凋亡率(37%)明显高于对照组和单独用药组。TUNEL染色可见典型的凋亡形态学特征。Western blot分析表明单独用药和联合用药组Bcl 2表达降低,Bax表达上调,Bcl 2/Bax比值降低。结论 一定浓度的丹皮酚能增强阿霉素在体外对HepG2细胞株的增殖抑制作用,其作用机制为通过降低Bcl 2表达,上调Bax表达,使得Bcl 2/Bax比值降低诱导凋亡实现的。     

得力生注射液联合FOLFOX4方案治疗晚期消化道肿瘤临床观察

目的 观察得力生注射液联合FOLF0X4方案治疗晚期消化道肿瘤的临床疗效.方法 60例晚期消化道肿瘤随机分为得力生注射液联合FOLFOX4方案治疗组(试验组)和单用FOLFOX4方案治疗组(对照组),每组30例.观察近期临床疗效、生活质量、免疫指标、毒副反应等.结果 试验组总有效率和生活质量改善率分别为56.7%、70.0%,对照组分别为40.0%、46.7%,比较差异有统计学意义(P<0.05).试验组化疗毒副反应较轻,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 得力生注射液联合FOLFOX4方案治疗晚期消化道肿瘤可显著提高疗效,改善患者的生活质量,增强机体免疫功能,降低化疗药物的毒副反应.     

得力生注射液联合射频消融治疗晚期肝癌的临床观察

目的:探讨得力生注射液联合射频方案及单纯射频治疗肝癌的临床疗效。方法:48例晚期肝癌患者根据分期状况相同或相近随机分为A、B两组。两组病人均采用射频方法消融肝脏肿瘤,A组病人射频治疗后静脉输入得力生注射液4支/日,共用2周。结果:A组总缓解率为5 3.4%,B组总缓解率为41.7%;A组中位生存期为8.6个月,B组中位生存期为6.3个月,两组无显著性差异,但A组病人的临床受益率明显高于B组(P<0.05),两组均无明显副作用。A组病人的原位复发率明显低于B组(P<0.05)。结论:得力生注射液联合射频治疗肝癌可以取得满意的疗效,并且能提高病人的生活质量,减少肿瘤复发。     

得力生注射液联合化疗治疗晚期结肠癌的疗效观察

目的：探讨得力生注射液（DLS）联合化疗治疗晚期结肠癌的临床疗效。方法：63例晚期消化道肿瘤患者随机分为化疗组（对照组）和化疗联合得力生组（观察组）,其中观察组30例,奥沙利铂85rag／m。ivgttdl;亚叶酸钙（CF）200mg／m2 ivgttdl-2;氟尿嘧啶（5-FU）400mg／m。ivdl-2;氟尿嘧啶（5-FU）600mg／m2 CIV22hd1-2 14天为1周期。化疗当天开始予DLS20-40mlivgttd1-18。对照组33例,化疗方案同治疗组。结果：对照组总有效率和生活质量改善率分别为33．3％和42．4％,观察组分别为63．3％和66．7％,两组比较有显著性差异（P〈0．05）;对照组WBC减少为74．8％,高于观察组的51．4％;对照组治疗后CD3＋、CD4＋、CD4＋／CD8＋降低,CD8＋增高,治疗前后对比有显著性差异（P〈0．01）;而观察组治疗前后无显著性差异。结论：得力生联合化疗可显著提高化疗疗效,增强免疫力,减轻化疗不良反应,提高患者生活质量和化疗依从性。     

得力生注射液联合化疗治疗晚期结肠癌的疗效观察

目的:探讨得力生注射液(DLS)联合化疗治疗晚期结肠癌的临床疗效.方法:63例晚期消化道肿瘤患者随机分为化疗组(对照组)和化疗联合得力生组(观察组),其中观察组30例,奥沙利铂85mg/m2 ivgtt d1;亚叶酸钙(CF) 200mg/m2 ivgtt d1-2;氟尿嘧啶(5-FU)400mg/m2 iv d1-2;氟尿嘧啶(5-FU)600mg/m2 CIV 22h d1-2,14天为1周期.化疗当天开始予DLS 20-40ml ivgtt d1-14.对照组33例,化疗方案同治疗组.结果:对照组总有效率和生活质量改善率分别为33.3%和42.4%,观察组分别为63.3%和66.7%,两组比较有显著性差异(P<0.05);对照组WBC减少为74.8%,高于观察组的51.4%;对照组治疗后CD3+、CD4+、CD4+/ CD8+降低,CD8+增高,治疗前后对比有显著性差异(P<0.01);而观察组治疗前后无显著性差异.结论:得力生联合化疗可显著提高化疗疗效,增强免疫力,减轻化疗不良反应,提高患者生活质量和化疗依从性.     

得力生注射液联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌的临床观察

目的观察得力生注射液与化疗联合应用治疗晚期非小细胞肺癌的近期疗效及毒副反应.方法将62例晚期非小细胞肺癌病人随机分为治疗组和对照组,治疗组用得力生注射液＋NP方案治疗,对照组用NP方案治疗.结果治疗组有效率为50%,对照组有效率为43.75%,两组对比差异无显著意义（P〉0.05）;治疗组生活质量增加者占53.13%,对照组增加者占37.5%,治疗组较对照组生活质量有明显的提高（P〈0.05）.消化道反应治疗组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ度占50%（16/32）,对照组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ度占80%（24/30）,差异有显著意义（P〈0.01）.结论得力生注射液对晚期非小细胞肺癌有效,对改善临床症状、减轻化疗副反应和提高生活质量方面均有较好作用.     

顺铂、得力生对胰腺癌细胞株生长和凋亡的作用

目的:体外研究胰腺癌细胞株p1,p2,p3,p4,p7的Survivin、Bc l-2和p53蛋白的表达情况,顺铂、中药得力生对胰腺癌细胞株的细胞增殖和凋亡的作用,研究细胞毒性药物与中药对胰腺癌细胞的联合作用,以及相关蛋白表达对上述作用的影响。方法:免疫组化检测上述蛋白在细胞中的表达;MTT方法检测细胞的增殖;TUNEL原位检测细胞的凋亡。结果:5种细胞株中均有不同程度Survivin和p53蛋白的表达,均无Bc l-2的表达。Survivin在p1、p3表达最强,在p2表达最弱;p3主要表达在细胞浆,其余4种细胞均表达在细胞核及细胞浆;p53在p2和p4细胞中表达率最高,为60%,但是在p2细胞中表达较弱。顺铂、中药得力生对胰腺癌细胞株的细胞增殖均具有抑制作用,且有协同趋势;Survivin和p53的表达程度与顺铂对胰腺癌细胞增殖的作用呈一定的反向关系;顺铂和中药得力生诱导下均检测到凋亡细胞。结论:Survivin和p53的表达可能调节胰腺癌细胞对顺铂的药物敏感性;中西医结合治疗胰腺癌可能具有很好的应用前景。     

沉默SEPT9基因对肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨SEPT9基因与肝癌的关系,进一步揭示SEPT9基因在肝癌发生发展过程中的作用.方法 将构建的针对SEPT9基因的shRNA表达载体通过脂质体LipofectamineTM 2000转染人肝癌HepG2细胞,荧光显微镜下观察细胞的转染效率,RT-PCR、Western blot法分别检测SEPT9 mRNA和蛋白质的表达抑制情况,CCK-8检测细胞的生长抑制情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 荧光显微镜观察细胞的转染效率达到70％以上;SEPT9 mRNA及蛋白表达抑制率均受到明显抑制.CCK-8法检测结果显示,实验组HepG2细胞的生长受到明显抑制;流式细胞术检测结果显示实验组HepG2细胞凋亡明显(P＜0.05).结论 抑制SEPT9基因的表达可有效抑制HepG2细胞的增殖,并对细胞凋亡有明显的促进作用.     

得力生注射液联合化疗治疗老年肺癌的临床观察

目的观察化疗与得力生注射液联用治疗老年肺癌(治疗组)的临床疗效,并与单用化疗作对比。方法将57例老年肺癌随机分为得力生加化疗组和单纯化疗组(对照组)两组,分别给予相应治疗,观察近期疗效、生活质量、毒副反应。结果治疗组与对照组总有效率分别为46.7%、40.0%(P>0.05)。而治疗组中位缓解期为7个月,对照组中位缓解期为5个月(P<0.05)。两组患者体重和Karnofsky(KPS)评分治疗组治疗后体重和KPS评分比治疗前增加(P<0.05),对照组治疗前后无明显变化(P>0.05)。血液学毒性治疗组白细胞下降II度8例(26.6%)、III度1例(3.3%),对照组II度15例(55.5%)、III度3例(11.1%),两组均无Ⅳ度毒性反应,两组比较差异有显著性(P<0.05);胃肠道反应治疗组II度10例(33.3%)、III度2例(6.0%),对照组II度14例(51.9%),III度6例(22.2%),Ⅳ度2例(7.4%)。两组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论得力生注射液对老年肺癌改善临床症状、提高生活质量和减轻化疗副反应均有较好作用。