炮制对雄黄毒性成分As_2O_3含量的影响

雄黄是常用毒剧中药之一,As_2O_3是其所夹杂的主要毒剧成分。目前,雄黄的炮制以干研法和水飞法为最常见。笔者以古蔡氏(Gutyeit)分析法测定了这两法炮制成品中的As_2O_3含量,发现水飞法能去除雄黄中的As_2O_3,使之降至安全范围内,且其降低速率与水飞时用水量有关。而干研法则对其无影响,相比之下,水飞法有着独特的优点。故建议,雄黄的炮制应提倡以水飞法。同时,笔者认为。七七年版国家药典对雄黄中的As_2O_3限量规定太松,对药用雄黄中的As_2O_3含量应限制在1mg/g以下为宜。     

炮制对雄黄毒剧成分As_2O_3含量的影响

雄黄是常用毒剧中药之一,As_2O_3是其所夹杂的主要毒剧成份。目前,雄黄的炮制以干研法和水飞法为最常见。笔者以古蔡(Gutzeit)氏分析法测定了这两法炮制成品中的As_2O_3含量,发现水飞法能去除雄黄中的As_2O_3,使之降至安全范围内,且其降低速率与水飞时用水量有关,当用水量为1:200～1:250(g:ml)时,As_2O_3去除效果最好。     

水飞法炮制对雄黄中可溶性硫和砷含量的影响

目的:探讨水飞法炮制对雄黄中可溶性硫和砷含量的影响,揭示水飞法炮制雄黄的科学意义。方法:采用硫离子选择电极法和氢化物发生-原子吸收法测定雄黄生品和水飞法炮制雄黄中可溶性硫和砷的含量。两种方法均灵敏、可靠、回收率高。结果:与雄黄生品相比,水飞法炮制雄黄样品中可溶性硫含量显著增加(P0.05),可溶性砷含量明显降低(P0.05)。结论:雄黄中可溶性硫水平的增加与砷水平的降低可能是水飞法炮制雄黄具有减毒增效的原因。     

雄黄炮制方法初探

采用不同浓度、不同比例碱洗、不同碱洗次数对不同粒度的雄黄进行炮制。分析炮制后雄黄中As_2O_3的含量。结果表明,可溶性As_2O_3的含量明显降低,低于药典限量规定。碱洗和酸洗雄黄的失重一致。为探索碱洗法炮制雄黄的可行性提供了实验依据。     

雄黄水飞炮制机制研究

目的 通过对水飞雄黄和干研雄黄物相结构、元素组成、总砷及可溶性砷含量及抗炎活性进行比较，以阐明雄黄水飞的炮制机制。方法 制备了粒径基本一致的水飞雄黄和干研雄黄，分别采用X射线衍射（X-ray diffraction,XRD）法明确其物相结构并测定伴生矿石含量，采用扫描电子显微镜-能谱仪观测水飞品和干研品形貌特征并检测其元素种类和比例，采用火焰光度原子吸收分光光度法和氢化物发生-原子吸收光度法对2种雄黄中总砷及可溶性砷含量进行了测定。采用二甲苯诱导昆明小鼠耳肿胀实验模型观察雄黄水飞品及干研品不同剂量组的抗炎作用。结果 水飞雄黄和干研雄黄的物相均是AsS和/或As4S4；水飞品相比于干研品，其伴生矿石含量有所减少、与氧结合的砷含量较低、总砷及可溶性砷含量较高。抗炎实验表明，阳性药醋酸地塞米松组、水飞品高剂量组及干研品高剂量组的耳肿胀度与对照组相比均显著降低，水飞品高剂量组的耳肿胀度与干研品高剂量组相比降低有显著性差别。结论 与干研法炮制雄黄相比，水飞法炮制雄黄并不改变其物相种类，但有除杂、减毒及增效三重效果，揭示了水飞法炮制雄黄的机制，丰富了水飞法炮制雄黄的科学内涵。     

对改进中药炮制方法的几点意见

一、对合理的传统炮炙方法,应严格遵守其操作程序目前国内大多数厂家都对朱砂、雄黄采用于法粉碎,干法粉碎易磨擦生热,造成朱砂中游离汞含量增加,增强了毒副作用。雄黄中As_2O_3是其所夹杂的主要毒剧成分,目前国内已有人对干法粉碎和水飞法粉碎的雄黄进行了As_2O_3含量测定,实验表明水飞时用水量越多,As_2O_3含量就越低,而且有效地除去了砂石杂质。醋制元胡可使其有效成分元胡乙素等生物碱与醋酸根离子结合生成盐,入煎时水溶度提高一倍,从而增强了药     

采用扫描电镜-能谱仪比较水飞法、水洗法及干研法对雄黄饮片质量的影响

目的:比较雄黄水飞品、水洗品及干研品中二硫化二砷及各元素的含量,以阐明水飞法、水洗法及干研法对雄黄饮片质量的影响,并对雄黄水飞品、水洗品及干研品进行快速鉴别。方法:依据2015年版《中国药典》(一部)雄黄项下规定对3种炮制品进行含量测定;采用扫描电镜-能谱仪对雄黄3种炮制品进行形貌观察,对3种炮制品中的元素种类及含量进行分析。结果:3种炮制品的二硫化二砷含量排序为水飞品水洗品干研品;水飞品及水洗品的形貌相似,而干研品的形貌与其他2种炮制品不同;3种炮制品的氧元素含量排序呈现干研品水洗品水飞品的趋势。结论:采用扫描电镜-能谱仪可以对雄黄水飞品和干研品进行快速鉴别,为鉴别雄黄不同炮制品提供了一定的技术支持。水飞法的除杂减毒效果最好,水飞品质量优于水洗品和干研品,说明水飞法炮制雄黄具有一定的科学依据。     

用机器加工的雄黄要反复水洗

<正> 雄黄始载于《神农本草经》,被列为中品,为含砷类成分的矿物药,其主要成分为As_2S_2。在自然界中,常与雌黄、砒石、铅石、银矿等共生。刚采得的雄黄原矿含有大量的杂质及毒性成分 As_2O_3故必须首先对其进行选择。(挑选块大色赤、质脆有光泽者,即“熟透”者入药)再进行一定的加工处理方能运用于临床。对雄黄的加工炮制     

乳钵研磨机水飞雄黄

雄黄为硫化物类矿石,呈不规则块状,主含二硫化二砷(AS_2S_2),《中国药典》要求研成极细粉或水飞。目前生产厂家都使用粉碎机或球磨机进行加工。由于粉碎机高速旋转,发出高热,雄黄受热容易氧化,产生AS_2O_3有使后者含量增高,毒性增加的危险。用水飞法加工雄黄,因为AS_2O_3溶于水,能降低矿石内原有的AS_2O_3含量,保证了安全用药目的。但人工水飞,费时费力,劳动强度大,生产效率低,为克服这些缺点,我厂新购进一台北京市     

纳米雄黄炮制方法的探讨

目的:以炮制品得率及残渣质量,粒径分布,As2S2和As2O3的含量为指标,考察不同炮制方法对纳米雄黄的影响,筛选其最佳炮制方法。方法:采用高能球磨法制备纳米雄黄生品,利用水飞法、酸水飞法和碱水飞法对其进行炮制,计算各炮制品得率及残渣质量;利用激光散射法测定粉体粒径,电镜扫描法观察粉体的表观形貌;直接碘量法和二乙基二硫代氨基甲酸银法(Ag-DDC法)分别测定各样品中As2S2与As2O3的含量。结果:水飞品、酸水飞品和碱水飞品的得率分别为96.71%,95.86%,79.08%,残渣质量分别为0.328,0.891,2.208 g;生品及各炮制品的平均粒径分别为(157.3±4.8),(143.9±6.2),(137.7±4.5),(139.8±5.3)nm;As2S2质量分数分别为(94.26±1.33)%,(98.97±0.98)%,(99.58±1.45)%,(99.37±2.60)%,As2O3质量分数分别为(9.64±0.68),(3.44±0.29),(2.83±0.27),(18.17±1.70)mg·g-1。结论:3种炮制方法均能减小纳米雄黄生品的粉体粒径,提高其As2S2的含量,且水飞法和酸水飞法均可降低其As2O3的含量。确定最佳炮制方法为酸水飞法。     

雄黄炮制前后X射线衍射分析研究

目的采用X射线衍射法评价雄黄药材和饮片的质量,比较雄黄药材及饮片X衍射图谱的异同,为矿物药雄黄的鉴定、炮制和质量研究提供依据。方法 X射线衍射法对8批雄黄药材和6批雄黄饮片进行测试分析,使用Ori-gin7.5软件以及参照国际衍射数据中心雄黄的标准卡片对比分析,比较图谱间的相似度及异同点。结果雄黄药材和雄黄饮片均为α雄黄(AsS)和β雄黄(As4S4)的混合体,均未检出砒霜(As2O3),但基本能检出伴生矿雌黄(As2S3)和二氧化硅。雄黄药材中特征峰较多,饮片的特征峰较相应药材少。结论 X射线衍射法可证明炮制过程可以明显减少雄黄药材中的杂质,使雄黄饮片的质量趋同。     

中药辅助As_2O_3~+沙利度胺治疗骨髓增生异常综合征的疗效观察

目的:观察中药辅助As2O3+沙利度胺治疗骨髓增生异常综合征的临床疗效。方法:25例MDS患者,随机分成两组,治疗组14例,采用中药辅助As2O3+沙利度胺治疗,对照组11例,采用As2O3+沙利度胺治疗,疗程90天,于治疗前后行血常规、骨髓涂片检查、临床症状及输血间隔时间等评估。结果:治疗90天后两组患者的指标均较前改善,指标改善中药参与组较早出现且更明显;同时考虑患者的症状改善情况,治疗组整体疗效较对照组更为显著,有效率高达78.5%。结论:中药辅助As2O 3+沙利度胺治疗骨髓增生异常综合症90天后,较对照组更能改善患者外周血等的相关指标,同时改善患者症状,整体疗效满意。     

雄黄炮制新工艺的探索

通过对不同粒度和不同水、酸洗次数的雄黄样品、醋煮、醋洗雄黄样品及部分地区的雄黄炮制品等进行As₂O₃、As₂S₂含量测定、微量元素分析和急性毒性实验,探索既能达到传统炮制目的,又能适应工业化生产的雄黄炮制新工艺的可能性。     

二硫化二砷诱导哮喘豚鼠肺泡灌洗液中嗜酸细胞凋亡的研究

目的观察二硫化二砷(As2S2)诱发哮喘豚鼠肺泡灌洗液中嗜酸细胞凋亡的作用。方法采用卵白蛋白制备哮喘豚鼠模型并激发哮喘,提取肺泡灌洗液并分离其中的嗜酸细胞。将嗜酸细胞悬浮生长于含10%小牛血清的RPMI 1640培养液中,嗜酸细胞初始浓度均为2×109L-1。A组As2S2以1.406 3 mg/L终浓度分别加入细胞培养液中培养3,6,12,24,48 h。B组将As2S2终浓度调整为0.04,0.09,0.18,0.35,0.70,1.41,2.81 mg/L,培养6h。2组均以不加As2S2为对照。Wright’s染色、透射电子显微镜观察嗜酸细胞的形态学变化。流式细胞仪检测观察嗜酸细胞凋亡率。结果嗜酸细胞与As2S2作用6 h后,Wright’s染色、透射电子显微镜均观察到嗜酸细胞出现凋亡的形态学改变。将嗜酸细胞与终浓度为1.406 3 mg/L As2S2在培养基中分别培养3,6,12,24,48 h后,流式细胞检测可见嗜酸细胞凋亡率随着As2S2作用时间的延长而先升高,于24 h达最高,凋亡率为27.19%,而后下降。各不同时间组嗜酸细胞凋亡率与对照组比较均有显著性差异。将嗜酸细胞与不同终浓度As2S2在培养基中分别培养6 h后,流式细胞检测可见嗜酸细胞凋亡率随着As2S2浓度的增加而升高,各不同浓度组嗜酸细胞凋亡率与对照组比较亦均有显著性差异。结论As2S2可促进哮喘豚鼠肺泡灌洗液中嗜酸细胞凋亡,随着As2S2作用时间的延长和浓度增加这种作用更明显。     

宝藿苷-Ⅰ联合As_2O_3对食管癌Eca-109细胞增殖的影响

目的研究宝藿苷-Ⅰ与As2O3联合应用对食管癌细胞Eca-109增殖的影响。方法取对数生长期Eca-109接种于96孔培养板,宝藿苷-Ⅰ组予以25 mg/L宝霍苷As2O3组予0.18 mg/L As2O3,联合用药组予12.5 mg/L宝藿苷-Ⅰ+0.09 mg/L As2O3,对照组予0.1%DMSO。采用MTT法分析对Eca-109细胞增殖的抑制作用,DNA琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡,流式细胞术分析细胞周期,Western Blot技术检测C-myc基因蛋白的表达,每组均重复3次。结果 3个用药组均可明显抑制Eca-109细胞的增殖(均P<0.05),但联合用药组抑制作用显著优于单独用药组(P<0.05);3个用药组均可使细胞凋亡,使细胞周期阻滞在G2/M期,使C-myc表达下调,与对照组相比均有显著性差异(P均<0.05),但联合用药组较单药组作用更显著(P<0.05)。结论各自半量的宝藿苷-Ⅰ与As2O3联合应用对Eca-109细胞的增殖抑制有显著的增强作用,明显优于各自的单味应用效果。     

中药辅助As_2O_3+ATRA双诱导治疗急性早幼粒细胞白血病4周的疗效观察

目的:观察中药辅助As2O3+ATRA双诱导治疗急性早幼粒细胞白血病4周的临床疗效。方法:回顾性分析22例确诊为急性早幼粒细胞白血病患者,其中治疗组12例,对照组10例,对照组行As2O3+ATRA双诱导治疗,治疗组在行双诱导治疗的基础上辅助以中医药治疗,并于治疗前后行血常规、骨髓涂片检查及临床症状评估。结果:经28天治疗后,两组患者的指标均较前改善,指标改善中药参与组更明显;同时考虑患者的症状改善情况,治疗组整体疗效较对照组更为显著,有效率高达91.6%。结论:中药辅助As2O3+ATRA双诱导治疗急性早幼粒细胞白血病4周后,较对照组更能改善患者外周血及骨髓的相关指标,同时改善患者症状,整体疗效满意。     

激光对蒙药那如-3抗心肌氧化损伤作用的影响

目的观察激光对蒙药那如-3抗氧化损伤作用的影响.方法用邻苯三酚法测SOD,TBA法测MDA,改良的Gricss法测NO.结果与对照组相比,蒙药单用及蒙药与激光联用均可提高大鼠心肌SOD活力,联用组提高非常显著(P＜0.01);单用及联用均可降低大鼠心肌MDA含量,其联用组降低非常显著(P＜0.01);联用组可显著提高NO含量(P＜0.05).结论激光可提高蒙药那如-3抗氧化损伤的药效.     

葛根总黄酮联合三氧化二砷体外诱导NB4-R1细胞凋亡的实验研究

目的:探讨葛根总黄酮联合三氧化二砷(As2O3)对维甲酸耐药细胞株NB4-R1增殖及凋亡的影响。方法:采用葛根总黄酮(0、10、30、50μg/mL)联合As2O3(1μmol/L)处理NB4-R1细胞24、48、72 h,MTT法检测细胞增殖抑制率;光学显微镜及荧光显微镜观察细胞形态改变;流式细胞仪检测细胞周期变化;FITC-AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡率,蛋白印迹法检测凋亡相关蛋白表达。结果:(1)一定浓度葛根总黄酮对NB4-R1细胞生长有抑制效应,呈剂量和时间依赖性,相同条件下,葛根总黄酮联合1μmol/L As2O3对NB-R1细胞抗增殖作用强于单用葛根总黄酮,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)FITC-Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡结果发现葛根总黄酮(0、10、30、50μg/mL)及葛根总黄酮联合1μmol/L As2O3处理NB4-R1细胞48 h后,早期凋亡率呈浓度依赖,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)瑞氏染色,在光镜下观察到葛根总黄酮和葛根总黄酮+As2O3联用组呈现不同程度的细胞凋亡形态学特征,且联用组较单药组明显。(4)流式细胞术检测细胞周期变化发现葛根总黄酮和葛根总黄酮+As2O3联用可影响细胞进程,表现为S期细胞增多,葛根总黄酮+As2O3联用组比各单用葛根总黄酮组Sub-G1增加更为明显。(5)Western blottimg结果显示葛根总黄酮可上调NB4-R1细胞中JNK表达,下调ERK1/2表达。结论:低浓度葛根总黄酮体外对维甲酸耐药细胞株NB4-R1细胞具有增殖抑制作用,呈时间-浓度依赖性,与1μmol/L As2O3具有协同作用;其诱导凋亡作用机制可能为阻滞NB4-R1细胞周期进程,激活JNK途径,下调ERK通路。     

雄黄肝脏毒性的病理形态学特征

目的:研究反复灌胃给予雄黄后,大鼠肝脏毒性的病理形态学特征,为安全、有效地使用雄黄提供科学依据.方法:随机将大鼠分为对照组和雄黄0.01,0.04,0.17 g·kg-1剂量组.各剂量组均每日灌胃给药1次,对照组给予高纯水,连续3个月.于给药后1,2,3个月和停药1,2个月后,测定血清生化指标,并在光镜下观察肝组织病理形态学变化.结果:连续灌服雄黄≥0.04 g·kg-1 3个月后,≥40％的肝细胞轻度浊肿、变性,炎细胞浸润,10％～20％动物出现片状肝细胞浊肿、嗜酸性变及灶状坏死等病变.停药1个月后,0.17g·kg-1剂量组有50％的肝细胞可见轻度浊肿,间质少量炎症细胞浸润,其余各组与对照组比较均无统计学差异.给药2,3个月后,试验各组的活化部分凝因激酶时间(APTT)较对照组明显缩短.连续给药3个月及停药1个月后,凝血酶原时间(PT)也明显缩短.各组动物的其余生化指标与对照组比较未见明显差异.结论:大鼠连续灌服雄黄≥0.04 g·kg-1 3个月后,肝脏出现轻度的早期毒性病变;停药后,病变逐渐恢复至正常.     

三氧化二砷对肝癌治疗及剂型研究新进展

通过查阅近几年国内外有关三氧化砷(As2O3)研究资料，对As2O3治疗肝癌的体内体外实验研究、临床试验及新剂型研究进行了综述。临床试验表明静脉注射给药治疗原发性肝癌，在规定的药物剂量范围内毒副作用较小，且疗效确切，可以用于肝癌预防和治疗，显示出可喜的前景；As2O3抗肝癌机制研究已逐步深入，还开展了联合用药研究等；但是新剂型研究很少。因而应加强高效、低毒、定向的新型给药系统的研究，使As2O3成为更理想的治疗肝癌药物。