三七总皂苷对原代培养大鼠皮层神经细胞的保护作用

 目的：研究三七总皂苷(PNS)对神经细胞的保护作用。方法：采用原代培养的大鼠大脑皮层神经细胞,观察谷氨酸(500μmol·L^-1,8min),缺氧5h再给氧不同时间(0,3,24h)对细胞的影响以及PNS的作用。结果：PNS25,50mg·L^-1明显减少缺氧/再给氧损伤时细胞内酶的释放,减轻细胞形态学的改变,提高细胞的存活率。对谷氨酸介导的兴奋性毒性,PNS也有一定的拮抗作用。结论：PNS的脑保护作用机制可能与其抗兴奋性毒性和缺氧性损伤的作用有关。     

三七总皂苷结合针灸干预对急性缺血性脑卒中大鼠血脑屏障的保护作用及对PI3K/Akt信号通路的影响

目的观察三七总皂苷(PNS)结合针灸治疗急性缺血性脑卒中大鼠血脑屏障保护作用及对PI3K/Akt信号通路的影响。方法将大鼠随机分为假手术组、模型组、针灸组、PNS+针灸组4组,每组各15只。采用Zea Longa线栓法制作大鼠缺血性脑卒中模型,假手术组大鼠仅分离血管,而不插入栓线,针灸组及PNS+针灸组大鼠术后给予针灸治疗,PNS+针灸组大鼠在针灸治疗基础上尾静脉注射PNS,连续治疗7 d。比较大鼠神经行为学评分、血脑屏障通透性、脑组织含水量以及脑组织PI3K、Akt蛋白表达。结果术后24 h各脑卒中组大鼠神经行为学评分无显著差异(P>0.05),术后3 d、术后7 d针灸组、PNS+针灸组大鼠神经行为学评分较模型组显著降低(P<0.05),且PNS+针灸组大鼠神经行为学评分显著低于针灸组(P<0.05)。各组大鼠左脑组织伊文思蓝(EB)含量、含水量无显著差异(P>0.05),各脑卒中组大鼠右脑组织EB含量、含水量显著高于假手术组(P<0.05),其中针灸组与PNS+针灸组大鼠右脑组织EB含量、含水量较模型组显著降低(P<0.05),而PNS+针灸组大鼠右脑组织EB含量、含水量显著低于针灸组(P<0.05)。各脑卒中组大鼠脑组织PI3K、AKt表达水平均较假手术组显著升高(P<0.05),其中针灸组以及PNS+针灸组大鼠脑组织PI3K较模型组显著升高(P<0.05),且PNS+针灸组大鼠脑组织PI3K表达显著高于针灸组(P<0.05);而模型组、针灸组以及PNS+针灸组大鼠脑组织Akt表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论PNS联合针灸治疗急性缺血性脑卒中大鼠具有显著的血脑屏障保护作用,可有效改善大鼠神经行为学状况,其作用机制可能与促进PI3K/Akt信号通路的激活有关。     

三七总皂甙对大鼠脊髓损伤后HSP70阳性神经元表达的影响

目的探讨脊髓继发性损伤的病理生理机制及三七总皂甙(Panaxnotoginsengsaponins,PNS)防治该病的作用机理。方法以Wistar大鼠65只为研究对象,分为空白组、假手术组、溶媒对照组、三七总皂甙(PNS)组,各实验组按2、6、12、24小时相点观察,Allen's脊髓损伤模型100g*cm致伤脊髓。各组在相应时相点取脊髓组织,采取免疫细胞化学方法观察脊髓组织热休克蛋白70(HeatShockProtein70,HSP70)阳性神经元的表达变化。结果脊髓HSP70阳性神经元表达PNS组>溶媒对照组>假手术组>空白组。结论HSP70参与了脊髓继发损伤的病理生理机制,PNS可能通过诱导脊髓组织HSP70神经元的表达而起保护作用。     

三七总皂苷对Alzheimer''''s病大鼠模型大脑胆碱能神经病理损害的保护作用

目的:观察三七总皂苷(PNS)对老年性痴呆(AD)大鼠模型大脑胆碱能神经病理损害的保护作用.方法:以d-半乳糖腹腔注射致亚急性损伤合并鹅膏蕈氨酸(IBA)损毁双侧大脑Meynert基底核建立AD大鼠动物模型,利用免疫组织化学方法检测大脑切片胆碱乙酰基转移酶(ChAT)免疫反应活性及阳性神经元数量及形态学改变.结果:PNS能明显减轻由d-半乳糖损害和鹅膏蕈氨酸损毁导致的大脑胆碱能神经元数量减少和ChAT水平降低.结论:PNS对AD大鼠模型大脑胆碱能神经的病理损害具有保护作用.     

三七总皂甙治疗急性重型颅脑损伤的疗效观察及护理

基础研究表明，三七总皂甙(panax notogimcng，PNS)对创伤性颅脑损伤有较好的脑保护作用，但其临床应用方面的研究报道极少。2002年5月～2004年5月，我科将PNS注射液应用于急性重型颅脑损伤的治疗，现将治疗结果和护理体会总结如下。     

中医药对缺血性脑血管病保护机制的临床研究进展

通过查阅近5年中医药对缺血性脑血管病损伤保护机制的临床研究文献,从中医药抑制脑缺血时细胞能量耗竭及酸中毒、炎症因子表达、兴奋性氨基酸毒性、自由基损伤、细胞凋亡等角度出发,对近年来中医药对缺血性脑血管病损伤的临床保护机制予以综述。旨在进一步阐释中医药治疗缺血性脑血管病具体作用机制,并为开发新药提供有益启示。     

三七总皂苷对大脑基底核损伤动物模型大脑神经元突触素的影响

目的:观察三七总皂苷(PNS)对大脑基底核损伤动物模型突触素(SYP)损害的保护作用。方法:以D-半乳糖腹腔注射致亚急性损伤合并鹅膏蕈氨酸(IBA)定位注射损毁双侧大脑Meynert基底核建立老年性痴呆(AD)大鼠动物模型,利用免疫组织化学方法检测大脑切片突触素SYP免疫反应活性。结果:PNS能明显减轻由D-半乳糖损害和鹅膏蕈氨酸损毁导致的大脑突触素SYP免疫反应活性水平。结论:PNS对AD动物模型大脑神经元突触素SYP的损害具有保护作用。     

三七总皂甙对大鼠离体灌流肝的影响

李喆氏等报道,用四氯化碳造成大鼠离体灌流肝损伤模型,观察了三七总皂甙(PNS)对该模型的作用,目的在于了解动物实验和离体器实验是否有一致性及对 PNS的保肝作用机理进行初步探讨。本实验结果表明:PNS 能增加大鼠离体灌流肝的灌流量,提示其保肝作用机理可能与其改善肝内微循环有关。在灌流液中加入 PNS 后,能明显抑制 GPT 的升高,灌流后肝组织的显微观察也提示,PNS 组肝损伤明显轻于 CCl_4损伤组。说明离体灌流肝模型能反映和观察到PNS 对化学性肝损伤的保护作用,与整体动物实验结果一致。该实验揭示在临床上使用三七治疗肝脏疾病提供了一定的实验依据。     

三七总皂苷对庆大霉素所致大鼠肾毒性的保护作用

目的研究三七总皂苷(PNS)对庆大霉素所致大鼠急性肾损伤的保护作用。方法腹腔注射庆大霉素致大鼠急性肾损伤模型,同时肌肉注射PNS治疗10 d,观察尿液中尿蛋白、葡萄糖、酮体的变化,血液中肌酐、尿素氮、总蛋白和白蛋白的变化及肾组织的病理改变。结果与模型组比较,PNS组尿液中蛋白、酮体、葡萄糖水平及血液中肌酐、尿素氮、总蛋白和白蛋白水平明显降低。结论 PNS对庆大霉素诱发大鼠急性肾损伤有明显保护作用。     

冰片配伍黄芪甲苷与三七总皂苷对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障转运蛋白的影响

目的从血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)转运蛋白角度探讨冰片配伍黄芪甲苷(astragalosides IV,AST IV)和三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)在脑缺血再灌注状态下促进药物成分入脑的作用。方法采用大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,ig给予冰片、AST IV、PNS及其配伍药物,2,3,5-氯化三苯四氮唑(2,3,5-triphenyl tetrazolium chloride,TTC)染色法测定脑组织损伤,Western blotting法检测脑组织外排蛋白P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)和多药耐药相关蛋白1(multidrug resistance protein-1,MRP-1)、MRP-2、MRP-4、MRP-5及摄取蛋白有机阳离子转运体3(organic cation transporter3,OCT3)、有机阴离子转运多肽-2(organicaniontransportingpolypeptides-2,OATP-2)蛋白的表达,real-timePCR法检测脑组织多药耐药(multidrug resistance,mdr)基因mdr1a、mdr1b和mrp-1、mrp-2、mrp-4、mrp-5 mRNA表达。结果 TTC染色结果显示,脑缺血再灌注后,大鼠脑组织出现明显梗死灶。各药物能显著减少脑梗死体积,ASTIV+PNS的效应强于AST IV与PNS单用,冰片+AST IV+PNS的效应强于各药物单用及AST IV+PNS。外排蛋白和基因检测显示,脑缺血再灌注后,大鼠脑组织P-gp、MRP-1、MRP-2、MRP-4、MRP-5蛋白表达均显著增多。与模型组比较,冰片能显著下调大鼠脑组织P-gp、MRP-2、MRP-4蛋白表达水平,PNS能显著下调MRP-4、MRP-5蛋白表达水平,AST IV、AST IV+PNS与冰片+AST IV+PNS能显著下调P-gp、MRP-2、MRP-4、MRP-5蛋白表达水平,且冰片+AST IV+PNS的效应显著强于各药物单用及AST IV+PNS,AST IV+PNS的效应显著强于AST IV或PNS单用。基因表达结果与蛋白表达结果类似。摄取蛋白检测结果显示,与对照组比较,脑缺血再灌注后大鼠脑组织OCT-3蛋白表达在模型组及各给药组变化均不明显,而模型组OATP-2蛋白表达水平显著降低。PNS、AST IV+PNS及冰片+AST IV+PNS能显著上调OATP-2蛋白表达水平,且AST IV+PNS的效应显著强于AST IV、PNS单用,冰片+ASTIV+PNS的效应显著强于各药物单用及ASTIV+PNS。结论脑缺血再灌注后,脑组织损伤,BBB的主要外排蛋白和基因表达均显著增强,而摄取蛋白OATP-2表达显著降低。冰片配伍AST IV及PNS后,能增强抗缺血性脑损伤的作用,其作用可能与下调BBB中外排蛋白P-gp、MRP-2、MRP-4、MRP-5和相应基因表达,同时上调摄取蛋白OATP-2表达,促使脑组织中冰片、AST IV及PNS有效成分的吸收与富集而发挥药理作用有关。     

三七总皂苷对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用及机制的实验研究

目的：探讨三七总皂苷注射液对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法：40只Wistar大鼠被随机分为4组：假手术组、缺血再灌注损伤模型组、尼莫地平对照（Nim）组、三七总皂苷注射液处理组（PNS）。建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型，对脑水肿和脑梗死进行测量，并采用硫代巴比妥酸盐法测定MDA含量、邻苯三酚自氧化法测定SOD活性。结果：PNS组与模型组比较，脑组织含水量减少（P〈0．01），脑梗死面积显著减小（P〈0．05）；SOD活力显著升高（P〈0．05），MDA含量显著降低（P〈0．05）。结论：MDA是反映组织损伤程度的物质、SOD是体内重要的内源性保护物质，三七总皂苷注射液可降低缺血脑组织MDA的含量、增加SOD活性而发挥对脑的保护作用。     

线粒体和KATP在三七总皂苷心脏保护中的作用

目的:探讨ATP敏感性钾通道(KATP)和线粒体通透性转换孔(MPTP)在三七总皂苷(PNS)心脏保护中的作用.方法:利用Langendorff灌注技术,在离体大鼠心脏观察不同药物对缺血/再灌注后心功能的影响.结果:(1)与对照组相比,PNS可浓度依赖地改善大鼠缺血/再灌注心功能的恢复.再灌注60 min后,PNS组心脏左室发展压(LVDP)、左室压力上升和下降最大变化速率(±LVdp/dtmax)和冠脉流量(CF)均明显高于对照组的(P<0.05或0.01);而左室舒张末压(LNEDP)明显低于对照组(P<0.01).(2)预先应用非特异性KATP阻断剂格列本脲可完全消除PNS(80 mg/L)对缺血/再灌注心脏的保护作用;此外,特异性线粒体KATP阻断剂5-HD能够大部分阻断PNS(80 mg/L)心功能改善作用.(3)再灌注初期应用MPTP开放剂苍术苷可完全消除PNS(80 mg/L)的保护作用.结论:PNS具有明显的抗心肌缺血/再灌注损伤作用;此作用与KATP,尤其是线粒体KAaV开放以及抑制MPTP开放有关.     

三七总苷对应激大鼠血清及胃黏膜氧自由基的影响

目的：观察三七总苷对应激大鼠血清及胃黏膜氧自由基的影响。方法：采用经典水浸-束缚应激模型,三七总苷组（PNS 66mg/kg）预防性灌胃给药3天,检测大鼠血清、胃黏膜SOD、MDA、NO含量。结果：水浸-束缚应激6 h后模型组胃黏膜NO含量比正常对照组降低,MDA含量增加,SOD活性下降;PNS治疗组,NO含量略升高,MDA含量下降,SOD活性增高;模型组血清NO含量比正常对照组降低,MDA含量增加,SOD活性下降;PNS治疗组血清NO含量升高,但MDA含量和SOD活性与模型组比较差异无统计学意义。结论：水浸-束缚应激可造成大鼠氧自由基损伤,氧自由基损伤主要发生在胃黏膜。PNS能够清除氧自由基,抑制过氧化物产生,对应激大鼠胃黏膜有一定的保护作用。     

栀子治疗脑缺血的研究进展

缺血性脑卒中是严重威胁人类健康的疾病之一,具有发病率高、死亡率高和致残率高的特点,且一直缺乏有效的治疗手段。其发生与能量代谢紊乱、钙超载、自由基损伤及炎症反应等有关。栀子不仅具有解热、镇痛、保肝和利胆作用,而且对缺血性脑损伤具有良好的保护作用。关于栀子主要有效成分对缺血性脑损伤的保护作用研究较多,但具体的作用机制还不明确。笔者拟通过综述近年来栀子主要活性成分治疗脑缺血损伤的作用机制,从有效成分单体和整体两方面进行整理分析,以期为栀子饮片防治缺血性脑损伤提供依据,同时为栀子饮片的进一步研究和应用提供参考。     

三七总皂苷对糖尿病小鼠空间认知功能改善及海马神经的保护作用研究

目的:评价三七总皂苷(PNS)对糖尿病模型小鼠空间学习记忆能力改善及海马神经的保护作用。方法:45只昆明种小鼠随机分为正常对照组(NC组)、模型组(DM组)、PNS治疗组(PNS组),每组15只。PNS组按200 mg/kg剂量灌胃给予PNS水溶液,其余两组给予等量双蒸馏水灌胃,每天1次,连续30 d。对各组动物进行Morris水迷宫学习记忆行为学检测及对大脑海马进行病理学分析。结果:定位航行实验中,与DM组比较,PNS组逃避潜伏期明显缩短(P<0.05);空间探索实验中,与DM组比较,PNS组表现出较好的原平台搜索策略,可延长其目标象限游泳时间(P<0.01);病理结果显示:PNS组神经元形态和数量均有不同程度的改善,神经元数量与DM组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:三七总皂苷对糖尿病模型小鼠空间认知功能有改善作用,对海马神经具有一定保护作用。     

三七总皂苷对过氧化氢所致内皮细胞损伤的保护作用

目的:探讨三七总皂苷(PNS)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)过氧化氢(H2O2)所致损伤的保护作用。方法:采用体外培养HUVECs,建立过氧化氢(500μmol/L作用24h)内皮细胞损伤模型。分为4组:空白组、过氧化氢组、PNS低剂量(L)组(浓度为30μmol/L)、PNS高剂量(H)组(浓度为60μmol/L)。正常培养6h,用噻唑蓝(MTT)比色法测定HUVECs增殖及细胞活性,荧光素双醋酸酯(FDA)染色检测HUVECs生命力强度,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测各组细胞损伤相关蛋白超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽(GSH)的表达。用荧光定量(PCR)法检测各组细胞损伤相关基因SOD、MDA、LDH、GSH的表达。结果:PNS在一定浓度范围内可显著提高受损HUVECs活力,Western Blot结果表明SOD和GSH的蛋白表达升高,MDA和LDH的蛋白表达降低,差异具有统计学意义(P0.01)。PCR结果与Western Blot结果相同。结论:PNS在一定浓度时可避免HUVECs不受H_2O_2的损伤。其分子作用机制可能是通过下调LDH、GSH蛋白表达,上调SOD、MDA蛋白表达而发挥作用。     

三七皂(T)对无糖培养引起 SK-N-SH 细胞损伤的保护作用

采用SK－N－SH细胞无糖培养方法，建立神经细胞能量代谢障碍模型，通过细胞学、形态学与脂质过氧化损伤指标的检测，观察中药三七皂甙（PNS）对模型细胞的保护作用。结果：无糖培养下细胞皱缩、形态不完整，用药后细胞形态正常，神经细胞存活数增加，细胞凋亡率降低；细胞脂质过氧化损伤减轻。表明三七皂甙对能量代谢障碍引起的神经细胞损伤有保护作用，这一作用可能与其抗脂质过氧化损伤有关。     

丹参素对缺糖-缺氧损伤神经细胞的保护作用

研究表明脑组织缺血性损伤过程中存在着神经细胞凋亡。且神经细胞凋亡在缺血性脑损伤中起十分重要的作用。药物可通过干预神经细胞凋亡过程阻止缺血性损伤的进一步发展，而发挥对神经细胞损伤的保护作用。细胞内Ca^2 超载是缺血性脑损伤的发病机制之一，在缺血后神经元凋亡发生中也     

基于ATR/Chk1/P53信号通路探讨三七总皂苷对自然衰老大鼠睾丸生殖细胞DNA损伤的保护作用

目的基于ATR/Chk1/P53信号通路探讨三七总皂苷(PNS)对自然衰老大鼠睾丸生殖细胞DNA损伤的保护作用。方法将SPF级SD大鼠随机分为青年对照组(3月龄),衰老模型组(18月龄),PNS低、中、高剂量(10、30、60 mg/kg)组(18月龄),每组10只。PNS低、中、高剂量组大鼠分别ig给予PNS 10、30、60 mg/kg,每周6 d,给药6个月。结束时称体质量后处死大鼠,迅速取出睾丸组织,称取睾丸质量,计算睾丸指数。HE染色法观察睾丸组织形态学变化,免疫组化法检测DNA损伤相关蛋白γ-H2AX、ATR的表达和定位,Western blotting检测睾丸组织中DNA损伤相关蛋白γ-H2AX、Chk1、p-P53、P21的表达水平。结果与青年对照组比较,衰老模型组大鼠睾丸质量、睾丸指数显著降低,PNS能不同程度地升高睾丸质量、睾丸指数;HE结果表明,PNS能显著改善自然衰老所致的睾丸组织形态学变化;与青年对照组相比,衰老模型组大鼠睾丸组织DNA损伤标志蛋白γ-H2AX表达水平和阳性灶点数明显升高,ATR的阳性灶点数及其下游Chk1、p-P53、P21的蛋白表达明显升高,而PNS干预后可降低上述DNA损伤相关反应蛋白的表达。结论 PNS能够减轻自然衰老大鼠睾丸组织DNA损伤,其机制可能与调控ATR/Chk1/P53信号通路有关。     

三七总皂苷抗缺血再灌注损伤机制研究进展

三七总皂苷(panax notoginseng saponins PNS)是中药三七主要有效活性成分,具有抗缺血再灌注(ischemia-reperfusion injury I/R)损伤作用。近年研究表明主要通过抑制炎症反应、抗氧化应激、阻滞细胞内钙超载、改善能量代谢、减少细胞凋亡等途径保护组织器官再灌注损伤。现对三七总皂苷的具体成分、抗I/R损伤作用机制进行系统的总结和综述。