人脑外伤后皮层基质金属蛋白酶9的表达:定量、定位和时相

目的探讨基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinases-9,MMP-9）在人创伤性脑损伤（traumatic brain injury,TBI）后挫伤皮层中的表达情况,包括表达位置、表达强度和表达时相。方法挫伤区皮层的标本来自于24位TBI患者,取样时间从伤后5h到5d,利用免疫组化技术测定MMP-9的表达强度。结果在人TBI后的挫伤区皮层中,MMP-9表达明显上调,表达高峰为伤后24-48h,MMP-9主要在神经元细胞中表达,神经胶质细胞中也有少量表达。结论MMP-9在人TBI后的挫伤区皮层中表达上调,提示其可能在TBI后的病理生理过程中起着重要作用。     

创伤性脑损伤急性期高血糖对脑GLUT-3表达的影响

目的探讨大鼠创伤性脑损伤后高血糖对神经元的损害作用及其可能机制。方法成年雄性SD大鼠180只,随机分成正常对照组,创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)组,胰岛素治疗组,每组伤侧及健侧皮层设立自身对照。分别测定每组伤前及伤后各时间点血糖值,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定伤后伤侧及健侧皮层葡萄糖转运蛋白3(glucose transporter 3,GLUT-3)基因表达,Western-blot法测定伤后伤侧及健侧皮层GLUT-3蛋白表达,免疫荧光法测定伤后各组伤侧及健侧皮层单个神经元神经特异性烯醇化酶(neuronspecificenolase,NSE)表达量和NSE阳性染色细胞数。结果正常对照组各时间点血糖值,GLUT-3表达量,单个神经元NSE表达量及NSE阳性细胞数均未见明显变化(P均0.05);TBI组动物伤后血糖升高,伤侧皮层GLUT-3表达增加,单个神经元NSE表达量增加而NSE阳性染色细胞数明显减少(P均0.05);胰岛素治疗组伤后血糖变化不明显(P0.05),伤后12、24、48、72 h GLUT-3表达量,单个神经元NSE表达量及NSE阳性染色细胞数均明显多于TBI组(P均0.05)。各组健侧皮层GLUT-3和单个神经元NSE表达量,NSE阳性染色细胞数均未见明显变化(P均0.05)。结论 TBI后高血糖可加重神经元损伤,其机制可能与TBI后高血糖减少伤后神经元GLUT-3的表达,增加伤后神经元葡萄糖代谢障碍有关。     

PI3K/Akt通路在创伤性脑损伤中的表达及抗凋亡作用

目的 研究创伤性脑损伤(TBI)后脑组织中Akt 蛋白磷酸化激活情况及其在神经细胞凋亡中的作用.方法 24 只雄性Wistar 大鼠,采用自由落体颅脑损伤模型随机分成假手术组、外伤后1 h、3 h、6 h、12 h、1 d、3 d、7 d 组.于相应时间点处死后行蛋白免疫印迹法(western blot)检测磷酸化A...     

Caspase-3与创伤性脑损伤

Caspase-3是神经元凋亡的关键蛋白酶。在创伤性脑损伤中,caspase-3介导的凋亡级联反应可使神经元大量死亡,加重脑损伤。Caspase-3的激活途径分为内源性途径和外源性途径。其中,内源性途径由启动子caspase-8通过裂解胞质的Bid而启动;外源性途径则以死亡受体的活化而启动。两种途径的调节都有3个水平。Caspase-3一旦被激活,则细胞凋亡不可避免。近年来,学者对于创伤性脑损伤中的凋亡现象进行研究,获得了一定成果。结果提示,创伤性脑损伤中存在capase-3介导的凋亡现象。但如何应用脑保护治疗减轻脑损伤,并应用于临床实践,则仍有待于进一步研究。     

Cyt-C Bcl-XL和Bcl-XS在大鼠创伤性脑损伤模型中的表达意义

目的 观察大鼠创伤性脑损伤(TBI)后细胞色素C释放及凋亡因子Bcl-XL和Bcl-XS的表达意义.方法 采用大鼠自由落体建立脑损伤模型,分别于伤后2h、6h、12 h、24 h、72 h、120 h、168 h检测大鼠脑挫裂伤侧海马CA2-CA3区细胞色素C染色阳性细胞(免疫组化法),应用Bcl-XL和Bcl-XS原位杂交法检测Bcl-XL和Bcl-XS mRNA表达.结果 脑挫裂伤后,海马CA2-CA3区Cyt-C阳性染色的神经细胞出现具有明显时相性,脑损伤后大鼠脑组织内Bcl-XL、Bcl-XS mRNA出现相应改变.结论 大鼠脑挫裂伤后海马CA2-CA3区细胞有相应变化并出现细胞凋亡.     

小鼠卵巢免疫反应产物内GATA-4的表达定位

背景：特异性转录因子GATA-4家族对动物生殖细胞分化和生殖过程中多种激素的调节有非常重要的作用。 目的：观察小鼠卵巢内GATA-4免疫反应产物的特征与分布。 方法：选取健康昆明种 6周龄ICR 小鼠6只,取卵巢进行石蜡切片,应用免疫组织化学ABC法,DAB显色观察GATA-4在此时期卵巢中的表达情况。 结果与结论：GATA-4免疫反应细胞在6周龄小鼠的卵巢中均有分布,主要在初级卵泡和次级卵泡的颗粒细胞,在卵泡膜细胞上有少量分布,黄体上未见分布。说明小鼠卵巢内存在GATA-4。     

小鼠脑皮质撞击模型的构建和评估

目的 ;探索建立小鼠脑皮质撞击模型,为今后进一步开展小鼠颅脑创伤研究创造条件。方法雄性C57BL/6J小鼠36只,随机分为6组(包括实验组5组和对照组1组),应用NYU Impactor Ⅰ型脑皮质撞击仪,金属杆(重10g)从不同高度落下垂直打击小鼠脑皮质造成损伤,建立小鼠脑皮质撞击模型。致伤后观察小鼠神经反射及意识恢复时间。伤后24 h处死小鼠,取海马CA2/3区脑组织行退变神经元Fluoro-Jade B组织荧光染色,通过立体细胞计数观察退变神经元数量变化。结果打击高度为10~40 mm时,损伤侧脑组织病理改变的严重程度逐级加重,与损伤程度存在较好的相关性;打击高度为10 mm时可近似模拟轻型颅脑损伤;打击高度为20~30 mm时近似模拟中型颅脑损伤;打击高度为40 mm时近似模拟重型颅脑损伤。结论应用NYU Impactor Ⅰ型脑皮质撞击仪可以成功地制作出所需的小鼠脑皮质撞击模型,具有重复性好、简便易用的特点,是较理想的小鼠致伤模型。     

大鼠弥漫性脑损伤后Homer1a及1b/c蛋白表达及意义

目的研究大鼠弥漫性脑损伤后Homer1蛋白3种亚型表达规律及其意义.方法 SD大鼠105只,体重(300±25)g,分为正常组、假手术组和弥漫性脑损伤(DBI)组,DBI组应用Marmarou大鼠DBI模型致伤,假手术组不予以自由落体打击,其余处理同DBI组,分别在损伤后30 min及1、6、12、24、72、168 h取大鼠主要脑区及核团进行Homer1a、1b/c蛋白分子的免疫组织化学和免疫印迹分析检测.结果两种检测方法均发现损伤组神经组织中Homer1a蛋白自伤后30 min起表达,持续至伤后168 h,而正常及假手术组未见该蛋白阳性表达,而Homer1b/c于正常组、假手术组及损伤组均可见明确的阳性表达.结论大鼠弥漫性脑损伤后Homer1a蛋白的表达于损伤前后有显著变化,而Homer1b/c于损伤前后无明显变化,提示Homer1a蛋白分子参与了神经元损伤修复过程.     

TIMP-3、MMP-3与缺血性脑损伤

在脑缺血损伤机制中,基质金属蛋白酶(MMPs)及其内源性抑制剂(TIMPs)的作用日益受到重视。研究表明,TIMP-3、MMP-3及其复合体介导了多种细胞生理和病理发生、发展机制;它们参与了脑缺血再灌注损伤后炎性级联反应及细胞凋亡等机制;同时也参与动脉粥样硬化斑块形成与破裂等。通过研究TIMP-3、MMP-3与脑缺血再灌注损伤的相关性,将有利于脑缺血后神经保护治疗及预防脑缺血发生。     

细胞黏附分子(ICAM-1)在大鼠弥漫性脑损伤中的表达意义

目的探讨ICAM—1在大鼠弥漫性脑损伤中的表达及意义。方法采用Marmarou方法获得大鼠弥漫性脑损伤模型．实时定量RT—PCR、S—P免疫组化法分别测定ICAM—1蛋白和mRNA在外伤后不同时间点的表达变化．干湿重法测脑组织含水量．组织切片苏木精一伊红染色观测炎性细胞浸润情况。结果外伤组与假手术对照组比较，ICAM—1蛋白表达分别于伤后6h明显升高．72h达到高峰（P〈0.05），ICAM—ImRNA表达3h即明显升高，72h达最高峰，其后下降。7d时仍高于假手术对照组（P〈0．01）。伤后脑组织含水量较假手术对照组高，同时炎性细胞大量聚集。结论大鼠脑外伤诱导了ICAM—1的表达．ICAM—1通过介导炎性细胞的浸润可能参与了伤后脑水肿的形成过程．     

转基因动物在创伤性脑损伤研究中的应用

转基因动物是指用实验的方法将外源基因导入早期胚胎细胞，使之整合于细胞基因组中而建立的动物品系。目前，已研制出与超氧化物歧化酶、金属蛋白酶、细胞凋亡基因族、肿瘤坏死因子及一氧化氮合成酶等有关的转基因动物模型，为从基因水平研究脑外伤后继发性损伤的机制提供了有用的工具。     

转基因动物在创伤性脑损伤研究中的作用

转基因动物是指用实验的方法将外源基因入早期胚胎细胞，使之整合于细胞基因组中而建立的动物品系。目前，已研制出与超氧化物歧化酶、金属蛋白酶、细胞凋亡基因族、肿瘤坏死因子及一氧化氮合成酶等有关的转基因动物模型，为从基因水平研究脑外伤后继发性损伤的机制提供了有用的工具。     

脑损伤后水通道蛋白4表达与血脑屏障通透性的关系

目的研究脑损伤后，水通道蛋白4（AQP4）的表达变化与血脑屏障（BBB）通透性之间的关系。方法健康成年Wistar大鼠，随机分成创伤性（TBI）组和假手术（SO）组。自由落体硬膜外撞击方法致重度脑创伤模型。于伤后4h、8h、12h、1d、3d、5d、7d取出大鼠脑组织，进行以下实验：①测创伤脑组织中伊文思蓝（EB）外渗的量，以EB外渗的量反应BBB通透性的变化；②免疫组化（IHC）和原位杂交（ISH）检测AQP4的表达变化。结果脑损伤后，BBB通透性增加，其增加有两个高峰，分别在TBI后12h和3d，后者尤为更明显。IHC和ISH显示，脑损伤后AQP4在脑组织中的表达逐渐上调，1d达高峰，持续至3d后下降，7d接近SO组水平。AQP4的表达变化与脑组织伊文思蓝（EB）含量的变化呈正相关（r=0．894，P〈0．05）。结论脑损伤后BBB通透性的增加与脑水肿的形成密切相关。TBI后BBB通透性增加，可能与AQP4表达上调有关，两者的变化影响TBI后脑水肿的发生、发展。     

PACAP对大鼠创伤性脑损伤后caspase-3的影响

目的观察垂体腺苷酸环化酶激活肽（PACAP）对创伤性颅脑损伤（TBI）后大鼠脑组织内切冬酶-3（caspase-3）表达及活性变化的影响。方法采用TBI模型，运用免疫组织化学及免疫荧光技术，观察TBI伤后2h～3d伤侧大脑皮层、海马caspase．3表达及活性变化情况。结果在伤后各时相点（2、12、24、48、72h）PACAP治疗组caspase-3表达与TBI组相比较，皮质与海马的表达都要相对减少；caspase-3的活性明显下降（P〈0．05）。结论PACAP能降低TBI脑组织内caspase-3表达及活性，减少神经细胞凋亡。     

脑红蛋白在创伤性脑损伤中的研究进展

脑红蛋白广泛分布于脑内神经元,能可逆性地与氧结合,在缺血缺氧的状态下表达增加并发挥显著的神经保护作用。近年来研究发现创伤性脑损伤后脑组织脑红蛋白的表达反应性增高并表现出良好的神经保护作用。本文就近年来脑红蛋白在创伤性脑损伤中的研究进展作一综述。     

一氧化氮和一氧化氮合酶在大鼠脑损伤组织中的表达

目的 探讨创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)后脑组织匀浆中一氧化氮(nitric oxide,NO)含量、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性以及与脑水肿之间的关系.方法 SD大鼠52只,36只随机分为正常对照组(n=6)和手术组(n=30),手术组按受伤到处死的不同时间(6、24、72、120、168 h)分成5个亚组,每亚组6只,各组取脑组织匀浆检测NO、NOS及测定脑组织含水量.16只随机分4组,正常对照组、伤后6h、72 h、168 h各4只,行尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸黄递酶(Nicoti-namide adenine dinucleotide phosphate diaphorase,NADPHd))组化染色检测皮层及脑底NOS阳性细胞.结果:TBI后脑组织内NO含量、NOS活力即有升高,与对照组比较有明显差异(NO含量比较F=468.89,NOS活力比较F=84.32,P＜ 0.05).脑组织含水量在外伤后升高,与对照组比较有明显差异(F=1963.51,P＜0.05).NADPHd组化染色显示TBI皮层NOS阳性细胞明显多于正常对照组,伤灶脑底也出现了染色块及浓染的细胞群与阳性纤维束.结论 大鼠TBI后损伤灶外确实发生了NO、NOS的升高,伤后1周内持续存在;NO含量、NOS活性与脑组织含水量的变化趋势基本一致,为临床治疗脑水肿提供实验依据.     

基质金属蛋白酶9及其抑制剂在脑膜瘤中的表达

目的探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制剂TIMP-1在脑膜瘤中的表达与脑膜瘤侵袭性的关系。方法采用免疫组化S-P法测定手术切除的70例不同组织学类型脑膜瘤标本中MMP-9及TIMP-1的蛋白表达。结果MMP-9和TIMP-1在良性脑膜瘤中的阳性表达率分别为35.00%、52.50%;在恶性脑膜瘤中的阳性表达率分别为76.67%、53.33%。MMP-9在恶性脑膜瘤和良性脑膜瘤的表达均存在显著性差异,TIMP-1无差异。结论MMP-9与脑膜瘤的生物学特性相关,促进脑膜瘤的侵袭;MMP-9/TIMP-1的失衡与脑膜瘤的恶性程度和侵袭能力相关。     

功能磁共振在创伤性脑损伤中的应用研究进展

创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)后脑组织在各种因素的直接或间接损伤诱导下会发生复杂的病理生理改变,采取有效的医学诊疗技术对这一病理生理改变过程进行描述、评估对提高TBI的诊疗效果及改善患者预后具有重要的意义。功能磁共振(functional Magnetic Resonance Imaging,f MRI)是在数字技术和影像学技术快速发展下应运而生的一种磁振造影技术,在科研领域的应用主要集中在各种认知、神经、心理课题,而临床上其在脑损伤、脑部肿瘤等疾病诊疗中的作用日益凸显。本文通过对近年来国内外相关文献的回顾和整理,对f MRI在创伤性脑损伤临床诊断中的应用进行综述。