脆性X综合征与FMR－1基因

脆性Ｘ综合征（ＦＸ）患者的脆性位点（ＦＲＡＸＡ）与ＦＭＲ－１位点一致，脆性断点位于（ＣＧＧ）ｎ上，而ＦＭＲ－１突变有两类：（ＣＧＧ）ｎ重复数突变和点突变（或丢失）。同时表明ＦＭＲ－１５＇侧ＣｐＧ岛甲基化。并介绍ＴＦＭＲ－１（ＣＧＧ）ｎ突变分子生物学检测方法。     

脆性X综合征与FMR—1基因

脆性Ｘ综合征（ＦＸ）患者的脆性位点（ＦＲＡＸＡ）与ＦＡＲ－１位点一致，脆性断点位于（ＣＧＧ）ｎ上，而ＦＭＲ－１突变有两类：（ＣＧＧ）ｎ重复数突变和点突变（或丢失）。同时表明ＦＭＲ－１５′侧ＣＰＧ岛甲基化，并介绍了ＦＭＲ－１（ＣＧＧ）ｎ突变分子生物学检测方法。     

FMR—1基因分子遗传学研究进展

ＦＭＲ－１基因（ＣＧＧ）ｎ结构的扩展是ＦＲＡＸＡ位点脆性现象出现和脆性Ｘ综合征患者发病分子遗传学基础，过去的几年中，ＦＭＲ－１基因的上述动态突变的研究已取得了长足的进展，已成为人类动态突变性疾病研究的范例；此外，ＦＭＲ－１基因的错义突变和缺失型突变也能导致脆性Ｘ综合征相同的临床表现，从而显示出表现为脆性Ｘ综合征临床征候的患者具有高度的遗传异质性，并使这些患者及其家系成员的基因诊断和产前基因诊断进一     

脆性X综合征：FMR－1基因的分离及脆性X突变的特征

脆性Ｘ综合征是家族性智力低下的最常见原因。脆性Ｘ染色体的分子生物学研究已经取得了重大突破，使用ＹＡＣ克隆的方法已经克隆出ＦＭＲ—１基因。ＦＭＲ－１基因外显子区ＣＧＧ重复的扩增及甲基化是脆性Ｘ综合征产生的原因。本文对ＤＮＡ分析法用于脆性Ｘ综合征产前诊断和携带者检出也进行了讨论。     

男性弱智群体脆性X综合征全突变者的筛选研究

男性弱智群体脆性Ｘ综合征全突变者的筛选研究李薇杜风兰朱丽阳荆泽李军脆性Ｘ综合征是Ｘ－性连锁先天性智力低下中最常见的一种疾病。１９３１年Ｖｅｒｖｅｒｋ等［１］应用分子克隆技术发现了在Ｘｑ２７．３脆性位点附近的智力低下基因（ＦＭＲ－１），揭示该综合征的发...     

DMD基因突变类型及其研究方法

ＤＭＤ基因位于Ｘｐ２１．１—２１．３，由７９个外显子及其相应的内含子约２３００ｋｂ组成，１３９７４ｋｂ的ｍＲＮＡ中１１．３ｋｂ的序列为３６８５个氨基酸残基的抗肌营养不良蛋白（ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎｐｒｏｔｅｉｎ）编码。随着Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹和各种ＰＣＲ技术的引进。在ＤＭＤ基因上已发现了５０种ＲＦＬＰ，１３种ＳＴＲ（Ｓｈｏｒｔｔａｎｄｅｎｒｅｐｅａｔ），８种碱基置换，同时探明了ＤＭＤ基因突变的分子基础包括：（１）基因部分缺失；（２）基因部分重复；（３）基因内连接片段的形成：（４）碱基置换；（５）ＳＴＲ的多态性改变。本文就ＤＭＤ基因突变的类型，突变的原因，以及突变的研究方法作一概述。     

唾液口腔粘膜上皮细胞FMR1基因突变的PCR检测

本文采用ＰＣＲ技术对５个已确诊为脆性Ｘ综合征〗Ｆｒａ（Ｘ）【家系的１５名成员唾液中口腔粘上皮细胞ＦＭＲ１基因进行了分析，并与其外周血ＰＣＲ结果进行了比较，发现６例全突变患者有３例两种组织的结果出现了明显关 ，而５全本、４例前突变携带者及另３例全突变患者两种组织的ＰＣＲ结果完全一致，提示唾液中口腔粘膜上皮细胞同样可用于检测ＦＭＲ１基因突变，同时也表明Ｆｒａ（Ｘ）患者体内ＦＭＲ１基因突变存在着组织间的     

用RT-PCR技术分析脆性X男性患者的FMR-1基因的表达

目的为探讨脆性Ｘ男性患者与ＦＭＲ－１基因表达之间的关系，从而建立一种快速、简单且适合于筛查群体中男性患者的方法。方法采用ＲＴ－ＰＣＲ技术，对两个经细胞遗传学方法证实的脆性Ｘ家系进行检测。结果两个脆性Ｘ家系中的男性患者均无ＦＭＲ－１基因的表达，其父母均有ＦＭＲ－１基因表达，所有被检个体均有内对照基因ＨＰＲＴ的表达。结论ＦＭＲ－１基因表达缺失与脆性Ｘ男性患者的发病有一定关系。这一方法的进一步研究，将使脆性Ｘ男性患者的诊断方法更加简单、快速，有可能用于大规模群体筛查。     

通过精子分型测定FMR1CGG重复间断对突变频率的影响

脆性Ｘ综合征是一种低外显率的Ｘ连锁显性疾病，智力低下是常见的临床表现，其分子学基础为Ｘｑ２７．３的ＦＭＲ１等位基因功能丧失，这是由于ＦＭＲ１基因５′端非翻译区ＣＧＧ重复扩展的结果。脆性Ｘ综合征起源于ＦＭＲ１基因的ＣＧＧ重复不稳定表达。目前已识别出３种...     

多聚酶链式反应检测FMR－1基因突变

采用多聚酶链式反应（ＰＣＲ）结合银染或非同位素杂交的方法，对１５例脆性Ｘ染色体阳性的患者和携带者进行了检查。结果显示，该方法可以检出ＦＭＲ－１正常扩增带、前突变与完全突变，与细胞遗传学检查相比，ＰＣＲ检测更为快捷与准确。     

FMR-1基因(CGG)n重复序列的快速基因检测方法

ＦＭＲ－１（ｆｒａｇｉｌｅＸｍｅｎｔａｌｒｅｔａｒｄａ－ｔｉｏｎ－１）基因５′端非翻译区三核苷酸（ＣＧＧ）ｎ重复序列在正常人群中呈正常多态性,重复拷贝数为６～５２;当（ＣＧＧ）ｎ扩增为５３～２００拷贝数时,则为前突变,见于正常男性传递者及女性携带者;...     

脆性X综合征fra（X）研究进展

脆性Ｘ综合征ｆｒａ（Ｘ）研究进展浙江省瑞安市人民医院遗传室（３２５２００）叶家鹤上海医科大学儿科医院朱畅宁审阅自１９９１年在Ｘｑ２７．３脆性位点上发现ＦＭＲ－１基因（ＦＲＡＸＡ），并确认ｆｒａ（Ｘ）系该基因内第一个外显子的５＇端非翻译区（ｕｎｔｒａｎ...     

早孕期绒毛细胞短期培养的染色体脆性位点研究

筛选１０２份人工流产的绒毛标本，分组进行短期培养及染色体脆性位点（ＦＳ）的研究，结果表明：Ｍ１９９加ＭＴＸ（２组）（终浓度为４×１０～（－８）ｍｏ１／Ｌ）与单纯Ｍ１９９（１组）比较，染色体畸变率（ＣＡＲ）和脆性位点表达率（ＦＲ）差别均有显著意义（Ｐ＜０．０５）；Ｍ１９９加ＢｒｄＵ（终浓度为２×１０～（－４）ｍｏ１／Ｌ）（３组）与Ｍ１９９加ＭＴＸ比较ＦＲ差别有极显著意义（Ｐ＜０．０ｌ）；ＲＰＭＩ１６４０加ＭＴＸ（终浓度８×１０～（－８）ｍｏ１／Ｌ）（４组）与２组比较中期分裂相数差别有显著意义（Ｐ＜０．０５）。     

脆性X综合征：FMR—1基因的分离及脆性X突变的特征

脆性Ｘ综合征是家族性智力低下的最常见原因。脆性Ｘ染色体的分子生物学研究已经取得了重大突破。使用ＹＡＣ克隆的方法已经克隆出ＦＭＲ－１基因外显子区ＣＧＧ重复的扩增及甲基化是脆性Ｘ综合征产生的原因。本文对ＤＮＡ分析法用脆性Ｘ性综合征产前诊断和携带者检出也进行了讨论。     

GST-人可溶性成纤维细胞生长因子受体1融合蛋白在酵母细胞中的表达及活性测定

目的：表达重组人可溶性成纤维细胞生长因子受体１（ｓｏｌｕｂｌｅ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　１，ｓＦＧＦＲ１），研究其对成纤维细胞生长因子（ＦＧＦ）生物学活性的拮抗作用。方法：采用逆转录－ＰＣＲ（ＰＴ－ＰＣＲ）技术自人肺成纤维细胞获得ｓＦＧＦＲ１　ｃＤＮＡ，测序确证后，将其克隆人酵母细胞表达载体ｐＹＥＸ４Ｔ－１；重组质粒转化入酵母细胞（ＤＹ１５０）中进行诱导表达，表达产物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及 Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ鉴定。利用 ＮＩＨ３Ｔ３细胞增殖抑制实验检测重组人 ｓＦＧＦＲ１的生物学活性。结果：经 ＣｕＳＯ４诱导，酵母细胞表达出重组谷胱苷肽转移酶（ＧＳＴ）－ｓＦＧＦＲ１融合蛋白，此蛋白在凝胶上表现为 １条约 ６０ｋＤ的阳性区带，在 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ实验中可被ＧＳＴ特异性抗体识别。重组ＧＳＴ－ｓＦＧＦＲ１融合蛋白的粗提物在体外能够桔抗ＦＧＦ介导的促ＮＩＨ３Ｔ３细胞增殖的活性。结论：重组ＧＳＴ－ｓＦＧＦＲ１融合蛋白在酵母表达系统中得到有效表达，并具有很好的生物活性。     

中国人细胞色素P4502D6基因多态性

目的为探讨中国人ＣＹＰ２Ｄ６酶基因的多态性分布规律。方法应用聚合酶链反应和ＸｂａⅠ限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）对１００名正常汉族人的ＣＹＰ２Ｄ６基因做了研究。结果发现在中国人群该基因Ａ、Ｂ、Ｄ和Ｅ４种引起酶活性缺失的突变频率分别为１％、６．５％、０．５％和１％；ＸｂａⅠＲＦＬＰ显示：２９ｋｂ／２９ｋｂ、４４ｋｂ／２９ｋｂ和４４ｋｂ／４４ｋｂ基因型的频率分别为３８％、４６％和１３％；而且还发现虽然Ａ和Ｂ突变主要于２９ｋｂ／２９ｋｂ基因型，但也有１２％的Ｂ突变见于４４ｋｂ／４４ｋｂ基因型。结论中国人ＣＹＰ２Ｄ６基因的这四种引起酶缺乏性的突变频率均较欧美人低。ＸｂａⅠ４４ｋｂ等位基因频率相对较高。     

可溶性syndecan-1 对人多发性骨髓瘤细胞体外的生物学作用

目的：研究可溶性ｓｙｎｄｅｃａｎ－１（ＣＤ１３８）分子对人多发性骨髓瘤（ＭＭ）细胞生长行为的影响及其机制。方法：用亲和层析法分离可溶性ｓｙｎｄｅｃａｎ－１;借助＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入、间接免疫荧光、ＡＮＮＥＸＩＮ－Ｖ及ＰＩ标记分析ＭＭ细胞增殖、凋亡周期变化。结果：（１）从ＸＧ－２细胞培养上清中分离纯化得到分子量为６０ｋＤ左右的可溶性ｓｙｎｄｅｃａｎ－１分子;（２）可溶性ｓｙｎｄｅｃａｎ－１分子在体外能抑制ＸＧ－１增殖,阻滞细胞增殖停留在Ｇ２／Ｍ期。并介导其凋亡;ＦＧＦ、５％小牛血清、肝素酶Ⅲ可逆转一定浓度可溶性ｓｙｎ－ｄｅｃａｎ－１的作用,ＨＧＦ、ＶＥＧＦ和ＩＧＦ－１可部分逆转可溶性ｓｙｎｄｅｃａｎ－１分子对细胞的生长抑制作用;（３）ＩＬ－６及激发型抗ＩＬ－６Ｒ１３０（ｇｐ１３０）单抗对可溶性ｓｙｎｄｅｃａｎ－１ｗ     

结核性淋巴结炎的“结节病”样变型

对１２例经病理学专家会诊、从病变上认定的淋巴结“结节病”石蜡包埋组织，应用结核杆菌ＤＮＡ特异性序列片段的聚合酶链反应（Ｍ．ＴＢ－ＰＣＲ）技术、ＢＣＧ免疫组化（ＢＣＧ－ＩＨＣ）技术和抗酸染色（ＡＦ）进行了分支杆菌／结核杆菌检测。在这１２例考虑为“结节病”的病例中：有１例呈ＢＣＧ－ＩＨＣ和Ｍ。ＴＢ－ＰＣＲ两项阳性；另１例呈ＡＦ、ＢＣＧ－ＩＨＣ和Ｍ．ＴＢ－ＰＣＲ三项阳性。研究结果提示：（１）某些结核性淋巴结炎可呈结节病样病变；（２）淋巴结结节病很可能与分支杆菌／结核杆菌感染有关。     

NFG和TGF—β1的表达与滋养细胞肿瘤相关性的免疫组化研究

为了探讨非分蚀性葡萄胎（ＨＭ）转化为侵蚀性葡萄胎（ＩＨＭ）的细胞生物学机制，本研究采用免疫组织化学法观察了ＮＧＦ和ＴＧＦ－β１在ＨＭ和ＩＨＭ中的分布。结果显示：在ＨＭ绒毛中，合体滋养细胞（ＳＴ）和新生基质细胞ＮＧＦ和ＴＧＦ－β１呈阳性和阳性；老年基质细胞和细胞滋养细胞（ＣＴ）呈阴性；在ＨＭ的中间型滋养细胞，ＮＧＦ呈阳强性着色，ＴＧＦ－β１阴性；在ＨＭ绒毛干中，ＳＴ的ＮＧＦ呈强性阳，ＮＧＦ和ＴＧＦ－     

血小板衍生生长因子及其受体与病毒性肝炎肝纤维化的关系

目的研究血小板衍生生长因子在病毒性肝炎肝纤维化中的作用。方法以免疫组化技术检测血小板衍生生长因子（ＰＤＧＦ）－ＢＢ以及ＰＤＧＦ的β受体（ＰＤＧＦＲ－β）在病毒性肝炎肝组织中的表达。结果ＰＤＧＦ－ＢＢ及ＰＤＧＦＲ－β在肝组织中的表达与肝纤维化程度明显相关，肝硬变及慢性肝炎Ｓ３～４期患者肝组织ＰＤＧＦ－ＢＢ及ＰＤＧＦＲ－β表达强度明显高于急性肝炎及慢性肝炎Ｓ０～２期患者，同时与结蛋白、Ⅲ型前胶原肽在肝组织中的表达以及血清金属蛋白酶组织抑制因子－１（ＴＩＭＰ－１）呈明显正相关。结论ＰＤＧＦ－ＢＢ及ＰＤＧＦＲ－β不仅对星状细胞的活化、分裂、增殖及其合成胶原等细胞外基质（ＥＣＭ）均有明显的促进作用，而且可能通过上调ＴＩＭＰ－１减少ＥＣＭ的降解，促进肝纤维化的发生和进展过程。